中国海洋大学生物化学B真题00-09答案

2007年一、填空1、醇多羟基酸类甾醇2、磷酸戊糖途径3、双缩尿反应4、10.925、40 606、肌球蛋白肌动蛋白7、3.6 0.54 氢键β折叠片β转角（β凸起）8、磷酸化9、四氢叶酸（与氨基苯甲酸PABA竞争性结合二氢叶酸合成酶）10、亚麻酸11、糖异生作用12、低高13、32 106 14、DNA聚合酶引物15、DNA RNA 蛋白质二、判断1、肽链中Cα—N、Cα—C可以自由旋转，其他键均不可以2、20种氨基酸与茚三酮反应除Pro为黄色，其余呈紫色3、一般来说，蛋白质的一级结构决定空间构象5、胰蛋白酶专一的水解Lys，Arg等碱性氨基酸羰基侧链肽，胰凝乳蛋白酶专一的水解Phe，Tyr等芳香氨基酸羰基侧链6、血红蛋白对氧的结合具有协同效应，使其再氧分压很低时能有效的释放氧，氧分压高时能快速的结合氧7、乙烯的作用是降低植物生长速度，催促果实早熟8、维生素B1即硫胺素，常以硫胺素焦磷酸辅酶形式存在，常是脱羧酶的辅酶9、人体必须的氨基酸主要有Val Trp Thr Ile Met Phe Lys等10、蔗糖由葡萄糖和果糖构成，麦芽糖由葡萄糖构成，乳糖由半乳糖和葡萄糖构成（β）11、别构酶一般都是寡聚酶，通过次级键由多个亚基构成（所有别构酶都是寡聚酶）12、米氏常数是酶的特征常数，每个酶都有以个特定的Km值，随测定的底物、反应的温度、pH及离子强度而改变13、竞争性抑制Km变大，Vmax不变；非竞争性抑制Km不变，Vmax变小；反竞争性抑制Km、Vmax都变小14、核酶是一类具有催化活性的核酸，他的动力学方程符合米氏方程15、DNA分子变性时其紫外吸收迅速增加（对于纯样品，只要读出260nm处的A值就可以算出含量。

通常以A值为1相当于50ug/mL双链DNA或40ug/mL单链DNA或RNA）16、核酸中的稀有碱基（大多都是甲基化碱基）大多出现于tRNA中17、生物膜上的脂质主要是磷脂（还有胆固醇和糖脂）18、膜蛋白（膜内在蛋白和膜周边蛋白→不跨膜）跨膜区的二级结构一般是α螺旋（以单一α螺旋跨膜、以多段α螺旋跨膜、以蛋白质分子末端片段插膜、通过共价键结合的脂插膜→锚定在膜上）19、糖异生途径不是糖酵解途径的简单逆反应过程，其中有3步迂回措施：（1）丙酮酸【丙酮酸羧化酶、ATP】→草酰乙酸【磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶、GTP】→磷酸烯醇式丙酮酸；（2）果糖—1，6—二磷酸【果糖—1，6—二磷酸酶】→果糖—6—磷酸；（3）葡萄糖—6—磷酸【葡萄糖—6—磷酸酶】→葡萄糖。

生成一分子葡萄糖，消耗4ATP和2GTP。

20、葡萄糖激酶对葡萄糖专一性强，己糖激酶专一性不强21、辅酶NADH主要是通过呼吸链提供ATP分子，而NADPH在还原性生物合成中提供还原力（提供氢离子）22、解偶联剂（2，4—二硝基苯酚【DNP】、三氟甲氧基苯腙羰基氰化物【FCCP】）可以破坏氧化磷酸化的偶联，电子传递产生的能量将以热量的形式释放;氧化磷酸化抑制剂：抑制氧的利用和抑制A TP的形成，寡霉素对利用氧的抑制可以被解偶联剂解除;离子载体抑制剂（除氢离子）：增加线粒体内膜对一价阳离子的通透性破坏氧化磷酸23、线粒体内膜对氢离子、氯离子、钾离子、氢氧根离子都是不通透的24、脂肪酸的β氧化降解是从分子的羧基端开始的，ω氧化使中、长链脂肪酸末端甲基氧化转变为二羧基酸，加速了脂肪酸的氧化，α氧化即脂肪酸α—羟化酶催化α位羟基化，主要在于植烷酸的分解，缺少α氧化会造成植烷酸的积聚25、层析系统的理论塔板数越高，系统的分离能力越好26、原核生物肽链合成时首先由甲酰蛋氨酰—tRNA（tRNA fMet i）进入核糖体P位点识别启动密码子AUG27、中心法则即遗传信息从DNA传到RNA，再传到蛋白质，一旦传给蛋白质就不再转移29、在原核生物中，转录和翻译是同时进行的30、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶三、选择1、Pro2、尿素或盐酸胍（巯基乙醇能打开二硫键）3、D：20种氨基酸，除组氨酸外，在生理PH（7左右）下都没有明显的缓冲容量4、色氨酸：碱水解多数氨基酸都遭到破坏，但色氨酸是稳定的。

