实验9紫外线对微生物生长的影响及抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定
微生物试验-细菌的人工培养及形态学检查
实验一 细菌的人工培养
一、细菌在自然界的分布
1.空气中细菌的检查：每班两个血平板，标记 方法：在室内选择一处放一个平皿，揭开皿盖，
暴露放置10min，即盖上皿盖，放入37℃温箱 培养24小时，观察结果。
2.人体表面细菌的检查---手 指（每组1个平皿）
方法：取一普通平皿培养 基，一部分标记“前”， 另一部分标记“后”，然 后将手指在标记“前”的 部分沾一下，洗手后在标 记“后”的部分沾一下。 放入37℃温箱培养24h后 观察细菌的生长情况。
呼吸道咽部常驻菌群种类较多，正常人咽部需氧菌 中，甲型链球菌检出率最高，其次是奈瑟球菌属和表 皮葡萄球菌。
二、 理化因素对细菌的影响
1.物理因素对细菌的影响---紫外线
原理：紫外线主要作用于 DNA，使一条DNA链上相邻 的两个胸腺嘧啶以共价键结合成二聚体，从而干扰 DNA 的复制与转录导致细菌变异或死亡。
3.人体内部细菌的检查--咽喉部
方法：用“咳碟法”进行检查，取一个血琼脂平 皿培养基，打开平皿盖，置于口腔前约 10cm， 对着平皿咳嗽几次，标记时间，姓名，然后放 入37℃温箱培养24h后观察菌落特征。
二、外界因素对细菌的影响：
1.物理因素对细菌的影响 ：
紫外线：全班两份普通平板：一组大肠杆菌， 一组葡萄球菌，比较紫外线对G+，G-的抑制作 用。
满足a充足的营无菌
（三）分类：1、按物理性状
分类：
+0.3~0.5%琼脂
+1.5~2.5%琼脂
半固体培养基 液体培养基
固体培养基
观察细菌动力 大量繁殖细菌 细菌的分离和纯化
短期保存菌种
固体平板培养基
液体培养基
固体斜面培养基 半固体培养基
微生物考试试题(附答案)
微生物考试试题(附答案)一．选择题（每个2分，共20分）1、组成病毒粒子衣壳的化学物质是（）A、糖类B、蛋白质C、核酸D、脂肪2、属于细菌细胞特殊结构的为（）A、荚膜B、细胞壁C、细胞膜D、核质体3、噬菌体属于病毒类别中的（）A、微生物病毒B、昆虫病毒C、植物病毒D、动物病毒4、半固体培养基中，琼脂使用浓度为（）。
A、0.B、0.3—0.5%。
C、1.5—2.0%。
D、5%6．下述那个时期细菌群体倍增时间最快()A稳定期B衰亡期C对数期D延滞期7.下面关于连续培养的说法中，叙述不正确的是（）A.恒化连续培养的控制对象是菌体密度B.恒浊连续培养中微生物菌体以最高生长速率生长C.恒化继续造就的产物是分歧生长速率的菌体D.XXX继续造就无生长限制因子8.以下叙述中精确的说法是（）A.产生抗逆性强的芽孢是产芽孢细菌在不良环境条件下的一种生殖方式。
B.厌氧的微生物需要较低的氧化复原电位。
C.一种细菌的学名是Staphylococcus aureus,其中aureus属名，Staphyloccus是种名D.类病毒是有侵染性的蛋白颗粒。
9.下述诱变剂中常引起移码突变的是：（）A亚硝酸B烷化剂C碱基类似物D丫啶类染料10.下述那个最可能产生一个重组细胞：（）AF+xF-BHfrxF+CHfrxF-DF+xF-二、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释（每个2分，共12分）1.Gram positive bacteria2.parasporal crystal3.colony4.life cycle5,capsule6,endospore三、判断改错题（每个2分，共10分）1.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物（）2.遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。
（）3.低剂量照射紫外线，对微生物几乎没有影响，但以超过某一阈值剂量的紫外线照射，则会导致微生物的基因突变。
微生物学与免疫学习题8参考答案
微生物学与免疫学习题8参考答案一名词解释1．最小杀菌浓度：最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration，MBC）：杀死99.9%（降低3个数量级）的供试微生物所需的最低药物浓度。
有些药物的MBC与其MIC非常接近，如氨基糖苷类。
有些药物的MBC比MIC大，如β内酰胺类。
如果受试药物对供试微生物的MBC≧32倍的MIC，可判定该微生物对受试药物产生了耐药性。
2．最小抑菌浓度：最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）：在特定环境下孵育24小时，可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度，用于定量测定体外抗菌活性。
3．获得耐药性:对原来敏感的抗生素通过遗传性的改变而获得了抗药性4．多重耐药性：同时对两种以上作用机制不同的药物产生的抗药性5．交叉耐药性：对结构类似或作用机制类似的抗生素均有抗药性6．赖药性：不仅对该药物具有抗性，而且需要该药物作为特殊的营养因素7．耐受性：该菌在最低抑菌浓度时仍受到抑制，但最低杀菌浓度提高8．免疫(immunity)是指机体识别和排除抗原性异物，执行免疫防卫，维持自身生理平衡与稳定的功能。
9．免疫原性：刺激机体产生免疫应答，包括产生抗体或效应T淋巴细胞的性能。
10.免疫反应性：指与抗体或效应T细胞发生特异性结合的能力。
二．选择题1．IMVC试验最常用于鉴定下列何种细菌（B）A．化脓性球菌B．肠杆科细菌C．厌氧性细菌D．结核分枝杆菌E．霍乱弧菌2．与内毒素有关的细菌结构是AA．外膜B．核膜C．线粒体膜D．荚膜E．细胞膜3．内毒素的主要成分为EA．肽聚糖B．蛋白质C．鞭毛D．核酸E．脂多糖4．革兰阳性菌细胞壁与致病有关的化学组分是DA．N-乙酰胞壁酸B．磷壁酸C．壁磷壁酸D．膜磷壁酸E．脂肪酸5．青霉素的抗菌机理是EA．破坏肽聚糖的聚糖支架B．损害细胞膜C．干扰菌细胞的酶系统D．作用于核糖体抑制蛋白质合成E．抑制四肽侧链D-丙氨酸与甘氨酸交联桥的连结6．下列哪种细菌具有异染颗粒AA．白喉棒状杆菌B．百日咳鲍特菌C．流感嗜血杆菌D．伤寒沙门菌E．铜绿假单胞菌7．与细菌侵袭力有关的结构是BA．芽胞B．荚膜C．细胞壁D．中介体E．核糖体8．破坏热原质最有效的方法是EA．高压蒸气灭菌B．紫外线照射C．酒精D．煮沸E．高温干烤9．对人致病的细菌大多是DA．专性需氧菌B．专性厌氧菌C．微需氧菌D．兼性厌氧菌E．以上都对10．细菌代谢产物中与致病性无关的是EA．外毒素B．内毒素C．侵袭性酶D．热原质E．细菌素11.分离致病性肠杆菌科细菌最合适的培养基是CA.普通培养基B.血琼脂培养基C.选择培养基D.鉴别培养基E.厌氧培养基12．不能与红汞同时使用的化学消毒剂是DA．漂白粉B．乙醇C．新洁尔灭D．碘液E．洗必泰13．对血清培养基的灭菌，应选用CA．煮沸法B．巴氏消毒法C．间歇灭菌法D．流通蒸气灭菌法E．高压蒸气灭菌法14．常用的碘液浓度为CA．10g/L B．20g/L C．25g/L D．30g/L E．50gL15．乙醇消毒剂常用的浓度是CA．100％B．95％C．75％D．50％E．30％16．下列消毒灭菌法哪种是错误的AA．金属器械——漂白粉B．排泄物——漂白粉C．饮水——氯气D．含糖培养基——间歇灭菌法E．人或动物血清——滤过除菌17．新生儿预防淋病奈瑟菌所致的脓漏眼的消毒剂是AA．20~40g/L龙胆紫B．1g/L高锰酸钾C．20g/L红汞D．10g/L硝酸盐E．20g/L碘液18.在病原微生物的分类中，属于第一类的是DA.脊髓灰质炎病毒B. 天花病毒C.登革病毒D.新生隐球菌E.小鼠白血病病毒19. 在病原微生物的分类中，属于第二类的是BA.新疆出血热病毒B.汉坦病毒C.轮状病毒D.流感病毒E.破伤风梭菌20.属于高致病性病原微生物是AA.天花病毒B.登革病毒C.流感病毒D.志贺菌E.沙眼衣原体【参考答案】1．B 2．A3．E4．D 5．E 6．A7．B 8．E 9．D10．E 11.Ｃ12．D 13．C 14．C 15．C16．A 17．D18.B 19.B20.A三．填拱题1．口服给药制剂细菌总数≤1000个/g或≤100个/mL；霉菌和酵母总数≤100个/mL（或/g），不得检出大肠埃希菌.2．在控制菌（病原菌）的检查中口服药—不能检出沙门氏菌、大肠杆菌；外用药、眼科制剂—不能检出金葡菌、绿脓杆菌；深部用药不能检出破伤风梭菌。
