微生物对抗生素抗性实验设计
病原微生物耐药性实验报告
病原微生物耐药性实验报告一、实验目的本实验旨在探究病原微生物的耐药性，并分析耐药性产生的原因，为临床合理使用抗生素提供参考。
二、实验设备与试剂1. 试验设备：培养皿、显微镜、离心机、恒温培养箱、移液管等。
2. 试剂：复方盐酸红（MRSA筛选培养基）、亚洲疟原虫PLDH试剂、乙酸丹试剂、DNA提取试剂盒等。
三、实验步骤1. 样本采集：采集来自患者的分泌物、血液或尿液样本，并遵循严格的无菌操作。
2. 细菌培养：将样本接种于MRSA筛选培养基上，并在恒温培养箱中培养18-24小时。
3. 菌落观察：观察菌落的生长情况，记录菌落形态和特征。
4. 选择敏感菌株：挑选感染性较强的菌落，进行继续培养。
5. 耐药性测试：将挑选的菌株分别接种于含有不同抗生素的琼脂平板上，观察菌落的生长情况和抗生素对于菌株的抑制效果。
6. 细菌形态观察：将不同菌株进行染色，并使用显微镜观察菌株形态特征，如大小、形状等。
7. 耐药基因检测：使用DNA提取试剂盒提取菌株的基因样本，并进行耐药性基因的PCR扩增与检测。
8. 耐药性机制分析：对不同菌株中检测到的耐药性基因进行比对，分析耐药性产生的机制。
四、实验结果与分析1. 菌落观察：观察到样本中产生的菌落数量较多，其中挑选出了数个不同形态的菌株。
2. 耐药性测试：结果显示，部分菌株对某些抗生素表现出耐药性，而对其他抗生素则较敏感。
3. 细菌形态观察：通过染色和显微镜观察，发现不同菌株的形态特征存在差异，有的为球状，有的呈链状等。
4. 耐药基因检测：在PCR扩增与检测中，发现某些菌株中存在耐药性基因，如β-lactamase基因等。
5. 耐药性机制分析：通过对不同菌株的耐药性基因比对，发现耐药性基因的差异可能导致不同耐药性的产生。
五、实验结论1. 实验结果表明，病原微生物样本中存在一定比例的耐药菌株。
2. 耐药性的形成可能与菌株自身基因变异、外源性耐药基因的获取等多种因素有关。
3. 进一步研究病原微生物的耐药性机制对于改善临床抗生素治疗的有效性具有重要意义。
实验室微生物ast
实验室微生物ast
实验室微生物AST（抗生素敏感性测试）是一种用于确定微生
物对抗生素的敏感性或抗性的测试方法。
这种测试对于选择治疗方
案和监测抗生素耐药性非常重要。
AST通常通过以下步骤进行：
1. 样本收集，从患者身上收集微生物样本，例如血液、尿液、
痰液或其他体液。
2. 培养，将微生物样本在适当的培养基上培养，以促进其生长。
3. 鉴定，鉴定培养出的微生物种类，通常通过形态学特征和生
化试验。
4. AST测试，将已鉴定的微生物接种到含有不同抗生素的琼脂
板上，观察微生物在不同抗生素条件下的生长情况。
5. 结果解读，根据微生物在不同抗生素条件下的生长情况，确
定微生物对各种抗生素的敏感性或抗性。
AST测试可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗方案，避免使
用对微生物无效的抗生素，减少抗生素滥用和耐药性的发展。
然而，AST测试也有局限性，例如需要时间和专业技能，有时会出现假阳
性或假阴性结果等问题。
因此，在临床实践中，医生通常会结合患
者的临床症状、病史和其他检查结果来综合判断最佳的治疗方案。
AST测试在微生物学和临床医学中扮演着重要的角色，对于治疗感
染病症具有重要意义。
微生物学中的抗生素抗性机制
微生物学中的抗生素抗性机制抗生素抗性是指细菌对抗生素药物出现的耐药性，是一种长期以来困扰着医学界和生物学界的问题。
而微生物学中的抗生素抗性机制则是解决这一问题的关键之一。
在本文中，我们将探究微生物学中的抗生素抗性机制，以更好地理解细菌对抗生素药物的快速适应和演化过程。
一、抗生素抗性的来源抗生素抗性可以来自多方面的因素，包括但不限于以下几个方面：1.细菌突变造成的抗药性细菌的基因可在繁殖过程中发生突变，导致抗药性。
例如，一些细菌会产生β-内酰胺酶，来破坏β-内酰胺类抗生素的分子结构，从而减少它们对这些细菌的杀伤作用。
2.细菌遗传信息的水平转移细菌与细菌之间存在DNA水平的横向转移现象，即遗传信息无需通过父母代直接传递，而是可以与其他细菌共享遗传物质。
这种现象称为水平基因转移。
当某个细菌存在抗生素抗性基因的时候，这个基因可以从一个繁殖细胞进入到另一个繁殖细胞中，从而遗传到下一代细胞。
3.细菌代谢酶系统的改变在某些情况下，细菌会通过调整代谢酶系统来减缓抗生素的药物代谢，从而减少药物对细菌产生的影响。
二、微生物学中的抗生素抗性机制微生物学中的抗生素抗性机制通过研究细胞活动过程、基因突变以及微生物之间传递遗传信息的机制来揭示细菌产生耐药性的途径，为研究抗生素抗性提供了启示。
以下是微生物学中的抗生素抗性机制的一些例子：1.基因调控细菌基因的调控是控制细菌对抗生素抗性的重要机制。
利用发现的这些调控机制，研究人员可以预测某种抗生素抗性的产生，并探测研究细菌是否被感染。
例如，细菌可调控它们表达的抗生素药物浓度，当它们感受到一种抗生素时，就可以增加或减少抗生素的浓度，从而适应药物的杀伤作用。
2.细菌表面的化学变化细菌表面的化学变化也是细菌产生抗药性的重要机制之一。
研究人员可以通过改变细菌基因，调控细菌表面的化学变化，进而使细菌对药物产生更强的抗性。
例如，细菌表面的糖基化与表面胞外多聚物的变化，会作出抵御抗生素的反应。
实验11-抗生素的抑菌试验
实验十一抗生素的抑菌试验一目的要求1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法2、了解抗生素的抗菌谱二实验原理抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。
抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。
由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。
而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。
新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。
微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。
三实验器材1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。
2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。
3、试剂青霉素、链霉素。
四方法步骤1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。
2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。
3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。
4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。
5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。
实验报告微生物对抗生素的敏感性测试
实验报告微生物对抗生素的敏感性测试实验报告实验目的：本实验旨在通过微生物对抗生素的敏感性测试，了解微生物对不同抗生素的敏感度以及寻找合适的抗生素用于治疗感染性疾病。