酸水解较好，但色氨酸遭到破坏羟基氨基酸小部分水解，天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解5、与氧结合时是3价，去氧后是2价6、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶、凝血酶、纤溶酶7、B：凝胶过滤层析是根据分子大小分离的技术8、Edman降解法用于N末端分析，苯异硫氰酸酯（PITC）法9、竞争性抑制（丙二酸和琥珀酸结构类似）10、B型：DNA的构型有：A、B（C、D、E）、Z 11、核糖体12、A：酶活力大小即酶含量多少，酶比活力代表酶的纯度=总活力U/总蛋白mg 13、k：维生素K是凝血酶原和其他蛋白质中谷氨酸残基羧化作用的辅因子14、去污剂：膜周边蛋白通过静电力和非共价键与其他膜蛋白相互作用连接在膜上。

膜内在蛋白主要考疏水力与膜脂相结合。

去污剂如SDS：十二烷基硫酸钠，可蛋白质中的氢键和疏水作用15、NAD+：一般来说，细胞的有机成分比代谢总产物的还原程度高，生物合成是一个还原性的反映过程16、解偶联剂17、DNA聚合酶Ⅲ：DNA聚合酶Ⅰ是切除和修复，DNA聚合酶Ⅱ是修复，DNAⅢ聚合酶是复制18、限制性内切酶19、级联放大效应五、简单题1、超二级结构：若干相邻二级结构元件组合在一起，彼此相互作用，形成种类不多的、有规则的二级结构组合或二级结构串，在多种蛋白质中充当三级结构的构件，称为超二级结构结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成的三级结构的局部折叠区，他是相对独立的紧密球状实体，称为结构域模体：具有特殊功能的超二级结构，是二个或三个二级结构的肽段在空间上接近形成的具有特殊功能的超二级结构亚基：有些蛋白质是由两条或多条多肽链构成，其中每条多肽链称为亚基或亚单位2、（1）别构调控：酶分子的非催化部位与某些化合物可逆的非共价结合后发生构想的改变，进而改变酶活性状态，称为酶的别构调节。

别构酶一般都是寡聚蛋白，通过次级键由多亚基组成，在别构酶分子上有和底物结合和催化底物的活性部位，也有和调节物或效应物结合的调节部位。

调节部位和活性部位虽然在空间上是分开的，但这两个部位可以相互影响，通过构想的变化产生协同效应，实现对酶活的调控（2）酶原的激活：体内合成出的蛋白质，有时不具有活性，经过蛋白水解酶专一作用后，构想发生变化，形成酶的活性部位，变成活性蛋白，活性蛋白是酶，这个前体就称为酶原，该活化过程是不可逆的，通过专一蛋白水解酶作用，使原来酶原无活性的构想变成了有活性的构想，实现了对酶的调控（3）可逆的共价修饰：这种调控作用通过共价调节酶进行。

共价调节酶通过其他酶对其多肽链上的某些基团进行可逆的共价修饰，改变酶的构像，使处于活性与非活性的互变状态，实现多酶活的调控，这种调控方式最普遍的就是磷酸化作用3、（1）化学偶联假说：此假说认为在电子传递过程中产生一种活泼的高能共价中间物，它随后裂解驱动氧化磷酸化作用，在糖酵解中可以看到这种情况：甘油醛—3—磷酸被NAD+氧化释放的能量形成甘油酸—1，3—二磷酸，这就是一个具有高能磷酸基团的酰基磷酸化物，但是在氧化磷酸化作用中一直未能找到任何一种活泼的高能中间产物（2）构想偶联假说：这种假说认为在电子沿电子传递链传递使线粒体内膜蛋白质组分发生了构象变化，形成高能形式，这种高能形式通过ATP的合成而恢复其原来的构象。

这一假说和化学偶联假说一样，至今未能找到有力的实验证据4、（1）复制：①DNA复制采取半保留复制的方式②DNA聚合酶是一种模板指导的酶并且需要有引物链的存在③DNA聚合酶有校对、修复功能（2）转录：①转录过程RNA聚合酶要以一条DNA链为模板，受DNA的指导②转录后对RNA的加工可以消除一定的错误（3）翻译：①发生在tRNA上的校正突变，产生校正tRNA②密码子的简并性和变偶性，密码的编排具有放错功能③翻译过程要以mRNA为模板④氨酰—tRNA合成酶能够纠正酰化错误5、（1）糖与蛋白质：①糖分解代谢过程中产生的丙酮酸经TCA循环转变为草酰乙酸、α—酮戊二酸等可用于合成各种氨基酸的碳链结构，经氨基化或转氨基后即生成相应的氨基酸，另外糖分解产生的能量也可供氨基酸合成蛋白质用②蛋白质分解为氨基酸脱氨基后形成α—酮戊二酸、丙酮酸、草酰乙酸、琥珀酸经TCA循环和糖异生途径可形成葡萄糖和糖原（2）脂和蛋白质：①脂类分子中的甘油可以经丙酮酸转变为草酰乙酸、α—酮戊二酸进而变为氨基酸。

