乳酸脱氢酶LDH检测试剂盒LD

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大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒说明书

大鼠乳酸脱氢酶（LDH）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供研究使用。

药品名称：通用名：大鼠乳酸脱氢酶（LDH）酶联免疫分析试剂盒使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆、或相关组织液中乳酸脱氢酶（LDH）含量。

实验原理本试剂盒应用间接法测定标本中大鼠乳酸脱氢酶（LDH）水平。

用纯化的大鼠乳酸脱氢酶（LDH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的乳酸脱氢酶（LDH）标准品和未知浓度的乳酸脱氢酶（LDH）待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的乳酸脱氢酶（LDH）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠乳酸脱氢酶（LDH）浓度。

试剂盒组成1 20倍浓缩洗涤液50ml×1瓶9 标准品S1（6 IU/L）0.5ml×1瓶2 链霉亲和素-HRP6ml×1瓶标准品S2（4 IU/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条标准品S3（2 IU/L）0.5ml×1瓶4 生物素标记的抗-IgG抗体6ml×1瓶标准品S4（1IU/L）0.5ml×1瓶5 显色剂A液6ml×1瓶标准品S5（0.5 IU/L）0.5ml×1瓶6 显色剂B液6ml×1/瓶10 密封袋1个7 终止液6ml×1瓶11 封板膜3张8 样品稀释液6ml×1瓶12 说明书1份标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融操作步骤1.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。

乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案

乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LD 或LDH ，EC1.1.1.27 ）是一类NAD依赖性激酶，有LDHA、LDHB、LDHC三种亚基，可构成6种四聚体同工酶。

动物乳酸脱氢酶是由4个亚单位组成的四聚体，常见的A、B 两种亚基构成的5种LDH同工酶（LDH1-5），C亚基则仅组成一种LDH同工酶即LDH-C4。

乳酸脱氢酶为含锌离子的金属蛋白，分子量为135-140kD，是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一，可催化丙酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应，也可催化相关的α-酮酸。

LDH广泛存在于人体组织中，以肾脏含量最高，其次是心肌和骨肌。

红细胞内LDH约为正常血清的100倍。

一、乳酸脱氢酶分类1.根据结合辅酶的不同，微生物体一般包含两种乳酸脱氢酶，NAD-依赖型乳酸脱氢酶（NAD-dependent lactate dehydrogenases，nLDHs）和NAD-非依赖型乳酸脱氢酶（NAD-independent lactate dehydrogenases，iLDHs）两大类。

2.按其催化底物的构型不同，NAD-依赖型乳酸脱氢酶可以分为NAD依赖型-L-乳酸脱氢酶（L-NAD-依赖型乳酸脱氢酶）和NAD依赖型-D-乳酸脱氢酶（D-NAD-依赖型乳酸脱氢酶）两大类，分别催化丙酮酸合成L-乳酸和D-乳酸。

3.根据天然电子受体的不同，可以将NAD-非依赖型乳酸脱氢酶分为三类。

第一类为膜蛋白，利用膜醌类作为外部的电子受体；第二类直接利用O2作为电子受体，根据氧化终产物的不同，又将其细分为乳酸氧化酶（Lactate oxidase，LOX）和乳酸单氧酶（Lactate monooxygenases，LMO），其中前者产生丙酮酸和H2O2，而后者产生乙酸、CO2和H2O；第三类是硫胺b2（flavocytochrome b2），存在于真菌中，它天然的电子受体为细胞色素c。

乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书

货号：MS1001 规格：100管/48样乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase，LDH）试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：LDH（EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD+/NADH之间互变。

测定原理：LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体5mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入1.3 mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；试剂三：液体5 mL×1瓶，4℃避光保存；试剂四：液体20mL×1瓶，4℃保存；样品测定的准备：1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为1000~5000：1的比例（建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm，蒸馏水调零。

乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)

