微生物形态观察

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微生物学实验一 微生物制片及形态观察

微生物学实验一  微生物制片及形态观察

实验一微生物制片及形态观察一、显微镜油镜的使用显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。

显微镜的种类很多,在实验室中常用的有:普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。

1. 结构光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。

光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等;机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等(图1-1)。

图1-1 光学显微镜结构图标本的放大主要由物镜完成,物镜放大倍数越大,它的焦距越短。

焦距越小,物镜的透镜和玻片间距离(工作距离)也小。

油镜的工作距离很短,使用时需格外注意。

目镜只起放大作用,不能提高分辨率,标准目镜的放大倍数是十倍。

聚光镜能使光线照射标本后进入物镜,形成一个大角度的锥形光柱,因而对提高物镜分辨率是很重要的。

聚光镜可以上下移动,以调节光的明暗,可变光栏可以调节入射光束的大小。

显微镜用光源,自然光和灯光都可以,以灯光较好,因光色和强度都容易控制。

一般的显微镜可用普通的灯光,质量高的显微镜要用显微镜灯,才能充分发挥其性能。

有些需要很强照明,如暗视野照明、摄影等,常常使用卤素灯作为光源。

2. 原理显微镜的放大效能(分辨率)是由所用光波长短和物镜数值口径决定,缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率,可见光的光波幅度比较窄,紫外光波长短可以提高分辨率,但不能用肉眼直接观察。

所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的,提高数值口径是提高分辨率的理想措施。

要增加数值口径,可以提高介质折射率,当空气为介质时折射率为1,而香柏油的折射率为1.51,和载片玻璃的折射率(1.52)相近,这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜,从而提高分辨率。

