第九章植物脱毒技术

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常见植物的脱毒与快速繁殖技术

常见植物的脱毒与快速繁殖技术

甘蔗脱毒
甘蔗脱毒是指通过一定的技术手段去除甘蔗植株体内病毒 的过程,使其恢复健康生长。常用的脱毒方法包括热处理、 化学处理和微茎尖培养等。
快速繁殖
脱毒后的甘蔗植株可以通过组织培养技术进行快速繁殖, 在人工控制的条件下,利用幼嫩的茎尖或根尖培养出大量 的无病毒植株。
案例效果
通过甘蔗脱毒与快速繁殖技术,可以快速获得大量无病毒 的甘蔗种苗,提高甘蔗产量和品质,增加农民收入。
常见植物的脱毒与快速繁殖技术
目录
• 植物脱毒技术 • 植物快速繁殖技术 • 植物脱毒与快速繁殖的应用 • 植物脱毒与快速繁殖的前景与挑战 • 案例分析
01 植物脱毒技术
热处理脱毒
总结词
通过加热植物组织,使病毒粒子失活或抑制其复制,从而达到脱毒目的。
详细描述
热处理脱毒通常是将植物组织暴露在高温下,如热水或热蒸汽,使病毒粒子失 去活性。这种方法适用于多种植物,尤其是难以通过其他方法脱毒的植物。
在园艺上的应用
花卉产业的发展
01
通过植物脱毒与快速繁殖技术,可以快速大量繁殖各类花卉苗
木,满足市场需求,促进花卉产业的发展。
园林绿化的优化
02
无病毒种苗生长健壮,抗性强,能够改善城市绿化效果,提高
园林景观品质。
切花和盆栽植物的生产
03
利用植物脱毒与快速繁殖技术,可以大量生产优质切花和盆栽
植物,丰富人们的家居生活。
马铃薯脱毒与快速繁殖案例
01 02
马铃薯脱毒
马铃薯脱毒是指通过一定的技术手段去除马铃薯植株体内病毒的过程, 使其恢复健康生长。常用的脱毒方法包括热处理、化学处理和微茎尖培 养等。
快速繁殖
脱毒后的马铃薯植株可以通过组织培养技术进行快速繁殖,在人工控制 的条件下,利用幼嫩的茎尖或根尖培养出大量的无病毒植株。

《植物脱毒技术》课件

《植物脱毒技术》课件
玉米
在玉米种植中,脱毒技术可以去除病 毒对玉米生长的影响,提高产量和品 质。
脱毒技术在森林植物上的应用
树木
在森林植物中,脱毒技术可以消除病毒对树木生长的影响,提高树木的生长速 度和木材质量。
竹子
在竹子种植中,脱毒技术可以去除病毒对竹子生长的影响,提高竹材的产量和 品质。
04 植物脱毒技术的优缺点及展望
谢谢聆听
注意事项
嫁接过程中需保证嫁接部位的愈合良 好,并注意砧木的选择和处理。
03 植物脱毒技术的应用
脱毒技术在园艺植物上的应用
花卉
通过脱毒技术,可以去除花卉中的病 毒,提高花卉的品质和产量。
蔬菜
在蔬菜种植中,脱毒技术可以消除病 毒对蔬菜生长的影响,提高产量和品 质。
脱毒技术在农作物上的应用
小麦
通过脱毒技术,可以消除小麦中的病 毒,提高小麦的产量和品质。
植物脱毒技术的优点
提高植物抗性
脱毒后的植物对病虫害的抵抗力更强,生长 更健康。
改善品质
提高产量
脱毒植物的生长速度和生长量都有所增加, 从而提高产量。
脱毒植物的品质得到改善,如更甜、更香的 果实。
02
01
延长存储时间
脱毒植物的寿命延长,更耐存储和运输。
04
03
植物脱毒技术的缺点
技术要求高
植物脱毒技术需要专业 的技术和设备,操作复 杂。
成本高
植物脱毒技术的成本较 高,包括技术、设备、 人员等费用。
可能产生变异
在脱毒过程中,植物可 能会出现基因变异,需 要进一步筛选和鉴定。
可能影响生态平衡
大规模种植脱毒植物可 能对当地生态平衡产生 影响。
植物脱毒技术的展望
A