2、手工比色检测：按照下表设置测定管，溶液应按照顺序依次加入，幵注意避免产生气泡。如果样品中的 LDH 浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行管。
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加入物(ml) 待测样品(血清、血浆、体液等) LDH 检测工作液
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乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)
简介：
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH 或 LD)属于氧化还原酶，能够催化氢氧原子或电子从一中底物转移到另一种底物上乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生的一个极其重要的酶，含有锌离子，广泛分布于人和动物组织、植物和微生物中，能可逆的催化乳酸(L)和丙酮酸(P)之间的氧化还原反应。乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)是利用乳酸脱氢酶催化上述逆反应，即丙酮酸+NADH+H+→乳酸+NAD+。在上述反应过程中，丙酮酸还原成乳酸，同时 NADH 氧化成 NAD+，引起 340nm 处吸光度的下降。该 LD-P 法的优点是：1、操作比二硝基苯肼比色法简单；2、重复性好；3、准确性比二硝基苯肼法好；4、
2、处理后的样品应及时检测，否则 LD4 和 LD5 易失效。 3、血清或肝素抗凝血浆检测效果较好，草酸类、EDTA 抗凝剂对 LDH 活性有抑制作用。
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4、避免使用溶血样本。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服幵戴一次性手套操作。
自动分析仪计算公式：LDH(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(296/10)=ΔA/min×4758.8 注意：如果待测样品加入 LDH 保护工作液，其结果应除以 0.9。

小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒操作说明操作说明

小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒操作说明操作说明小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒操作说明小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒实验原理小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被小鼠乳酸脱氢酶(LDH）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小鼠乳酸脱氢酶(LDH）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。

为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。

最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明

乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明乳酸脱氢酶（LDH）法操作说明操作简介：乳酸脱氢酶（LDH）法是一种常用的生物化学分析方法。

本文将详细介绍使用乳酸脱氢酶法进行实验操作的步骤。

材料准备：1. 乳酸脱氢酶试剂盒2. 样品溶液3. 乳酸标准品4. 实验用试管和显微管操作步骤：1. 样品制备- 将待测样品装入实验用试管中。

每个样品应分别装入不同的试管，以避免交叉污染。

- 若样品过浓稀，需要进行适当的稀释，确保样品浓度在测试范围内。

2. 标准曲线制备- 准备不同浓度的乳酸标准品溶液，浓度范围可根据实验要求而定。

- 将不同浓度的标准品溶液分别装入实验用试管中。

3. 试剂添加- 分别向样品管和标准品管中加入相同体积的乳酸脱氢酶试剂，充分混匀。

4. 反应温育- 将所有试管置于恒温水浴中，温度设定为适合乳酸脱氢酶反应的温度（一般为37°C）。

- 在设定的反应温度下，将试管保持在水浴中反应一段时间（时间根据实验要求而定）。

5. 反应终止- 在反应时间结束后，以适当的方法终止反应。

常见的终止方式是添加酸性试剂或采用其他合适的方法。

6. 测定乳酸脱氢酶活性- 使用光度计、分光光度计或其他合适的仪器，测定样品和标准品反应后产生的光吸收值。

吸收值与乳酸脱氢酶活性成正比。

- 通过标准曲线，将样品的吸收值转化为对应的乳酸脱氢酶活性。

注意事项：1. 本实验操作需要严格按照实验室安全操作规范进行，避免任何可能导致个人受伤或污染的行为。

2. 实验过程中的试剂、标样和废液等应按照实验室规定的方法处理，不得随意丢弃。

3. 在操作过程中，保持实验器材和试剂的洁净，尽量避免外界因素对实验结果的影响。

4. 操作时需注意避免交叉污染，尤其是样品的装管和试剂的配比过程。

5. 样品和标准品的选择要合适，浓度范围应覆盖实验要求。

6. 温育过程中，确保试管能均匀受热，并避免发生温度不稳定的情况。

总结：乳酸脱氢酶（LDH）法是一种可靠的生物化学分析方法，适用于乳酸脱氢酶活性的测定。

LDH检测

乳酸脱氢酶释放法lactate dehydrogenase release assay碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。

本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。

同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。

细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。

通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH 的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。

LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。

LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。

本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。

吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。

该酶联反应原理的示意图如下：可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。

一个试剂盒可进行100次检测。

包装清单：产品编号产品名称包装C0016-1 LDH释放试剂 1.5mlC0016-2 乳酸溶液2mlC0016-3 酶溶液1ml×2C0016-4 INT溶液(10X) 0.2mlC0016-5 INT稀释液2ml—说明书1份保存条件：-20℃保存，一年有效。

乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui

乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒
（乳酸底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。

表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下，吸光度≤0.50。

2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下，吸光度变化率≤0.002。

2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时，吸光度变化率≥0.004。

2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。

2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。

表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5%。

2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。

2.6准确度
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。

2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。

乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求haifeng

乳酸脱氢酶测定试剂盒（乳酸底物法）
适用范围：本产品适用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。

1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；
2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
2.1.3试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。

2.2 净含量
净含量不低于标示值。

2.3 试剂空白
2.3.1空白吸光度
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度应小于0.5。

2.3.2空白吸光度变化率
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下，空白吸光度变化率不大于0.002/min。

2.4 线性范围
(25,1000)U/L范围内，相关系数≥0.990；
(25,100]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；
(100,1000)U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.5 分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下，换算为测定浓度为300U/L的样本, 吸光度变化率△A/min应不小于0.015。

2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5.0%。

2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。

2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090593，测定结果应不超过标示值的±10%。

2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存，可稳定12个月。

取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应满足2.4和2.7的规定。

乳酸脱氢酶(LDH)释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒产

乳酸脱氢酶（LDH）释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途乳酸脱氢酶（LDH）释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂是一种旨在通过酶联连续反应系统检测由于细胞损伤导致的细胞内稳定的乳酸脱氢酶释放到细胞外，使四唑盐染料碘硝基氯化四氮唑（INT）还原为红色甲臜（farmazan），即比色法定量测定酶活性，以评价活体细胞繁殖的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

适用于各种药物、化学、环境因子和营养因子处理的贴壁或悬浮生长中的动物或人体细胞。

替代传统的同位素[51 Cr]释放检测的最佳选择。

产品严格无菌，即到即用，简捷敏感，性能稳定，显色清晰，检测准确，重复性好。

技术背景细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的损害或完全裂解导致细胞浆内的酶释放外泄到培养液里，其中包括活性稳定的乳酸脱氢酶。

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）释放法的测定是基于在乳酸脱氢酶的作用下，还原NAD+反应生成的NADH，再与氧化型2-（4-碘苯）-3-（4-硝基苯）-5-苯四唑（Iodonitrotetrazolium；INT）在硫辛酰胺脱氢酶（diaphorase）的催化下反应生成红色生色产物甲臜（formazan），在490nm波长下产生吸收峰，从而确定释放的乳酸脱氢酶的活性，作为细胞膜完整性的标志：吸光值与细胞死亡或毒性程度成线性正相关。