显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积,而物镜的放大倍数越高,分辨率越高。

3. 使用方法1)低倍镜观察先将低倍物镜的位置固定好,然后放置标本片,转动反光镜,调好光线,将物镜提高,向下调至看到标本,再用细调对准焦距进行观察。

微生物实验报告微生物形态观察分布灭菌消毒

微生物实验报告微生物形态观察分布灭菌消毒

微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜油镜的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜油镜的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻片时停止转动,以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前2.油镜用毕后, 要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最后,用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头3.镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3.微生物知识1.细菌按形态分类:球菌:球形包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等杆菌:杆状包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等螺旋菌:螺旋状包括螺旋菌、弧菌等2.细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3.细菌的特殊结构荚膜:如肺炎双球菌鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌;如:变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类;原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚病毒5.真菌单细胞:圆形、芽生孢子;如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽;如:霉菌6.白假私酵母菌白念生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7.新型隐球菌生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜比菌体大1-3倍致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌子弹形、脑膜炎双球菌蚕豆形、四联菌2杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌异染颗粒、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌staphyloccocus;肺炎双球菌pneumo coccus;脑膜炎球菌meningococcus;破伤风杆菌Clostridium Tantenus;霍乱弧菌vibrio cholera;芽胞spore;鞭毛flagellum;荚膜capsule;钩端螺旋体leptospira五、实验结果绘8幅细菌镜下图,已交;六、思考与讨论1.显微镜高倍镜使用时看不清楚的常见原因1 未滴加镜油2 镜头不干净3 标本放置反了,所以达不到对焦平面4 制片问题:标本太厚、染色误差等细菌分布一、实验目的1. 掌握固体培养基的制备2. 掌握机体常见部位及环境中的细菌采样、培养、及初步鉴定3. 掌握革兰氏染色方法及结果判定二、实验原理1. 培养基:1.细菌生长所需营养物质:水、碳源、氮源、无机物和生长因子2.培养基分类:1根据营养物质:营养培养基、选择培养基、鉴别培养基2根据物理性质:液体培养基、固体培养基和半固体培养基3.细菌在培养基中的生长状况:表面生长、均匀浑浊生长、沉淀生长2. 革兰氏染色:革兰阳性细菌细胞壁的肽聚糖peptidoglycan层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,通道弯曲,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后孔径仍可使结晶紫与碘的复合物通过,因而将染料洗去而被脱色;三、实验材料咽拭子、羊血培养皿:1套/人;大号普通培养皿:1块/2人;载玻片:1片/人;A、B菌:6套/桌;NS:1份/人;滤纸:1张/人;消毒液:4套/桌;三角瓶、电天平、营养琼脂、称药纸、称药勺、量筒:1套/桌四、实验内容1. 培养基制备1按产品要求称取营养琼脂2每实验桌制备200ml3高压蒸汽灭菌后,在洁净工作台内倒平皿4所制备的普通平皿用于空气培养2. 机体不同部位的细菌采样、培养1咽部正常菌群的采样、培养咽拭子擦拭咽部,平行划线法接种于羊血平皿;2手指消毒前后细菌的采样培养未消毒手指平行划线法接种于普通平皿;同一手指碘酒、酒精消毒后平行划线法接种于普通平皿;3. 环境中细菌采样培养1空气培养将培养皿打开暴露于空气中,20分钟后盖好平皿盖儿2流通纸币或硬币的细菌采样培养将硬币正反面分别在培养基上充分接触3采样结束后,将培养皿底部朝上放入铁丝筐,统一置培养箱:37℃18-24小时4. A、B、C菌鉴定革兰氏染色法1. 细菌涂片制备程序:1取一干净玻片,火焰上方缓缓通过三次去油2蜡笔画线将玻片分割为A、B、C三区域3接种环取生理盐水分别滴入A、B两区域各一滴4分别取少许A、B 、C菌,与生理盐水充分混匀成菌液,风干后形成菌膜5固定火焰上方缓缓通过三次6革兰氏染色7滤纸吸干水分,油镜观察2. 革兰氏染色:1细菌涂片、火焰固定2结晶紫初染1min3卢戈氏碘液媒染1min495%乙醇脱色30-40s5沙黄复染1min五、实验结果A:G+,球菌,推测为金黄色葡萄球菌;B:G-,短杆菌,推测为大肠杆菌;六、思考与讨论1.影响革兰氏染色的因素:1细菌本身因素:菌龄:如果菌龄太大,可能出现假阴性2操作因素涂片:取菌应适量,涂片要均匀,如果某个部分菌层太厚,可能在脱色时达不到,会导致局部假阳性固定:固定温度太高或时间太长都会导致细菌结构破坏而出现假阴性;但是固定不够,细菌会在水洗时被冲掉初染:初染时间虽然说是1分钟,但是可以适当延长,时间太短会出现假阴性;染色滴加不均匀可能出现半阴半阳媒染:和初染一样脱色:脱色时间不能过长,基本上用酒精滴过之后马上水冲就可以了,否则容易出现假阴性复染:复染时间需足够长,否则可能会染不上消毒灭菌一、实验目的1. 了解实验室常用消毒灭菌方法及其原理2. 掌握实验中所用仪器的使用方法3. 掌握机体常见部位及环境中的细菌培养物的初步鉴定4. 强化革兰氏染色技能二、实验原理1.口咽部及皮肤正常菌群鼻咽部及扁桃体:葡萄球菌、类白喉杆菌、肺链、溶血及非溶血性链球菌、奈瑟菌等口腔:链球菌多见、放线菌、螺旋体、G-杆菌等皮肤:表皮葡萄球菌、丙酸杆菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌2.溶血类型α溶血:现象:草绿色溶血环常见菌种:机会致病菌甲链、肺链原理:细菌产生过氧化氢将血红蛋白氧化成深绿色的高铁血红蛋白β溶血:现象:透明溶血环常见菌种:致病菌乙链原理:细菌释放溶血素使红细胞破裂,血红蛋白释放三、实验材料咽拭子培养物:1套/人;空气、纸币、手指消毒前后培养物:1套/2;载玻片:1片/人;NS:1支/人;滤纸:1张/人四、实验内容1. 常用消毒灭菌方法:示教讲解1.热力灭菌:1干热灭菌法:焚化、烧灼、干烤160 ℃ ,2小时2湿热灭菌法:煮沸2%Na2CO3,105 ℃;高压蒸汽灭菌,20分钟,121℃,临床运用最广的灭菌方法2. 紫外线Ultraviolet radiation:波长265nm-266nmDNA吸收光谱杀菌能力最强;紫外光穿透力差,一般只用于不耐热物品表面的消毒;3. 过滤filtration用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌,用于不耐热物质的灭菌血清、毒素、抗生素等滤菌器:薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器4. 低温保存菌种冷冻真空干燥法6.实验室常用化学消毒剂:70-75%乙醇洁净台消毒:来苏水擦拭防腐剂:三氯甲烷、硫柳汞、叠氮钠2.细菌分布结果鉴定1观察菌落2取部分菌落的细菌进行革兰氏染色并观察五、实验结果1. 咽部正常菌群的采样、培养结果:在羊血培养皿上出现四种菌落:(1)数目多,划线沿线都有;针尖大小;无色、光滑、湿润、透明、圆形;周围出现草绿色溶血环,发生了不完全溶血即α溶血;(2)数目较多,划线沿线都有;较小;乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形;(3)少,只出现在四个点;中型;乳黄色、光滑、半湿润、不透明、形状不规则;在此种菌落下方的培养基出现了透明溶血环,发生了完全溶血即β溶血;(4)1个菌落;较大;乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形;粘稠;取1、2、3进行革兰氏染色,结果如下;(1)G+,链球菌,根据不完全溶血推断,为甲型链球菌;(2)G-,球菌,细胞个体小,形状像金黄色葡萄球菌,但是染色为阴性;(3)G-,球菌;2. 手指消毒前后细菌的采样培养结果:1消毒前:仅出现2个菌落,较小;乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形;革兰氏染色结果:G-,杆菌2消毒后:无菌落出现;3. 硬币正反面的细菌采样培养结果:1正面三种菌落:113个菌落;较小;乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形;和手指消毒前的菌落一样;21个菌落;较大;白色、光滑、湿润、近似圆形;35个菌落;较大;中央乳黄色边缘颜色变浅、光滑、湿润、中间凸、不规则、边缘光滑取其中2、3进行革兰氏染色,结果如下:2G-,杆菌;和手指消毒前的细菌一样3G-,链杆菌;形态较大,形状像炭疽芽胞杆菌,但是没有芽孢且染色为阴性;2反面两种菌落:12个;较大,乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形;2多个,沿硬币边缘线连成一片;针尖大小、无色、光滑、湿润、透明;4. 空气培养结果平皿敞开在实验室的窗台上放置了约20分钟,当时阳光照在上面:平皿出现了五种菌落:111个;中等大小;白色、光滑、湿润、半透明、圆形22个;较大;周围白色,中间有一个透明圈,光滑、湿润、中间凹的圆饼状31个;较大;周围黄色,中间有一个透明的圆形区域,半湿润、没有光泽41个;较大;边缘橘黄色,中央偏白、明显凸起、干燥、形状不规则51个;较大;边缘透明,中央乳黄色,光滑、湿润、半透明、圆形取其中3、4进行革兰氏染色,结果如下:3G-,杆菌;和手指消毒前、硬币正面菌落2的细菌一样4出现三种细菌:G-,双球菌G+,双球菌G-,梭菌六、思考与讨论1.巴氏消毒法的利用巴氏消毒法是一种低温消毒法,包括:低温维持法:摄氏度维持30分钟;高温瞬时法:摄氏度作用15-30秒;该法适用于食品的消毒;现主要应用于乳制品;2.为什么湿热消毒法的温度比干热消毒法低课堂上讲到的干热消毒法温度都比湿热消毒法要高,说明湿热灭菌法可在较低的温度下达到的灭菌效果可以与干热法相同,分析原因如下:(1)湿热中蛋白吸收水份,更易凝固变性;(2)水分子的穿透力比空气大,更易均匀传递热能,在干热状态下,由于热穿透力较差,微生物的耐热性较强,必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的(3)蒸汽潜热大,每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能,可迅速提高物体的温度; 3.细菌分布试验结果讨论咽部正常菌群主要为:溶血和非溶血性链球菌、球菌等,不同人由于个体差异和取样部位差异,所得菌种也有所不同手的消毒是有效的,消毒后细菌明显减少了;同时手上的菌是很多的,所以需要常洗手;手上较常见的是四联球菌;硬币上的菌也相对较多,因为它经历的环境很多;在咽部、硬币和未消毒的手上,都得到了一种很像大肠杆菌的革兰氏阴性杆菌,说明这种菌分布非常广泛;4.空气培养取样染色时,为什么得到三种菌图1 空气培养取样革兰氏染色10100一般认为,菌落形成是一个菌落到培养基上并增殖而来,但是在空气培养得到的菌落取样染色时,发现了三种形态完全不同的菌如图1,较大的双球菌和梭菌为革兰氏阴性,较小的双球菌为革兰氏阳性;可能的原因有:(1)取样的污染,该菌落被两次取用,可能遭到污染(2)在非常小的概率下,三个不同的菌掉到了同一处,同时这三种菌的生长互不影响甚至互利,于是形成了混合菌群;(3)三个菌落在生长过程中由于靠得很近而融合了;。

