2.标准病理制片流程
病理标本检查和取材的制度流程与操作规范
病理标本的检查和取材的制度、流程与操作标准1.取材前阅读申请单中的内容，初步判断病变的性质。
2.核对申请单的编号与标本的编号、标本的份数是否相符。
3.对于核对无误的标本应按以下程序取材：3.1.小标本和不完整的标本通常为活检标本，应按如下标准取材。
3.1.1应描述和记录送检标本的数量〔少量时精确计算，多量时进行估计〕、大小〔假设干mm或cm；多量时聚拢测量〕、形状、色泽和质地等。
3.1.2少量的小标本应全部取材制片。
3.1.3多量的小标本，原那么上全部取材制片；数量过多时，可尽量多地取材制片，剩余的标本应置于4%的中兴甲醛中妥善保存备用。
“立埋〞，即将黏膜面与包埋盒的底面垂直。
3.1.5使用镊子夹取标本时须严防挤压组织。
3.2大标本通常为手术标本，应按如下标准取材：3.2.1记录切除标本的手术类型。
3.2.2应描述和记录送检标本的大小〔三维长度，mm或cm〕、形状、色泽、外表、质地等，球形或接近球形的标本可测其直径〔mm或cm〕。
必要时称重〔g或kg〕。
3.2.3检查切面：通常沿标本长径切开或剪开〔囊性标本时〕，描述和记录其形状特点，例如囊性和实性及其所占比例、色泽、质地、纹理、坏死；囊肿壁的厚度及其内外外表、囊腔内容物及其性状等，有的脏器，例如前列腺、胰腺、甲状腺等，应间隔一定距离〔甚至间距2mm左右〕做多个平行切面，检查有无微小肿物。
3.2.4带有脏器的标本，应描述和记录病变处与有无脏器的毗邻关系特点。
3.2.5必要时，绘简图说明巨检病变的特点和解剖学关系，病注明取材部位的编号，以便镜检时定位。
3.2.6切取有代表性病变区域的组织制片，适量包括与病变区域毗邻的“正常〞结构和坏死组织等。
3.2.7完整切除的肿瘤标本，切取的组织块应包括其包膜，较大的肿瘤应酌情多处包膜取材。
3.2.8切取组织块的刀具必须锋利，严防挤压组织。
3.2.9切取组织块的数量，依巨检病变的具体情况酌定，一般以满足诊断需要为准。
病理实验流程
Pathology
抗原修复注意事项及质量控制：
（2）煮沸热修复：电炉或者水浴锅加热0.01mol/L枸橼酸
钠缓冲溶液（pH6.0）至95℃左右，放入组织切片加热 10~15min； （3）微波热修复：在微波炉里加热0.01mol/L枸橼酸钠缓 冲溶液（pH6.0）至沸腾后将组织切片放入，断电，间隔 5~10min，反复1～2次； （4）酶消化方法： 常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。 胰蛋白酶使用前预热至37℃，切片也预热至37℃，消化时 间约为5~30 min；胃蛋白酶消化37℃时间为30 min。
Pathology
组织的处理（机器操作）：
包括固定、脱水、透明、浸蜡和包埋，是制作优 质切片的关键，一旦组织处理有欠缺，往往导致 无法挽回的后果。
（1）制片过程按操作流程进行。 （2）包埋用石蜡必须过滤。 （3）试剂必须按要求及时更换。
Pathology
切片：
• 切片是制片技术中非常重要的环节。影响切片质量的因素
Pathology
特殊检查需要：
当某些特殊检查需要保持组织的抗原性或酶的活性不 被破坏时、或某些细胞成分在常规染色时无法显示时，也 需采用冷冻切片技术。例如: 确定细胞内脂肪作特殊染色时，需要作冷冻切片； 肾穿刺活检的荧光标记； 酶组织化学或某些特殊抗原的免疫组化检测等，也需要作 冷冻切片。
显示胶原纤维染色（VG及Masson）， 显示网状纤维染色（氢氧化银氨液浸染法）， 显示抗酸杆菌染色（苯酚碱性品红法）， 显示真菌和糖原染色（PAS）。
Pathology
三 、 相关技术简介
5.免疫组织化学染色技术
应用抗原与抗体的特异性反应原理，在石蜡切片组织、 冷冻切片组织、细胞涂片及细胞培养爬片上进行检测抗 原或抗体的特异性定位的方法，称为免疫组织化学法， 即用免疫学的方法进行组织化学检测。 适用于蛋白水平上组织的抗原或抗体检测。
病理痰标本制片流程
病理痰标本制片流程1. 标本采集。
- 由临床医师按要求采集痰液，一般要求患者晨起后用清水漱口，然后用力咳出深部痰液于无菌容器中。
2. 标本固定。
- 将采集到的痰液立即放入10%中性福尔马林固定液中，固定液的量应为痰液体积的5 - 10倍，固定时间一般为6 - 24小时。
3. 脱水处理。