酶联连续反应系统为：lactate dehydrogenaseNAD+ + Lactate → Pyruvate + NADHdiaphoraseNADH + INT → NAD++ Formazan（red）产品内容裂解液（Reagent A）1毫升补充液（Reagent B）1毫升反应液（Reagent C）5毫升显色液（Reagent D）1毫升终止液（Reagent E）1毫升标准液（Reagent F）20微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，反应液（Reagent C）和显色液（Reagent D）避免光照；有效保证6月用户自备96孔细胞培养板：用于细胞操作的容器细胞培养箱：用于孵育反应孔板离心机：用于沉淀细胞酶标仪：用于定量检测染色后的细胞实验步骤一、贴壁细胞检测1．准备96孔细胞培养板的待测细胞（每孔100微升）：包括未处理的对照细胞（样品对照孔），未处理的后续裂解的细胞（样品最大酶活性对照孔），以及药物处理的细胞（处理样品孔），并做好标记（细胞密度为每孔2 X 103至2 X 104细胞）2．到规定的检测时间点前1小时，从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板（注意：确保细胞培养液维持在100微升容量）3．加入10微升裂解液（Reagent A）到未处理的后续裂解的细胞孔里（样品最大酶活性对照孔）4．同时加入10微升补充液（Reagent B）到其余所有检测孔里5．放回湿润的细胞培养箱里，继续培养1小时，即规定检测时间6．从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板7．放进孔板离心机离心10分钟，速度为250g8．分别小心移取50微升上清液到新的96孔板的相应孔里，避免触摸细胞颗粒，同时注意做好标记9．分别加入50微升反应液（Reagent C）（注意：使用前，须混匀）10．分别加入10微升显色液（Reagent D）11．摇动96孔板混匀12．在室温下孵育30分钟，避免光照13．（选择步骤）分别加入10微升终止液（Reagent E）14．即刻放进酶标仪里测读：波长490nm15．计算处理样品实际吸光读数：处理样品孔吸光读数－样品对照孔吸光读数16．计算样品细胞最大酶活性的实际吸光读数：样品最大酶活性对照孔吸光读数－样品对照孔吸光读数17．计算细胞毒性或死亡率（％）：（处理样品实际吸光读数÷样品细胞最大酶活性的实际吸光读数）X 10018．或绘制细胞生长曲线：纵座标（Y轴）为实际吸光读数（A）；横坐标（X轴）为细胞数或时间点或药物浓度；据此计算其LD50二、悬浮细胞检测1．准备96孔细胞培养板的待测悬浮细胞（每孔100微升）：包括未处理的对照细胞（样品对照孔），未处理的后续裂解的细胞（样品最大酶活性对照孔），以及药物处理的细胞（处理样品孔），并做好标记（细胞密度为每孔5 X 103至5 X 104细胞）2．到规定的检测时间点前1小时，从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板（注意：确保细胞培养液维持在100微升容量）3．加入10微升裂解液（Reagent A）到未处理的后续裂解的细胞孔里（样品最大酶活性对照孔）4．同时加入10微升补充液（Reagent B）到其余所有检测孔里5．放回湿润的细胞培养箱里，继续培养1小时，即规定检测时间6．从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板7．放进孔板离心机离心10分钟，速度为250g8．分别小心移取50微升上清液到新的96孔板的相应孔里，避免触摸细胞颗粒，同时注意做好标记9．分别加入50微升反应液（Reagent C）（注意：使用前，须混匀）10．分别加入10微升显色液（Reagent D）11．摇动96孔板混匀12．在30℃温度下孵育30分钟，避免光照13．（选择步骤）分别加入10微升终止液（Reagent E）14．即刻放进酶标仪里测读：波长490nm15．计算处理样品实际吸光读数：处理样品孔吸光读数－样品对照孔吸光读数16．计算样品细胞最大酶活性的实际吸光读数：样品最大酶活性对照孔吸光读数－样品对照孔吸光读数）17．计算细胞毒性或死亡率（％）：（处理样品实际吸光读数÷样品细胞最大酶活性的实际吸光读数）X 10018．或绘制细胞生长曲线：纵座标（Y轴）为实际吸光读数（A）；横坐标（X轴）为细胞数或时间点或药物浓度；据此计算其LD50注意事项1．本产品为100次（1个96孔板）操作2．操作时须戴手套3．整个操作须无菌操作4．建议每个样品安排3个孔，即重复3次，计算时取其平均值5．检测体系相应增加，试剂用量按比例相应增加：例如200微升检测体系，试剂用量增加1倍6．每孔中的培养液需100微升，避免使用周边培养孔（常常液体蒸发而减少）7．系统测试，可以加入2至5微升标准液（Reagent G）到50微升无细胞的细胞培养液里，然后按照说明书加入反应液（Reagent C）和显色液（Reagent D）即可8．细胞裂解效果不佳，可以使用20微升裂解液（Reagent A）处理9．孵育时，须避光10．染色完成后，建议即刻检测，最迟不得超过1小时11．细胞培养和处理时，避免使用草酸（OXALATE），草氨酸（OXAMATE）和EDTA，否则影响检测的准确性12．血清含有乳酸脱氢酶，建议使用浓度不要超过1％13．细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大等因素会造成细胞自然释放乳酸脱氢酶14．酚红会干扰检测15．样品最大酶活性对照孔或最大OD吸光读数与细胞裂解程度密切相关16．如果用户没有孔板离心机，则移取上清液时格外小心17．如果用户没有匹配的波长，可以使用波长470nm至570nm之间的任一波长替代18．本公司提供系列细胞繁殖检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。