微生物菌落及个体形态观察,实验报告

微生物菌落及个体形态观察,实验报告

微生物菌落及个体形态观察,实验报告
实验目的:
观察微生物菌落的形态及个体形态,了解微生物的生长特点和性状。

实验材料和设备:
1. TSY琼脂培养基
2. 火焰灭菌器
3. 培养皿
4. 显微镜
5. 无菌培养基
6. 实验手套及护目镜
实验步骤:
1. 准备培养基:将TSY琼脂培养基按照说明书制备好,热离
心并倒入培养皿中。

2. 灭菌处理:使用火焰灭菌器对培养皿进行灭菌处理,避免外界细菌的污染。

3. 分菌涂布:将待观察的微生物菌液取少量涂布于培养皿表面,通过灭菌针均匀地划过琼脂表面。

4. 培养:将培养好的培养皿倒置放置于恒温培养箱中,设定合适的温度和湿度条件,使其适宜生长。

5. 观察生长:每隔一段时间使用显微镜观察微生物的菌落生长情况,并记录下来。

实验结果:
通过观察发现,微生物菌落的生长形态各异。

有的菌落呈圆形,
边缘光滑,整齐排列;有的菌落呈不规则的形状,边缘模糊,有分枝延伸出;还有一些菌落呈现为六边形或星形等不寻常的形状。

个体形态方面,通过显微镜观察发现微生物细胞大小不一,有的呈球形,有的呈杆状,形态多样。

实验结论:
微生物菌落的形态和个体形态具有多样性,不同的微生物具有不同的生长特点和形态。

通过观察可以初步了解微生物的外观特征,并对微生物的分类和鉴定提供参考。

不同形态的菌落和个体形态的研究对于深入了解微生物的生态环境和功能具有重要意义。

实验一显微镜的使用及微生物形态的观察

实验一显微镜的使用及微生物形态的观察
实验一:显微镜的使用及微生物形 态的观察
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果 • 实验总结
01 实验目的
掌握显微镜的使用方法
掌握显微镜的基本操作
包括调整焦距、照明调节、移动载玻片等。
了解显微镜的保养和清洁
定期清洁显微镜,保持其良好的工作状态。
熟悉不同倍率下的观察效果
04
原生动物属于真核生物,根据形态和运动方式可分为鞭毛虫、变形虫、 纤毛虫等。
微生物在自然界中的作用和意义
分解有机物
微生物在自然界中起到分解有机物的作用,将动 植物残体和排泄物等有机物分解成简单的无机物 ,如二氧化碳和水,为其他生物提供营养。
促进植物生长
一些微生物能够促进植物的生长和发育,如根瘤 菌能够与豆科植物共生形成根瘤,为植物提供氮 素营养;菌根真菌能够与植物根系形成共生关系 ,为植物提供磷素营养等。
03 实验步骤
显微镜的准备
01
02
03
清洁显微镜
使用柔软的湿布擦拭显微 镜的表面,确保显微镜干 净无尘。
检查显微镜部件
确保显微镜的目镜、物镜、 载物台等部件完好无损, 没有损坏或松动。
调整光源
打开显微镜的光源,确保 光源亮度适中,没有闪烁。
样本的制备
选择样本
选择要观察的微生物样本,如细菌、藻类、原生 动物等。
详细地观察。
观察和记录微生物形态
观察记录
在观察过程中,注意记录不同微生物的形态特征,并 绘制简单的显微镜图像或使用相机拍摄记录。
分析结果
根据观察记录,分析微生物的种类、数量和分布情况, 并得出实验结论。
整理器材
实验结束后,清洁并整理好显微镜和相关器材,以便 下次使用。

微生物形态观察实验报告

微生物形态观察实验报告

实验报告课程名称:生命科学趣味实验实验名称:微生物形态观察指导教师:一、实验目的:1.掌握普通光学显微镜的原理、结构、各部分的功能和使用方法。

2.了解酵母菌、霉菌的个体形态特征。

二、实验原理:显微镜成像原理:目镜、物镜各自相当于一个凸透镜,被检标本置于聚光器与物镜之间,即物镜下方1~2倍焦距之间,物镜可使标本在物镜的上方形成一个倒立放大实像(倒像),该实像正好位于目镜的下焦点(焦平面)之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处。

三、实验仪器、材料酵母菌涂片、霉菌涂片。

奥林巴斯显微镜、擦镜纸等。

四、实验方法:1 显微镜安置取显微镜时一手握住镜臂,一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳,置显微镜于平整实验台上,镜座距实验台边缘约3~4 cm,接通电源。

注意:显微镜移动时切忌用单手拎提。

2 选择物镜将低倍物镜放入光路。

3 调整光强打开显微镜主电源,调整照明度。

通过亮度调整旋钮来改变电压大小从而调整显微镜亮度强弱。

4 调整聚光器位置和孔径光阑在孔径光阑环上刻有物镜倍率(10倍,40倍),观察时将其与使用物镜相对应倍率放到正面。

5 放置标本调粗调旋钮使载物台下降,向外拉开机械式载物台样本夹自前向后将标本切片放入平台,标本放稳后,再将标本夹轻轻放回原位;通过垂直旋转移动杆和水平旋转移动杆来上下和左右移动标本。