- 从固定液中取出痰液，依次放入不同浓度的乙醇溶液中进行脱水。
- 70%乙醇，浸泡1 - 2小时。
- 80%乙醇，浸泡1 - 2小时。
- 90%乙醇，浸泡1 - 2小时。
- 95%乙醇，浸泡1 - 2小时。
- 100%乙醇（Ⅰ），浸泡1 - 2小时。
- 100%乙醇（Ⅱ），浸泡1 - 2小时。
4. 透明处理。
- 将脱水后的痰液放入二甲苯（Ⅰ）中透明15 - 30分钟。
- 再放入二甲苯（Ⅱ）中透明15 - 30分钟。
5. 浸蜡处理。
- 将透明后的痰液放入已融化的石蜡（Ⅰ）中，浸蜡1 - 2小时。
- 再放入石蜡（Ⅱ）中，浸蜡1 - 2小时。
6. 包埋。
- 用镊子将痰液从浸蜡容器中取出，放入包埋框中，倒入融化的石蜡，迅速将包埋框置于冷水中冷却，使石蜡凝固成块。
7. 切片。
- 将包埋好的蜡块固定在切片机上，调整切片厚度为4 - 6μm，进行切片，将切下的切片漂浮在40 - 45℃的温水上展平。
8. 贴片与烤片。
- 用载玻片将展平的切片捞起，使切片贴附在载玻片上，然后将载玻片放入60 - 65℃的烤箱中烤片1 - 2小时。
9. 脱蜡至水。
- 将烤片后的载玻片放入二甲苯（Ⅰ）中脱蜡5 - 10分钟。
- 再放入二甲苯（Ⅱ）中脱蜡5 - 10分钟。
- 然后依次放入100%乙醇（Ⅰ）、100%乙醇（Ⅱ）、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇中各浸泡1 - 2分钟，最后放入蒸馏水中浸泡2 - 3分钟。
10. 染色。
- 常用的染色方法为苏木精 - 伊红（HE）染色。
- 将脱蜡至水后的切片放入苏木精染液中染色5 - 10分钟，然后用流水冲洗10 - 15分钟。
申请病理会诊流程
申请病理会诊流程以下是申请病理会诊流程的更口语化版本：1. 找对医生：看门诊：先去看医生，他们觉得需要做病理检查，就会建议你去做。
2. 病理检查：取样：在医生指导下，可能要做个活检（比如穿刺、切片），或者尸体解剖，取出病变组织。
送检：把样本送到病理科，填个表，写清楚你是谁、取了哪儿、医生咋说的。
3. 病理制片：处理样本：病理科收到样本，先把它固定好、脱水、包埋，变成可以显微镜看的样子。
染色切片：然后把样本切成薄片，染上色，做成能在显微镜下看的病理切片。
4. 病理诊断：医生看片：病理医生在显微镜下仔细看切片，看看细胞长啥样、组织结构咋样，给出初步诊断。
专家会诊：如果诊断有困难或者需要进一步确认，病理科会找内部或外部的病理专家一起讨论。
5. 出具报告：写报告：病理医生根据诊断结果，写个病理报告，详细说说看到了什么、诊断是什么、有啥建议。
发报告：报告写好后，发给主诊医生或患者本人，作为看病的重要参考。
6. 申请会诊：提出申请：主诊医生或患者对病理诊断有疑问，或者想找个更牛的医生看看，就可以申请会诊。
填申请单：填个申请单，写清楚患者是谁、原病理报告大概说了啥、为啥要会诊。
7. 选定会诊机构：找专家：根据病情需要，找一个水平高、经验丰富的病理诊断中心或知名医院病理科。
问清楚：先问问人家会诊怎么申请、需要啥材料、多少钱。
8. 提交材料：寄样品：按照会诊机构的要求，把原病理切片、蜡块、临床资料等寄过去。
交钱：根据收费标准，交个会诊费。
9. 等待会诊：专家讨论：会诊机构收到样本后，组织病理专家重新看看，或者大家一起讨论，得出会诊意见。
等结果：会诊意见出来后，会诊机构会出具会诊报告，寄回给申请人。
10. 后续处理：看报告：主诊医生或患者收到会诊报告后，跟原病理报告对比一下，看看会诊意见是啥意思。
调方案：根据会诊结果，主诊医生可能需要调整治疗方案，或者让你做进一步检查治疗。
以上就是申请病理会诊的基本流程，目的就是确保病理诊断的准确性，给看病提供科学依据。
标准病理组织制片和染色技术
02
１、石蜡：
切片蜡___软蜡50℃以下，酶，保存抗原活性 (纯度高密度好) 硬蜡50℃以上-62∽64℃ 工业石蜡___质地较差，价格便宜 纯度低，熔点不准确
2、根据组织的不同选用：
60∽62℃-----皮肤、骨组织、硬纤维瘤 58℃以下----作免疫组化酶
01
恒温箱温度一般高于石蜡熔点4∽5℃ 浸蜡可分三级 软蜡 54---56℃ 硬蜡 58---60℃ 硬蜡 60—62℃
单击此处添加小标题
02
涂片法－如：血液、精液、痰、胸腹水等
单击此处添加小标题
03