植物脱毒技术

植物脱毒技术

主要影响因素:茎尖大小,一般要求茎尖长度小于1mm。 1mm。 主要影响因素:茎尖大小,一般要求茎尖长度小于1mm
茎尖越小, 技术上通常切取茎尖越小 脱毒效果越好, 技术上通常切取茎尖越小,脱毒效果越好,但是茎尖培养 的成活率变低。但对于木本植物来说, 的成活率变低。但对于木本植物来说,由于其分生组织在 离体条件下很难控制其生长发育或者其形成的苗不易生根。 离体条件下很难控制其生长发育或者其形成的苗不易生根。 所以在脱毒时可以采用微嫁接的方法,即,将分生组织嫁 所以在脱毒时可以采用微嫁接的方法, 接到试管中繁殖的砧木上,得到完整植株。 接到试管中繁殖的砧木上,得到完整植株。
1 2 3
指示植物法 免疫学方法 分子生物学法
酶联免疫吸附法(ELI A) 酶联免疫吸附法(ELISA) 免疫电镜法( 免疫电镜法(ISEM) ) 反转录聚合酶链反应(RT反转录聚合酶链反应(RT-PCR) 核酸斑点杂交技术(NA ) 核酸斑点杂交技术(NASH)
此外,还有PCR微量板杂交法, 此外,还有PCR微量板杂交法,蛋白质电泳 PCR微量板杂交法 法等也可以用来检测植物病毒。 法等也可以用来检测植物病毒。
3
抗病毒药剂脱毒
选用三氮唑核苷(C8H12N4O5)、盐酸吗啉双胍 选用三氮唑核苷(C Cl)、土霉素(C )3种药剂进行试验 种药剂进行试验。 (C5H14N5Cl)、土霉素(C22O9H31N2)3种药剂进行试验。取刚分 化长5 10mm的不定芽供试 的不定芽供试。 化长5-10mm的不定芽供试。培养基配 方:MS+BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L +GA30.2mg/L,将抗病毒药剂按试验设计(二次回归正交设 将抗病毒药剂按试验设计( 将抗病毒药剂按试验设计 分别设A代表三氮唑核苷 B代表盐酸吗啉双胍,C 三氮唑核苷, 代表盐酸吗啉双胍,C代表 计)分别设A代表三氮唑核苷, B代表盐酸吗啉双胍,C代表 土霉素,加入培养基中,每种处理组合20 其它同一般MS 土霉素,加入培养基中,每种处理组合20 瓶,其它同一般MS 培养基的配置.选取合适的优系短枝富士进行第1次转接, 培养基的配置.选取合适的优系短枝富士进行第1次转接, 次转接后45d.在无菌条件下取样, 重量不低于0.5g, 45d.在无菌条件下取样 0.5g,进 第1次转接后45d.在无菌条件下取样, 重量不低于0.5g,进 ELISA检测 培养期间,注意观察嫩梢生长情况,及时记载. 检测. 行ELISA检测.培养期间,注意观察嫩梢生长情况,及时记载.

植物的脱毒技术

植物的脱毒技术



(2)方法 ①材料的消毒 茎尖既可来自于大田或是盆栽,也可以来自无菌苗。 来自大田或是盆栽的要进行外植体的消毒,消毒方 法则是根据经验灵活运用,与器官培养基本一致。 另外,培养外植体的环境为清洁干净为好,并且给 植株定期喷施内吸型杀菌剂(如多菌灵等)或抗生 素(如0.1%链霉素)。
四、植物脱除病毒的方法



畸形生长型 :各种反常的生长。 变色型:叶片的局部或全部颜色改变。 如褪绿、变黄、变橙、变红、变紫、变 蓝绿等。郁金香碎裂病毒感染郁金香, 使其花色由单色发生斑驳或纵向条点。 坏死与变质:某些细胞组织死亡或组织 质地变软或变硬或木栓化。
郁 金 香 条 斑 病 毒 (TuBV)
黄瓜花叶病毒(CMV)

胚状体的发生方式
三、植物快速繁殖的途径和方法

5.原球茎型:兰科等植物的培养属于这 一类型,原球茎(protocorm)是缩短了 的、呈珠粒状的、由胚性细胞组成的、 类似嫩茎的器官。培养兰花的茎尖或液 芽可直接产生原球茎,可以分化成植株, 也可以继代增殖产生新的原球茎,这取 决于条件和培养基。
四、植物脱除病毒的方法

在茎尖培养时为抑制褐化的发生,需要 优化上述各因子。应用抗氧化剂AC和 Vc也可有效抑制茎尖培养的褐化现象。 此外,在茎尖培养基中,应尽量多加些 有机营养成分,如水解酪蛋白、水解乳 蛋白和椰乳等,有利于茎尖分生组织的 培养。
小结


剥取的茎尖大小与茎尖的成活率呈正相 关系,茎尖越大,成活率越高。茎尖越 小,受伤越越多,褐化就越严重,成活 率越低。 茎尖大小与脱毒率呈负相关,茎尖越大, 脱毒率就越低,茎尖越小,脱毒率就越 高。
百合丛簇病(CTLV)
二、培养无病毒种苗的意义

植物脱毒技术

植物脱毒技术

三、植物脱毒的原理和方法
(一)植物脱毒原理:
1)植物病毒本身不具有主动转移 的能力。
在一个植物体内,病毒易于通过维管 系统而移动,但在分生组织中不存在维 管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞 间连丝,速度很慢,难赶上活跃生长的 茎尖;
2)在旺盛分裂的分生细胞中,代谢活性高,竞争 抑制了病毒的复制; 3)在植物体内,可能存在着病毒钝化系统,它在 分生组织中比其他任何区域具有更高的活性。 4)在茎尖存在高水平内源生长素,也可能抑制病 毒的增殖 。
(一)无病毒原种的保存
获得无毒原种不易,若保存不好会很快重 新感染病毒。为防止再度感染,应在隔离条件 下保存。 若原种保存得好,无毒原种可以利用5-10年, 在生产上可以创造更多的经济效益。
1、隔离种植保存 通过无毒原种要在隔离区或隔虫网室内种植保 存。植物病毒的传播媒介主要是昆虫如蚜虫、叶蝉 2、离体保存 脱毒苗经鉴定后,选择无病原种株系,回接于 试管内,可长期保存,是最理想的保存方法。
(贝母:多年生草本植物,其鳞茎供药用,有止咳化痰、清热 散结之功。产于四川、云南、陕西秦巴山区,甘肃等地)
5、便于运输
常规的块根、块茎等,体细胞大、 含水量高,包装、运输十分不便。 离体繁殖的种苗体积小,易携带, 运输十分方便。
以马铃薯为例:
按一亩地4000株计算,常规薯4000个重 200kg(每个50g),若用试管薯4000个则只有 2kg(每个0.5g)。