6 聚焦① 对焦要领为:从侧面看,转动粗调旋钮,使物镜尽可能接近标本;一边看目镜,一边调粗调旋钮,使载物台下降;看到标本后,再用细调旋钮正确对焦。

② 调整瞳距:一边看目镜,一边移动双目镜筒,让左右视野一致。

标识●的位置表示瞳距。

③ 调整屈光度数:以右眼看右侧目镜,旋转粗、细调旋钮对好焦距;以左眼看左侧目镜,旋转屈光度调整环,对好焦距。

④ 目镜眼罩使用方法:戴眼镜时候,将眼罩折叠,可防止眼镜和目镜接触所造成擦痕;不戴眼镜时候,将折叠眼罩向外拉长,可防止目镜和眼睛之间射入不必要光线,利于观察。

实验五微生物菌落形态观察

实验五微生物菌落形态观察

实验五微⽣物菌落形态观察实验五微⽣物菌落形态观察1、本次实验的⽬的和要求(1)观察细菌、酵母菌、霉菌三⼤类微⽣物具体菌落的形态特征。

(2)总结三类微⽣物菌落的⼀般特征并能识别。

(特征描述:形状、⼤⼩、颜⾊、边缘、隆起、光泽、质地等。

)2、实验内容或原理菌落:单个菌体在固体平⾯培养基上⽣长繁殖形成的⾁眼可见的群体。

区分和识别各类微⽣物可从菌落形态(群体形态)和细胞形态(个体形态)两⽅⾯进⾏,菌落形态是⽆数细胞形态的集中反映,因此每⼀⼤类微⽣物都有其⼀定的菌落特征,可通过这些特征差异区分和识别。

特征描述:形状、⼤⼩、颜⾊、边缘、隆起、光泽、质地等。

细菌菌落特征:凝胶状、表⾯较光滑、湿润、与培养基结合不紧密,易挑取,正反颜⾊⼀致。

酵母菌菌落特征(与细菌相似) :⽐细菌⼤⽽厚,不透明,表⾯光滑、湿润、粘稠,易⽤针挑起。

多呈乳⽩⾊,少数呈红⾊。

霉菌的菌落特征:⽐细菌菌落⼤,由菌丝组成疏松的绒⽑状、絮状或蜘蛛⽹状,有的⽆固定⼤⼩,延⾄整个培养基中,产⾊素,使菌落显⾊。

3、需⽤的仪器和试剂(1)培养基:PDA培养基、⽜⾁膏蛋⽩胨培养基、YEPD培养基(2)菌落观察:(a)霉菌:⿊曲霉、⿊根霉、青霉、犁头霉、⽑霉(b)酵母菌:酿酒酵母菌(c)细菌:⼤肠杆菌4、实验步骤1.细菌菌落形态观察包括:菌落⼤⼩、颜⾊、形状(圆形、不规则、假根形)、边缘(整齐光滑、叶状、波浪状、锯齿状、丝状)、隆起(扁平、低凸起、⾼凸起)、透明度(透明、半透明、不透明)、光泽(⾦属光泽、油脂性光泽)、质地(油脂状、膜状、粘稠状)、表⾯状态(光滑、褶皱、颗粒状、龟裂状)等。

2.⼤多数酵母菌的菌落与细菌相似,呈圆形,湿润有粘性,不透明,表⾯光滑,有油脂光泽。

多数为⽩⾊或乳⽩⾊,少数为红⾊,培养时间长了,颜⾊会变暗。

与培养基结合不紧,易被挑起。

质地粘稠,边缘皱褶状。

3.霉菌由分枝状菌丝组成,菌丝粗⽽长,形成菌落疏松,菌丝有绒⽑状、棉絮状、蜘蛛⽹状,菌落很⼤是细菌的⼏⼗倍,表⾯蔓延,有多种颜⾊,菌落正反⾯颜⾊多有不同。

微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察

微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察

3-2
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第15页
3.革兰氏染色法:
革兰氏染色法将细菌分为G+和G- ,这由两类细菌细胞 壁结构和组成不一样而决定。用结晶紫初染后,全部细菌都 染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘 复合物,增强了染料与菌体结协力。用乙醇脱色处理时,两 类细菌脱色效果是不一样。G+细菌细胞壁主要由肽聚糖形 成网状结构组成,且壁厚、类脂含量低,用乙醇脱色时使细 胞壁脱水、网状结构孔径缩小,通透性降低,使得结晶紫— 碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染依然 保持初染剂蓝紫色。G-细菌则不一样,因为其细胞壁肽聚糖 层较薄,类脂含量高,所以在脱色处理时,类脂被乙醇溶解, 细胞壁通透性增大,使结晶紫—碘复合物比较轻易被洗脱出 来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂颜色。
总菌数 A 16104 B 32000A B(个 / ml) 5
4-3
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第24页
2. 区分酵母菌死活细胞基础原理 美蓝是一个无毒性染料,它氧化型呈蓝色,
还原型是无色。用美蓝对酵母菌活细胞进行染 色时,因为细胞新陈代谢作用,细胞内含有较 强还原能力,能使美蓝由蓝色氧化型变成无色 还原型。所以,含有还原能力酵母活细胞是无 色或淡蓝色,而死细胞或代谢作用衰老细胞则 呈蓝色,借此即可对酵母菌死细胞和活细胞进 行判别。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第25页
四. 试验内容
1. 酵母菌形态观察及死活细胞判别 (1) 在载玻片上加半滴美蓝染液,在染液上 滴一滴菌液。取一块盖玻片,先将一边与菌液 接触,然后慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后,先用低倍镜然后用 高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况,并依据颜