实验原理：抗生素是一种能够抑制或杀死微生物的药物。
在临床上，常用的抗生素有青霉素、头孢菌素、红霉素等。
然而，不同种类的微生物对不同抗生素的敏感性有所不同。
通过进行微生物对抗生素的敏感性测试，可以确定哪种抗生素对某些微生物具有良好的杀菌作用。
实验步骤：1. 准备工作：清洗实验器材并消毒，准备好所需培养基和抗生素。
2. 预备培养基：根据实验要求，制备适当浓度的培养基。
将培养基倒入培养皿中，等待其凝固。
3. 培养微生物：选择需要测试的微生物菌株，在实验室条件下进行培养。
将微生物菌株接种至含有培养基的试管或琼脂平板上。
4. 抗生素敏感性测试：使用消毒针将不同抗生素溶液分别滴在培养皿上，确保每个培养皿中的抗生素浓度相同。
5. 培养：将培养皿放入恒温培养箱中，以适当的温度和湿度进行培养。
6. 观察结果：观察培养皿中微生物的生长情况，并记录下来。
7. 分析结果：根据微生物的生长情况和抗生素的作用，判断微生物对抗生素的敏感性。
实验结果：根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 对某种抗生素敏感的微生物，在接触抗生素后，抗生素会抑制其生长，形成抗生素有效区域。
2. 对某种抗生素抗性的微生物，在接触抗生素后，仍然能够正常生长，没有形成抗生素有效区域。
3. 通过对不同微生物菌株的抗生素敏感性测试，可以找到适合治疗的抗生素。
实验讨论：本实验是一种常用的微生物实验方法，通过测试微生物对抗生素的敏感性，可以帮助医生选择合适的抗生素用于治疗感染性疾病。
然而，现今临床上微生物的抗药性问题十分严重，这意味着某些微生物已经对常规抗生素产生了抗性，因此需要开发新的抗生素或采用其他治疗方法。
实验结论：通过微生物对抗生素的敏感性测试，可以准确判断微生物对不同抗生素的敏感性。
实验结果对选择合适的抗生素进行治疗具有指导意义，在临床实践中有着重要的应用价值。
抗生素抗菌谱以及微生物的耐药性
生物制药专题报告姓名专业学号实验一：抗生素抗菌谱及微生物耐药性1、实验目的：1.1学习抗生素抗菌谱的测定方法，了解常见抗生素的抗菌谱。
1.2学习微生物耐药性的测定方法，了解微生物对抗生素耐药性产生的原因及对策。
2.实验原理：2.1抗生素抗菌谱的测定：抗生素—是一类由微生物或其它生物生命活动中合成的次级代谢产物或其人工衍生物，在低浓度时就能抑制或干扰它种生物（包括病原菌、病毒、癌细胞等）的生命活动，可作为优良的化学治疗剂。
各种抗生素有其不同的抑菌范围，即抗菌谱。
如青霉素、红霉素：抗G+；链霉素、新霉素：抗G-；庆大霉素、万古霉素、头孢菌素：兼抗G+和G-；氯霉素、四环素、金霉素、土霉素：G+和G-以及支原体、衣原体和立克次氏体等2.2微生物耐药性的测定：耐药性-即抗药性，指微生物、寄生虫或肿瘤细胞对于化学治疗药物作用的耐受性。
耐药性一旦产生，药物的化疗作用就明显下降。
3.实验材料：3.1抗生素抗菌谱的测定：菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、脓绿杆菌、沙门氏菌四种培养基：牛肉膏蛋白胨培养基供试抗生素：左氧氟沙星和Amp两种设备与用具：恒温培养箱、接种环、培养皿3.2微生物耐药性的测定：菌种：大肠杆菌培养基：牛肉膏蛋白胨培养基供试抗生素：庆大霉素、土霉素、氨苄青霉素、环丙沙星、头孢拉定、罗红霉素、盐酸左氧氟沙星。
设备与用具：恒温培养箱、镊子、圆滤纸片、培养箱4.实验步骤：4.1抗生素抗菌谱的测定：（在无菌操作台进行操作）将加入左氧氟沙星的的平板和加入Amp的平板大致划分为4等分，每一等分用记号笔表明相应的细菌名称。
用接种环分别在相应区域接种四种不同的细菌。
将划好线的细菌平板，置37o C倒置培养24-48h。
记录细菌的生长情况，根据其生长情况可以初步确定相应抗生素的抗菌谱。
4.2微生物耐药性的测定：将金黄色葡萄球菌菌液和大肠杆菌菌液分别涂布在两个平板上，基本涂布均匀。
将平板划分为6等分，最中间的可作为第七份，每一等分都表明相应的抗生素名称，将分别浸有抗生素的小圆滤纸片贴在平板的每一等分中。
微生物综合设计性实验论文——不同抗生素对细菌抑制作用的研究
Abstract： Objective To study the different antibacterial effect between streptomycin and kanamycin on
Escherichia coli and Staphylococcus albus. And determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of antibiotics. Methods Using the method of filter paper to determinate these two antibiotics’ antimicrobial effect of Escherichia coli and Staphylococcus. In the same concentration, through Control experiments to compare the different antibacterial effect of two kinds of antibiotics . Using blank control experiment set different concentration of antibiotics to study, taking the size of inhibition zone to indicate the inhibitory effect. Through the parallel control experiment statistics the diameter of inhibition zone to find the minimum inhibitory concentration of two kinds of antibiotics on bacteria (MIC). Results Streptomycin on Escherichia coli and Staphylococcus albus MIC are 5 g/mL and 8 g/mL; Kanamycin on Escherichia coli and Staphylococcus albus MIC are 15 g/mL and 25 g/mL. Conclusions Two kinds of antibiotics have inhibitory effect on two kinds of bacteria, and this effect decrease with the decrease of their concentration. Comparing the different the value of MIC shows that whether for Escherichia coli or Staphylococcus albus , kanamycin’s MIC values are greater than streptomycin’s, Therefore, the inhibitory effectiveness of streptomycin is strength than kanamycin.
