血清乳酸脱氢酶LDH测定

血清乳酸脱氢酶LDH测定

1 检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理

LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，

LDH

NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活力成正比。

L-乳酸 + NAD+丙酮酸 + NADH + H+

3 标本：

3.1 病人准备：无特殊。

3.2 类型：血清或EDTA血浆。

3.3 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<2%。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

4 实验材料

4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司LDH试剂盒（沪

食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成

氯化钾 190mmol/L 试剂1（R1）乳酸

62.5mmol/L

Tris缓冲液 100mmol/L

试剂2（R2）NAD+ 30mmol/L Tris缓冲液 100mmol/L 4.1.2试剂准备试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，

试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。试剂1 与试剂

2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定14天。

4.1.4 变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，

或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项试剂中含叠氮钠为防腐剂。不可入口！避

免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的LDH校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪

6 操作步骤

6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法

以LDH复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

9 参考值范围

成人： 114～240

儿童：

1～30天 145～765 125～735

31天～1年 190～420 170～450

1～3岁 165～395 155～345

4～6岁 135～345 155～345

7～9岁 140～280 145～300

10～12岁 120～260 120～325

13～15岁 100～275 120～290

16～18岁 105～230 105～235

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值：109—245u/l

10 临床意义

乳酸脱氢酶（LDH）由五种不同的同工酶组成，催化L-乳酸与丙酮酸的相互转换。LDH存在于人体所有组织的细胞质中，在肝、心和骨骼肌中含量较高，在红细胞、胰腺、肾和胃中含量较低。在多种病理情况下出现LDH活力的升高，如心肌梗死、癌症、肝脏疾病、血液疾病或肌肉疾病。由于LDH缺乏器官特异性，因此在鉴别诊断时，有必要作LDH同工酶和其它酶类的测定，如碱性磷酸酶、丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶。

11 操作性能

11.1试剂空白吸光度（340nm、1cm光径&37℃）：≤0.50A。

11.2线性范围：1000U/L±10%，线性相关系数（r）≥0.990。

11.3准确度：用相对偏差（RE%）表示测定结果的不准确度，相对偏差（RE%）≤±10%。

11.4精密度：(1)批内精密度：变异系数（CV%）≤5%；(2)批间精密度：相对极差（%）≤5%。

12 超出范围结果处理

本试剂的线性范围为1000U/L。当样本中乳酸脱氢酶活性高于1000U/L时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:9稀释，重新测定，结果乘以10。

13 病危报警值的处理

无警告/危急值

14 方法局限性

14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。

14.2甘油三酯浓度＜9.5mmol/L或877mg/dL、胆红素浓度＜490μmol/L或29mg/dL对测定无影响。溶血样本可对测定结果产生干扰，应避免用于测定。

14.3有关可能干扰本测定的药物或物质，