实验(探究酵母菌数量变化)

例3 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法
检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用 吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸 吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小 格组成，容纳液体的总体积为0．1 mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格 内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 5n×105 个／mL。
♣ 酵母菌的计数 （3）计数的操作 稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释 加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌 细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴 （将计数室充满即可），让菌液沿缝隙自行渗入计数室。 注意不可有气泡产生。
（3）计数的操作显微计数：静止 5分钟后，先用低倍镜 （16×10）找到计数室所在的 位置。然后根据血球计数板规 格，每个计数室选取5个（或4 个）中方格中的菌体进行计数。 每个小方格内约有5-10个菌体 为宜。对于压在小方格界线上 的酵母菌应取相邻两边及顶角 计数。如遇酵母出芽，芽体大 小达到母细胞的一半时，即作 为两个菌体计数。计数一个样 品要从两个计数室中计得的值 来计算样品的含菌量。
例1 :在用血球计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释 50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片 下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此 估算10mL培养液中有酵母菌 2x107 个。
例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球 计数板每个大方格容积为0.1mm3 ，由400个小 方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个 小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 稀释 后 再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格 中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母 菌总数有 2×108 个。
目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素
☺关注本实验中的几个关键点：
♣ 酵母菌的计数 ►利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种 常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数 法。 ►优点：直观、快速。 ►适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体 培养基中菌体的计数。 ►此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为 总菌计数法。
放大后的计数池
16个小格
25个中格
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25X16 = 400小格
抽样检测： 5×16=80个小格 抽样检测： 4×25=100个小格
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16X25 = 400小格
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25个小格
每个计数室（大方格）共有400小格，总容积为0.1mm3
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16个中格
♣ 酵母菌的计数 （2）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？ 所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数 酵母细胞个数/mL= 所数的小方格数
第1天
第3天
第6天
第7天
酵母菌细胞数（× 106个/mL）
0
对照组 实验组
时间
♣ 酵母菌的计数 （4）血球计数板的清洗： • 使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水 柱冲洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干 或用吹风机吹干。镜检，观察每个小格内是 否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则 必须重复洗涤至干净为止。
♣ 酵母菌的计数
（5）注意事项： • 进行计数前，应先将试管摇匀，目的是 使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少 计数误差。 • 显微镜计数时，对于压在小方格界线上 的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。 • 若一个小方格内酵母菌数量过多，难以 数清时，则可将培养液稀释一定倍数后 再计数。 • 本实验无对照实验，酵母菌每天的数量 变化可形成前后对照。 • 血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷， 可采用浸泡和冲洗的方法清洗。
♣ 酵母菌的计数 （1）计数工具——血球计数板
∆ 血球计数 实物图 板是一种 专门用于 计算较大 单细胞微 生物的一 正面图 种仪器。 ∆ 计数时， 常采用样 侧面图 方法。
计数室 滴液处
♣ 酵母菌的计数 （1）wk.baidu.com数工具——血球计数板
•每块计数板由H形凹槽分为2个 同样的计数池。 •每个计数池分为9个大方格。