微生物抗生素抗性机制及其应对策略研究
微生物抗生素抗性机制及其应对策略研究抗生素在人类医药和养殖业中起着关键作用，但随着时间的推移，微生物对抗生素的耐药性逐渐增强，这对世界范围内的公共卫生问题构成了威胁。
为了对抗这种抗生素抗性的持续上升趋势，科学家们正在研究和探索微生物抗生素抗性机制，以及应对这一问题的策略。
本文将介绍微生物抗生素抗性的机制，并讨论当前应对抗生素抗性的策略。
一、微生物抗生素抗性机制1.基因突变微生物会经历基因突变，从而产生对抗生素的抗性。
这些基因突变可能导致微生物的生命功能发生变化，使其能够对抗生素产生抵抗。
例如，在细菌细胞壁合成过程中，发生基因突变会导致抗生素无法与其结合，从而使微生物对抗生素产生抵抗力。
2.外源基因获取微生物可以通过水平基因转移来获取与抗生素抗性相关的外源基因。
这种转移可以直接从其他微生物体中获取抗性基因，也可以通过质粒媒介进行传递。
外源基因的获取使得微生物能够破坏抗生素的作用机制，从而产生抗性。
3.药物代谢和泵排机制微生物可以通过药物代谢和泵排机制来增加对抗生素的耐药性。
药物代谢是指微生物产生特定酶，能够将抗生素进行分解，从而抵抗其作用。
泵排机制则是通过排斥抗生素，防止其进入细胞内部产生效应。
二、应对微生物抗生素抗性的策略1.合理使用抗生素合理使用抗生素是控制抗生素抗性的重要策略。
医生和兽医应该只在确保真正需要使用抗生素的情况下开具处方，并根据微生物的敏感性选择合适的抗生素。
此外，公众应该意识到抗生素对治疗病毒感染无效，不应滥用抗生素。
2.开发新的抗生素目前已经有很多微生物对现有抗生素产生了耐药性，因此开发新的抗生素是控制抗生素抗性的重要方法之一。
科学家们正在通过利用抗生素资源的合理利用和研发新的抗生素来对抗抗生素抗性。
3.促进协作与监管国际间的协作与监管也是控制抗生素抗性的重要手段。
各国政府和科研机构应加强合作，分享研究成果和数据，制定统一的抗生素使用和监管政策。
同时，加强对抗生素在养殖业中的使用监管，减少过度使用。
抗生素抑菌实验实验报告
抗生素抑菌实验实验报告抗生素抑菌实验实验报告一、引言抗生素是一类能够抑制或杀死细菌的药物，对于治疗细菌感染起着至关重要的作用。
然而，近年来，抗生素耐药性的问题日益严重，给人类健康带来了巨大的挑战。
本实验旨在通过抗生素抑菌实验，研究不同抗生素对细菌生长的抑制作用，进一步了解抗生素的作用机制，为合理使用抗生素提供实验依据。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 大肠杆菌培养基- 水平培养皿- 纯化的不同抗生素溶液（包括青霉素、头孢菌素和红霉素）- 细菌培养液2. 实验方法：- 准备细菌培养液：将大肠杆菌接种于含有营养物质的培养基中，培养24小时。
- 制备抗生素溶液：将各种抗生素溶解于适量的溶剂中，制成不同浓度的溶液。
- 进行抗生素抑菌实验：将细菌培养液均匀涂布于水平培养皿中，然后在不同区域加入不同浓度的抗生素溶液。
培养24小时后，观察抗生素对细菌生长的抑制情况。
三、实验结果在本实验中，我们选择了青霉素、头孢菌素和红霉素作为抗生素，分别制备了不同浓度的溶液。
实验结果显示，随着抗生素浓度的增加，对细菌的抑制作用也逐渐增强。
在低浓度下，细菌的生长并未受到明显的抑制，但随着抗生素浓度的增加，细菌的生长逐渐减缓甚至停止。
在高浓度下，细菌的生长完全被抑制，培养皿上观察不到任何细菌生长。
四、讨论与分析通过本实验，我们可以看出抗生素对细菌的抑制作用与其浓度呈正相关关系。
这是因为抗生素能够干扰细菌的生长和繁殖过程，从而达到抑制细菌的效果。
当抗生素浓度较低时，其作用不足以抵消细菌的生长速度，因此细菌仍能够继续繁殖。
但随着抗生素浓度的增加，抗生素对细菌的抑制作用逐渐增强，最终导致细菌生长停止。
同时，不同的抗生素对不同类型的细菌也会产生不同的抑制效果。
一些细菌可能对某种抗生素具有抵抗能力，即产生了抗药性。
这是由于细菌的遗传变异导致的，使其能够产生能够破坏或改变抗生素的作用机制的酶。
因此，在临床使用抗生素时，应根据细菌的抗药性情况选择合适的抗生素。
实验11-抗生素的抑菌试验
实验11-抗生素的抑菌试验实验目的：本实验的目的在于了解抗生素的抑菌作用并学习抗生素敏感性试验的方法。
实验原理：抗生素是广泛用于医生领域以及日常生活中的一种药物。
抗生素可以抑制或杀死致病菌，从而治疗疾病。
不同类型的抗生素作用机制不同，但抗生素大部分作用于细菌的生长和繁殖过程中的关键步骤，如细菌细胞壁的合成或DNA复制等。
不同种类的细菌对抗生素的敏感性也不相同，有些细菌对某些抗生素产生了耐药性，因此了解细菌对抗生素的敏感性是非常重要的。
抗生素敏感性试验是一种常见的实验方法，旨在寻找一种特定的抗生素是否能够杀死或抑制正在生长的细菌。
该实验方法可以采用不同的技术，例如扩散法、筛选法、稀释法等。
在该实验中，我们将采用扩散法来测定细菌对抗生素的敏感性。
扩散法试验包括以下几个步骤：1. 准备培养基：将适量的琼脂糖肉汤（TSA）加入试管中，加热至完全融化，然后立即冷却至50℃左右，以避免其蒸发。
2. 种植细菌：将待测试的细菌菌液转移到琼脂糖肉汤中，并搅拌均匀。
然后，将菌液倒入含有琼脂糖的平板培养基中。
让其在室温下凝固，然后将其在温度适当的培养箱中孵育24小时。
3. 准备抗生素滤纸：将抗生素滤纸切成适当大小，并在其中加入一定量的抗生素药物。
4. 将滤纸放在琼脂糖肉汤的表面上，让其均匀地铺在平板表面上。
然后，将詹森器或其他适当的装置用于压缩滤纸，使其与培养基接触。