微生物生长与控制习题及答案
第七章微生物的生长及其控制习题、名词解释1．微生物连续培养2．抗微生物剂3．抗生素4．抗代谢物5．微生物的抗药性6．灭菌7．消毒8．生长曲线9. 深层液体培养：、填空题1．一条典型的生长曲线至少可分为、、和4 个生长时期。
2．测定微生物的生长量常用的方法有、、和。
而测定微生物数量变化常用的方法有、、和；以生物量为指标来测定微生物生长的方法有、和。
3．获得细菌同步生长的方法主要有（1）和（2），其中（1）中常用的有4. 控制连续培养的方法有5 .影响微生物生长的主要因素有等。
6•对玻璃器皿、金属用具等物品可用进行灭菌；而对牛奶或其他液态食品一般米用灭菌, 其温度为,时间7 .通常，细菌最适pH的范围为，酵母菌的最适pH范围，霉菌的最适pH值范围是杀灭或抑制微生物的物理等。
9.抗生素的作用机制有10.抗代谢药物中的磺胺类是由于与相似，从而竞争性地与二氢叶酸合成酶结合，使其不能合成三、选择题1. 以下哪个特征表示二分裂？（）A、产生子细胞大小不规则 B 、隔膜形成后染后体才复制C、子细胞含有基本等量的细胞成分 D 、新细胞的细胞壁都是新合成的2. 代时为0.5h的细菌由103个增加到109个时需要多长时间？（）A、40h B 、20h C 、10h D 、3h3. 如果将处于对数期的细菌移至相同组分的新鲜培养基中，该批培养物将处于哪个生长期？（）A、死亡期B 、稳定期C、延迟期D、对数期4. 细菌细胞进入稳定期是由于：①细胞已为快速生长作好了准备；②代谢产生的毒性物质发生了积累；③能源已耗尽；④细胞已衰老且衰老细胞停止分裂；⑤在重新幵始生长前需要合成新的蛋白质（）。
A、1，4 B 、2，3 C 、2，4 D 、1，55. 对生活的微生物进行计数的最准确的方法是（）。
A、比浊法 B 、显微镜直接计数C、干细胞重量测定 D 、平板菌落记数6. 下列哪咱保存方法全降低食物的水活度？（）A、腌肉B、巴斯德消毒法C、冷藏D、酸泡菜7. 连续培养时培养物的生物量是由（）来决定的。
实验9紫外线对微生物生长的影响及抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定
实验九紫外线对微生物生长的影响抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定及硫化氢产生实验杨明轩生物111 28一、实验目的1、了解并掌握紫外线和抗生素杀灭微生物细胞的原理。
2、学习和掌握应用紫外线杀菌的实验操作步骤。
3、学习并掌握采用液体培养技术测定药剂对微生物的最低抑制浓度的方法。
4、通过了解不同细菌对含能产硫化氢半固体培养基的分解利用情况，结合实验八的结果，认识微生物代谢类型多样性。
二、实验原理紫外线是杀菌效率较强的物理因素。
其原理是，紫外线可以直接作用于细胞内的DNA 分子，使同一DNA 链上相邻的嘧啶形成胸腺嘧啶二聚体，因而导致双链DNA 结构发生变化，使DNA 的正常复制受到影响，最终导致细胞死亡。
紫外线的杀菌效果与照射剂量呈正相关，即紫外灯的功率、照射时间和照射物品距紫外灯的距离等因素都会影响杀菌效果。
虽然紫外线具有很好的杀菌效果，但其穿透能力不强，一层黑纸即可阻挡紫外线的通过，因此紫外线常用于室内空气灭菌或器皿的表面灭菌。
本实验采用平板法验证紫外线的杀菌作用和不同微生物对紫外线的耐受性。
很多化学药剂都能够抑制微生物的生长。
最低抑制浓度( MIC)是指药物抑制微生物生长的最低浓度，由于微生物对药物的耐受性不同，因此最低抑制浓度是有差异的。
可以通过液体稀释法来测定最低抑制浓度。
将一定培养液中加入不同浓度的药剂，配制成一定浓度梯度，再将制备好的菌悬液按一定体积接种，置一定温度培养后，可通过肉眼或分光光度计测定浊度，以不能生长菌株的试管内药剂的浓度为MIC。
三、实验材料1 菌种：大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis )、普通变形杆菌(Proteus vulgaris )、2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、LB 培养基、产硫化氢半固体穿刺培养基；3、试剂：无菌水、10血/ d链霉素；5、仪器：无菌培养皿、无菌试管、刮铲、灭菌黑纸、。
《微生物学》题库第七章微生物的生长及其控制
《微生物学》题库第七章微生物的生长及其控制第一部分微生物生长部分一、单项选择题1、菌株的定义应该是（）。
A.具有相似特性的细胞群体B.具有有限的地理分布的微生物群体C.从一单独的细胞衍生出来的细胞群体D.与种（species）一样定义2、微生物的干重一般为其湿重的（）。
A.5%～10%B.20%～25%C.25%以上D.10%～20%3、用于总活菌计数的方法是（）A.浊度计比浊法B.血球板计数法C.平板菌落计数法D.显微镜直接计数法4、下列不属于微生物直接计数法特点的是（）A.必须利用显微镜计数B.可以区分活菌与死菌C.不能区分活菌与死菌D.计数室都是400小格组成5、一个细菌每10分钟繁殖一代，经1小时将会有多少个细菌（）A.64B.32C.9D.16、代时是指（）。
A.从对数期结束到稳定期开始的间隔时间B.培养物从接种到开始生长所需要的时间C.培养物的生长时间D.细胞分裂繁殖一代所需要的时间7、微生物分批培养时，下列符合延迟期的特点是（）。
A.微生物的代谢机能非常不活跃B.菌体体积增大C.菌体体积不变D.菌体体积减小。
8、制备原生质体，选择适宜的菌龄期为（）A.迟缓期B.对数期C.稳定期D.死亡期。
9、下述那个时期细菌群体倍增时间最快（）A.稳定期B.衰亡期C.对数期D.延滞期10、细菌芽孢产生于（）A.对数生长期B.衰亡期C.稳定期前期D.稳定期后期正确答案：D11、处于（）的微生物，死亡数肯定大于新生数。
A.适应期B.对数期C.稳定期D.衰亡期12、指数期细菌的特点是（）A.细胞以指数速度死亡B.细胞准备开始分裂C.细胞以最快速度进行分裂D.细胞死亡数和分裂数相同13、细菌最适生长温度是（）℃A.35-40B.10-20C.20-30D.30-3514、真菌最适生长温度是（）℃A.35-40B.10-20C.20-30D.30-3515、微生物生长繁殖的最高温度是（）。