微生物的形态观察实验报告

微生物的形态观察实验报告

微生物的形态观察实验报告
通过在显微镜下观察不同类型的微生物,了解它们的形态特征和结构,从而深入了解微生物的分类和生物学特征。

实验步骤:
1. 准备样本:从不同来源,如水、泥土、食物等,收集微生物样本。

2. 制备菌片:将菌种种入适当的培养基,使其生长和繁殖。

然后在玻璃片上刮取一些菌落,通过灭菌消毒杀死细菌并干燥。

3. 加染剂:将制备好的菌片放入染液中,染色时间与染色方法与染料种类有关。

4. 滴加液滴:将染色后的菌片在显微镜下观察。

实验结果:
在显微镜下观察到了许多不同形态的微生物,如红球菌、链球菌、葡萄球菌、酵母菌等。

它们的形态、大小、颜色和结构都有所不同。

例如,链球菌呈链状,难看,通常组成串并捆扎在一起。

一个典型的酵母菌是一个圆形或卵形,有微细的细胞壁,有一些嚼口器,通常高达数微米,直径可达10微米。

结论:
通过观察不同形态的微生物,我们可以更好地了解它们之间的差异和分类,从而更好地探索它们在自然界和人类生活中的作用。

此外,对微生物形态的深入认识也有助于开发生物科技和医学治疗手段。

显微镜观察微生物形态的实验报告

显微镜观察微生物形态的实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除显微镜观察微生物形态的实验报告篇一:微生物实验报告:微生物形态观察实验一微生物形态观察一、实验目的1.巩固显微镜的使用方法,重点练习油镜的使用;2.认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构;3.练习手绘微生物图片。

二、实验原理1.细菌基本形态细菌是单细胞生物,一个细胞就是一个个体。

细菌的基本形态有3种:球状,杆状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。

球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。

杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等,是细菌中种类最多的。

螺旋菌分为弧菌和螺菌。

除此之外,还有一些特殊形态的细菌。

2.细菌特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。

荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质,具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。

鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体,具有运动功能,在菌体上的着生位置、数目因菌种而异。

菌毛(又称纤毛)是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬,且数量较多的丝状体,与细菌吸附或性结合有关。

芽孢又称内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段,在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体,具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。

3.真菌的结构特征菌丝是构成真菌营养体的基本单位,是一种管状细丝。

可伸长并产生许多分枝,许多分枝的菌丝相互交织在一起,就叫菌丝体。

根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。

为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要,许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态,这些特化的形态称为菌丝变态。

比如吸器、假根、子实体。

4.放线菌的结构特征放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞生物。

链霉菌是典型的放线菌,其细胞呈丝状分枝,菌丝直径很小,在营养生长阶段,菌丝内无隔,故一般呈多核的细胞状态。

当其孢子落在固体基质表面并发芽后,就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝,同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝。

1.微生物的形态观察

1.微生物的形态观察
细菌的个体形态1杀螟杆菌5h细菌的个体形态3细菌的个体形态特殊结构1鞭毛细菌的个体形态特殊结构2杀螟杆菌22h芽孢细菌的个体形态特殊结构2杀螟杆菌52h芽孢变形杆菌周生菌毛细菌的个体形态特殊结构3变形杆菌周生菌毛放线菌菌丝放线菌菌丝放线菌轮生菌丝螺旋菌丝假根足细胞青霉穗酵母菌落形态菌落是由某一微生物的单个细胞或孢子在培养基表面繁殖后形成的肉眼可见的集落
微生物的形态观察
实验内容
1、用显微镜观察细菌、放线菌霉菌、 和酵母菌四大类群的个体形态, 并画出。 2、肉眼观察它们的菌落形态, 放线菌:丝状菌,菌丝分为基内菌丝、气 生菌丝和孢子丝(轮生和螺旋) 霉菌:丝状菌,有假根、足细胞、青霉穗 等。 酵母菌:椭圆形,有时形成假丝。
细菌的个体形态( 细菌的个体形态(1)
大 肠 杆 菌 的 革 兰 氏 染 色
细菌的个体形态( 细菌的个体形态(2)
合 四 联 球 菌 和 大 肠 杆 菌 混
杀螟杆菌5H
细菌的个体形态( 细菌的个体形态(3)
螺 旋 菌
细菌的个体形态- 细菌的个体形态-特殊结构1
鞭毛
细菌的个体形态- 细菌的个体形态-特殊结构2
菌落形态特征
从菌落的大小、气味、颜色、表 面有无光泽,是否透明、干燥程度、 粘稠度、菌落隆起情况、边缘是否 整齐等角度描述四大类型菌群的菌 落形态特征
放线菌菌落(产水溶性色素)
放线菌菌落(产脂溶性色素)
放线菌菌落(产脂溶性色素)
放线菌菌落
各种霉菌菌落
青霉菌
思考题
1 如何区别四大类型微生物类群的个体形态和 菌落特征?
杀螟杆菌22H(芽孢)
细菌的个体形态- 细菌的个体形态-特殊结构2
杀螟杆菌52H(芽孢)
细菌的个体形态- 细菌的个体形态-特殊结构3

微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察

微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察

结果分析和报告撰写
分析实验结果
对观察到的微生物形态特征进行详细 记录和分析,确定其分类和鉴别结果 。
撰写实验报告
根据实验结果和分析,撰写实验报告 ,包括实验目的、实验过程、结果分 析等内容。
05
注意事项
显微镜的保养与维护
01
02
03
04
清洁
每次使用后,应用软布轻轻擦 拭显微镜表面,以防止灰尘和 污垢积累。
放大倍数较高,可观察微生物的超微结构,但操作复杂且成本较 高。
载玻片
• 用于放置显微镜观察的样品,通常为透明无色的玻璃片。
盖玻片
• 用于覆盖样品,防止样品移动或干燥,同时起到一定的放大作用。
细菌或真菌样品
细菌
常见的肠道细菌、病原菌等。
真菌
酵母菌、霉菌等。
染色剂(如美蓝、结晶紫等)
美蓝
用于染色细菌细胞壁,使其易于 观察。
逐渐调高倍数,仔细观察微生物的形态特征,如形状 、大小、颜色、细胞结构等。
记录观察结果,绘制微生物形态图谱,以便后续分析 。
04
结果分析
微生物形态特征的识别
80%
识别微生物的形状
通过显微镜观察,可以识别出微 生物的形状,如球形、杆形、螺 旋形等。
100%
识别微生物的大小
通过测量显微镜下观察到的微生 物,可以得出其大小,通常以微 米(μm)为单位。
结晶紫
常用于染色革兰氏阳性菌,使其 呈现紫色。
03
实验步骤
显微镜的使用
打开显微镜电源,调整光源亮度,确保光源稳 定。
01
打开显微镜的载物台,放置待观察的样本 。
03
02
放置显微镜于平坦的台面上,调整显微镜的 高度和角度,确保观察舒适。