5. 将培养板放置于适当的环境中孵育，一般是37℃下的恒温箱。
然后，在24小时后，评估抗生素在细菌生长上的作用。
根据细菌在平板上的生长和抗生素滤纸周围的清晰区域，可以得出抗生素对细菌的敏感性结果。
实验材料：1. 感兴趣的抗生素药物2. 琼脂糖肉汤（TSA）3. 需要测试的细菌菌液实验步骤：1. 准备琼脂糖肉汤培养基。
2. 在试管中接种需要测试的细菌，搅拌均匀。
将其倒入含有琼脂糖肉汤的平板培养基中。
在放置室温下使其平板凝固，然后将其置于适当温度的培养箱中孵育24小时。
抗生素抑菌实验报告
抗生素抑菌实验报告抗生素抑菌实验报告引言：抗生素是一类能够抑制或杀死细菌生长的药物，广泛应用于医疗领域。
然而，近年来，由于滥用和不当使用抗生素，细菌对抗生素的抵抗性逐渐增强，导致了严重的公共卫生问题。
为了更好地了解抗生素的抑菌效果，本实验旨在研究不同类型的抗生素对细菌生长的影响。
实验设计：1. 实验材料：- 细菌培养基：含有营养物质的培养基，提供细菌生长所需的营养。
- 不同类型的抗生素：如青霉素、头孢菌素等。
- 培养皿：用于培养细菌的容器。
- 细菌培养物：含有特定细菌的培养物，用于实验。
- 培养箱：用于控制实验环境的温度和湿度。
2. 实验步骤：- 步骤一：准备细菌培养基和培养皿，将细菌培养基均匀倒入培养皿中。
- 步骤二：在培养皿上均匀涂抹细菌培养物，使细菌均匀分布。
- 步骤三：在培养皿上分别滴加不同类型的抗生素，形成不同的实验组。
- 步骤四：将培养皿放入预先调节好的培养箱中，控制温度和湿度。
- 步骤五：观察培养皿中细菌的生长情况，记录实验结果。
实验结果与分析：经过一段时间的培养，观察到不同实验组中细菌的生长情况有所不同。
下面将对实验结果进行分析：1. 对照组：对照组中没有加入任何抗生素，细菌在培养基上生长繁殖。
这是因为培养基提供了细菌所需的营养物质，使其能够正常生长。
2. 青霉素组：青霉素是一种广谱抗生素，对多种细菌具有抑制作用。
观察到在青霉素组中，细菌的生长明显受到抑制，数量较对照组明显减少。
这是因为青霉素能够破坏细菌细胞壁的合成，导致细菌无法正常生长和繁殖。
3. 头孢菌素组：头孢菌素是一种β-内酰胺类抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑制作用。
观察到在头孢菌素组中，细菌的生长也受到明显抑制，数量明显减少。
这是因为头孢菌素能够抑制细菌的细胞壁合成，导致细菌无法正常生长和繁殖。
结论：通过本实验的结果可以得出以下结论：1. 抗生素对细菌的生长具有明显的抑制作用。
2. 不同类型的抗生素对细菌的抑制效果有所差异，这与抗生素的作用机制和细菌的耐药性有关。
抗生素抑菌实验实验报告
一、实验目的本实验旨在探究不同种类抗生素对细菌的抑菌效果，以及不同抗生素对同一种细菌的抑菌效果差异，为临床合理使用抗生素提供理论依据。
二、实验原理抗生素是具有抗菌作用的药物，通过抑制细菌生长或杀死细菌来达到治疗感染的目的。
本实验采用琼脂扩散法，将抗生素与细菌共同培养在琼脂平板上，观察抗生素对细菌的抑菌效果。
三、实验材料与仪器1. 实验材料（1）细菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌（2）抗生素：青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素（3）琼脂粉、牛肉膏、蛋白胨、生理盐水2. 实验仪器（1）恒温培养箱（2）无菌操作台（3）无菌试管（4）微量移液器（5）培养皿四、实验方法1. 制备菌悬液将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，37℃恒温培养18-24小时，用生理盐水洗涤3次，制成菌悬液。
2. 配制抗生素溶液将青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素分别用生理盐水配制成不同浓度的溶液。
3. 制备琼脂平板将牛肉膏蛋白胨培养基与琼脂粉混合，加入适量的生理盐水，高压蒸汽灭菌后，倒入培养皿中，待凝固。
4. 琼脂扩散法（1）将菌悬液均匀涂布于琼脂平板表面。
（2）用无菌移液器吸取抗生素溶液，滴加于琼脂平板上，使抗生素溶液在琼脂平板上扩散。
（3）37℃恒温培养24小时，观察并测量抑菌圈直径。
五、实验结果与分析1. 不同抗生素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果实验结果显示，青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素对金黄色葡萄球菌均具有明显的抑菌效果，其中青霉素的抑菌效果最强，抑菌圈直径为15mm；氯霉素次之，抑菌圈直径为12mm；硫酸庆大霉素和红霉素的抑菌圈直径分别为10mm和8mm。
2. 不同抗生素对大肠杆菌的抑菌效果实验结果显示，青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素对大肠杆菌均具有明显的抑菌效果，其中青霉素的抑菌效果最强，抑菌圈直径为12mm；氯霉素次之，抑菌圈直径为10mm；硫酸庆大霉素的抑菌圈直径为8mm。
微生物在抗生素抗性基因传播中的作用研究
微生物在抗生素抗性基因传播中的作用研究抗生素抗性是当今全球面临的严重威胁之一。
为了解决这一问题，科学家们对微生物在抗生素抗性基因传播中的作用进行了广泛的研究。