LD_L法

LD_L法
乳酸脱氢酶测定试剂盒(LD-L法)
主要成份：
试剂1(R1)：N-甲基-D-葡糖胺(N-Methyl-D-Glucamine)缓冲液；试剂2(R2)：乳酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷
批准文号：
国食药监械(进)字2014第2403303号
【药品名称】
通用名称：乳酸脱氢酶测定试剂盒(LD-L法)
英文名称：Lactate Dehydrogenase(LDH-L)
汉语拼音：RuSuanTuoQingMeiCeDingShiJiHe(LD-LFa)
【成份】
试剂1(R1)：N-甲基-D-葡糖胺(N-Methyl-D-Glucamine)缓冲液；试剂2(R2)：乳酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。

(具体内容详见产品说
明书)。

产品有效期：存储条件：2～8℃储存，有效期一年。

附件：
注册产品标准，产品说明书。

【适应症】
该产品用于定量测定人血清，血浆中的乳酸脱氢酶(LDH)的活力。

【规格】
试剂1(R1):5×100ml，试剂2(R2):5×20ml；试剂1(R1):5×70ml，试剂2(R2):5×14ml；试剂1(R1):2×75ml，试剂2(R2):2×15ml；
试剂1(R1):2×100ml，试剂2(R2):2×20ml；试剂1(R1):1×5000ml，试剂2(R2):1×1000ml；。

LDH文档,乳酸脱氢酶测定试剂盒(LDH)检测标准操作规程

1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒（IFCC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆乳酸脱氢酶(LDH)的测定。

3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。

3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定30天。

试剂不可冰冻。

3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理LDH 催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH 的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。

LDH乳酸+ NAD+ + H2O 丙酮酸+ NADH + H+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。

4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。

4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。

当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。

4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。

4.3.3 测试基本参数4.4参考范围115～220 U/L （注：各实验室应有自己的参考范围。

）4.5 方法评价线性范围：4～1000U/L内。

当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。

精密度：批内变异系数：≤ 3.0%；批间变异系数：≤5.0%。

分析灵敏度：本试剂盒的检测低限不高于4 U/L。

乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书

乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒说明书（乳酸→丙酮酸连续监测法）【产品名称】中文名称：乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒（乳酸→丙酮酸连续监测法）英文名称：LACTATE DEHYDROGENASE REAGENT KIT（L→P method）【包装规格】50ml/盒（R-1：40ml×1，R-2：10ml×1），240ml/盒（R-1：64ml×3，R-2：48ml×1），250ml/盒（R-1：40ml×5，R-2：10ml×5），375ml/盒（R-1：100ml×3，R-2：75ml×1），2500ml/盒（R-1：500ml×4，R-2：500ml×1）。

【预期用途】本试剂盒用以测定人血清乳酸脱氢酶(LDH)的活力。

【检验原理】乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。

通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。

LDHL-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+【主要组成成份】试剂成份含量R-1 L-乳酸锂76mmol/LR-2 NAD ≥31mmol/l *不同批号试剂盒中的各组份，经检验符合产品性能指标的，可以互换。

【储存条件及有效期】本试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。

【适用仪器】本试剂适用于日立7020型、日立7060型、日立7080型、日立7150型、日立7170型、日立7180型、日立7600（D）型、日立7600（P）型自动分析仪以及奥林巴斯AU600、AU2700、东芝-雅培、BECKMAN CX系列、BECKMAN LX-20型等自动分析仪。

本试剂在日立7020自动分析仪上已通过第三方验证，并备有以上各种自动分析仪的参数可供参考。

【样本要求】空腹血清，保存于室温可稳定3小时，保存于0℃以下可稳定1周。

C0016 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒说明书

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品简介：碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。

本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。

同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。

细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。

通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。

LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。

LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr 标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。