A.最高生长温度B.最适生长温度C.致死温度D.无法判断16、下面关于微生物最适生长温度判断，正确的是（）A.微生物群体生长繁殖速度最快的温度B.发酵的最适温度C.积累某一代谢产物的最适温度D.无法判断17、将土壤接种在含放射性碳的葡萄糖培养基中，5天后检查，下列那种情况证明土壤中有生命（）。
微生物抗菌素敏感试验
微生物抗菌素敏感试验----3d81e25e-715e-11ec-80b9-7cb59b590d7d抗菌素敏感试验1.掌握药敏试验（K-B纸片琼脂扩散法）的方法、原理和结果判断。
2.掌握抗酸染色方法及结果判断1、抗菌药物分类：（1）β-内酰胺类：青霉素类和头孢菌素类（硫酶、单酰基环β-内酰化酶抑制剂、甲氧基青霉素类）（2）氨基糖甙类：链霉素、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素、小诺霉素、阿奇霉素（3）大环脂质：红霉素、白霉素、乙酰螺旋霉素、麦地那霉素、交沙霉素（4）四环素：四环素、土霉素、金霉素、强力霉素（5）氯霉素：氯霉素、甲砜霉素（6）作用于g+细菌的其它抗生素：林可霉素、氯林可霉素、万古霉素、杆菌肽（7）作用于g-菌的其它抗生素：多粘菌素、磷霉素、、环丝氨酸、利福平、抗真菌抗生素、灰黄霉素（8）抗肿瘤抗生素：丝裂霉素、放线菌素D、博莱霉素和阿霉素（9）具有免疫抑制作用的抗生素：环孢素2、抗菌药物敏感试验(antimicrobialsusceptibilitytestinginvitro)1）抑菌试验：体外测定抗菌药物抑制细菌生长能力的试验（1）纸片扩散法（discdiffusiontest）K-B纸片琼脂扩散法原理：将含有定量抗生素的纸片贴在接种试验菌的琼脂平板上。
纸张中的药物吸收琼脂中的水分并溶解，然后不断扩散到纸张周围区域，形成一个逐渐降低的梯度浓度。
在纸张周围的抑菌浓度范围内，被测细菌的生长受到抑制，从而形成一个透明的抑菌圈。
抑制区的大小反映了受试细菌对受试药物的敏感性，并与药物对受试细菌的最低抑制浓度（MIC）呈负相关。
（2）稀释试验a.将被检菌株接种于一组含有不同稀释度抗菌药物的培养基内b、在37℃下放置18-24小时后，抗菌药物可以用肉眼抑制受试细菌生长的最低浓度（MIC），即细菌对抗菌药物c.mic50mic90的敏感性d.根据mic和常用剂量时该药所能达到的血药浓度来划定细菌对各种药物的敏感度或耐药的界限（breakpoint,折点)（3） E试验（Etest）2）灭菌试验3）联合药敏试验4）检测细菌所产生的抗生素灭活酶试验3、药物敏感性分级1）敏感（s）这表明，在常规剂量的被测药物后，体内达到的血液药物浓度可以抑制或杀死被测细菌。
微生物的实验
微生物的实验实验一油镜的使用方法与革兰氏染色实验目的:掌握油镜的使用方法与革兰氏染色的方法实验原理: 革兰染色法⑴革兰阳性菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入；革兰阴性菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层薄，脂质含量多，乙醇易透入。
⑵革兰阳性菌等电点（pI 2~3）比革兰阴性菌（pI 4~5）低，在相同pH条件下，革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多，故与带正电荷的结晶紫染料结合较牢固，不易脱色。
⑶革兰阳性菌菌体含大量核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的细菌不被乙醇脱色；革兰阴性菌含核糖核酸镁盐很少，故易被脱色。
实验步骤: 1.涂片取洁净载玻片1张，用接种环取1～2环生理盐水放于载玻片上，用灭菌的接种环在固体培养基上挑取少许细菌与盐水混合，涂布成直径１cm左右的菌膜（可视挑取菌落的多少涂片范围相应变化）。
若采用液体培养物，可直接取1～2环菌液涂布。
接种环须经火焰灭菌方可放回原处，以免造成污染。
2.干燥涂片最好在室温中自然干燥，或将标本接种面向上，置酒精灯火焰高处慢慢烘干，切勿在火焰上烤。
3.固定干燥后的标本面向上迅速通过火焰3次，这样既可杀菌，又能将细菌固定在玻片上，以免玻片上细菌在染色过程中被水冲洗掉。
2.染色(1)初染：滴加结晶紫染液2～3滴于涂布细菌处，覆盖菌膜，1min后以细水漫过轻洗，将积水甩干。
(2)媒染：滴加卢戈碘液同上，1min后水洗，并将标本片上的积水甩净。
(3)脱色：加95%乙醇数滴于标本片上，轻轻摇晃数秒，斜持玻片使乙醇流掉，再滴加乙醇直至无紫色脱下为止（约30s，灵活掌握时间），细水冲洗，甩干。
(4)复染：滴加石炭酸复红染液，30s～1min后水洗，用吸水纸吸去积水。
3. 镜检用油镜观察，并判断细菌的染色性。
记录实验结果。
4.实验后处理擦干油镜镜头，整理、清洁显微镜，把显微镜放回原处，把标本片放入消毒缸中。
注意事项: 1.标本片涂的太薄或太厚，菌体分散布不均匀，都可影响染色结果。
重庆理工大学610药学基础(微生物学和生物化学)2013--2018年考研真题
重庆理工大学2013 年攻读硕士学位研究生入学考试试题学院名称：药学与生物工程学院学科、专业名称：药学、微生物与生化药学第一部分微生物学一、名词解释（每个5分，共40分）营养缺陷型接合富营养化孔蛋白选择毒力正变株PHB 呼吸链二、选择题（每题2分，共40分）1、霉菌的基本形态是( )。
A、球状B、杆状C、螺旋状D、分枝丝状体2、发酵是以 ( )作为最终电子受体的生物氧化过程。
A、O2B、CO2C、无机物D、有机物3、细菌的芽孢是( )。
A、繁殖体B、营养体C、休眠体D、运动器官4、链霉素是从何种微生物中提取出来的( )。
A、细菌B、放线菌C、真菌D、衣原体5、接种环常用的灭菌方法是( )。
A、火焰灭菌B、干热灭菌C、高压蒸汽灭菌D、间歇灭菌6、酵母菌在( )条件下进行酒精发酵。
A、有氧B、无氧C、有二氧化碳D、有水7、下列微生物能通过细菌滤器的是( )。
A、细菌B、酵母菌C、病毒D、霉菌8、在固体平板上,青霉菌菌落周围葡萄球菌不能生长,此种关系为（）。
A、竞争关系B、猎食关系C、拮抗关系D、寄生关系9、除（）外都是噬菌体的最重要的特征参数。
A、潜伏期B、裂解期C、平稳期D、裂解量10、大部分微生物( )。
A、是原生动物B、帮助改善生活质量C、生活在海洋的底层D、发现于外层空间11、属于细菌细胞特殊结构部分的是( )。
A、细胞壁B、细胞膜C、芽孢D、原生质12、接合时Ｆ因子进入受体细胞，受体细胞（）A、经历裂解B、快速繁殖C、变成供体细胞D、发育出线粒体13、微生物双名法两个组成部分是（）。
A、目名和科名B、科名和属名C、属名和种的形容词D、属名和多样化的词14、古细菌概念的提出依据是1977年Woese对（）核酸序列同源性的测定分析。
A、23S rRNAB、16S rRNAC、tRNAD、mRNA15、抗体分泌在机体的腔中如消化道的是（）。
A、IgDB、IgAC、IgED、IgM16、G+细菌细胞壁的主要成分为( )。
兽医微生物学(浙江农林大学)知到章节答案智慧树2023年
兽医微生物学（浙江农林大学）知到章节测试答案智慧树2023年最新绪论单元测试1.兽医微生物学的研究领域包括：家畜家禽、伴侣动物、实验动物、水生动物以及野生动物微生物。
参考答案:对第一章测试1.SPF动物是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性微生物的动物。