磨片法－主要用有钙盐坚硬材料，牙齿、介壳、坚骨－手工磨
单击此处添加小标题
04
分离法a、压片法－动终板的制备b、撕碎法c压碎法
单击此处添加小标题
二、取材（实验病理、临床病理、尸解诊断）
实验病理取材 动物的杀死：动物杀死方法很多，根据动物大小、种别、观察目的而定。
乙醇结构式 CH3 · CH3 · OH 水的结构式 H2O
···H---O ···H---O ···H---O ···H---O ···H---
H
R
H
R
乙醇的羟基（－OH）和水形成氢键， 水分子与乙醇分子逐步缔合在一起。
乙醇与水相混容的原理：
常用的脱水剂 强，使组织硬化，和二甲苯互溶。 缺点：使组织收缩，变脆。 强，收缩厉害。临床病理用于快速脱水 ，既脱水又透明使组织收缩小不硬化 既脱水又透明皮肤、骨 叔丁醇发松子醇 根据组织大小、类别、种属、分别安排
. 临床活检取材： 注意事项： 请单位姓名与标本一致，防止混乱差错。 查标本是否符合要求—干涸坏变，固定液 多少。 材时描写：大小，形态，色泽，硬度等。 麻或针帽大小组织——染伊红？：镜纸 包好 见肿瘤取材方法：略。
病理诊断报告工作制度模板
病理诊断报告工作制度模板一、总则病理诊断报告是医疗机构临床诊断和治疗的重要依据，为确保病理诊断报告的准确性和及时性，提高医疗服务质量，制定本工作制度。
本制度适用于本机构病理科（室）病理诊断报告的制作、审核、签发和管理等工作。
二、组织架构与职责1. 病理科（室）负责人：负责病理诊断报告工作的组织领导，对病理诊断报告的质量全面负责。
2. 病理医师：负责病理标本的检查、诊断和报告撰写。
3. 病理技师：负责病理标本的处理、制片和染色等技术操作。
4. 病理诊断审核医师：负责对病理诊断报告进行审核，确保报告的准确性和完整性。
5. 病理诊断签发医师：负责对审核通过的病理诊断报告进行签发。
三、工作流程1. 病理标本接收：病理科（室）收到临床科室送检的病理标本后，应及时进行登记、核对和处理。
2. 病理制片：病理技师根据标本类型和诊断需求，进行切片、制片和染色等操作。
3. 病理诊断：病理医师在仔细观察制片后的病理切片的基础上，结合临床资料，进行病理诊断，并撰写病理诊断报告。
4. 病理诊断审核：病理诊断审核医师对病理诊断报告进行审核，重点关注诊断的准确性、完整性和规范性。
5. 病理诊断签发：病理诊断签发医师对审核通过的病理诊断报告进行签发，并加盖病理科（室）印章。
6. 病理诊断报告发放：病理科（室）应及时将签发的病理诊断报告送达临床科室，并确保报告的安全、保密和及时性。
四、质量控制与持续改进1. 病理科（室）应建立健全质量控制体系，对病理诊断报告的整个流程进行监控和管理。
2. 定期对病理医师、病理技师等进行专业培训和技能考核，提高病理诊断报告的质量。
3. 病理科（室）应定期组织病理诊断报告质量评估，对存在的问题进行分析和改进。
4. 鼓励病理科（室）参与国内外病理诊断报告质量标准的制定和交流，不断提升病理诊断报告的质量水平。
五、记录与归档1. 病理科（室）应详细记录病理诊断报告的制作、审核、签发和发放过程，确保可追溯性。
病理切片制备步骤
病理切片制备步骤全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：病理切片制备是病理学研究的重要步骤，通过对组织样本的切割、染色和观察，可以帮助医生准确诊断疾病。
下面我们来详细介绍病理切片制备的步骤。
一、组织采集和固定1. 组织采集：首先需要采集患者患病组织样本，可以是手术切除标本、活检标本或尸检标本。
2. 组织固定：将组织样本放入10%中性缓冲福尔马林或其他适当的固定液中，固定时间为6-48小时，确保组织细胞结构不变。
二、脱水和包埋1. 脱水：将固定的组织样本置于不同浓度的乙醇溶液中，逐渐去除水分。
2. 渗透：将脱水的组织样本放入蜡渗透剂中，使组织透明并与蜡充分渗透，以便进行切片。
3. 包埋：将渗透后的组织样本置于熔融的石蜡中，使组织固定在石蜡块中，以便进行切片。
三、切片和染色1. 切片：用旋转式切片机将石蜡包埋的组织块切割成厚度为3-5微米的切片。
2. 染色：将切片放入不同的染色剂中，如血液学染色、组织学染色、免疫组化染色等，以便观察组织结构和细胞形态。
四、封片和观察1. 封片：将染色后的切片放入显微镜玻璃片上，加入透明封闭剂，覆盖玻璃片，制成玻璃切片。