本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。

吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。

该酶联反应原理的示意图如下：可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。

一个试剂盒可进行100次检测。

保存条件：-20℃保存，一年有效。

C0016-3需注意避免反复冻融。

C0016-4需避光保存。

试剂盒解冻后可以短期4℃存放，2-3天内有效。

乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒

Focusonyourresearch Serviceforlifescience乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）比色法测试盒货号：Ｅ－ＢＣ－Ｋ０４６－Ｍ方仪器：酶标仪（４４０－４６０ｎｍ）规格：９６Ｔ（４０ｓFocusonyourresearchServiceforlifescience基本信息用途本试剂盒合用于检测血清、血浆、胸水、组织、细胞等样本中LDH活力。

检测范围及敏捷度检测范围：6-1000U/L敏捷度：6U/L背景介绍乳酸脱氢酶（EC，LDH）是一种氧化复原酶，它催化丙酮酸和乳酸的互相转变，同时将NADH氧化成NAD+[1]。

LDH是一种四聚体分子，由两个亚基构成，分别为H亚基和M亚基[2]。

在组织损害或红细胞溶血后，细胞将LDH开释到血液中。

细胞外的LDH活性用于检测细胞损害或细胞死亡[3]。

检测原理以辅酶I为递氢体，LDH催化乳酸产生丙酮酸，丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈棕红色，颜色的深浅与丙酮酸的浓度呈正比，经过测定OD值，可计算LDH的活力。

本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，介绍使用 BCA法（货号：E-BC-K318-M）。

乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒供给试剂和物件编号名称规格(size)保留方式（96T）(Storage)试剂一基质液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent1)(SubstrateBuffer)试剂二辅酶I粉剂×1支2-8℃保留6个月(Reagent2)(CoenzymeI)试剂三显色剂5mL×1瓶2-8℃避光保留6(Reagent3)(ChromogenicAgent)个月试剂四碱溶液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent4)(AlkaliReagent)试剂五2μmol/mL丙酮酸标准品1mL×1支2-8℃保留6个月(Reagent5)(2μmol/mLPyruvicAcidStandard)96孔酶标板1板96孔覆膜2张样本地点标志表1张注：试剂严格按上表中的保留条件保留，不一样试剂盒中的试剂不可以混用。

乳酸脱氢酶测定方法操作规程

乳酸脱氢酶（LDH）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒（IFCC 法）使用说明书【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或血浆中乳酸脱氢酶的活力。

【检验原理】LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH。

NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。

乳酸+ 2O LDH丙酮酸+NADH+H+【主要组成成份】R1：Good’s缓冲液50 mmol/LL-乳酸 5.0 mmol/LR2：NAD+7.0 mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2~8℃保存有效期为18个月。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定30天。

试剂不可冰冻。

【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。

若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。

建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。

【样本要求】新鲜血清或血浆，采集后及时测定，应避免溶血和污染。

【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向上升反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。

校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。

质控品测定值应该在规定的范围内。

若超出规定范围，有必要采取相应的措施或联系生产厂家。

【参考范围】男性：135~225U/L 女性：135~214U/L（注：各实验室应有自己的参考范围。

乳酸脱氢酶LDH总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说

乳酸脱氢酶（LDH）总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途乳酸脱氢酶（LDH）总活性终点比色法定量检测试剂是一种旨在通过乳酸脱氢酶反应系统中反应完成后还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用终点比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞和组织裂解萃取样品（动物、人体、植物、昆虫等）乳酸脱氢酶（LDH）的总活性检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶，催化丙酮酸和乳酸的互相转化反应。

乳酸脱氢酶由4个亚单位构成，有两种类型：肌肉型和心肌型。

根据其亚单位成分，分为5种同功酶。

乳酸脱氢酶的活性检测用来评价细胞或组织的损害状况。

基于丙酮酸（pyruvate）底物在乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）的催化下，转化成乳酸（lactate），同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），完全反应后，在分光光度仪下产生吸收峰值的变化（340nm 波长）由此定量测定乳酸脱氢酶的活性。