参考答案:对2.光感作用是指紫外光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料如：结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用，这一现象为光感作用。
参考答案:错3.植物杀菌素是指存在于某些植物中的杀菌物质。
参考答案:对4.微生物学的发展可概况为三个阶段，分别是：形态学时期、生理学及免疫学的奠基时期、近代及现代微生物学时期。
参考答案:对5.脂多糖又称内毒素，其结构包括：O抗原侧链多糖、核心多糖、类脂A；其中核心多糖是内毒素的主要毒性成分。
参考答案:错6.培养基按照功能的差异可以分为：鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基。
参考答案:对7.细菌的生长曲线包括：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期四个时期，其中稳定期致病力最强，染色特征明显。
参考答案:错8.麦康凯琼脂培养基含有胆盐，抑制革兰阳性菌的生长，可用于分离大肠杆菌。
该培养基中含有乳糖和中性红指示剂，故大肠杆菌呈现粉红色。
参考答案:对9.实验室常使用的杀菌灯紫外线波长为253.7 nm；光复活最有效可见光波长510 nm。
参考答案:对10.高压灭菌的主要机制是细菌在水中发生空（腔）化作用，在细胞表面产生空泡和瞬时高压，菌体崩解。
参考答案:错11.抗生素的抑菌原理包括：干扰细胞壁细胞壁的合成、损伤细胞膜而影响其通透性、影响菌体蛋白的合成、影响核酸的合成等。
参考答案:对12.革兰阳性菌的细胞壁，其脂类含量较多，而肽聚糖较少，当用95%酒精脱色时，脂类被溶，使得细胞壁孔隙变大。
参考答案:错13.消毒剂的性质、浓度和作用时间是影响消毒剂作用发挥的唯一因素。
参考答案:错14.射线可作用于细菌周围液体内的氧分子，形成氧化性基团，能使菌体内酶类的-SH氧化而失去活性。
大肠杆菌培养实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除大肠杆菌培养实验报告篇一：大肠杆菌实验报告大肠杆菌紫外线诱变及抗药性菌株筛选0740063阿噟兰1.前言抗生素能破坏细菌细胞壁的结构，使细菌的繁殖和生长受到抑制。
但某些细菌对抗生素表现出抗性，原因是其基因发生了改变，产生能抵抗抗生素的性状。
在自然情况下，细菌的基因突变率很低，而且突变是不定向的，因此在自然条件下，想要获得有抗性的细菌是很困难的。
当给与适当的物理条件时，其突变率会大大增加。
如当用α射线、β射线、γ射线、Χ射线、中子和其他粒子、紫外线、微波等物理因素辐射时，能够促进遗传物质突变。
DnA对紫外线（uV）有强烈的吸收作用，尤其是碱基中的嘧啶，它比嘌呤更为敏感。
紫外线引起DnA结构变化的形式有DnA链断裂、碱基破坏、胸腺嘧啶二聚体等。
因此，紫外线通常作为诱变剂，用于微生物菌种选育。
一般细胞分裂越旺盛，诱变剂量越大，突变率高，诱变最有效的波长253~265nm。
选择合适的诱变剂量对于获得较高突变率十分关键，过高或过低的辐射剂量会导致菌株死亡或诱变不充分而降低诱变效果。
在紫外线诱变下，菌株发生不定向的突变，想要得到需要的特向变异必须对诱变后的菌株做筛选。
本实验想要得到的是能够抵抗抗生素的菌株，因此可以用抗生素培养基作为筛选培养基对菌种进行筛选。
若菌株没有发生定向突变，则该菌株不能在抗性培养基上正常生长，只有发生了定向突变才可能在筛选培养基上正常生长。
紫外线对于菌株有诱变作用外，对菌株还有较强的致死作用，因为紫外线改变了菌株的基因结构导致菌株无法正常生长繁殖。
因此，通过本实验的操作，在合适的照射剂量的设置下，比较不同不同照射剂量下的致死效果和突变率，并初步分析两者的相关性。
在分析死亡曲线和诱变率曲线的基础上，能了解诱变育种的机理和方法，为做进一步的诱变实验做准备。
2.材料和方法2.1实验材料、仪器和试剂菌种：大肠杆菌仪器：超净台、离心机、高压灭菌锅、培养箱、磁力搅拌器、培养皿、涂布器、移液管、移液器试剂：牛肉膏蛋白胨培养基相关试剂、硫酸卡那霉素水溶液（50mg/ml）、生理盐水2.2实验方法2.2.1制备培养基普通培养基——牛肉膏蛋白胨培养基（400ml）：牛肉膏5g蛋白胨10gnacl5g琼脂20g蒸馏水1000mlph7.0按配方配制好培养基后置于灭菌锅中115℃15min，倒平板，4皿*15ml*5组+2皿*15ml=22皿*15ml=330ml筛选培养基(200ml)：含抗生素50mg/L。
微生物大实验实验报告 (自动保存的)
中央民族大学生命与环境科学学院微生物综合性设计实验报告2013年11月30日化学抑杀菌剂的效果评价 Evaluation of bactericide effect of chemical inhibition卡那霉素、氨苄青霉素和四环素对细菌抑杀效果的评价杨芳（中央民族大学生命与环境科学学院北京100081）摘要：目的了解抗生素对微生物生长的影响，学习抗菌谱试验的基本方法；自主设计方案，掌握评价化学抑杀剂作用效果方法；掌握评价化学抑杀剂作用效果方法。
方法本实验主要采用倾注法测菌悬液浓度、滤纸片法测定抗生素的最小抑制浓度（MIC）及pH值对抗生素作用效果的影响和t检验法对实验结果进行统计学分析。
结果本次试验所用大肠杆菌和枯草芽孢杆菌菌悬液浓度分别为1.3 107CFU/mL、7.1 107 CFU/mL；对大肠杆菌卡那霉素、氨苄青霉素和四环素的MIC分别为0.006mg/mL、0.098 mg/mL和0.781mg/mL，对枯草芽孢杆菌卡那霉素、氨苄青霉素和四环素的MIC分别为0.024 mg/mL、0.391 mg/mL 和0.195mg/mL；卡那霉素对大肠杆菌为杀灭作用，对枯草芽杆菌为抑制作用、四环素对大肠杆菌为抑制作用，对枯草芽孢杆菌为杀灭作用、青霉素对枯草芽孢杆菌为抑制作用，因大肠杆菌出现抗性，所以青霉素对大肠杆菌的作用不明显。
结论对同一药剂，低浓度的药剂对细菌抑杀效果不明显而随着浓度的增大其抑杀效果越来越明显；同一浓度的同一药剂对不同细菌有不同的抑杀效果；不同药剂对同一细菌的抑杀效果是不同的。
关键字：最小抑制浓度；抗生素；大肠杆菌；枯草芽孢杆菌Kanamycin, ampicillin and tetracycline evaluation of the inhibition of bacterial killing effectsYang fang(College of life and environmental science, Minzu University of china, Beijing,100081 ) Abstract：Objective understand the impact of antibiotics on microbial growth, learn basic methods of spectrum antimicrobial testing; design independently, master evaluate effects of chemical agents to kill suppression methods; grasp evaluate effects of chemical agents to kill suppression methods. Methods This experiment measured use pour bacterial suspension