2. 观察：用光学显微镜观察切片，根据细胞形态和染色结果判断组织结构的变化，帮助医生做出疾病诊断。
以上就是病理切片制备的详细步骤，每一步都需要仔细操作和精心处理，以确保获得准确的组织切片和可靠的诊断结果。
希望以上内容对您有所帮助，如果有任何疑问，请随时向专业医学工作者咨询。
【2000字】第二篇示例：病理切片制备是一项关键的医学实验技朧，用于观察疾病组织的形态结构和病变情况。
正确的切片制备步骤对于准确诊断和治疗具有至关重要的意义。
本文将详细介绍病理切片制备的步骤及注意事项。
1. 采集标本：需要从患者身上采集组织标本。
这通常由有经验的医生或技术人员完成，确保采集到的标本完整、无损伤，并配有详细的临床信息。
2. 杀灭固定组织：采集到组织标本后，需要立即将其置入适当的固定液中进行固定。
病理切片步骤流程
病理切片步骤流程
一、病理标本接收
1.标本登记
（1）标本信息登记
（2）核对患者信息
2.标本处理
（1）标本初步处理
（2）定位需要切片的部位
二、标本固定
1.选择固定液
（1）根据标本类型选择固定液
（2）浸泡标本使其固定
2.固定时间
（1）确定固定时间
（2）控制固定时间以保证标本质量
三、组织脱水
1.醇度递增
（1）逐步使用不同浓度醇溶液脱水
（2）保证组织彻底脱水
2.渗透剂处理
（1）使用透明剂处理标本（2）保证标本透明度
四、组织包埋
1.包埋模具准备
（1）准备标本包埋模具
（2）注入包埋剂
2.标本定位
（1）将处理好的组织放入模具（2）调整标本位置
五、切片制作
1.切片机设置
（1）设置切片机参数
（2）切割标本制作薄片
2.切片染色
（1）染色处理
（2）固定染色结果
六、镜检与诊断
1.镜下检查
（1）镜检准备
（2）医生进行镜检
2.病理诊断
（1）根据切片结果进行诊断（2）生成病理报告。
病理科工作流程及报告发出时间 (2)
病理科工作流程及报告发出时间引言概述：病理科作为医学领域中重要的科室之一，负责疾病的诊断和治疗方案的制定。
病理科的工作流程和报告发出时间对于患者的治疗和疾病的进展具有重要意义。
本文将从五个大点详细阐述病理科的工作流程及报告发出时间。
正文内容：1. 病理标本的接收与处理1.1 标本接收：病理科接收来自临床科室的标本，包括活检、手术切除标本等。
病理科会进行标本的登记和记录，确保标本的准确性和完整性。
1.2 标本处理：病理科将标本进行初步处理，包括固定、切片和染色等步骤。
这些步骤是为了使标本适合于显微镜下的观察和分析。
2. 病理学检查与诊断2.1 组织学检查：经过标本处理后，病理科将标本放置在显微镜下进行观察。
通过观察细胞和组织的形态、结构和特征，病理科医生可以做出初步的诊断。
2.2 免疫组化检查：在组织学检查的基础上，病理科还会进行免疫组化检查，通过检测特定抗原的存在与否，进一步确定诊断。
2.3 分子病理学检查：病理科还可以进行分子病理学检查，通过检测基因或蛋白质的异常表达，提供更准确的诊断结果。
3. 报告撰写与审核3.1 报告撰写：病理科医生根据病理学检查的结果，撰写病理报告。
报告中包括标本的基本信息、病变的描述和诊断结果等。
3.2 报告审核：病理科的专家会对报告进行审核，确保报告的准确性和完整性。
如果有需要，还会与临床医生进行讨论，以提供更准确的诊断。
4. 报告发出时间4.1 术中冰冻切片：对于急诊手术或需要即时诊断的情况，病理科会进行术中冰冻切片检查。
这种检查通常在手术进行时进行，报告发出时间较短，可以为临床医生提供及时的诊断结果。
4.2 常规病理学检查：对于常规病理学检查，报告发出时间一般为24-48小时。
这是因为标本处理、显微观察和报告撰写等步骤需要一定的时间。
4.3 特殊检查：对于免疫组化和分子病理学检查等特殊检查，报告发出时间可能会延长，通常在3-7天左右，这是因为这些检查需要更多的实验操作和数据分析。
病理制片过程
病理制片过程ﻫ在临床病理科与组织学实验室,切片就是最重要得技术之一、切片得质量不好,就无法对标本进行观察、好得切片机只就是整个样品制备过程中得一个环节。
要制备一张好得切片,必须要将技术、知识与技巧进行完美得结合。
ﻫ待切片样品得质量就是非常关键得因素,而样品质量有取决于前期处理工作得准确无误(例如:固定、巨检、脱水与包埋)必须选择正确得切片机型号以及合适得钢刀或一次性刀片。