本文旨在探讨微生物在抗生素抗性基因传播中的重要角色，并讨论其对抗生素抗性的影响。
一、微生物介导的基因传播微生物是生物界中最为丰富多样的一类生物，它们广泛存在于自然界的各个角落，包括土壤、水体、动植物体表等。
正是由于微生物种类繁多，它们在抗生素抗性基因传播中扮演着关键的角色。
微生物可以通过三种主要的机制传播抗生素抗性基因，包括转移性质粒传播、水平基因转移和转座子传播。
这些机制使得抗生素抗性基因能够在不同微生物间产生传递和共享。
一方面，转移性质粒是一种存在于细菌细胞内的圆形DNA分子，能够独立复制和传递。
这些质粒广泛携带了各种抗生素抗性基因，通过细菌之间的接触和共享，从而在微生物群落中传播抗生素抗性。
另一方面，水平基因转移是指微生物通过直接接触或共享同一环境中的基因，以水平基因转移的方式将抗生素抗性基因传递到其他微生物中。
此外，转座子是一种能够在基因组DNA中移动的DNA序列，它们也可以在微生物之间传输和插入抗生素抗性基因。
二、微生物与宿主间的相互作用微生物与宿主间的相互作用也是导致抗生素抗性基因传播的重要机制之一。
以肠道微生物为例，人类肠道内寄居着大量微生物。
当人体使用抗生素时，这些抗生素不仅杀死感染的病原微生物，也会对正常肠道微生物产生影响。
这种干扰会导致一些肠道微生物的死亡和生长抑制，从而刺激其他微生物迅速繁殖。
另外，微生物与宿主之间存在着复杂的适应性和竞争关系。
宿主环境对于微生物的生存和繁殖至关重要。
在抗生素的作用下，对抗生素产生高度抗性的微生物可能会对宿主造成伤害，但一些微生物可能进化出特殊的适应策略，能够逃避抗生素的杀菌作用。
这样一来，微生物通过与宿主的相互作用，可以获取抗生素抗性基因并传递给其他微生物。
三、微生物的生态系统影响微生物在生态系统中扮演着重要的角色，它们的活动对于抗生素抗性基因的传播也具有重要的影响。
抗细菌实验报告
一、实验目的1. 探究不同抗生素对细菌的抑制作用。
2. 了解抗生素的最低抑菌浓度（MIC）。
3. 熟悉细菌接种、培养及抗生素敏感性试验方法。
二、实验原理抗生素是微生物或高等动植物在生命活动中产生的一类能抑制或杀死其他微生物或抑制肿瘤生长的物质。
本实验通过将细菌接种于含有不同浓度抗生素的培养基上，观察细菌的生长情况，以判断抗生素对细菌的抑制作用及最低抑菌浓度。
三、实验材料1. 菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
2. 抗生素：青霉素、链霉素、红霉素等。
3. 培养基：LB培养基、M-H琼脂培养基。
4. 仪器与设备：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台、接种环、移液器等。
四、实验方法1. 细菌接种：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌分别接种于LB液体培养基中，37℃、150 r/min培养12-24h，备用。
2. 抗生素制备：将不同抗生素分别用无菌生理盐水溶解，配制成不同浓度的抗生素溶液。
3. 抗生素敏感性试验：将M-H琼脂培养基倒入无菌平皿，待凝固后，用无菌移液器吸取不同浓度的抗生素溶液，滴加于琼脂平板表面，用无菌镊子轻轻涂抹均匀。
4. 细菌接种：用无菌接种环取适量细菌培养液，均匀涂布于抗生素处理过的琼脂平板表面。
5. 培养与观察：将平板置于37℃恒温培养箱中培养24h，观察细菌的生长情况。
五、实验结果1. 青霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用：随着青霉素浓度的增加，金黄色葡萄球菌的生长受到抑制，最低抑菌浓度为32μg/mL。
2. 链霉素对大肠杆菌的抑制作用：随着链霉素浓度的增加，大肠杆菌的生长受到抑制，最低抑菌浓度为16μg/mL。
3. 红霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用：随着红霉素浓度的增加，金黄色葡萄球菌的生长受到抑制，最低抑菌浓度为64μg/mL。
六、实验分析1. 青霉素对金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用，最低抑菌浓度为32μg/mL，可作为治疗金黄色葡萄球菌感染的首选抗生素。
2. 链霉素对大肠杆菌具有较强的抑制作用，最低抑菌浓度为16μg/mL，可作为治疗大肠杆菌感染的首选抗生素。
微生物的抗菌素抗性研究与防制
微生物的抗菌素抗性研究与防制随着人类对抗微生物的持续搏斗，微生物的抗菌素抗性问题愈发凸显。
现代医疗领域已经进入了抗生素药物的后抗生素时代，对抗菌素抗性的研究已经具有了非常重要的战略意义。
本文将对微生物的抗菌素抗性研究和防制措施进行归纳和阐述。
一、微生物药物耐受性的研究1. 抗菌素抗性机制细菌的抗菌素抗性主要是由于其内部的酶系统或其表面的蛋白质等结构发生改变，使得细菌可以逃避抗生素的杀伤。
其中，细菌的外膜和内膜的蛋白质、肽等结构对抗生素有着很大的影响。
此外，细菌还可以通过基因突变和基因转移等方式获得抗药性。
2. 分类根据细菌的抗药性机制的不同，可以将其分为以下几类：（1）天然耐药菌：这类细菌天然具有对某些抗生素的耐药性，在自然条件下就可以生存。
（2）质粒介导耐药菌：细菌通过水平基因转移的方式，来获取承载有抗生素抗性基因的质粒，并利用这些基因来获得对抗生素的耐药性。
（3）突变或新发现耐药菌：为了适应环境和生存的需要，一些细菌会发生基因突变，导致其获得对抗生素的耐药性。