定义:将一些对病毒敏感、症状特征显著的植 物作为指示植物(又叫鉴别寄主),利用病毒在其 他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法 . 优点:方法简单\灵敏\准确\擦方便,仍为一种经济有 效的方法 缺点:枯斑法不能测出病毒总的核蛋白浓度,而只能 测出相对的感染力

植物脱毒技术

植物脱毒技术
植物脱毒技术
第二节 脱毒苗鉴定
一、直接检测法 二、指示植物法 三、抗血清鉴定法 四、分子生物学鉴定法 五、电镜检测法
植物脱毒技术
一、直接检测法
直接观察植株生长状态是否异常,茎叶上有无特定 病毒可见症状,从而可判断病毒是否存在。如矮缩病 毒引起寄主植物叶片退绿、坏死、扭曲、植株矮缩, 花叶病毒引起寄主植物叶片脉间失绿等。 简便、直观、准确。
植物脱毒技术
三、抗血清鉴定法
(一)原理 人和动物感病后,血清中会产生抗体。刺激抗体产 生的物质多为蛋白质,称为抗原。抗原与抗体间能发 生高度专一性的反应,称为血清学反应(免疫反应)。
植物脱毒技术 三、抗血清鉴定法
抗体存在于血清中,故叫抗血清。植物病毒是核酸和蛋白质组成的复合体,因此, 也是一种抗原,注射到动物体内,会引起相应特异抗体的产生。因此,利用特定病毒 的抗血清.通讨血清学反应即可检测该种病毒。 抗血清鉴定方法专一性强、快速简便。分离纯化病毒(抗原),制备纯净的抗血清 是抗血清鉴定中最关键的环节。植物病毒抗血清的制备方法是:先提取、纯化植物病 毒,将高纯度病毒注射到动物(如家兔、山羊、老鼠)体内,再从动物血液中提取和 纯化抗血清。
植物脱毒技术
三、抗血清鉴定法
3.环形接口法 在毛细管或细长玻管中,抗 原抗体通过扩散结合。病毒抗原位于上部呈层 状,少量抗血清向毛细管渗入,至达到足够的 抗原/抗体比率时,在该区域产生可见沉淀物。 此法简单快速。
植物脱毒技术
三、抗血清鉴定法
4.酶联免疫吸附分析法(ELISA)
基本原理是用化学处理方法将酶与抗体(或抗原) 结合,制成酶标抗体(原),这些酶标记物仍保持其 免疫活性,能与相应抗体或抗原特异结合形成酶标记 免疫复合物,遇相应底物时,免疫复合物上的酶催化 无色的底物,降解生成有色产物或沉淀物,前者可用 比色法定量测定,后者可肉眼观察或通过光学显微镜 识别。

《植物脱毒快繁技术》课件

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05
植物脱毒快繁技术的发展前景与挑 战
技术发展前景
高效快速
植物脱毒快繁技术能够快速繁殖出大量无病 毒的健康植株,提高农业生产效率。
降低成本
无病毒的健康植株能够减少农药使用,降低 环境污染。
保护环境
通过大规模快速繁殖,可以降低生产成本, 提高经济效益。
促进农业现代化
植物脱毒快繁技术是农业现代化的重要组成 部分,能够推动农业技术的进步。
丰富园艺品种
通过该技术可以培育出更多具有优良性状和适应性的园艺品种。
在生态恢复上的应用
植被恢复
在荒山、荒地等生态脆弱地区,利用植物脱毒快繁技术可以快速恢 复植被,提高生态系统的稳定性。
治理水土流失
通过大量繁殖抗逆性强的无病毒植物,有效治理水土流失问题,保 护生态环境。
美化环境
脱毒植物的美观度高,可用于城市绿化、美化环境,提高生态质量 。
01
降低技术难度
通过研究和改进,降低植物脱 毒快繁技术的难度,便于更多 人掌握和应用。
02
应对病毒变异
加强病毒监测和预警,及时发 现和应对病毒变异,保持脱毒 技术的有效性。
03
完善法律法规
完善相关法律法规,为植物脱 毒快繁技术的推广和应用提供 法律保障。
04
提高农民认知度
加强宣传和培训,提高农民对 植物脱毒快繁技术的认知度和 接受度。
详细描述
微茎尖培养脱毒法是切取植物微茎尖组织进行组织培养,通过连续培养和筛选,获得无病毒植株。这 种方法具有更高的脱毒效率和成功率,适用于各种植物,特别是难以通过茎尖培养脱毒的植物。
03
植物快繁技术
植物组织培养技术
定义
植物组织培养技术是一种在实验室条件下,将植物的离体组织或 细胞培养成完整植株的技术。

《植物脱毒技术》课件

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结论和要点
通过了解《植物脱毒技术》,我们可以看到它在农业、环境和食品安全领域的重要性,以及未来的发展潜力。
植物脱毒技术的分类
生物学方法
利用微生物、激素和其他生 物因子来清除植物体内的有 害物质。
化学方法
使用化学物质和药剂来解毒 和恢复植物的健康状态。
遗传工程方法
通过基因编辑和转基因技术 来提高植物对有害物质的抗 性。
植物脱毒技术的应用
1
环境修复
2
清除受污染土壤和水源中的有害物质,
恢复生态平衡。
3
农业领域
《植物脱毒技术》PPT课 件
欢迎来到《植物脱毒技术》的世界。
技术背景
植物脱毒技术是一种为清除植物体内的有害物质而采取的方法,主要应用于农业和生物科学领域。
植物脱毒技术的定义
植物脱毒技术是一套用于消除有毒物质、净化植物组织并恢复其生长能力的 方法和策略。
提高农作物的生长质量和产量,减少农 药的使用。
食品安全
确保食品中没有有害物质残留,保护人 们的健康。
植物脱毒技术的优势
1 环保可持续
采用生物和自然方法,无污染且能循环利用。
2 经济效益
减少农药和化学物质的使用,降低生产成本。
3 提高品质
改善农作物的口感、色泽和储存性。
植物脱毒技术的未来展望
随着科学技术的发展,植物脱毒技术将不断创新,应用范围将进一步扩大, 并对人类健康和环境保护产生重要影响。