切片必须根据实际应用出发,需要根据样品得类型、大小、期望得厚度认真考虑,还要兼顾操作者得便利性与舒适性。
要且出高质量得切片,经验丰富得操作者也就是必不可少得条件之一。
操作者必须懂得切片机得工作原理,能够对机器进行精细调节以达到最佳效果;并且能应对常见故障,消除一些潜在得切片问题;还可以运用恰当得切片技术,提高切片速度但不影响质量、目前能做病理组织切片得地方很多,但要数上海舜田生物做出得病理切片相对质量上比较好,该公司有1位专业从事病理实验得老师及相关实验技术人员,积累了丰富得实验经验,所作出得切片及染色效果相当不错。
1 正确处理标本得重要性1.1固定ﻫ正确得固定就是病理制片技术中最重要得一步,这个步骤会影响到后续得每个环节。
如果固定不充分,样品得质量就会有欠缺。
组织必须在选定得固定剂中浸泡足够长得时间,使大分子保持固有形态。
正确得固定可以防止样品在脱水剂中发生变性以及后期处理步骤对于样品造成得损害、固定不充分可能增加切片得困难,表现出过度收缩,并且会导致细胞核染色不足与/或胞核呈现1.2巨检ﻫ样品需要修切成薄片,并尽可能做到均匀,否则很难在“泡沫"状。
ﻫ切片机上切出好得片子。
如果样品太厚以至于无法渗透充分,则必须经过再次处理才能进行切片。
这样会影响样品得质量,更浪费时间、从最初得步骤开始就正确处理会使后面得工作更简单,因此在大体取材得时候多花些功夫会为以后得步骤节省大量时间与精力。
ﻫ备注:包埋盒塞满组织且组织过厚就无法很好得固定,后续得处理步骤也会效果欠佳。
病理组织制片技术流程
病理组织制片技术流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片的制作流程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
病理科工作流程
目录
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一、组织脱水、透明、浸蜡 • 组织脱水
1.脱水的目的和原则：组织经固定后，含有大量水分，组织在透明浸蜡前必须进行脱水，就是用某些溶剂将组 织内的水分逐渐置换出来，以利于透明剂和石蜡的渗入，这个过程称为脱水。原则1.脱干净但又不过脱水； 2.脱水剂自低浓度至高浓度进行。
2.常用脱水剂：乙醇、丙酮 3.常用脱水顺序是：70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇Ⅰ、95%乙醇Ⅱ、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ。
17
四、石蜡组织切片制作技术 • 病理组织经取材、固定、脱水处理，用石蜡包埋后制作成蜡块，用切片机制作切片的过程称作为石蜡组织
切片。一般切片的厚度为3~5um。 • 捞片机内置蒸馏水，水温设置在45℃左右，有利于石蜡切片蜡带的铺平、伸展。 • 捞片位置要适当，组织面要放在载玻片下2/3的交界处，注意整齐美观。 • 切片机的保养及维护。
不足或含蜡过高，会造成脱蜡不干净。 4.保持液体的纯净度。 四、维护与保养
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七、全自动组织玻片封片机
• 注意事项及维护保养： 1.在更换中性树胶后，及时进行封片前的测试； 2.调节胶量的和适度，以保证封片后载玻片上的清洁； 3.及时检查盖玻片的质量，去除不合格、质量差的盖玻片； 4.封片前要仔细的将载玻片放置在篮筐架上，以保证封片质量； 5.检查最后一个透明二甲苯的液位，保证载玻片在封片前处于湿润状态，以驱除气泡； 6.定期清洁传送装置，保证传送装置上无中性树胶的污染。
火胶棉、树脂、塑料等）包成块的过程称为包埋。 • 常用包埋方法：石蜡包埋法、火胶棉包埋法、树脂包埋法、塑料包埋法、快速包埋法、液体标本包埋法 • 组织包埋的发展及现状：手工包埋、半自动组织包埋熔蜡器、全自动组织包埋、冷台一体机
最常用的包埋石蜡熔点为56~58℃、58~60℃
医院病理科工作日常管理制度
一、总则为规范医院病理科工作流程，提高病理诊断质量，确保医疗安全，特制定本制度。
二、工作职责1. 病理科主任负责全面领导病理科工作，确保病理诊断质量。
2. 病理科医师负责病理诊断工作，严格遵守职业道德，确保诊断准确。
3. 病理科技术人员负责病理制片、染色、封片等工作，保证病理切片质量。