微生物实验-放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察

微生物实验-放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察

毛霉与根霉的比较
①两者皆有假根,但根霉属有匍匐枝,毛霉属无。 ②根霉属有囊托,毛霉属无。③两者皆具囊轴④ 毛霉属孢子囊梗单株从菌丝上发生,分枝或不分 枝,根霉无分支。
二、实验原理
酵母
酵母菌是单细胞真核微生物。
酵母菌细胞的形态通常有球形、
卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬
形或藕节形等。比细菌的单细胞 个体要大得多,一般为1~5微米 ′5~30微米。酵母菌无鞭毛,不 能游动。
毛霉
毛霉又叫黑霉、长毛霉。
菌丝无隔、多核、分枝状,在基物内外能 广泛蔓延,有假根,无匍匐菌丝。
毛霉
毛霉显微结构
根霉
根霉(Rhizopus)属于毛霉目 根霉在自然界分布很广,用途广泛,其淀粉酶活性很强,
是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉 (即阿明诺法)生产酒精。
根霉显微形态
实验四 放线菌、霉菌、 酵母菌的形态观察
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
一、实验目的
1、学习掌握观察放线菌、霉菌标本片形态特征。
2、学习掌握观察酵母菌标本片形态特征。
二、实验原理---放线菌
放线菌 因菌落呈放线状而的得名
二、实验原理
放线菌
放线菌的形态比细菌复杂些, 但仍属于单细胞。在显微镜 下,放线菌呈分枝丝状
七、下一个实验
实验五 微生物数量的测定
酵母菌具有典型的真核细胞
结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、
细胞质、液泡、线粒体等,有的
还具有微体。
啤酒酵母的菌落
红酵母的菌落
各种酵母菌的菌落
酵母菌和霉菌的培养对比
电镜下的酵母
三、实验器材
1、菌种:根霉、青霉、曲霉、放线菌、酵 母等标本片

微生物形态观察

微生物形态观察
体。细菌的基本形态有三种:球状、杆状和螺旋状,分别 被称为球菌、杆菌和螺旋菌。
螺菌
小球菌 双球菌
链球菌 葡萄球菌
弧菌
细菌
放线菌
根霉
真菌
分生孢子
孢子梗
曲霉
霉菌的无隔菌丝(a)和 有隔菌丝(b)
实验原理:
2、细菌、放线菌、真菌的菌落特征 微生物广泛分布在自然环境的各个角落 ,在适宜
的温度和条件下培养一段时间后,每一个分散的菌体 或孢子就会迅速的生长繁殖形成一个个肉眼可见的细 胞群体即菌落。
霉菌
真菌菌落特征:
菌落质地一般比放线菌疏松,外 观干燥,不透明,呈现或紧或松的 蛛网状、绒毛状或棉絮状;菌落与 培养基的连接紧密,不易挑取;菌 落正反面的颜色和边缘与中心的颜 色常不一致。
酵母菌
类群 特征
细菌
放线菌
酵母菌
霉菌
菌落表面形 态特征
形态圆形或不规则,边缘光滑 或不整齐;大小不一,表面光 滑或皱褶;颜色不一,常见为 灰白色、乳白色;湿润粘稠
与细菌比较, 主要区别为表 面呈干燥细致 的粉末状或茸 毛状
颇似细菌的菌落, 与放线菌比较,
但不及细菌菌落 表面呈茸毛状
湿润、粘稠多为 和棉絮状,如
乳白色;一般圆 呈粉末状者则
形表面光滑
不及放线菌细
腻致密。与细
菌较,则差
异显著
菌落在培养 基上着生情 况
用接种环易从基质表面刮去菌 落
用接种环易刮 去表面的粉末 或茸毛,但留 下的玉色、圆 形部分,紧密 坚实,大部分 埋入基质中
(2)观察平皿中微生物菌落,并填写表格。
平皿 标号
菌落 名称 大小
颜色
干湿
特征描述 质地 形态

微生物形态观察实验报告

微生物形态观察实验报告

微生物形态观察实验报告微生物形态观察实验报告引言:微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌和病毒等。

微生物广泛存在于自然界中的各个环境中,对人类的生活和健康具有重要的影响。

为了更好地了解微生物的形态和特征,我们进行了一系列的实验观察。

本报告将详细介绍实验的目的、方法和结果,并对所观察到的微生物形态进行分析和讨论。

实验目的:1. 了解微生物的形态特征;2. 掌握常见微生物的观察方法;3. 分析不同微生物的形态差异。

实验方法:1. 根据实验要求,选择不同的微生物样本,包括细菌和真菌等;2. 准备好显微镜、载玻片和染色剂等实验器材;3. 采用湿涂片法或染色法制备微生物标本;4. 利用显微镜对标本进行观察和拍照。

实验结果:1. 细菌形态观察:在实验中,我们选择了大肠杆菌和链球菌两种常见的细菌进行观察。

通过显微镜观察,我们发现大肠杆菌呈现为短杆状,而链球菌则呈现为圆球状。

这种形态差异可能与它们的细胞结构和功能有关。

2. 真菌形态观察:在实验中,我们选择了酵母菌和霉菌两种常见的真菌进行观察。

通过显微镜观察,我们发现酵母菌呈现为单个的圆球状细胞,而霉菌则呈现为多个长丝状细胞的聚集体。

这种形态差异可能与它们的生长方式和繁殖方式有关。

3. 其他微生物形态观察:在实验中,我们还观察了其他一些微生物的形态特征。

例如,病毒是一种非细胞结构的微生物,通过电子显微镜观察,我们发现病毒呈现为非常小的颗粒状结构。

此外,我们还观察了一些微生物的胞内结构,如细菌的细胞壁和真菌的菌丝等。

讨论与分析:微生物的形态特征与其生物学特性密切相关。

细菌的形态多样,有的呈球状、杆状、螺旋状等,这种多样性可能与细菌的生存环境和功能有关。

真菌的形态也多样,有的呈球状、长丝状、菌丝状等,这种多样性可能与真菌的生长方式和繁殖方式有关。

病毒的形态非常简单,只有核酸和蛋白质组成的颗粒,这种简单性可能与病毒的寄生性质有关。

通过本次实验,我们对微生物的形态特征有了更深入的了解。

微生物形态观察实验报告

微生物形态观察实验报告

一、实验目的1. 掌握显微镜的使用方法,学会油镜的使用技巧。

2. 了解并掌握微生物的基本形态特征,包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌。

3. 培养无菌操作技能,提高实验操作的规范性和准确性。

二、实验原理微生物是构成生命的基本单位,其形态和结构是微生物学研究的重要内容。

通过显微镜观察微生物的形态,可以了解其生物学特性,为微生物的分类、鉴定和实验研究提供依据。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的纯培养物。