植物脱毒技术听课课件

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(三)其他脱毒方法
愈伤组织培养脱毒 茎尖微体嫁接脱毒 珠心胚培养脱毒 花药培养脱毒 抗病毒药剂处理脱毒
植物脱毒技术
一、植物脱毒的意义
“脱毒苗”或“无病毒苗”,是指不含有该 种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒 在植物体内的存在表现为阴性反应的苗木。
枣疯病 正常
辣椒病毒病
番茄病毒病
通过植物组织培养方法生产无病毒种苗 可以同时除去真菌、细菌和线虫的寄生, 因此产量大幅度增加,最高可增产300%, 平均增产也在30%以上。
毒和线形病毒有效。而对杆状病毒不起作用。 ●同时同样的处理效果也不一样(具有不确定性)。 ●对植株有伤害,只有部分植株成活。 ●对寄主植物进行较长时间的高温处理有可能钝化
植物组织中的阻抗因子,使寄主植物中抗病毒因 子难于活化,从而增加无效植株的发生率。
(二)茎尖培养脱毒
1. 原理: 病毒在感染植株上的分布是不均匀的,即老
(2)热空气处理
适用于生长期植物材料的脱毒处理。设 备可采用有照明、通风、调温、给水动能的 培养箱。方法是将待处理植株先进行盆栽, 成活后移入35~40℃的培养箱中处理几十分 钟至几个月。
3.热处理脱毒的优点与局限性
(1)优点: 对设备要求不高,技术简单,短时间可
除去病毒。
(2)局限性: ●热处理不能脱除所有病毒,此法只对那些球形病
叶片及成熟的组织和器官中病毒含量较高,而幼 嫩的及未成熟的组织和器官中病毒含量较低,生 长点(约0.1~1.0mm区域)则几乎不含或含病毒 很少。
2.茎尖培养的方法
(1)材料的选择和预处理
选择具有原品种典型特征、病毒危害较 轻的健壮植株,采集外植体。
(2)外植体的表面消毒
(3)茎尖剥离

植物脱毒技术课件

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•《植物脱毒技术》
任务三 茎尖剥离和接种
将消毒后的材料在解剖镜下进行剥离,如果是用于快速繁 殖的茎尖材料可带2-4个叶原基或更多,如果是用于脱毒的 切取0.1-0.5mm,带1-2个叶原基,并迅速接到培养基上。
2024/•22/10924/2/19
解剖镜下剥取茎尖
•《植物脱毒技术》
任务四 继代培养
•《植物脱毒技术》
Hale Waihona Puke (一)茎尖培养脱毒v 1.微茎尖培养脱毒机理 v 2.微茎尖培养脱毒的过程
剥离茎尖 顶芽或腋芽
感染病毒植株
茎尖培养
离体快繁
病毒检测 植株再生
防虫网室内繁殖脱毒苗 图11-1 微茎尖培养生产脱毒苗的流程图(陈世昌,2011)
•《植物脱毒技术》
马铃薯脱毒
•《植物脱毒技术》
马铃薯脱毒技术
•2024/2/19
•《植物脱毒技术》
(二)热处理脱毒
1.热处理脱毒的原理 2.热处理脱毒的方法 ①温烫处理脱毒法 ②热空气处理脱毒法 3.影响热处理脱毒的因素 4.热处理的优缺点
•2024/2/19
•《植物脱毒技术》
(三)茎尖脱毒与热处理相接合
•2024/2/19
•《植物脱毒技术》
(四)微体嫁接脱毒法
一、脱毒苗培育的意义
v (一)植物病毒的危害 v (二)病毒传播的方式 v (三)脱毒苗培育的意义
•《植物脱毒技术》
二、脱毒的方法
v (一)茎尖培养脱毒 v (二)热处理脱毒 v (三)茎尖脱毒与热处理相接合 v (四)微体嫁接脱毒法 v (五)愈伤组织培养脱毒 v (六)珠心胚培养脱毒法 v (七)花药培养脱毒 v (八)抗病毒药剂法
任务1