4. 病理科护士负责病理标本的采集、送检、接收等工作，确保标本完整。
三、工作流程1. 病理标本采集（1）手术、活检等手术医师在术中取下的标本，无论组织大小，必须送做病理检查，不得随意丢弃。
（2）术中手术医师取出病理标本组织后递交器械护士，器械护士递交巡回护士，巡回护士将所取标本装入标本袋，离体30分钟内标本必须浸入10%中性福尔马林溶液或95%乙醇溶液内固定标本，然后封紧袋口，详细填写标本袋信息后妥善保管。
2. 病理制片、染色、封片（1）病理技术人员按照规范流程进行制片、染色、封片等工作。
（2）制片过程中，严格遵循制片规范，确保制片质量。
3. 病理诊断（1）病理医师根据病理切片，结合临床资料，进行病理诊断。
（2）病理诊断报告应由具有临床执业医师资格并具备初级以上病理学专业技术职务任职资格的医师签发。
4. 病理报告审核（1）病理报告签发前，由具有中级以上病理学专业技术职务任职资格的医师进行审核。
（2）审核内容包括病理诊断的准确性、完整性、规范性等。
5. 病理报告发放（1）病理报告签发后，由护士负责将病理报告发放给患者或家属。
（2）发放过程中，确保病理报告完整、准确。
四、质量控制1. 室内质控（1）病理科每月进行室内质控，确保病理诊断质量。
（2）室内质控内容包括病理制片、染色、封片、诊断等环节。
2. 室间评价（1）病理科定期参加室间评价，接受上级部门的质量检查。
（2）针对室间评价中发现的问题，及时进行整改。
五、培训与考核1. 病理科定期对医师、技术人员进行专业培训，提高业务水平。
2. 病理科对医师、技术人员进行定期考核，确保其具备相应的业务能力。
病理制片工作规范
重庆市中医院(市一院)病理科病理制片工作规范1. 标本的接收、清点制度：1.1 巨检结束后病理医师应向技术组当面交付组织块，并点清块数，记录签收。
有要求特殊处理的标本（如脱钙、糖原染色等）应当面向技术组说明，以便加以特殊处理。
1.2 组织包埋完成后必须进行清点蜡块数量，以防组织块在脱水、包埋过程中遗失。
1.3 切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
1.4 医师在诊断完成后交付档案室时必须当面清点，并作记录。
2. 制片过程各步骤应注意的事项：2.1 组织处理此过程包括固定、脱水、透明、浸蜡直至包埋，是制作优质切片的关键过程，一旦组织处理有欠缺，往往导致无法挽回的后果。
2.1.1 制片过程按操作流程进行标本处理2.1.2 有条件的单位应将大小标本分开固定脱水。
2.1.3 取材后组织应补充固定，固定时间：大标本固定时间不得少于6小时；小标本不得少于3 小时。
固定液必须及时更换，固定后必须流水冲洗；2.1.4 固定、脱水温度不得高于37℃。
2.1.5 包埋用石蜡必须过滤。
2.1.6 试剂必须及时更换。
（详见试剂的配制及更换制度）2.2 切片切片是技能含量很高的步骤，同一蜡块，用同一台切片机，同一把刀，不同的操作者会切出不同质量的片子。
2.2.1 切片刀必须锋利，切片厚度3～5微米。
切片完整，无污染，无皱褶。
2.2.2 组织片贴附应在除去标签位置后玻片的中间。
2.2.3 胃镜、纤支镜、穿刺等小活检组织切片须作非连续性切片，数量不得少于8张。
2.3 染色封片注意事项2.3.1 烤片温度应在60～62℃左右，不得高于65℃，时间不能少于20分钟。
2.3.2 剂染料必须及时更换。
2.3.3 切片封固前必须经酒精充分脱水，二甲苯透明，湿封。
不得用温箱烤干或电吹风吹干后干燥封片。
2.3.4 盖玻片使用前必须清洗。
（真空包装除外）2.2.5 封片时不得有气泡，不得有树胶外溢。
2.4 其他2.4.1 标签必须贴于玻片左侧，编号字迹必须清楚、整齐，且不易褪色，有条件者尽量采用打印。
病理制片程序
• （三）组织浸蜡 • 组织经过透明剂的完全透明后，被移放于65°c 左右熔化的石蜡中，于65°c的电热恒温箱中浸 渍的过程称为浸蜡。 • 组织在脱水时，组织中的脂类和类脂等物质在 脱水剂的作用下被溶解掉，留下了许多腔隙， 许多管腔组织和血管，也有许多腔隙，这些都 严重地影响了切片。组织浸蜡时，由于诱导剂 （二甲苯）的作用，石蜡进入到组织的各个角 落，并在各个角落中保存下来。当石蜡包埋后 冷却时，这浸入到里面的石蜡便可起到支撑的 作用，而且使组织不致于变形，塌陷等现象， 使切片能完整的切出，便于镜下观察。