乳酸脱氢酶反应系统为：lactate dehydrogenasepyruvate + NADH →lactate + NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）产品内容缓冲液（Reagent A）5毫升反应液（Reagent B）500微升底色液（Reagent C）500微升阴性液（Reagent D）500微升产品说明书1份保存方式保存反应液（Reagent B）和底色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，底色液（Reagent C）避免光照，有效保证12月用户自备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪或酶标仪：用于比色分析实验步骤一、测定准备1．准备好待测样品（例如细胞裂解样品等），置于冰槽里2．设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长340nm，并置零3．缓冲液（Reagent A）室温下均衡温度二、背景对照测定1．移取195微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿2．加入5微升阴性液（Reagent D）3．加入25微升反应液（Reagent B）4．在25℃温度下孵育3分钟5．加入25微升底色液（Reagent C）6．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）7．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照0分钟读数8．在25℃温度下孵育5分钟9．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照5分钟读数10．背景空对照实际读数：0分钟读数－5分钟读数三、样品测定1．移取195微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿2．加入5微升待测样品（20微克蛋白）（注意：样品须清澈，且pH为）3．加入25微升反应液（Reagent B）4．在25℃温度下孵育3分钟5．加入25微升底色液（Reagent C）6．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）7．即刻放进分光光度仪检测，此为样品0分钟读数8．在25℃温度下孵育5分钟9．即刻放进分光光度仪检测，此为样品5分钟读数10．样品实际读数：0分钟读数－5分钟读数四、计算样品活性[（样品读数－背景读数）X样品稀释倍数X 1（体系容量；毫升）]÷[（样品容量；毫升）X （毫摩尔吸光系数）X 5（反应时间；分钟）]＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔丙酮酸/分钟五、酶标板测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照和样品2．分别移取195微升缓冲液（Reagent A）到相应孔中3．分别加入5微升阴性液（Reagent D）或待测样品（20微克蛋白）（注意：样品须清澈，且pH为）4．分别加入25微升反应液（Reagent B）5．在25℃温度下孵育3分钟6．分别加入25微升底色液（Reagent C）7．轻轻摇动酶标板8．即刻放进酶标仪检测，此为0分钟读数9．在25℃温度下孵育5分钟10．即刻放进酶标仪检测，此为5分钟读数11．实际读数：0分钟读数－5分钟读数12．活性计算[（样品读数－背景读数）X样品稀释倍数X （体系容量；毫升）]÷[（样品容量；毫升）X （毫摩尔吸光系数）X （厘米）X 5（反应时间；分钟）]＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔丙酮酸/分钟注意事项1．本产品为20次操作，包括背景对照2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，背景测定只需1次4．样品须澄清，至关重要5．比色测定后，比色皿须清洗彻底6．背景空对照0分钟读数通常至为理想状态7．背景空对照的正常读数差值（0分钟－5分钟）通常为至（正负即可）8．样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致9．样本测定5分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性10．建议待测样本蛋白浓度为20微克/5微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒）11．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度12．乳酸脱氢酶单位活性定义为：在25℃，pH 条件下，每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所需的酶量作为一个活性单位13．本公司提供系列乳酸脱氢酶检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感。

乳酸脱氢酶测定试剂盒说明书

乳酸脱氢酶测定试剂盒说明书乳酸脱氢酶测定试剂盒(速率法)说明书【产品名称】通用名称:乳酸脱氢酶测定试剂盒(速率法)商品名称: 乳酸脱氢酶测定试剂盒(速率法)英文名称:LDH-L【包装规格】M-100462×50/2×10ml 4×50/4×10ml 1×100/1×20ml 2×100/2×20ml3×100/3×20ml 4×100/4×20ml 5×100/5×20ml 1×70/1×14ml R1/R22×70/2×14ml 3×70/3×14ml 4×70/4×14ml 5×70/5×14ml1×1000/1×200ml 1×5000/1×1000ml 1×10000/1×2000ml【预期用途】用于定量测定人血清，血浆中的乳酸脱氢酶(LDH)的活力。