2. 仪器:光学显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、无菌水、无菌棉签、培养皿、试管等。

四、实验步骤1. 涂片(1)将接种环在酒精灯上灼烧,待其冷却后,蘸取适量纯培养物。

(2)将接种环在载玻片上轻轻涂成薄层。

(3)在涂片上滴加适量无菌水,用无菌棉签轻轻涂抹,使菌体均匀分布。

2. 干燥将涂片放在室温下自然干燥。

3. 染色(1)将干燥后的涂片放入乳酸石炭酸棉蓝染色液中,染色5-10分钟。

(2)用蒸馏水冲洗涂片,去除多余的染色液。

4. 观察(1)将涂片放在显微镜载物台上,先用低倍镜观察,找到菌体后,用高倍镜观察。

(2)观察细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态、大小、颜色等特征。

5. 记录将观察到的微生物形态特征记录在实验报告中。

五、实验结果与分析1. 细菌细菌是单细胞生物,基本形态有球形、杆形和螺旋形。

在显微镜下,观察到细菌的形态和大小,为杆状,大小约为0.5-1.0μm。

2. 放线菌放线菌是丝状真菌,由菌丝构成。

在显微镜下,观察到放线菌的菌丝呈细长状,直径约为2-5μm,菌丝间有横隔。

3. 酵母菌酵母菌是单细胞真菌,个体形态多为卵圆形、圆柱形。

在显微镜下,观察到酵母菌的个体大小约为5-10μm,细胞壁较薄,细胞质透明。

4. 霉菌霉菌是丝状真菌,由菌丝构成。

在显微镜下,观察到霉菌的菌丝呈粗细不一的丝状,直径约为5-20μm,菌丝间有横隔。

六、实验结论通过本次实验,我们掌握了显微镜的使用方法,观察了细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态特征,了解了微生物的基本生物学特性。

实验报告3-微生物细胞形态及菌落特征观察

实验报告3-微生物细胞形态及菌落特征观察

微生物细胞形态及菌落特征观察实验报告马子午生命科学学院食品科学与工程专业 14101班 02号1.引言1.1实验目的学习细菌的一般接种方法;了解放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征;学习并掌握如何观察细菌的形态特征,掌握常用霉菌制片方法。

1.2实验原理放线菌的菌落会产生大量的基内菌丝和气生菌丝,并进一步分化产生孢子丝和孢子,表面呈粉状、颗粒状或絮状;部分蓝细菌可以形成孢子,由成串细胞连成丝状的蓝细菌,在细胞断裂时形成片段,这个片段由异形胞、营养细胞以及极节组成;酵母菌无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子,有性繁殖可以形成子囊和子囊孢子,当酵母菌繁殖旺盛时,母细胞出芽产生的子细胞没有脱离母细胞的时候,子细胞又开始繁殖,这样许多细胞连在一起,形成藕节状的假菌丝;霉菌有青霉和曲霉,青霉的菌落形态特征呈扫帚状,曲霉的形态特征为菊花状的头和足细胞。

霉菌的有些结构在制片过程中容易被破坏,影响观察,采用载玻片培养法。

简单易行,并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。

[1]2.材料与方法2.1材料与试剂曲霉(Aspergillus spp.),青霉(Penicillium spp.),放线菌,蓝细菌,啤酒酵母菌(Sac.cerevisiae),复红染液,美蓝染液,棉蓝染液,酸性酒精。

2.2仪器与设备显微镜,酒精灯,盖玻片,载玻片,镊子,接种环。

2.3方法与步骤2.3.1放线菌的形态观察(插片法)准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。