• （二）组织的透明 • 组织经过一系列酒精的处理后，虽然组织里所 含有的水分已基本上被脱去，但是组织脱水时 机里可残留着许多酒精，如果不将其去除掉， 必然影响组织的进一步处理，酒精不能溶解石 蜡，必须寻找一种既能与酒精混合，又能溶解 石蜡的试剂，方能使石蜡浸入到组织中去，这 类物质被称为透明剂。它们是二甲苯、苯、三 氯甲烷（氯仿）、香柏油、苯酚、松节油和汽 油等。虽然透明剂种类多，但根据性能及效果 看，还是二甲苯为最好。
• 全密闭柜式电脑控制自动组织脱水机。 • 这种脱水机由电脑、反应缸和试剂贮存缸三个 部分组成，这三部分可以分开使用，也可以结 合在一起，形成一个柜式，一台电脑可控制5 台脱水机。电脑功能包括时间、温度和真空负 压等，可在小荧屏上显示出来，同时可显示正 在进行的脱水程序。根据需要，该机可编九套 程序输入电脑，我们的编程如下：第一套为正 常室温下脱水程序，该程序在换新试剂的几天 内使用。第二套程序组织块脱水不充分时启动 使用，当第三套程序的组织块脱水不好时，则 应更换新液；第四套为周末程序，该套程序根 据两天的休假时间，安排好组织块的脱水时间。
• 如果组织在二甲苯放置到一定时间后， 仍没有达到透明，组织块中间可出现粉 白色的现象，这说明组织没有完全脱水， 处理这种情况有两种方法，一是将其重 新放入酒精脱水，然后再透明，这种方 法处理的组织很硬，切片较难。另一种 方法就是重取材。如果将没脱水好的组 织继续做下去，切片将不完整。或者无 法切片。
病理制片过程
病理制片过程? ? 在临床病理科和组织学实验室，切片是最重要的技术之一。
切片的质量不好，就无法对标本进行观察。
好的切片机只是整个样品制备过程中的一个环节。
要制备一张好的切片，必须要将技术、知识和技巧进行完美的结合。
? ? 待切片样品的质量是非常关键的因素，而样品质量有取决于前期处理工作的准确无误（例如：固定、巨检、脱水和包埋）必须选择正确的切片机型号以及合适的钢刀或一次性刀片。
切片必须根据实际应用出发，需要根据样品的类型、大小、期望的厚度认真考虑，还要兼顾操作者的便利性和舒适性。
要且出高质量的切片，经验丰富的操作者也是必不可少的条件之一。
操作者必须懂得切片机的工作原理，能够对机器进行精细调节以达到最佳效果；并且能应对常见故障，消除一些潜在的切片问题；还可以运用恰当的切片技术，提高切片速度但不影响质量。
? ?? ? 目前能做病理组织切片的地方很多，但要数上海舜田生物做出的病理切片相对质量上比较好，该公司有1位专业从事病理实验的老师及相关实验技术人员，积累了丰富的实验经验，所作出的切片及染色效果相当不错。
1 正确处理标本的重要性1.1 固定? ? 正确的固定是病理制片技术中最重要的一步，这个步骤会影响到后续的每个环节。
如果固定不充分，样品的质量就会有欠缺。
组织必须在选定的固定剂中浸泡足够长的时间，使大分子保持固有形态。
正确的固定可以防止样品在脱水剂中发生变性以及后期处理步骤对于样品造成的损害。
固定不充分可能增加切片的困难，表现出过度收缩，并且会导致细胞核染色不足和/或胞核呈现“泡沫”状。
1.2巨检? ? 样品需要修切成薄片，并尽可能做到均匀，否则很难在切片机上切出好的片子。
如果样品太厚以至于无法渗透充分，则必须经过再次处理才能进行切片。
这样会影响样品的质量，更浪费时间。
从最初的步骤开始就正确处理会使后面的工作更简单，因此在大体取材的时候多花些功夫会为以后的步骤节省大量时间和精力。
备注：包埋盒塞满组织且组织过厚就无法很好的固定，后续的处理步骤也会效果欠佳。
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• 封片
• 将已透明的切片滴上树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴 上标笺，切片标本就可使用。
请观看视频～～～
• HE染色过程：
•1 • 将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。 •2 • 酸水及氨水中分色，各数秒钟。 •3 • 流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。 •4 • 入70％和90％酒精中脱水各10分钟。 •5 • 入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