植物脱毒技术

植物脱毒技术

12
2、茎尖培养脱毒法
茎尖培养脱毒就是采取茎尖分生组织离体培养的方 法获取无病毒试管苗。 原理: 植物体内病毒靠维管束系统移动,分生组织中没有 维管束存在,病毒只靠胞间连丝移动,速度很慢, 难以追上生长活跃的分生组织,所以旺盛生长的根 尖、茎尖一般都无病毒或很少有病毒分布。
13
在解剖镜下,用锋利的解剖刀进行迅速准确地茎尖剥 离,再利用植物茎尖分生组织进行离体培养,再结合 病毒检测,就可以获得无病毒的植株。
16
4.低温疗法
低温疗法是基于超低温保存对细胞的选择性破坏 的原理,结合组织培养和病毒检测技术达到脱毒目的
原理:
含有病毒的顶端细胞的液泡较大,胞液中含有的水 分也较多,在超低温保存过程中易被形成的冰晶破坏 致死,而增殖速度较快的分生组织含的水分少,胞质浓, 抗冻性强,不宜被冻死。光学显微镜观察显示,液氮中 的超低温能杀死含较大液泡的细胞,而保存液泡小的 顶端分生组织细胞。这样超低温处理过的植株再生 后可能是无病毒的。
17
低温疗法的操作过程
植物材料的选 择和预处理
装载
冰冻保护剂脱 水
材料恢复生长 和病毒检测
解冻及卸载
冰冻
18
脱毒方法对比
脱毒方法
热处理脱毒 法 茎尖培养脱 毒法 抗病毒药剂 处理脱毒法
优点
方法简单,效果明显
缺点
1、具有局限性,不能去除所有病毒 2、极易使植物材料受热枯死,造成 损失
脱毒率高,脱毒速度 快
1、用于加速某些难繁殖或繁殖速度很低的植 物,或某些需要加速繁殖的特殊基因型, 如名贵花卉、优良资源、果树芽变分离、 工程植株等。
20
2、用于自然繁殖极易感染病毒的植物,如马 铃薯、甘薯、甘蔗、香蕉、石竹、百合等。

植物脱毒技术

植物脱毒技术

烟草愈伤组织中分离出来的单个细胞中,只有40%带
有这种病毒。由受侵染的愈伤基 础 教 育 学 院 生 化 系
(1)原理及依据 a、愈伤组织细胞分裂增殖速度快,而 病毒复制速度较慢,赶不上细胞的繁殖; b、愈伤组织细胞发生了抗病毒突变。
湛 江 师 范 学 院 基 础 教 育 学 院 生 化 系
(二)培养条件
温度 光照
湛 江 师 范 学 院 基 础 教 育 学 院 生 化 系
(二)生根诱导
有些基部发出不定根;
有些要继代到生根培养基中;
有些很难生根。
湛 江 师 范 学 院 基 础 教 育 学 院 生 化 系
(二)培养基 常用MS或White培养基。在培养基中 可酌情加5%-10%椰乳,0.1-1.0mg/L的 IAA、NAA、6-BA等,有的还要加活性炭。
织和维管束系统无直接联系,故可以通过
珠心组织离体培养获得无病毒植株。
缺点:会有20%~30%左右的变异率,同时无毒苗苗期
较长。
湛 江 师 范 学 院 基 础 教 育 学 院 生 化 系
三、微尖嫁接脱毒
把无病毒的茎尖作为接穗嫁接到在人工 培养基上生长的实生苗砧木上,然后将嫁接 后的砧木接种到新的培养基上培养。 微尖嫁接要求的剥离技术高,嫁接成活 率与接穗大小呈正相关,而脱毒率与接穗大 小呈负相关
氨基酸、抗菌素等)对离体组织和原生质体 具有脱毒效果。常用的药品有:8-氮鸟嘌 呤、2-硫脲嘧啶、杀稻瘟抗菌素、放线菌 素D、庆大霉素等。例如,将100ug 2-硫脲 嘧啶加入培养基可除去烟草愈伤组织中的 PVY (马铃薯病毒)。
湛 江 师 范 学 院 基 础 教 育 学 院 生 化 系
第二节 脱毒苗的鉴定
近细胞增殖转移,转移速度很慢,每小时只有几微米. 当叶片内病毒浓度增大到一定量时,就转移到韧皮部, 随后通过维管束转移到其他部分。 所以,应用茎尖培养可以获得脱毒苗。 由于茎尖培养脱毒效果好,后代遗传性稳定,所

《植物的脱毒技术》课件

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开发和实施植物脱毒 技术需要大量的资金 和技术支持。
3 可持续性
需要考虑处理后的物 质的处理和处置方式, 以确保环境的可持续 性。
植物脱毒技术的未来发展方向
新材料研究
寻找更高效和环保的材料, 用于植物脱毒技术的研究 和应用。
遗传改良
通过遗传改良方法,提高 植物的毒物清除能力。
跨学科合作
促进不同领域的合作,推 动植物脱毒技术的创新和 发展。
化学脱毒
使用化学物质来中和和 清除有毒物质。
物理脱毒
利用物理方法,如过滤, 吸附和辐照来去除有毒 物质。
植物脱毒技术的应用领域
农业
环境保护
提升农作物的毒物清除能力, 增加农作物产量和质量。
减少污染物对水体和土壤的 污染,保护生态环境。
工业
处理和处理产生的有毒废弃 物,确保工业生产的可持续 性。
植物脱毒技术的基本步骤
结论和要点
• 植物脱毒技术是一项重要的研究领域,可以应用于农业、环境保护和 工业等不同领域。
• 植物脱毒技术的发展面临着一些挑战,但也有很多解决方案和未来发 展的机会。
• 通过持续的研究和创新,植物脱毒技术有望为人类和环境带来更多的 益处。
《植物的脱毒技术》PPT 课件
欢迎来到《植物的脱毒技术》PPT课件。在本课程中,我们将探索植物脱毒技 术的定义和背景,以及其在不同应用领域中的重要性。
植物脱毒技术的定义和背景
了解植物脱毒技术的起源、基本原理和发展历史,以及为什么它对人类和环 境都非常重要。
植物脱毒技术的分类
生物脱毒
利用微生物或植物自身 的特性来降解和分解有 毒物质。
1
采集样本
收集含有有毒物质的植物样本,以便进行进一步的实验和分析。