concentration, filter paper assay antibiotic minimum inhibitory concentration (MIC) and the effect of pH on the effects of antibiotics and t-test of the experimental results were analyzed statistically. Results The tests used Escherichia coli and Bacillus subtilis bacteria suspension concentration was1.3 107CFU/mL, 7.1 107 CFU / mL. Escherichia coli kanamycin, ampicillin and tetracycline MIC was0.006 mg / mL, 0.098 mg / mL and 0.781mg/mL. Bacillus subtilis, kanamycin, ampicillin and tetracycline MIC was 0.024 mg / mL, 0.391 mg / mL and 0.195mg/mL; kanamycin killing effect on E. coli, Bacillus subtilis for the inhibition of E. coli tetracycline inhibition of Bacillus subtilis to kill, penicillin is the inhibition of Bacillus subtilis, Escherichia coli occur due to resistance, so the role of Escherichia coli penicillin is not obvious. Conclusions For the same drug, a low concentration of drug suppression kill little effect on bacteria and with the increasing concentration of its suppression kill more and more obvious effect; same drug in the same concentration ofdifferent suppression kill bacteria have different effects; different agents of the same suppression of bacterialkilling effects are different.Keywords: MIC; Antibiotic; E.coli; Bacillus subtilis一、引言：1.实验目的：1.1了解抗生素对微生物生长的影响，学习抗菌谱试验的基本方法；1.2巩固已学习的微生物实验技能，学以致用；1.3自主设计方案，通过滤纸片法研究一些常用抗生素的抑杀菌效果，掌握评价化学抑杀剂作用效果方法；1.4掌握评价化学抑杀剂作用效果方法；1.5培养学生的团队合作意识；1.6培养学生总结实验结果和撰写科研论文的能力。
大肠杆菌营养缺陷型菌株的诱变及筛选 山大微生物大实验
山东大学实验名称：大肠杆菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选作者：姚健(201000140136)同组者：刘新强指导老师：林建群(教授)实验日期：2013年5月22日-6月1日微生物大实验报告大肠杆菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选山东大学生命基地班姚健 201000140136摘要：营养缺陷型菌株或称异养型（auxotroph）菌株是许多微生物生理生化以及遗传研究的重要菌株材料。
此类菌株不仅在生物研究方面有着很重要的作用，而且在生物工程和生物技术上都有很重要的作用。
营养缺陷型菌株的筛选也成为了微生物科学工作者必备的基本实验技能之一。
实验采用物理诱变非电离辐射紫外线（15W）为诱变剂，来对大肠杆菌诱发突变，并用抗青霉素法淘汰野生型（富集营养缺陷型），采用点植对照法检出营养缺陷型，划线复证后得到两株营养缺陷型菌，进行生长谱法鉴定，两个平板都长满了菌落，即没有预期的营养缺陷型菌株出现。
Abstract:Auxotrophic bacterias are very important materials in the microbial biochemical and genetical research.Auxotrophic bacterias are important to not only bioresearch but also biotechnology.The screening of auxotrophic bacterias has become one of scientists’ primary experimental skills.We use the ultravioley light as the mutagen to induce the mutation of the E.coli,then weed out the wild type by Penicillin resistance method to gather auxotrophic bacterias,next we check out the auxotrophic bacterias by spot planting.We get two auxotrophic bacterias by marking out，finally we test the type of auxotroph by auxanography.Each bacteria grew well everywhere in the plate indicating that t here’s no auxotrophic bacteria.关键词：大肠杆菌；营养缺陷型菌株；紫外线诱变；划线复证；生长谱测定；筛选Key words:Escherichia;auxotrophic bacteria；ultravioley mutation;marking out;auxanography;screening1引言筛选营养缺陷型菌株一般具有四个环节：诱变处理、营养缺陷性的浓缩、检出、鉴定缺陷型。
微生物学(第六章-微生物生长及其控制)
“微生物学”练习题第六章-微生物生长繁殖及其控制一、选择题1、对于细菌群体生长曲线叙述不正确的是（）。
A、对容器内全部培养基里的细菌进行测定B、以细菌数目的对数为纵坐标C、以时间为横坐标D、细菌的群体生长曲线可分为四个时期2、消毒的目的是（）。
A、消灭一切微生物B、消灭病原微生物C、抑制有害微生物D、抑制生物体内病原微生物3、代时是指（）。
A、培养物从接种到开始生长所需要的时间B、从对数期结束到稳定期开始的间隔时间C、培养物生长的时间D、细胞分裂繁殖一代所需要的时间4、在典型的单细胞微生物生长曲线中，细胞形态最大的生长期是（）。
A、延滞期B、对数期C、稳定期D、衰亡期5、在典型的单细胞微生物生长曲线中，代时最短的生长期是（）。