• 脱水、透明：
• 染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
• 浸蜡，包埋：石蜡 • 将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全 浸入组织块后进行包埋，冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才 能在切片机上切成很薄的切片。 • 切片、展片、烤片： • 将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下 的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒 温箱中烘干。
• 工具/原料
• 固定液——甲醛（福尔马林） • 脱水剂——酒精 • 透明剂——二甲苯 • 石蜡 • 脱蜡剂：二甲苯 • 至水剂：酒精 • 染色剂：苏木精水溶液，酒精伊红染色液 • 生理盐水、蒸馏水、PBS实验必备溶剂
适用范围 组织学、胚胎学、病理学教学与科研。
• he染色实验具体步骤 • 1 取材，固定：固定液——甲醛（福尔马林）
----------------杨飞城
• HE染色操作步骤 • 苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ， 简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之 一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色 质与胞质内的核酸着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ， 主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE 染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最 基本、使用最广泛的技术方法。
• 脱蜡、至水、染色： • 脱蜡剂：二甲苯
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脱水剂：酒精
染色剂：苏木精水溶液，酒精伊红染
• 染色液
• 染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度 酒精，最后入蒸馏水，就可染色。 • 苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞 内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红 (Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸 性染料染色的结构具有嗜酸性。
• 从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0．5 厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏 固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞 死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结 构。
Hale Waihona Puke • 修剪，脱水，透明：脱水剂——酒精 • 透明剂——二甲苯
• 不同组织固定时间不同，固定成功后需要修剪25px*25px*5px，放 入包埋盒中，流水冲洗（去除组织中的固定液）30分钟。至于不 同浓度的酒精脱水，一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐 渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石 蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才 能浸蜡包埋。