而脂肪酸β氧化产生的乙酰辅酶A在动物体内由于没有乙醛酸循环不易被利用合成氨基酸，一般都经TCA循环被氧化产能②蛋白质分解产生的生酮氨基酸可形成乙酰乙酸，从而合成脂肪，而生糖氨基酸可通过丙酮酸变为甘油，也可形成乙酰辅酶A，经丙二酰合成脂肪(3)糖和脂：①糖经酵解生成二羟丙酮磷酸和丙酮酸，前者合成甘油，后者可以再形成乙酰辅酶A，经丙二酰形成脂肪酸②脂肪分解产生的甘油可转变为二羟丙酮磷酸，从而生成糖，而脂肪酸β氧化产生的乙酰辅酶A由于再动物体内酶有乙醛酸循环，一般都经TCA循环氧化成二氧化碳和水，生糖的机会很少2006年一、填空1、7—脱氢胆甾醇促进钙、磷的吸收和骨骼的发育2、16% 凯氏定氮法3、脲酶4、二氢叶酸合成酶5、α螺旋β折叠片β转角6、丙酮乙酰乙酸D—β—羟丁酸7、—10序列（Pribnow框，有助于DNA双链的解开）—35序列（识别区，提供RNA聚合酶识别的信号）8、5’—3’外切酶聚合酶9、8 8 4 柠檬酸循环（β氧化每一轮回产生一个NADP(2.5A TP)，一个FADH2(1.5ATP)，一个H+和一个乙酰辅酶A（10ATP））二、判断1、二硫键对蛋白质的三级结构有稳定作用，它的位置属于三级结构（某些二硫键是生物活性所必须的，另一些二硫键则不是生物活性所必需的，再绝大多数情况下，二硫键再多肽链的β转角附近形成的）2、竞争性抑制使酶对底物的Km值增大3、碱性氨基酸的等电点与PH之间的关系为：PI>PH>7，酸性氨基酸的等电点与PH之间的关系为：PI<PH<74、硫辛酸是一种酰基载体，存在于丙酮酸脱氢酶和α—酮戊二酸脱氢酶5、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶6、糖异生途径不是糖酵解途径的简单逆反应7、排阻层析（凝胶过滤层析）是根据分子大小进行分离的技术，不同大小的分子受到的排阻不同，最终按照分子大小从小到大的顺序流出8、端粒酶实际是一种反转录酶，它以RNA为模板来合成DNA的端粒结构（真核生物线性染色体的两个末端具有端粒结构富含G，功能是稳定染色体末端结构，防止染色体间末端连接，并可以补偿滞后链5’末端在消除RNA引物后造成的空缺，端粒酶的存在使端粒保持一定的长度）9、肌红蛋白和血红蛋白又相似的三级结构，但共价结构不相似，动力学常数也不同10、构成生物膜的脂质、蛋白质、糖类在膜两侧的分布都是不均匀的四、名词解释1、PI：氨基酸净电荷为0时的PH称为等电点，即PI2、蛋白聚糖：是一类特殊的糖蛋白，由一条或多条糖胺聚糖和一个核心蛋白共价连接而成3、生酮氨基酸：分解过程中能产生乙酰乙酰辅酶A的氨基酸，可通过乙酰乙酰辅酶A变为乙酰乙酸和β—羟丁酸，这些氨基酸称为生酮基酸（生糖氨基酸：凡能形成丙酮酸、α—酮戊二酸、琥珀酸、草酰乙酸的氨基酸都称为生糖氨基酸）4、酶活力单位：一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量（比活力：每mg蛋白质所含的酶活力单位数）5、PCR：聚合酶链反应，是体外酶促扩增DNA的一种应用广泛的生物技术，又称无细胞分子克隆法6、SDS-PAGE：十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳，再聚丙烯酰胺凝胶系统中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠和少量巯基乙醇，用于测定蛋白质分子量的方法7、氧化磷酸化：伴随电子经电子传递链传递到氧，ADP被磷酸化形成ATP的酶促过程即是氧化磷酸化作用8、蛋白质组：指细胞内基因组表达的所有蛋白质9、一碳单位：具有一个碳原子的基团称为一碳单位10、岗崎片段：DNA复制时，3’—5’走向的链短期内首先合成较短的DNA片段，接着出现较大的分子，这些较短的DNA片段称为岗崎片段11、别构效应：多亚基蛋白一般具有多个结合部位，结合再蛋白质分子的特定部位上的配体对该分子的其他部位产生的影响称为别构效应12、G蛋白：全名GTP结合蛋白，它既与GTP结合，也与GDP结合，是一类信号传递蛋白13、Na+-K+ATP酶：是一个跨膜的Na+-K+泵，即通过水解ATP提供的能量主动向外运输Na+，而向内运输K+14、Motif：是具有特殊功能的超二级结构，是二个或三个具有二级结构的肽段，再空间上相互接近形成的一个具有特殊功能的超二级结构15、质粒：染色体外自主复制的遗传因子，多为共价闭环的DNA分子五、问答题1、（1）前处理：分离纯化某中蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来，并保持原来的天然状态，不丢失生物活性就。