植物脱毒技术

植物脱毒技术

b、病毒复制的能力衰退或丢失 c、继代培养的愈伤组织产生抗性变异
3.微体嫁接离体培养脱毒法
应用微体嫁接的原因: 木本植物茎尖培养难以生根形成植株。 具体做法: 将极小的茎尖(0.14mm~1.0mm)作为接穗嫁接到 不带病毒的种子实生苗砧木上,然后将砧木、接穗一 起在培养基上培养。 优点:接穗在砧木上易成活,故可用很小的茎尖来培 养,去除病毒几率大,获得无病毒苗的可能性大。 微嫁接要求的剥离技术高,嫁接成活率与接穗大小 呈正相关,而脱毒率与接穗大小呈负相关
热处理方法
(1)愈伤组织热处理
离体培养 愈伤组织 热处理继 代 分化培养。 常用温度及时间:低温37—38℃处理2周、 4周或8周;高温50℃处理3—5min。
其它效果
• 香石竹(康乃馨)在38℃~40℃下经两个 月处理可除去全部病毒。
2.组织培养脱毒法 包括微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱 毒、珠心组织培养脱毒。
与抗体的专化结合, 形成可见反应而加以 判断。由于植物病毒抗血清具有高度的专 化性, 受体植物无论显、隐症, 无论是何 种传播介质, 均可通过抗血清反应法准确 判断病毒的存在与否, 进行病毒的快速诊 断。
4、抗血清鉴定法
利用抗原与抗体特异反应的特性,用已知病毒的 抗血清来鉴定未知病毒的种类,常用的有沉淀反应 法、琼脂扩散法、酶联免疫吸附法。其中酶联免役 吸附反应(ELISA)是常用的一种方法。
三、植物脱毒的原理和方法
(一)植物脱毒原理:
1)植物病毒本身不具有主动转移 的能力。
在一个植物体内,病毒易于通过维管 系统而移动,但在分生组织中不存在维 管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞 间连丝,速度很慢,难赶上活跃生长的 茎尖;
(二)植物脱病毒方法
物理方法

