抗生素微生物检验

CCMCC(B) 63 202〕的 营 养 琼 脂 斜 面 培 养 物 ，照上述方法
适宜的方法直接抽取每个容器中的全部溶液，沿滤器内壁缓
制备。
缓注人经预处理的滤器（滤膜直径1 3 m m ) 中，照上述（1 ) 同法 测定。
( 3 )静脉注射用无菌粉末及供注射用无菌原料药除另 有规定外，照光阻法中检查法的（3 ) 或（4 ) 制备供试品溶液，同
小诺霉素 多黏菌素B
枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 大肠埃希菌〔C M C C ( B ) 44 103〕
交沙霉素 丙酸交沙霉素 替考拉宁 万古霉素
枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕
附 录 XI A 抗 生 素 微 生 物 检 定 法
( 2 ) 标示装量为2 5 m l 以下的静脉用注射液或注射用浓溶 液 除 另 有 规 定 外 ，取供试品，用水将容器外壁洗净，在层流 净化台上小心翻转2 0 次 ，使混合均匀，立即小心开启容器，用
65X：加 热 3 0 分钟，备用。 短小芽孢杆菌（BaciZZus p u m iiu s)悬 液 取 短 小 芽 孢 杆 菌
啤酒酵母菌（A T C C 9763) 短小芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 202〕 短小芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 202〕 短小芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 202〕 藤黄微球菌〔C M C C ( B ) 28 001〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 短小芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 202〕 肺炎克雷伯菌〔C M C C ( B ) 46 117〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕
定供试品效价的一种方法。 菌悬液的制备
说明书的规定。临用时照表1 的规定进行稀释。 标准品的品种、分子式及理论计算值见表2 。
枯草芽孢杆菌( BadZIus s u b t i l i s )悬 液 取 枯 草 芽 孢 杆 菌
供 试 品 溶 液 的 制 备 精 密 称 （或量）取供试品适量，用各
C C M C C ( B ) 63 5 0 1 〕的营养琼脂斜面培养物，接种于盛有营养
6. 0 6. 0 7. 8 7. 8 7. 8 ® 6. 0 6. 0 6. 0 6.0 6. 0 6. 0 10. 5 7.8 7. 8 7. 8 7. 8 7. 8 7. 8 7. 8 7. 8 7. 0 7. 8 7. 8
7. 8 6. 0
7. 8 7. 8 6. 0 6.0
5, 0 〜10. 0 9. 0 〜43. 7 2. 0 〜12. 0 5. 0 〜20. 0 4. 0 〜25. 0 10. 0 〜40. 0 10. 0 〜40. 0 4. 0 〜25. 0 30. 0 〜80. 03 2. 0 〜12. 0 614〜 2344 0. 5 〜2, 0
当方法制备的菌斜面，用培养 基DI或 0 . 9 % 灭菌氯化钠溶液 将菌苔洗下，备用。
大 肠 埃 希 菌 （£ sc/ieric/iia c o l i ) 悬 液 取 大 肠 埃 希 菌 CCMCC(B) 44 103〕的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼
定外，每个供试品容器( 份）中含10Km 及 10Hm 以上的微粒不
14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16 M 〜 16 16 〜 18 ]6 〜 18 16 〜 18 16 〜 18 16 〜 18 24 〜 36 14 〜 16 14 〜 16 16 〜 18 18 〜 24 14 〜 16 ]4 〜 16 16 〜 18 14 〜 16 16 〜 18 16 〜 18 ]6 〜 18
单位/ml
培养条件 温度厂C 时间/ 小时
磺苄西林 去甲万古霉素 庆大霉素 红霉素 新霉素 四环素 土霉素 金霉素 氯霉素 杆菌肽 黏菌素
枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 短小芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 202〕 短小芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 202〕 金黄色葡萄球菌〔C M C C ( B ) 26 003〕 藤黄微球菌〔C M C C ( B ) 28 001〕 藤黄微球菌〔C M C C ( B ) 28 001〕 藤黄微球菌〔C M C C ( B ) 28 001〕 藤黄微球菌〔C M C C ( B ) 28 001〕 藤黄微球菌〔C M C C ( B ) 28 001〕 大肠埃希菌〔C M C C ( B ) 44 103〕
除另有规定外，每 l m l 中含lO ^rn及 1 0 p m 以上的微粒不得过 1 2 粒 ，含 2 5 ^ m 及 25/jim 以上的微粒不得过2 粒 。
( 2 ) 标示装量为1 0 0 m l以下的静脉用注射液、静脉注射用 无菌粉末、注 射 用 浓 溶 液 及 供 注 射 用 无 菌 原 料 药 除 另 有 规
母菌〔A T C C 9 7 6 3 〕的 V 号培养基琼脂斜面培养物，接种于
IV号培养基琼脂斜面上。在 3 2 〜 3 5 ' C 培 养 2 4 小 时 ，用灭菌
本法系在适宜条件下，根据量反应平行线原理设计，通过 水将菌苔洗下置含有灭菌玻璃珠的试管中，振摇均匀，备用。
检测抗生素对微生物的抑制作用，计算 抗 生 素 活 性 （效 价 ）的 方法。
试验菌