此外，一些新发现的微生物也因缺乏被抗生素杀灭的历史而具有较高的抗药性。
3. 抗菌素抗性的检测为了及时发现和对抗抗生素抗性的微生物，研究人员需要开发一些检测方法。
目前，常用的抗生素抗性检测包括传统的筛选法、酶联免疫吸附测定（ELISA）、磁性微球成像技术等。
二、微生物药物耐受性的防制1. 确认抗菌素耐药趋势要想防制抗菌素抗性，必须先了解抗菌素耐药的趋势。
目前，抗生素抗性的确诊与监测在临床上已经是一个必不可少的部分，因此，监测机构要定期对不同区域、不同种类的细菌进行分析和监测，为预防和控制工作提供依据。
2. 开发新的抗菌素新型抗生素的研发，对抗菌素抗性起到重要的作用。
目前，人们已经开始尝试在天然抗生素和人工合成抗生素的基础上，开发一些新的抗生素，以应对当前抗菌素抗性问题。
3. 注重使用抗菌素的规范性合理使用抗菌素是预防和控制细菌抗药性的重要措施。
微生物抗生素抗性的研究与防控
微生物抗生素抗性的研究与防控抗生素在医学和兽医领域的使用对人类和动物的健康产生了深远影响。
然而，随着时间的推移，微生物对抗生素的抵抗性也在不断增强。
这种抗生素抗性的问题对公共卫生和临床医学造成了巨大的挑战。
因此，对微生物抗生素抗性的研究和防控显得尤为重要。
本文将探讨微生物抗生素抗性的研究进展以及如何有效防控该问题。
第一部分：微生物抗生素抗性的背景在过去的几十年里，抗生素在医疗和兽医领域的广泛使用使得许多细菌逐渐产生了对抗生素的抵抗能力，形成了抗生素抗性。
抗生素抗性的发展源自于细菌的自然进化和基因变异。
这些变异可能是细菌自身产生的，也可能是细菌之间的基因交换导致的。
此外，滥用和不正确使用抗生素也是导致微生物抗生素抗性加剧的重要原因。
第二部分：微生物抗生素抗性的研究进展为了更好地理解微生物抗生素抗性的机制，科学家们进行了大量的研究。
他们发现，抗生素抗性主要是通过基因突变和基因传递来实现的。
基因突变是指细菌的基因发生突变，使其获得对抗生素的抵抗能力。
而基因传递则是指细菌之间通过水平基因转移，传递抗生素抵抗基因的能力。
这些研究成果对于我们深入理解微生物抗生素抗性机制和制定防控策略具有重要意义。
第三部分：微生物抗生素抗性的防控策略为了有效防控微生物抗生素抗性，我们可以从以下几个方面入手：1. 合理使用抗生素：减少不必要的抗生素使用是预防抗生素抗性的关键。
医生和兽医应该在必要的情况下合理开具抗生素处方，避免滥用或过度使用抗生素。
2. 促进公众教育：通过宣传教育，提高公众对于抗生素的正确使用和风险的认知，引导大众形成正确的用药观念。
3. 发展新型抗菌药物：随着抗生素抗性问题的日益严重，我们需要不断开发新的抗菌药物来应对多重耐药细菌的威胁。
4. 加强监测和报告机制：建立全面有效的监测和报告系统，迅速发现和应对抗生素抗性的突发事件，避免其扩散和传播。
第四部分：未来的挑战与展望尽管已经取得了一些成果，但微生物抗生素抗性问题仍然是一个持续存在的挑战。
琼脂扩散试验实验报告
琼脂扩散试验实验报告一、实验目的研究琼脂扩散试验在微生物学中的应用，了解琼脂扩散试验的原理和操作步骤，掌握琼脂扩散试验的结果分析方法。
二、实验原理琼脂扩散试验是一种经典的微生物学实验，用于测定抗生素对细菌的敏感性。
其基本原理是在含有琼脂的寒氏琼脂培养基上，将抗生素溶液滴在琼脂孔中，抑菌圈的形成与抗生素的杀菌作用有关。
三、实验材料与方法1. 实验材料- 寒氏琼脂培养基- 细菌培养物- 抗生素溶液2. 实验步骤1. 准备寒氏琼脂培养基，并熔化后冷却至40C左右。
2. 取一份细菌培养物，按照一定比例加入琼脂培养基中，混匀后倒入培养皿中。
3. 使用移液管将抗生素溶液滴在琼脂培养基表面形成孔。
4. 将培养皿反转，放置在恒温箱中培养一段时间。
5. 在恒温箱中观察并测量形成的抑菌圈直径。
6. 记录实验结果。
四、实验结果与分析通过实验观察，我们发现抗生素在琼脂培养基上形成了明显的抑菌圈。
根据抑菌圈的直径，我们可以初步判断细菌对抗生素的敏感性。
抗生素对细菌的敏感性可以分为以下几类：- 敏感：抑菌圈直径较大，说明细菌对抗生素具有较高的敏感性，抗生素可以很好地抑制细菌的生长。
- 中等敏感：抑菌圈直径较小，说明细菌对抗生素具有一定的敏感性，但抗生素的杀菌作用相对较弱。
- 抗性：无抑菌环形成，说明细菌对抗生素产生了抗药性，抗生素无法对细菌产生杀菌作用。
五、实验总结与心得体会通过此次实验，我们了解了琼脂扩散试验的原理和操作步骤。
琼脂扩散试验是一种简单且有效的方法，可以用于初步评估细菌对抗生素的敏感性。
然而，需要注意实验中的准确性和可重复性，以获得可靠的结果。
此外，本实验还有一些局限性，比如扩散试验只能用于评估细菌对抗生素的敏感性，而不能提供关于细菌对抗生素的具体抗药机制等更深入的信息。
因此，在微生物学研究中，还需要结合其他实验方法和技术手段进行综合分析。
在今后的学习和实验中，我们将继续学习琼脂扩散试验以及其他微生物学实验方法，以提高我们对微生物的研究能力和实验操作技巧。
抗生素与微生物相互作用的研究
抗生素与微生物相互作用的研究抗生素是20世纪最重要的药物之一，它的问世推动了人类医疗卫生的飞跃。
但同时，抗生素的普及也加速了微生物的演化进程，形成了众所周知的抗生素耐药性问题。
抗生素与微生物之间形成了一种十分复杂的相互作用关系。
为了更好地应对抗生素耐药性问题，加强对抗生素与微生物相互作用的研究具有重要的理论和实践意义。
简单地说，抗生素通过干扰微生物的生长和繁殖来发挥抗菌作用。
而微生物则通过多种途径来抵抗抗生素的侵害。