植物的快繁与脱毒培养

植物的快繁与脱毒培养

• 有性生殖退化、仅用无性繁殖方法繁殖的 植物,极易受病毒病的侵染。
• 大多植物病毒不经种子传播(专化性强的 病毒除外)。
• 病毒在生长旺盛的部位繁殖速度慢.
三、传统的植物脱毒技术简介
• 物理方法:X射线、紫外线、超短波、高温 热处理等
– 原理:钝化病毒,从而达到抑制病毒蔓延的目 的。
• 化学方法:采用化学抑制剂,干扰病毒在 植物体内的复制。
第一节 植物脱毒(virus elimination)培养
一、概念 • 利用植物组织培养技术,脱除植物细胞
中的病毒,生产健康的繁殖材料。
二、植物病毒病简介
• 定义:由植物病毒寄生引起的病害。
• 症状:
– ①变色,叶片的叶绿素形成受阻或积聚,从而产 生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花 青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常 见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶 病。
ISEM
• 脱毒苗的保存与快速繁殖
• 脱毒苗的离体保存与繁殖,建立脱毒种苗 生产繁殖网络体系,木本植物建立隔离的 脱毒苗母本园。
Proliferation medium
Rooting medium
六、植物脱毒培养的意义
• 能够有效地保持优良品种的特性; • 生产无病毒种苗,防止品种退化; • 快速繁殖新品种,使优良品种迅速应用; • 节约耕地,提高农产品的商品率;
五、脱毒植物的鉴定方法
指示植物 (test plants)鉴定——利用病毒在其他植 物上出现症状的特征,作为鉴别种类的标准。这种 专用以产生症状的(寄主)植物就是指示植物。寄 主植物能够辨别某种病毒的专化性症状。 方法:将待测植物的汁液接种到指示植物,如果 待测植株带毒,则指示植物上会出现特定症状。 由于病毒的寄生范围不同,所以应根据不同的病 毒选择适合的指示植物。
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徒长 水稻恶苗病
疮痂
卷叶 马铃薯卷叶病
指示植物法
几种马铃薯病毒的指示植物及表现症状
病毒种类 马铃薯X病 毒(PVX) 马铃薯S病 毒(PVS) 指示植物 千红日、曼陀罗、 辣椒、心叶烟 苋色藜、千日红、 曼陀罗、昆诺阿藜 表现症状 脉间花叶 叶脉深陷,粗缩
马铃薯Y病 野生马铃薯、洋酸 毒(PVY) 菜、曼陀罗
苹果茎沟病毒
苹果花叶病毒 苹果锈果类病毒 葡萄扇叶病毒 葡萄茎痘病毒
弗吉尼亚小苹果
兰蓬王、红玉和 金冠 国光 沙地葡萄圣乔治
葡萄卷叶病毒
欧亚种葡萄
叶片下卷、叶脉间变红
葡萄茎沟病毒
葡萄栓皮病毒 葡萄金黄病毒 葡萄脉坏死3 Baco 22A 110R 河岸葡萄
仅在Kober5BB上会产生茎沟
节间肿大,部分叶片背面出现栓皮 植株矮化,叶片下卷、黄化
叶片背面沿叶脉出现坏死斑,卷须 和嫩梢坏死
褪绿斑,沿脉斑驳,叶片畸形 新叶上出现叶片扭曲,叶缘残缺呈 破碎状
柑橘碎叶病
腊斯克枳橙、特洛 亚枳橙、卡里佐枳 橙和厚皮来檬
三、抗血清鉴定法 特 • 异性高,测定速度快,几小时甚至几分钟就可 以完成。植物病毒鉴定中最有用方法之一。 (一)原理 刺激抗体产生蛋白质抗原。抗原与抗体间能 发生高度专一性的血清学反应(免疫反应) (二)方法 1、叶绿体凝集法 2、块茎沉淀法 3、环形接口法 4、酶联免疫法:用梅标记抗原或抗体的微量测 定法。现在灵敏度较高和常使用的方法。
3、分别说明植物指示植物法和抗血清鉴定法
原理
4、写出我国的脱毒苗繁育生产体系
5、查阅资料,了解我国脱毒马铃薯生产状况
第三节 无病毒苗的保存和繁殖
通过不同脱毒方法所获得的脱毒植株,经鉴 定确系无特顶病毒者,既是无病毒原种。 无病毒植株并不是有额外的抗病性,它们有 可能很快又被重新感染。所以一旦培育得到无病 毒苗,就应很好保存,这些原原种或原种材料保 管得好可以保存利用5~10年。
一、无病毒苗的保存
(一)隔离保存 通常无病毒苗应种植在隔虫网内,使用300目, 即网眼为0.4~0.5mm大小的网纱,也可用盆栽钵。 栽培用的土壤也应进行消毒,周围环境也要整洁,
(四)影响茎尖脱毒效果的因素(茎尖脱毒技术
的关键)
植物种类、病毒种类、剥离茎尖的大小(0.30.5mm带1-3个叶原基)、培养基营养
用于脱毒的适宜茎尖大小
植物 病毒名称 马铃薯卷叶病毒 马 剥离茎尖大 小 (mm) 1.0~3.0 植物 百合 剥离茎尖大 病毒名称 小 (mm) 花叶病 0.2~1.0
生产场所应隔离病毒感染途径,• 好土壤消 做
毒或防蚜等工作。在此种植区及种植规模小的地 方,要较长时间才会感染。而在种植时间长、轮 作及种植规模大的产地则在短期内就可感染。 一旦感染,影响产量质量的,就应重新采用
无病毒苗,以保证生产的质量。
思考: 1、说明植物茎尖培养脱毒技术原理及其影响 因素
2、热处理脱毒原理是什么?
部分病毒的木本指示植物及相应症状
病毒种类 木本指示植物 苏俄苹果 司派227或光辉 表现症状
苹果褪绿叶斑病 毒
苹果茎痘病毒
叶片出现褪绿斑点,叶小,植株矮 化,长势弱
叶片反卷,植株矮化,皮层坏死 植株矮小,接合部内有深褐色坏死 环纹,木质部产生深褐色纵向条沟 叶片上产生黄斑、沿叶脉条斑 叶和茎干锈斑、坏死斑 叶片出现褪绿斑点、线纹斑及环斑、 局部坏死、畸形;叶脉间出现星状 透明斑
一些常见病毒病引起的可见病症
症状 病毒病名称 症状 病毒名称
褪绿、黄 小麦黄矮病 化 花叶、斑 烟草花叶病、菜豆花叶病、 驳 黄瓜花叶病 溃疡 枯死 穿孔 杨树溃疡病、柑桔溃疡病, 番茄溃疡病 马铃薯晚疫病、水稻白叶枯 病 桃细菌性穿孔病 柑桔疮痂病、梨黑星病、马 铃薯疮痂病
斑点 十字花科黑斑病
猝倒、棉花立枯病、瓜苗猝 立枯 倒病、水稻烂秧病 萎蔫 矮化 棉花枯萎病、茄科植 物青枯病 玉米矮化病、泡桐丛 枝病、小麦丛矮病