乳酸脱氢酶在血清中由5种同功酶组成。

这些酶是以四聚体结构存在。

有两亚型，M-亚型主要发现在骨骼肌里，H-亚型主要发现在心肌里。

因为它们电泳时向正极移动的特性，同功酶分为LDH1, LDH2, LDH3, LDH4各LDH5。

LDH1 向正极移动最快。

亚型是:H4, H3M, H2M2, HM3和M4。

【检验原理】++LDHL-乳酸 + NAD 丙酮酸 + NADH + H ,,,,在340nm处，每分钟吸光度的增加跟样品中LDH的活力成正比。

【主要组成成份】N-甲基-D-葡萄糖胺缓冲液- --------------------------------325mmol/lL-乳酸 -----------------------------------------------------------50mmol/l氧化型辅酶I ----------------------------------------------------10.0 mmol/l【储存条件及有效期】储存在冰箱(+2? 至 +8?C) ，有效期至少一年。

乳酸脱氢酶法操作说明

乳酸脱氢酶法操作说明装备与准备：1.安全镜、手套和实验室衣物。

2.LDH酶标仪和试剂盒。

3. 乳酸标准品（浓度待测，如1, 2, 4,和8mmol/L）。

4.甲酸钠和碳酸氢钠缓冲液（pH10）。

5.NADH。

6.甲酸钠酶混合物。

操作步骤：1.将LDH试剂盒中的所有试剂室温恢复到室温（20-25°C）。

2.使用甲酸钠和碳酸氢钠缓冲液，配制pH为10的缓冲液。

3.将试剂盒中的稀释液瓶放在LDH酶标仪中的样品槽中预热。

4. 在一个试管中加入10µl的标准品（1，2，4或8mmol/L），然后加入200µl的缓冲液和40µl的NADH。

5.加入10µl的甲酸钠酶混合物。

6.快速旋转混合试管中的液体。

7.立即将试管放在LDH酶标仪中的样品槽中，然后记录开始的时间。

8.观察反应液的吸光度变化。

该试剂盒中的酶会催化LDH的反应，并使NADH氧化为NAD。

NADH氧化产生的吸光度变化可以与待测标品中的乳酸浓度正相关。

9. 在约1至2分钟内，观察吸光度的稳定，并记录最大吸光度（Amax）的值。

10.用同样的步骤重复测量三个标准品。

11. 使用Amax值的三个测量结果，制作标准曲线。

将Amax值作为y 轴，标准品浓度（mmol/L）作为x轴绘制图表。

12.分析待测样本。

将待测样本用缓冲液稀释1:2或1:5的比例，在酶标板上重复三次。

13.将吸光度读数记录下来，并使用标准曲线，将吸光度转换为乳酸浓度。

14.使用样本的三个测量结果计算样本的均值。

注意事项：1.在操作之前，确保所有试剂和设备达到室温。

如果试剂需要特殊条件，按照说明书操作。

2.注意使用安全措施，如戴手套、安全镜和实验室衣物，以防止化学物质接触皮肤或眼睛。

3.按照说明书中的比例准确配制试剂和标准品。

4.必须在开始试验后立即将试管放入酶标仪中，以确保吸光度测量的准确性。

5.注意观察试剂盒中的反应液的颜色变化，并在愈合后的最大吸光度值时记录时间。

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit

人乳酸脱氢酶（LDH）ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶（LDH）ELISAKit人乳酸脱氢酶（LDH）ELISA试剂盒：（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本试验采用双抗体夹心ABCELISA法。

用抗人LDH单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的LDH与单抗结合，加入生物素化的抗人LDH，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最终加停止液硫酸，在450nm处测OD值，LDH浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中LDH浓度。

试剂盒构成（28℃保管）酶标板（CoatedWells） 96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate） 12ml 10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml 20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：80U/瓶 2瓶底物工作液（TMBSolution） 12ml第一抗体工作液（BiotinylatedAntibody） 12ml 停止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，28℃保管48小时；更长时间须冷冻（20℃或70℃）保管，躲避反复冻融。

2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成80000U/L的溶液。

设标准管8管，第一管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。

在第一管中加入80000U/L的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。

如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。

第八管为空白对照。

3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液 9ml蒸馏水）。

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。