接种与观察:用镊子从含放线菌菌种的培养基中取一块盖玻片,再用镊子在盖玻片上取菌种置于载玻片中央位置,直接镜检。

2.3.2蓝细菌形态观察准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。

接种:在载玻片中央滴一滴无菌水,取少量含有蓝细菌寄生的藻类于无菌水中,用镊子的头端慢慢敲碎至无菌水开始呈至绿色,盖上盖玻片。

镜检:直接镜检。

2.3.3啤酒酵母子囊孢子形态观察准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。

微生物形态和结构观察

微生物形态和结构观察

第二部分微生物形态和结构观察个体形态和细胞结构是微生物的重要特征,也是识别和鉴定微生物的主要依据之一。

微生物个体微小,要研究它们的形态和结构,通常需要显微镜;在许多情况下,还需要对标本进行染色。

学习和掌握形态学观察技术,对于研究、开发和利用微生物具有重要意义。

实验1 细菌染色和形态结构观察细菌的基本形态主要有球状、杆状和螺旋状。

在适宜的生长条件下,细菌细胞一般在幼龄阶段呈现特定形态。

但若培养条件发生变化或培养物老龄化,菌体形态会出现异常。

细菌个体微小且无色透明,对光线的吸收和反射与水溶液差别不大,直接在显微镜下观察,不易看清它们的真实面目。

对菌体进行染色,可以增加反差,显现细菌的一般结构和特殊结构。

染色技术是微生物形态学研究的重要手段,它可分为简单染色、鉴别染色和特殊染色三种类型。

一、简单染色法(一)目的要求1、学习细菌涂片的基本技术。

2、掌握细菌简单染色法。

3、熟练显微镜油镜的使用技术。

(二)基本原理简单染色是采用一种染料使细菌着色的染色方法。

微生物细胞含有蛋白质、核酸等两性电解质,在酸性溶液中离解出碱性基团而带正电荷,在碱性溶液中离解出酸性基团而带负电荷。

细菌的等电点为pH2~5。

在中性(pH7)、碱性(pH>7)或偏酸性(pH6~7)溶液中,细胞的等电点低于溶液的pH值,因此菌体一般带负电荷。

因为电离后碱性染料带正电荷,可与菌体内的负电荷结合,所以在细菌学研究中大多采用碱性染料进行染色。

常用的碱性染料有碱性复红、蕃红、结晶紫、孔雀绿、美蓝等。

(三)实验器材1、菌种:牙垢细菌。

2、染色液(1瓶/组):石炭酸复红染色液。

3、仪器及相关用品(1套/组):显微镜,香柏油,二甲苯,擦镜纸。

4、其它用品(1套/组):蒸馏水,载玻片,盖玻片,吸水纸,酒精灯,火柴,接种环,镊子,无菌牙签。

(四)实验程序简单染色的操作过程如图4-1所示。

图4-1 细菌的简单染色与显微镜观察1、涂片:取一片洁净无油污的载玻片(通常保存于盛有酒精的广口瓶内,用镊子取出载玻片,在酒精灯上引燃载玻片表面的酒精,冷却后即可使用),在中央滴一小滴蒸馏水,用无菌牙签取少许牙垢,与水滴混匀,涂成薄层(直径约为10mm)。

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实验一微生物形态观察
一、实验目的
1、巩固显微镜的使用方法,重点学习掌握油镜的使用方法。

2、观察并区别常见的细菌、放线菌和真菌菌落的基本形态特征和特殊结构。

3、学习微生物画图法,体会并展现微生物形态的美学价值。

二、实验原理(略)
三、实验器材
1、普通光学显微镜、镜油、镜头纸、擦镜液。

2、细菌装片:金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、破
伤风梭菌、固氮菌、螺菌。

3、霉菌装片:黑根霉、曲霉、青霉、毛霉。

4、酵母菌装片:出芽酵母。

5、放线菌装片。

6、微生物单菌落划线平板:大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、泾阳链霉菌、青
霉、酵母菌。

四、实验步骤
1、显微镜的基本调节
用10×物镜对焦,安放标本,调节光亮度、焦距、瞳距和视度,找到要观察的区域;换40×物镜,用细准焦螺旋调焦。

2、霉菌的特征结构观察
用400×观察黑根酶、曲霉、毛霉装片、青霉装片,用1000×观察接合孢子装片。

3、放线菌的特征结构观察
用1000×观察放线菌装片。

4、细菌基本形态观察
(1)显微镜下观察金黄色葡萄球菌装片,注意菌体间关系。

(2)显微镜下观察枯草芽孢杆菌、大肠杆菌装片。

(3)显微镜下观察螺菌装片,注意菌体螺旋。

5、细菌特殊结构观察
(1)油镜下观察固氮菌装片,注意细菌荚膜。

(2)油镜下观察螺菌装片,注意鞭毛的染色,位置,数目,形态和大小;
(3)用油镜观察苏云芽孢杆菌,巨大芽孢杆菌,枯草芽孢杆菌等,注意芽孢。

6、酵母菌的形态观察
观察出芽酵母形状和出芽方式、树枝状分支的假丝酵母的形状和大小。

7、微生物菌落观察
观察大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、泾阳链霉菌、青霉、酵母菌的菌落平板,
并描述菌落的形状、颜色(正、反面)、含水状态、透明度和边缘情况。

五、实验结果与讨论
1、拍摄五张具有代表性的微生物的照片,见图14-1至图14-5。

注:显微镜号为14。

图14-1 青霉(分生孢子、分生孢子梗),10×40放大
图14-2 放线菌(菌丝),10×100放大
图14-3 曲霉(菌丝、孢子),10×40放大
图14-4 毛霉,10×40放大
图14-5 螺菌(菌体的螺旋),10×100放大
2、用圆圈代表显微镜视野,画五个具有代表性的微生物的图片,下图为扫描后结果。

绘图扫描结果图
3、描述所观察的微生物菌落特征,见表1。

表1 描述所观察的微生物菌落特征
4、思考题
(1)细菌、放线菌、真菌、酵母菌在细胞大小、细胞结构上有何区别?
答:在细胞大小上,真菌和酵母菌的细胞相较于细菌和放线菌的细胞要大一些。


率地说,前两种一般比后两种大几倍至几十倍。

细菌和放线菌的细胞一般在1μm
左右,而真菌和酵母菌则多为10~100μm。

在细胞结构上,细菌和放线菌是原核生物,没有成形的细胞核以及各种复杂的由膜
包被的细胞器。

而真菌、酵母菌是真核生物,具有核膜包被的成形细胞核以及内质
网、线粒体等复杂的细胞器。

(2)如何从菌落的差异来区分细菌、放线菌、真菌、酵母菌?
答: 细菌的菌落一般湿润、光滑、较透明、质地均匀、菌落正反面颜色一致。

放线
菌的菌落形态多干燥致密,菌落边缘的琼脂平面常有变形,而且菌落正反面经常颜
色不一致。

霉菌菌落的质地一般比放线菌疏松,外观干燥,不透明,呈现或紧或松
的蛛网状、绒毛状或棉絮状,菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。


母菌菌落大而突起,较湿润,稍透明,一般呈乳白色,少数红或黑色,且正反面颜
色无差别,且多带酒香味。

六、实验小结
这堂课学习了油镜的使用方法,观察到了奇妙的微生物的微观世界,对微生物的形态特征有了更加感性的认识。

在使用油镜的过程中遇到了视野不干净的情况,我一直认为是油镜不干净,但是擦了好多遍都没有改善,后来经陈老师提醒才意识到是目镜不干净。

今后实验遇到问题要注意从多方面思考原因,冷静地分析问题而不是一味地埋头苦做。

最后感谢陈老师、麻老师和各位助教的耐心细心的讲解和指导。

七、参考文献
陈金春、陈国强主编,《微生物学实验指导》,清华大学出版社,2005年8月。

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