二、无病毒苗的繁殖 (一)无病毒苗的繁殖方法 1、嫁接繁殖 2、扦插繁殖
3、压条繁殖
4、匍匐茎繁殖
5、微型薯块繁殖
(二)无病毒苗繁育生产体系 我国农作物无病毒苗繁育生产体系归结 为以下模式: 国家级(或省级)脱毒中心——无病毒 苗繁育基地——无病毒苗栽培示范基地——作 物无病毒化生产
三、无病毒苗的利用 无病毒苗在生产中的利用也要防止病毒的再 感染。•
应用植物脱毒技术意义
植物脱毒技术可使植物恢复原来优良特性,
生长势增强,明显提高产量、改善品质,产
量的提高幅度最高可达300%。
植物脱毒技术不仅脱除了病毒,还可以去
除多种真菌、细菌及线虫病害,使种性得以
恢复,植株生长健壮,减少肥料和农药施用
量,降低生产成本,保护了环境
第一节 脱毒方法
一、茎尖培养脱毒 (一)通过茎尖培养脱毒的原理 1、病毒在植物体内的分布 病毒浓度不同,离尖端越远病毒浓度越高。茎 尖或根尖,离体培养便可获得无病毒再生植株。 2、茎尖大小与脱毒 茎尖外植体的大小与脱毒效果成反比。茎尖分 生组织不能合成自身需要的生长素,但下部叶原基 能提供,因而带叶原基的茎尖生长快,成苗率高。 但茎尖越大,脱毒效果差。
(二)茎尖脱毒方法
1、取样与消毒
可直接选定的植株上取顶芽进行消毒接种。采 顶芽与侧芽消毒接种 。 消毒方法是:剪取顶芽梢段3、5厘米,剥去大 叶片,用自来水冲洗干净,在75%酒精中浸泡30秒
左右,用1%-3次氯酸钠或5%-7%的漂白粉溶液消
毒10-20分,最后用无菌水冲洗材料4-5次。
酒精擦拭手
适用:多数植物
3、热处理结合茎尖培养脱毒 目前常采用将热处理和茎尖分生组织培养结合 起来的方法脱毒。 特点:既可缩短热处理时间,提高植株成活率,又
可剥离较大的茎尖,提高茎尖培养的成活率和脱毒
率。 适用:大多数植物,并可除去一般培养难以去除的 纺锤块茎类病毒
三、其他组织培养脱毒方法 (一)愈伤组织培养脱毒 将感染病毒的组织离体培养获得愈伤组织, 再诱导愈伤组织分化成苗,从而获得无病害毒植 株的方法,即愈伤组织培养脱毒法。 部分愈伤组织细胞不带病毒可能有以下两方 面的原因: 一是愈伤组织细胞分裂增殖速度快,而病毒复制 速度较慢,赶不上细胞的繁殖; 二是愈伤组织发生了抗病毒突变。
25+2℃ ,1500-5000LX,10-16h
一般光照培养比暗培养效果好。其间应更换新 鲜培养基。提高培养基中BA的浓度可形成大量从 生芽。 4.生根诱导 诱导生根的方法是将2-3cm高的无根苗转入生 根培养基继续培养1-2个月可生根。
(三)培养基与培养方式 1、培养基:MS, White , Morel等 2、培养方式:一般采用半固体培养基。
第九章 植物脱毒技术
宜职院08.9
目的与要求 了解脱毒意义,学习植物茎尖脱毒原理及其 操作程序,了解其他组织脱毒方法及应用,掌 握植物理化脱毒方法。学习植物脱毒苗的鉴定 方法,掌握各方法的鉴定原理,了解植物脱毒 苗的保存和繁殖方法。 具备植物茎尖脱毒技术基础,具有指示植物 鉴定脱毒苗的基本能力,有脱毒苗保存的认知。
第二节 脱毒苗鉴定 一、直接检查法 直接观察待侧植株生长状态是否异常,茎叶上有 无特定病毒引起的可见症状,从而可判断病毒是否 存在。 二、指示植物法 将一些对病毒反映敏感,症状特征显著的植物 作为指示植物,用以检验待测植物体内特定病毒的 存在。即指示植物法。 特点:条件简单,操作方便,经济而有效,只 能测出病毒的相对感染力。
铃薯Y病毒
马铃薯 马铃薯X病毒 马铃薯G病毒 马铃薯S病毒 斑纹花叶病毒 甘薯 缩叶花叶病毒 羽毛状花叶病毒
1.0~3.0
0.2~0.5 0.2~0.3 0.2以下 1.0~2.0 1.0~2.0 0.3~1.0
鸢尾
菊花
花叶病
各种病毒
0.2~0.5
0.2~1.0 0.2~0.8 0.6 0.3~1.0 0.7~3.0 0.2~1.0
外植体消毒
浸泡5min
器械消毒
酒精灯灼烧
酒精擦拭培养皿
2、茎尖剥离和接种 将已消毒的芽放在带滤纸的培养皿上—器械固 定—解剖镜下剥去幼叶—切下带1-2个叶原基的生 长点(0.3-0.5mm)—切下的茎尖转至培养基上 (顶部向上)。
酒精擦拭
旋转灼烧
显微镜下 获取茎尖
接种
盖好瓶塞
脱毒马铃薯试管苗
3.培养
随品种而异,有些轻 微花叶或粗缩,敏感 品种反应为坏死
叶尖呈浅黄色,有些 品种呈紫色或红色
马铃薯卷 叶病毒 (PLRV)
洋酸菜
(一)草本植物鉴定 1、汁叶涂抹法 被鉴定植物取1~3克幼叶—加10 毫升水及少量磷酸缓冲液-研碎过滤-加金钢砂作麾 擦剂-汁液在叶面上涂抹2~3次接种 2、小叶嫁接法 指示植物作砧木,被鉴定植物小 叶作接穗,常用劈接法。 (二)木本指示植物鉴定 1、直接在指示植物上嫁接待检植株的芽片 2、双重芽嫁接 3、双芽嫁接法
并及时喷施农药防治虫害,以保证植物材料在与
病毒严密隔离的条件下栽培。• 一种更便宜的方 另 法,是把由茎尖得到的并已经过脱毒检验的植物 通过离体培养进行繁殖和保存。
(二)长期保存 1、低温保存 将无病毒苗原种的器官或幼小植株接种到培 养基上,低温下离体保存,是长期保存无病毒苗 及其他优良种质的方法。只需半年或一年更换培 养基,也叫最小生长法。 2、冷冻保存(超低温保存) 用液氮(-196℃)保存植物材料的方法。常 用冷冻保护剂为DMSO(5-8%)、甘油、脯氨酸 (10%)、各种可溶性糖、聚乙二醇等。(见十二 章)
(二)珠心胚培养脱毒 柑橘类种子为多胚种子,除具有合子胚外还有珠 心胚,种子一般不带病毒,因此珠心胚植株不易带 病毒。 (三)微尖嫁接脱毒 指在人工培养基上培养实生砧木,嫁接无病毒茎 尖(0.14-1.0mm,带3-4个叶原基),以培养脱毒苗 的技术。 脱毒程序:无菌砧木培养——茎尖准备——嫁接— —嫁接苗培养——移植。
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