A、延滞期B、对数期C、稳定期D、衰亡期6、在典型的单细胞微生物生长曲线中，细胞产量最高的时期是（）。
A、延滞期B、对数期C、稳定期D、衰亡期7、下列保存方法会降低食物的水活度的是（）。
A、腌肉B、巴斯德消毒法C、冷藏D、酸泡菜8、能导致微生物死亡的化学剂是（）。
A、抑菌剂B、溶菌剂C、杀菌剂D、B和C9、微生物细胞内环境中的pH值一般为（）。
A、中性B、碱性C、酸性D、与所处环境一致10、只能用高压灭菌才能杀死的是（）。
A、结核分支杆菌B、病毒C、细菌芽孢D、霉菌孢子11、磺胺的结构类似物是（）。
A、二氢叶酸B、二氢蝶酸C、对氨基苯甲酸D、四氢叶酸12、青霉素杀菌的主要机理是（）。
A、损伤细胞膜B、干扰蛋白质合成C、破坏酶系统D、抑制细胞壁合成13、采用紫外线诱变菌种时需要在黑暗或红外条件下进行，主要原因是可见光激活微生物细胞中的（）。
A、光激活酶B、乙醛脱氢酶C、乙醇脱氢酶D、磷酸脱氢酶14、能通过抑制叶酸合成而抑制细菌的生长的是（）。
A、青霉素B、磺胺类药物C、四环素D、以上所有15、直接显微镜计数适宜的微生物是（）。
A、细菌B、原生动物C、病毒D、霉菌孢子和酵母菌16、所有微生物的世代时间（）。
抗生素生物效价测定详细参考
---一参照秘斗一一页眉页脚可删除一一实验一抗生素生物效价测定【实验目的】1.掌握抗生素生物效价测定的原理和方法；2.掌握管碟法测定抗生素生物效价相关的操作方法。
【实验原理】抗生素的效价常采用微生物学方法测定，它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定抗生素效价的方法，如管碟法。
管碟法是目前抗生素效价测定的国际通用方法，我国药典也采用此法。
管碟法是根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用，比较标准品和检品两者对试验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价。
管碟法的基本原理是在含有高度敏感性试验菌的琼脂平板上放置小钢管（内径6.0±0.l mm，外径8.0±0.l mm，高10±0. lmm），管内放人标准品和检品的溶液，经16~18小时恒温培养，当抗生素在菌层培养基中扩散时，会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度，即扩散中心浓度高而边缘浓度低。
因此，当抗生素浓度达到或高于乂集（最低抑制浓度）时，试验菌就被抑制而不能繁殖，从而呈现透明的无菌生长的区域，常呈圆形，称为抑菌圈。
根据扩散定律的推导，抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系，比较抗生素标准品与检品的抑菌圈大小，可计算出抗生素的效价。
常用的管碟法有：一剂量法、二剂量法、三剂量法。
后二法已经列入药典。
二剂量法系将抗生素标准品和供试品各稀释成一定浓度比例（2:1或4:1）的两种溶液，在同一平板上比较其抗药活性，再根据抗生素浓度对数和抑菌圈直径成直线关系的原理来计算供试品效价。
取含菌层的双层平板培养基，每个平板表面放置4个小钢管，管内分别放入供试品高、低剂量和标准品高、低剂量溶液。
先测量出四点的抑菌圈直径，按下列公式计算出检品的效价。
（1）求出W和V：W=（SH+UH）-（SL+UL）（式 2.10-1）V=（UH+UL）-（SH+SL）（式2.10-2）式中：UH：供试品高剂量之抑菌圈直径；UL：供试品低剂量之抑菌圈直径；SH：标准品高剂量之抑菌圈直径；SL：标准品低剂量之抑菌圈直径；（2）求出① 0=D-antilog（IV/W）（式 2.10-3）式中：。
环境工程微生物题库(有答案)
判断题1.微生物系统分类单元从高到低依次为界、门、纲、目、科、属、种（×）最高为域2.株是微生物分类最小单位（×）种是微生物分类最小单位3.溶原性噬菌体的DNA整合在宿主DNA上，不能独立进行繁殖（√）4.放线菌属于真核微生物（×）放线菌是原核微生物5.大多数放线菌属革兰氏阴性菌（×）除枝动菌属外，其余放线菌均为革兰氏阳性菌6.放线菌的菌体由纤细的长短不一的菌丝组成，在固体培养基上呈辐射状，菌丝分支，为单细胞（√）7.霉菌的菌落疏松，菌丝细小，与培养基结合紧密，不易用接种环挑取（×）霉菌菌落形态较大8.菌苔是细菌在固体培养基上的培养特征之一（×）菌落是细菌在固体培养基上的培养特征之一9.大肠杆菌属于单细胞微生物，金黄色葡萄球菌属于多细胞微生物（×）细菌都是单细胞10.大肠杆菌是革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性菌（√）11.碱性染料能与细胞中带正电的组分结合，常用于细菌染色（×）碱性染料是和细胞中带负电的组分结合12.革兰氏阳性菌细胞壁的脂肪含量比革兰氏阴性菌高（×）低13.红螺菌的同化作用类型为光能异养型（√）14.渗透酶属于诱导酶，其他酶属于结构酶（×）渗透酶是载体蛋白15.一切厌氧微生物都含有超氧化物歧化酶（×）耐氧厌氧微生物含超氧化物歧化酶，一切厌氧微生物都不具有过氧化氢酶16.分子氧对专性厌氧微生物的抑制和杀死作用是因为这些微生物缺乏过氧化氢酶（√）17.主动运输需要载体和能量，促进扩散不需要载体和能量（×）促进扩散要载体不要能量18.大多数微生物可以合成自身所需的生长因子，不必从外界摄取（√）19.核糖体的功能是合成蛋白质（√）20.明胶是最常用的凝固剂（×）琼脂最常用的凝固剂21.浓乳糖蛋白胨培养基是合成培养基（×）是天然培养基22.豆芽汁培养基是合成培养基（×）是天然培养基23.分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此时细胞处于代谢活动低潮，细胞数目不增加（√）24.恒化培养与恒浊培养的区别是前者菌体始终处于对数期（×）区别前者保持细菌浓度不变，后者保持营养成分浓度不变25.乳糖操纵子是由结构基因、操纵基因、调节基因组成（√）26.操纵子的结构基因通过转录、翻译控制蛋白质的合成，操纵基因和调节基因通过转录、翻译控制结构基因的表达（√）27.细菌所有遗传信息都储存在细菌染色体上（×）细菌为原核微生物，无染色体，基因还可以存在质粒上28.遗传型相同的个体在不同环境下会有不同的表现型（√）29.低剂量的紫外线照射，对微生物没有影响，但超过某一阈值的紫外线照射，则会导致微生物基因突变（×）低剂量紫外线照射导致基因突变30.导致牛得疯牛病的朊病毒的遗传物质是DNA（×）是蛋白质31.HgCl2的杀菌机理是与微生物酶的-SH基结合，使酶失去活性，或与菌体蛋白质结合，使之变性或沉淀（√）32.反消化作用是在好氧条件下进行的（×）在厌氧条件下进行33.好氧活性污泥法处理废水过程中，去除的有机污染物全部转化为二氧化碳和水（×）大部分转化为微生物自身组成34.活性污泥法处理废水，易产生污泥膨胀问题（√）35.用霉菌、酵母菌处理有机废水时，有时会出现活性污泥丝状膨胀，这时可以通过修改工艺来解决（√）36.对厌氧消化-甲烷发酵，污水pH一般保持在之间（√）37.自然界中产甲烷菌有很多种，有些是好氧的，有些是厌氧的，有些是兼性厌氧的（×）甲烷菌都是厌氧的38.导致水体富营养化的生物主要是硅藻（×）是蓝藻39.水体中有机物浓度越高，微生物代谢作用消耗的溶解氧越多（√）40.任何土质中微生物种类都按细菌、真菌、放线菌、原生动物、藻类的顺序由多到少排列（×）任何土质中微生物种类都按细菌、放线菌、真菌、原生动物、藻类的顺序由多到少排列填空题1.微生物和其他类型微生物相比具有个体极小、分布广种类多、繁殖快、易变异特点。