培养基
编号
pH值
灭菌缓冲液 抗生素浓度范围
培养条件
pH值
单位/ ml
温 度 " C 时间/小时
链霉素 卡那霉素 阿米卡星 巴龙霉素 核糖霉素 卷曲霉素
枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕 枯草芽孢杆菌〔C M C C ( B ) 63 501〕
35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37
14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16 14 〜 16
535
附 录 XI A 抗生素微生物检定法
续表
抗生素类别
试验菌
培养基
编号
pH值
灭菌缓冲液 抗生素浓度范围
pH值
上述（1 ) 操作测定。 结果判定
藤黄微球菌（M ic r o c o c c u s lu t e u s )悬 液 取 藤 黄 微 球 菌 CCMCC(B) 28 001〕的营养琼脂斜面培养物，接种于盛有营养
(1)标示装量为1 0 0 m l 或 1 0 0 m l 以上的静脉用注射液
琼脂培养基的培养瓶中，在 2 6 〜 2 7 'C 培 养 2 4 小时 ，或采用适
品种项下规定的溶剂溶解后，再 按 估 计 效 价 或 标 示 量 照 表 1
琼腊培养基的培养瓶中，在 3 5 〜 3 7 ' C 培 养 7 日，用革兰染色
的规定稀释至与标准品相当的浓度。
法涂片镜检，应 有 芽 孢 8 5 % 以 上 。 用灭菌水将芽孢洗下，在
表 1 抗生素微生物检定试验设计表
抗生素类别
抗生素微生物检定包括两种方法，即管碟法和浊度法。
肺炎克雷伯菌( K l e b o s i e l l a P n e u m o n ia e )悬 液 取 肺 炎 克 雷伯菌〔C M C C ( B ) 46 1 1 7 〕的营养琼脂斜面培养物，接种于营 养琼脂斜面上，在 3 5 〜 3 7 ’C 培 养 2 0 〜 2 2 小时。临用时，用无
I
7. 8 〜8. 0
7. 8
I
7. 8 〜8. 0
7. 8பைடு நூலகம்
I
7. 8 〜8. 0
7.8
I
7. 8 〜8. 0
7.8
I
7. 8〜8. 0
7. 8
I
7. 8 〜8. 0
7. 8
0. 6 〜1. 6 0. 9 〜4. 5 0. 9 〜4. 5 0. 9〜4. 5 2. 0 〜12. 0 10. 0 〜40. 0
测定结果经计算所得的效价，如低于估计效价的9 0 % 或 高于估计效价的1 10% 时 ，应调整其估计效价，重新试验。
除另有规定外，本法的可信限率不得大于5 % 。 第一法管碟法
菌水将菌苔洗下，备 用 。 支气管炎博德特菌( B o r d e t e l l a B r o r t c k i s e p t i c a )悬 液 取
金黄色葡萄球菌（S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s )悬 液 取 金 黄 色葡萄球菌〔CM CC (B) 26 003〕的营养琼脂斜面培养物，接种 于营养琼脂斜面上，在 3 5 〜 3 7 ’C 培 养 2 0 〜 2 2 小时。临用时， 用灭菌水或0 .9 % 灭菌氯化钠溶液将菌苔洗下，备用。
脂斜面上，在 3 5 〜 3 7 T 培 养 2 0 〜 2 2 小时。临用时，用灭菌水
得 过 3 0 0 0 粒 ，含 2 5 p m 及 2 5 ^ 0 1 以上的微粒不得过3 0 0 粒 。
附 录 XI A 抗生素微生物检定法
将菌苔洗下，备用。 啤酒酵母菌（S a c c h a r o m y c e s c e r e v is ia e ) 悬 液 取 啤 酒 酵
5 〜 20 5〜 20 0. 5〜 20 5〜 20 5〜 403 1〜 4 5 〜 10 2. 0 〜8. 0 50 〜 200 20 〜 40 5 〜 40
35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜3735 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37 35 〜 37
营养琼脂 6. 5 〜6. 6
培养基 n
7. 8 〜8. 0
n
7. 8 〜8. 0
n
6. 5 〜6. 6
i
6. 0
① 两 性 霉 素 B 双碟的制备，用 菌 层 1 5 m l 代替两层。 ② 乙 酰 螺 旋 霉 素 ，抗 II检定培养基制备时，调 节 p H 值 使 灭 菌 后 为 8. 0 〜8. 2 。 ③ 含 3 % 氣化钠。 ④ 加 0 . 3 % 葡萄糖。
0. 5〜2. 0 1 0 0 0 〜400 0
支气管炎博德特菌〔C M C C (B ) 58 403 〕的营养琼脂斜面培养 物 ，接种于营养琼脂斜面上，在 3 2 ~ 3 5 ’C 培 养 2 4 小时。临用
本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标
时 , 用无菌水将菌苔洗下，备用。
准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测
标 准 品 溶 液 的 制备 标准 品的 使用 和保 存，应照标准品
IV
6. 0 〜6. 2
i
7. 8 〜8. 0
i
7. 8 〜8. 0
i
7. 8 〜8. 0
n
7. 8 〜8. 0
n
8. 0 〜8. 2
i
7. 8 〜8. 0
n
7. 8 〜8. 0
i
7. 8 〜8. 0
n
7. 8 〜8. 0
ii④ 8. 0 〜8. 2
营养琼脂 8. 0 〜8. 2
培养基 i
7. 8 〜8. 0
I
6. 5〜6. 6
I
6. 0
I
7. 8 〜8. 0
I
7. 8〜8. 0
E
7. 8 〜8. 0
n
6. 5〜6. 6
n
6. 5〜6. 6
n
6. 5 〜6. 6
E
6. 5〜6. 6
n
6. 5 6. 6
YI
7. 2 〜7. 4
两性霉素 奈替米星 西索米星 阿奇霉素 磷霉素 乙酰螺旋霉素42 妥布霉素 罗红霉素 克拉霉素 大观霉素 吉他霉素 麦白霉素