这些途径包括改变细胞膜结构、降低药物渗透率、改变药物的靶点、产生降解酶等等。
微生物的这些抵抗机制往往不是单一的，而是形成一种“抗性基因”网，具有很高的复杂性和动态性。
抗生素的选择和使用往往受到微生物的敏感性和抗性状态的影响。
传统的抗生素敏感性检测方法主要是通过对微生物培养基上的生长情况进行观察来评估微生物的敏感性和抵抗情况。
这种方法具有操作简单、成本低等优点，但是受到微生物多样性、环境因素等诸多因素的干扰。
同时，这种方法也无法准确反映微生物对抗生素的抵抗能力和稳定性。
近年来，基于分子生物学技术的抗生素敏感性检测方法得到了快速发展。
这些方法包括PCR、DNA芯片、基因测序等，可以直接检测与微生物抵抗有关的基因和表达情况。
相对于传统的培养法，这些方法具有可靠性高、敏感性好、速度快等优势，可以有效地评估微生物对抗生素的敏感性和抗性状态。
除了对抗生素抵抗机制和敏感性的研究外，近年来还有很多科学家致力于探究微生物内部的相互作用关系和群体行为。
微生物之间不仅可以相互竞争、合作，而且还可以进行基因水平上的水平转移和重组。
这种群体性基因转移的现象被称为“水平基因转移”，是微生物进化中的重要机制之一。
水平基因转移可以使得微生物更快速和适应性地改变自己的生理活动，同时也可以向其他微生物传递有益的适应性信息。
这些活动的研究对于深入理解微生物之间的相互作用，以及探索新型抗生素的策略具有重要意义。
最后，需要指出的是，抗生素与微生物相互作用的研究具有重要的理论和实践意义。
微生物对抗生素抗性实验设计
微生物综合性实验设计报告化学抑杀菌剂的效果评价微生物综合性实验设计报告化学抑杀菌剂的效果评价一、所选化学试剂的主要性质试剂性状药理应用备注头孢霉素白色或类白色的结晶性粉末；微臭。
在水中略溶，在乙醇、氯仿、乙醚中几乎不溶。
1％水溶液pH为3.5～6。
在碱性物质存在时，游离酸容易溶解。
对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠杆菌、流感嗜血杆菌等有抗菌作用。
抑制细胞壁合成其游离酸供口服，用于呼吸道、泌尿道、皮肤和软组织等部位的敏感菌感染，注射剂也用于败血症和骨感染。
对青霉素过敏或有过敏体质者及肾功能不全者慎用。
对头孢类抗生素过敏者禁用；注射剂刺激性较低，适宜于肌注应用；可致菌群失调、维生素缺乏、二重感染等副作用。
干燥、阴凉处，避免受热。
红霉素白色或类白色的结晶或粉末；无臭，味苦；微有引湿性。
在甲醇、乙醇或丙酮中易溶，在水中极微溶解。
抗菌谱与青霉素近似，对葡萄球菌、螺旋杆菌等有较强的抑制作用。
对支原体、放线菌、立克次氏体、衣原体有抑制作用。
金黄色葡萄球菌对本品易耐药。
抑制蛋白质合成抗菌谱与青霉素相似，且对支原体，衣原体，立克次体等及军团菌有抗菌作用。
在酸中不稳定，能被胃酸破坏，抗菌活性随pH值的升高而增强。
与万古霉素、青霉素、及碳酸氢钠等混用可产生浑浊、沉淀或降效。
主要对革兰氏阳性菌具有抗菌性。
细菌的聚核糖体结合而抑制肽链的延伸；磺胺类复方磺胺甲噁唑白色结晶性粉末，无臭，味微苦。
几乎不溶于水，溶于稀盐酸、氢氧化钠试液或氨试液中。
熔点为167-171℃。
抗菌谱与SD相似，但抗菌作用较强。
磺胺药在体内的代谢产物乙酰化物的溶解度低敏感菌所致肠炎，支气管炎，中耳炎，尿路感染等交叉过敏对一种磺胺药过敏的患者对其它磺胺药可能过敏。
穿心莲清热、祛湿、利胆。
用于肝胆湿热引起的口苦、肋痛；急性胆囊炎、胆管炎。
黄连素黄连素是一种重要的生物碱，它具有显著的抑菌作用。
黄连素能对抗病原微生物，对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌等都有抑制作用，其中对痢疾杆菌作用最强，常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。
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微生物综合性实验设计报告化学抑杀菌剂的效果评价
微生物综合性实验设计报告
化学抑杀菌剂的效果评价
一、所选化学试剂的主要性质
试剂性状药理应用备注
头孢霉素白色或类白色的
结晶性粉末；微
臭。
在水中略溶，
在乙醇、氯仿、乙
醚中几乎不溶。
1％水溶液pH为
3.5～6。
在碱性物
质存在时，游离酸
容易溶解。
对金黄色葡萄
球菌、肺炎链球
菌、大肠杆菌、
流感嗜血杆菌
等有抗菌作用。
抑制细胞壁合
成
其游离酸供口服，
用于呼吸道、泌尿
道、皮肤和软组织
等部位的敏感菌感
染，注射剂也用于
败血症和骨感染。
对青霉素过敏或有过敏
体质者及肾功能不全者
慎用。
对头孢类抗生素
过敏者禁用；注射剂刺
激性较低，适宜于肌注
应用；可致菌群失调、
维生素缺乏、二重感染
等副作用。
干燥、阴凉
处，避免受热。
红霉素白色或类白色的
结晶或粉末；无
臭，味苦；微有引
湿性。
在甲醇、乙
醇或丙酮中易溶，
在水中极微溶解。
抗菌谱与青霉
素近似，对葡萄
球菌、螺旋杆菌
等有较强的抑
制作用。
对支原
体、放线菌、立
克次氏体、衣原
体有抑制作用。
金黄色葡萄球
菌对本品易耐
药。
抑制蛋白质
合成
抗菌谱与青霉素相
似，且对支原体，
衣原体，立克次体
等及军团菌有抗菌
作用。
在酸中不稳定，能被胃
酸破坏，抗菌活性随pH
值的升高而增强。
与万
古霉素、青霉素、及碳
酸氢钠等混用可产生浑
浊、沉淀或降效。
主要
对革兰氏阳性菌具有抗
菌性。
细菌的聚核糖体
结合而抑制肽链的延
伸；
磺胺类
复方磺胺甲噁唑白色结晶性粉末，
