高中生物 第一部分《实验二 微生物的培养和利用》课件1 浙科版选修1

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步骤：
• 1、制备培养基：在60℃左右时，将两只三 角瓶中已灭菌的LB固体培养基和尿素固体 培养基，在酒精灯旁分别倒入两个培养皿 中，在水平的超净台上摇匀，平放至凝固
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步骤：
• 2、制备细菌悬液。在无菌条件下，将1g土 样加到有99mL无菌水的三角瓶中，振荡 10min，即成10－2土壤稀释液。依此法制 备10－3、10－4和10－5的土壤稀释液。
• 在完全营养培养基上菌落多，在尿素为N源 培养基上只能生长少数的菌落，即能利用 尿素的细菌。
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设备及用品：
• 1、250mL的三角瓶2个 • 2、有盖试管5支（15mm×150mm）、试管架 • 3、培养皿4个 • 4、超净台 • 5、移液器 • 6、玻璃刮刀 • 7、酒精灯 • 8、200mL烧杯1个
实验２ 分离以尿素为 氮源的微生物
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实验原理：
• 脲或称尿素，是蛋白质降解的产物。人和 其它哺乳动物的尿中都含有尿素，有一些 细菌含有脲酶，它们可以通过降解尿素作 为其生长的氮源。选择以尿素作为唯一氮 源即可分离出此类微生物。
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实验方法：
• 制备LB完全营养培养基和尿素为N源的培 养基，分别培养土壤中的微生物。
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思考与练习：
• 1、为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培 养基？
• 答：琼脂是未被纯化的混合物，内含一定 的含N化合物，用琼脂糖替代琼脂后，微生 物只能以尿素为唯一N源，利于对细菌的筛 选。
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思考与练习：
• 有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？ • 此类细菌使废弃物降解形成氨后将其利用，
防止尿素在自然情况下高温水解形成氨， 并进一步形成一些化合物，使土壤板结
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思考与练习：
• 3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的 环带出现？
• 此细菌能分解尿素产生氨，氨为碱性，酚 红指示剂在碱性下为红色，标志着存在脲 酶水解尿素的作用，红色区域大小代表脲 酶活练习：
• 4、与全营养培养基上的菌落数比较，为什 么尿素培养基上只有少数菌落？
• 答：说明能利用尿素的细菌只占少数。
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步骤：
• 3、用涂布分离法分离细菌。取10－4和10－5 土壤稀释液各0.1mL，分别加入到LB培养 基和尿素培养基中，用玻璃刮刀将菌液涂 布到整个平面上
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步骤：
• 4、培养细菌。将培养甲倒置，在37度恒温 箱中培养24—48h，观察菌落数
• 5、观察。全营养培养基中菌落较多，尿素 培养基只有少量菌落。