微生物学检验题库及答案
微生物学检验题库及答案一.名词解释1.医院感染：指患者在医院内因治疗、护理等原因而感染的疾病。
2.肥达反应：一种血清学试验，用于检测病原体感染。
3.内基小体：一种细胞质内含有细胞核酸的小体，存在于某些细胞中。
4.噬菌体：一种寄生于细菌的病毒。
5.血浆凝固酶：一种酶，可促进血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，从而参与血液凝固过程。
6.败血症：一种严重的血液感染，常由细菌引起。
7.灭菌：杀灭或去除物品中的所有微生物。
8.药物敏感试验：一种实验室技术，用于测试微生物对药物的敏感性。
9.外-XXX试验：一种血清学试验，用于检测梅毒感染。
10.L型细菌：一种变异的细菌，缺乏细胞壁。
11.菌群失调：指肠道菌群组成的失衡状态。
12.微生物：一类生物体，包括细菌、病毒、真菌等。
13.细菌：一种单细胞微生物，广泛存在于自然界中。
14.最小抑菌浓度：指能抑制微生物生长的最低药物浓度。
15.菌落：细菌在培养基上生长形成的圆形或不规则形状的群体。
16.汹涌发酵：一种微生物在液体培养基中进行的大规模发酵过程。
17.无菌操作：一种操作技术，用于避免微生物的污染。
18.流感杆菌“卫星现象”：指流感杆菌在革兰氏染色中与其他细菌形成的“卫星”状结构。
19.培养基：一种用于微生物培养的营养物质混合物。
20.包涵体：一种细胞内含有病毒或细菌的小体。
21.正常菌群：指人体内正常存在的微生物群落。
22.内毒素：一种由细菌产生的毒素，可引起炎症反应等症状。
23.干扰现象：指两种或多种微生物在同一培养基上生长时，彼此干扰或抑制的现象。
24.菌血症：一种细菌感染，细菌进入血液循环引起全身炎症反应。
25.菌丝：真菌等微生物生长时形成的长丝状结构。
二.填空题1 L型细菌是指缺乏细胞壁的细菌。
2杀灭物体上所有微生物的方法称为消毒。
3细菌H-O变异是指细菌在不同环境下表型的变异。
4药敏试验所用标准培养基是Muller-Hinton培养基，所用菌液相当于0.5 McFarland标准的细菌／ml，细菌接种采用Kirby-Bauer法。
第二版生物制药技术习题答案
第二版-生物制药技术习题答案第一章绪论1、生化药物：从生物体分离纯化所得的一类结构上十分接近人体内正常生理活性物质的，能调节人体生理功能以达到预防和治疗疾病目的的物质。
P12、按照药物的化学本质，把生物药物分为氨基酸类、蛋白质类、酶类、核酸类、多糖类、脂类、维生素及辅酶类。
P3-5 3、生物药物的原料来源分为动物、植物、微生物、海洋生物、人体五大类。
P54、肝素的化学成分属于一种多糖，其最常见的用途是抗血凝。
P45、SOD的中文全称是超氧化物歧化酶，能专一性清除氧自由基。
P46、辅酶在人体内的酶促反应中起重要的递H、递e等作用，有药用价值，人体生化反应中重要的辅酶：NAD、NADP、FMN和FAD 。
P47、前列腺素的成分是一大类含五元环的不饱和脂肪酸，重要的天然前列腺素有PGE1、PGE2、PGF2α等。
P58、请说明酶类药物主要有几类，并分别举例。
P4第二章生物药物的质量管理与控制1、中试：是把已取得的实验室研究成果进行放大的研究过程。
P282、热原：是指在药品中污染有能引起动物及人的体温升高的物质。
P423、生物检定法：利用药物对生物体的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。
4、生物药物质量检验的程序包括取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告。
5、药物的ADME表示药物在体内的整个过程，它们分别是吸收Absorption、分布Distribution、代谢Metabolism、排泄Excretion。
6、生物药物在表示含量的时候有百分含量和活性效价两种。
7、英美等国在药品的质量管理上采取典型的主副典机制，其中美国的药典和副药典分别简称为 USP 和 NF 。
8、在生物药物的质量管理规范中，GMP、GLP、GCP分别指良好药品生产规范、良好药品实验研究规范、良好药品临床试验规范。
9、为了对新兴的基因工程药物进行质量管理，中国在2000年编制并颁布了中国生物制品规程。
10、基因工程生产的重组蛋白药物，须进行蛋白纯度检查，按WHOG规定，须用HPLC 和非还原SDS-PAGE 两种方法测定，纯度均应达到95%以上。
微生物实训心得体会
竭诚为您提供优质文档/双击可除微生物实训心得体会篇一：微生物实验心得微生物实验心得体会这学期的微生物实验已经结束，这是我第一次接触到微生物的世界中，以前也只是在书本中学习，但是真正走进它们的世界中是通过这个课程开始的。
在开始微生物实验之前我是以为这个实验不会很难，但是通过本学期的学习发现这个课程真的很难。
你不仅需要理论知识作为铺垫，你还需要有严谨的实验精神。
第一节课老师给我们介绍了我们本学期微生物实验的几个实验和报告的要求，也让我们了解了微生物实验和以往其他实验的不同。
实验步骤虽然很简单，但是往往一个微小的细节处理不当也会导致你整个实验结果的失败。
这个我真的深有体会，我们小组的实验结果都很不理想。
实验步骤说难也不难，其实无非是先对配置培养液，然后对清洗干净的试管、培养皿以及配置好的培养液进行灭菌，等灭菌完了就放入无菌室进行细菌的接种，最后将接种好细菌和培养液的培养皿放进恒温培养箱进行培养。
看似很简单的操作过程我却状况百出。
我总结了几点导致这么多次实验失败的地方。
第一是操作不够规范，在培养皿中倒入培养液后没有摇匀导致培养基边缘开裂，未等琼脂培养液凝固就倒置导致培养基分布不均匀。
第二是理论知识欠缺，没有等培养液冷却至40到50摄氏度就倒入培养基然后马上就接种了细菌，导致细菌已经被烫死。
好在值得欣慰的是最后一个自主实验还是比较成功的。
试验以环境对微生物生长的影响为题设计实验，我们小组通过ph值，温度，紫外线照射三个方面进行研究，结果很满意，很明显。
大肠杆菌在ph值为7时生长最适，在温度为37℃时生长最佳，紫外线会抑制其生长。
不得不承认，通过这次实验的学习，我们学到了很多，得到了很多，有些是书本上学不到的，只有自己参与了，操作了，才会知道。
也要感谢老师对我们的照顾。
篇二：微生物实验心得体会微生物实验心得姓名：关琦琦学号：09070401048班级：生物科学09-2班指导老师：吾尔恩微生物实验心得本学期已临近尾声，我们即将告别微生物实验这门课程，在这一学期，八个微生物实验中，我们学到了许多知识，这些知识将会陪伴我们一生，下面我们就来通过一些实验来回顾一下本学期的微生物实验。
最小生物膜抑制浓度
最小生物膜抑制浓度最小生物膜抑制浓度（MIC）是在微生物学中广泛应用的一个概念，用于研究抗生素对细菌的抑制能力。
MIC是指在抗生素对细菌的最低有效浓度，即能够完全抑制细菌的生长。
要了解最小生物膜抑制浓度，需要首先了解生物膜的概念，以及其在细菌对抗生素的抗性中的作用。
生物膜是细菌在水中形成的一层薄膜。
这一层膜能够在不同环境下保护细菌免受外界影响，比如温度、pH值和抗生素等。
这种膜的形成是细菌之间的一种自卫机制，使得细菌能够在不利的环境条件下生存和繁殖。
然而，这也使得细菌对抗生素的抗性增强，从而成为医疗领域普遍存在的问题。