无臭，味微苦。
几
乎不溶于水，溶于
稀盐酸、氢氧化钠
试液或氨试液中。
熔点为
167-171℃。
抗菌谱与SD
相似，但抗菌作
用较强。
磺胺药
在体内的代谢
产物乙酰化物
的溶解度低
敏感菌所致肠炎，
支气管炎，中耳炎，
尿路感染等
交叉过敏对一种磺胺
药过敏的患者对其它磺
胺药可能过敏。
穿心莲清热、祛湿、利胆。
用于肝胆湿热引起的口苦、肋痛；急性胆囊炎、胆管炎。
黄连素黄连素是一种重要的生物碱，它具有显著的抑菌作用。
黄连素能对抗病原微生物，对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌等都有抑制作用，其中对痢疾杆菌作
用最强，常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。
临床主要用于治疗细菌性
痢疾和肠胃炎，它无抗药性和副作用。
二、所用菌种主要特点
大肠杆菌革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。
周身鞭毛，能运动，无芽孢。
能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，该菌对热的抵抗力较其他肠
道杆菌强，55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。
胆盐、煌绿等对
大肠杆菌有抑制作用。
对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感，但易耐药，是由带有R
因子的质粒转移而获得的。
白色葡萄球菌球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。
葡萄球菌无鞭毛，不能运动。
无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。
易被常用的碱性染料着色，革兰氏染色为阳性。
其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性，对各种氨基酸和生长因子的要求较高，特别是对烟盐酸、硫胺素的要求更为明显。
多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。
致病性菌株能分解甘露醇。
三、实验仪器与实验试剂
仪器：高压蒸汽灭菌锅，鼓风干燥箱，微波炉、恒温培养箱、天平、分光光度计；
其他：灭菌的培养皿、酒精灯、滤纸片（13mm）、移液管、移液枪（200ul）、接种环、涂布棒、镊子、烧杯、三角瓶、锥形瓶、玻璃棒、量筒、吸管、涂布棒，棉花，纱布，线绳，pH 试纸等；尺子
试剂：无菌生理盐水，牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂粉，水，酵母膏，头孢拉定胶囊，0.25g/片，罗红霉素，0.15g/片，复方磺胺甲噁唑，黄连素 0.1g/片，复方穿心莲；
四、实验步骤
第一天：
清洗仪器：培养皿（30个）、移液管（25个）、涂布棒（4个），滤纸片（160个），包扎进行空气灭菌；
第二天：
1、配制牛肉膏蛋白胨培养基（500ml），调节PH（7.0—7.2），分装于（4个）三角瓶，
（2个）试管，包扎灭菌。
2、试验各药片在生理盐水中的最大溶解度。
3、分装生理盐水于三角瓶（6个）、试管（30个/5ml）。
4、菌种的扩大培养——将两种菌种划线接种于事先准备的两个斜面培养基中。
5、制备菌悬液。
6、取出装有培养基的试管拉制斜面，并将三角瓶中已灭菌的培养基分装于30个培养
皿中。
7、药剂溶液梯度稀释：根据最大溶解度配制溶液，计算最终浓度（mg/L），并进行梯
度稀释（以一倍递增）（即5ml药剂+5ml无菌生理盐水），共六个梯度。
8、涂布法接种（每个培养皿中接种0.2ml菌液）。
划线斜面接种。
9、贴滤纸片。
每个浓度两个平行。
（每个培养皿一个空白对照）。
10、倒置培养，37℃，24h。
第三天：
1、观察并测量抑菌圈的大小。
2、配制LB培养基（1000ml），分装试管（105个/8ml）中灭菌。
取120ml生理盐水于
150ml三角瓶中包扎灭菌。
3、制备菌悬液（120ml）。
4、通过滤纸片测得最有效的浓度（最大直径抑菌圈），在此基础上测定有效浓度时，直接选取该浓度，按加几倍计量方式进行实验。
配制该浓度溶液20mL，实验处理如下
表1 实验处理方式
实验组处理 1 2 3 4 5 培养基（mL）8 7.5 7 6.5 6 菌悬液（mL） 1 1 1 1 1 药物用量（mL） 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 OD值
阴性对照无菌生理盐水1mL+菌悬液1mL+培养基8mL
阳性对照即为最高药物用量组
空白对照无菌生理盐水2mL+培养基8mL
第四天：
1.在分光光度计上测透光率（600nm）
2.分别测定不同浓度下的透光率（OD）
3.根据测定结果找出杀死受试菌种的最低浓度。
附1
牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏 3g 1.5g
蛋白胨 10g 5g
NaCl 5g 2.5g
琼脂 18g 9g
水 1000ml 500ml
pH7.0-7.2
附2
胰蛋白胨 10g 5g
酵母粉 5g 2.5g
氯化钠 10g 5g
水 1L 500ml
pH 7.0-7.2。