最小生物膜抑制浓度与生物膜有着密切的关系。
抗生素阻止细菌通过干扰其代谢或细胞壁合成来生长。
然而，对于有生物膜的细菌，抗生素必须通过生物膜才能到达细胞，因此其作用就会变得很受限制。
最小生物膜抑制浓度是指抗生素能够穿过细菌的生物膜，到达细胞内部的最低有效浓度。
为了测量最小生物膜抑制浓度，通常使用微量分光光度计或肉眼观察。
最小生物膜抑制浓度测量的过程需要先将细菌放在一种富含营养物质的培养基中，培养出足够数量的细菌。
然后在这些细菌上添加不同浓度的抗生素，使得细菌的生长被不同程度地抑制。
一旦细菌的生长被完全抑制，就可以确认其最小生物膜抑制浓度。
在这个过程中，需要注意避免过度稀释，否则会影响测量结果的准确性。
最小生物膜抑制浓度的测量结果对于临床医生和药物研究人员具有重要意义。
这个概念可以作为指导选择抗生素治疗的依据。
如果细菌的最小生物膜抑制浓度非常低，就意味着抗生素能够非常有效地杀灭这些细菌。
如果细菌的最小生物膜抑制浓度非常高，就意味着对抗生素的抵抗力很强，需要更高浓度的抗生素或者更强效的治疗方案。
此外，最小生物膜抑制浓度还可以用于评估新型抗生素的疗效，从而指导药物设计和研发。
总之，最小生物膜抑制浓度是微生物学中的一个核心概念，能够帮助研究人员了解抗生素和细菌之间的相互作用，指导制定更有效的治疗方案，促进药物研发和创新。
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实验9紫外线对微生物生长的影响及抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定(总3页)
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实验九紫外线对微生物生长的影响
抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定及硫化氢产生实验
杨明轩生物111 28
一、实验目的
1、了解并掌握紫外线和抗生素杀灭微生物细胞的原理。
2、学习和掌握应用紫外线杀菌的实验操作步骤。
3、学习并掌握采用液体培养技术测定药剂对微生物的最低抑制浓度的方法。
4、通过了解不同细菌对含能产硫化氢半固体培养基的分解利用情况，结合实验八的结果，认识微生物代谢类型多样性。
二、实验原理
紫外线是杀菌效率较强的物理因素。
其原理是，紫外线可以直接作用于细胞内的DNA分子，使同一DNA链上相邻的嘧啶形成胸腺嘧啶二聚体，因而导致双链DNA结构发生变化，使DNA的正常复制受到影响，最终导致细胞死亡。
紫外线的杀菌效果与照射剂量呈正相关，即紫外灯的功率、照射时间和照射物品距紫外灯的距离等因素都会影响杀菌效果。
虽然紫外线具有很好的杀菌效果，但其穿透能力不强，一层黑纸即可阻挡紫外线的通过，因此紫外线常用于室内空气灭菌或器皿的表面灭菌。
本实验采用平板法验证紫外线的杀菌作用和不同微生物对紫外线的耐受性。
很多化学药剂都能够抑制微生物的生长。
最低抑制浓度（MIC）是指药物抑制微生物生长的最低浓度，由于微生物对药物的耐受性不同，因此最低抑制浓度是有差异的。
可以通过液体稀释法来测定最低抑制浓度。
将一定培养液中加入不同浓度的药剂，配制成一定浓度梯度，再将制备好的菌悬液按一定体积接种，置一定温度培养后，可通过肉眼或分光光度计测定浊度，以不能生长菌株的试管内药剂的浓度为MIC。
三、实验材料
1、菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、
2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、产硫化氢半固体穿刺培养基；
3、试剂：无菌水、10μg/μl链霉素；
5、仪器：无菌培养皿、无菌试管、刮铲、灭菌黑纸、。
四、实验方法
（1）紫外线对微生物生长的影响
1、将供试菌株接种于LB斜面，置37℃培养过夜。
2、将5ml无菌水分别注入菌种管内，混匀制成均匀的菌悬液，37℃振荡培养过夜。
3、取事先制备的LB平板3个，分别以菌悬液涂布一个平板，并做好标记。
4、取一灭菌的剪成五角星形状的黑纸放置在培养皿中央，将培养皿放于紫外灯箱内，打开皿盖，开紫外灯照射15min，盖好培养皿盖后将培养皿取出，注意将培养皿立即倒置于37℃温箱中培养过夜。
5、观察结果平纪录。
（2）抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定
1、取活化好的菌种斜面，分别挑取一环接种于液体培养基中，在37℃下培养6~8h，作为测试液。
2、按下表配制不同链霉素浓度的培养基并按照顺序加样（每个试管3个重复），全班留一个只含培养基，不接菌也不用药的，做对照。
3、将试管置于37℃温箱培养12~24h，取出试管，充分震荡，用肉眼观察每个试管浊度，用“+”或“-”表示生长与否。
也可用分光光度计检测浊度。
表1 不同链霉素浓度的培养基的配制
（3）硫化氢产生实验
取硫化氢产生试管半固体柱状培养基，穿刺接种S. aureus、B. subtilis、P. vulgaris，28℃培养2天。
观察试管是否变黑（FeS沉淀）。
五、实验结果
（1）紫外线对微生物生长的影响
在黑纸覆盖的地方菌落生长良好。
而大肠杆菌的平板在黑纸覆盖区域的边缘位置长有少量菌落，其他没有覆盖的地方也零星的长有菌落；而金黄色葡萄球菌平板在没有黑纸覆盖的地方几乎没有菌落的生长。
（2）抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定
表2 抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定的结果
因为实验操作中，对于CK管（药物浓度为0）忘记了加入菌液，导致CK管也为“－”，通过比照同班其他组数据，可知CK管由上表可知E. coli、S. aureus均为“＋＋＋”，而链霉素对大肠杆菌的MIC为0μg/ml，链霉素对金黄色葡萄球菌的MIC为80μg/ml。
（3）微生物对含硫化氢培养基的水解（见实验八实验报告汇总）
六、思考题
1、分析结果，比较并观察菌株对紫外线的耐受能力。
答：由上面的结果可知，大肠杆菌平板在无覆盖的区域也长有少量菌落，而金黄色葡萄球菌无覆盖区域几乎没有菌落生长。
因此，大肠杆菌对紫外线的耐受能力比金黄色葡萄球菌更强。
2、为什么紫外线照射后应立即将培养皿放置于黑暗条件下培养？
答：紫外线可以直接作用于细胞内的DNA分子，使同一DNA链上相邻的嘧啶形成胸腺嘧啶二聚体，因而导致双链DNA结构发生变化。
但在可见光的作用下，嘧啶二聚体能够被光裂合酶直接切开，也能够被光解作用恢复为单体形式，即为DNA损伤的光修复。
直接黑暗培养能够避免光修复对实验结果造成影响。
3、分析操作因素会对结果有什么影响？
答：（1）涂菌时如果涂布器温度过高，则会造成菌体死亡，影响结果；
（2）如果黑纸盖得不严，留有缝隙，会造成纸下面的部分菌体死亡，得不到预期结果；
（3）紫外线照射时，紫外灯的功率、照射时间和照射物品距紫外灯的距离等因素都会影响结果；
（4）实验需要无菌操作，若引入杂菌，则会影响结果。
4、分析以上结果，判断两个测试菌株的抗药能力。
答：由上面的数据可知，链霉素对大肠杆菌的MIC为0μg/ml，对金黄色葡萄球菌的MIC 为80μg/ml。
因此，金黄色葡萄球菌对链霉素的抗药性远比大肠杆菌对链霉素的抗药性要强。
这也符合链霉素主要对革兰氏阴性菌起作用的药物特点。