病理制片技1
病理制片技术——常用试剂及染液的配制
病理制片技术——常用试剂及染液的配制一、Harris氏苏木精染色液的配制1．试剂准备：苏木精10 g，硫酸铝钾80 g，无水乙醇200 ml，蒸馏水2000 rnl，氧化汞3 g，冰乙酸40ml。
2．配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内，加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。
(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内，加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。
(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中，继续加热至液体沸腾关闭电源。
此时液体应呈透明的玫瑰红色。
(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中，边加氧化汞边搅拌。
此时苏木精被氧化，液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。
(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。
(6)用湿毛巾保护，将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。
(7)密封瓶口室温避光直射储存备用，临用前每100 ml苏木精液加入2～3 ml冰乙酸混匀。
二、伊红染色液的配制l. 试剂准备；伊红Y 20 g，蒸馏水1500 ml，95％乙醇500 ml，冰乙酸lml。
2．配制步骤(1)先将20 g伊红Y溶于500 m1蒸馏水中，用玻棒搅拌至其完全溶解后再加入1000 ml 蒸馏水并搅匀，液体呈深红色。
(2)加入500 ml 95％乙醇并搅匀，此时液体由深红色转变为荧光绿色。
(3)加入lml冰乙酸并搅匀，密封瓶口室温储存备用。
三、HE染色分化液的配制0.5％盐酸乙醇液：蒸馏水300 ml与95％乙醇700 ml混合后加入浓盐酸5 ml混匀。
四、HE染色返蓝液的配制0.5％氢氧化氨液：在1000毫拜蒸馏水中溶入5毫升浓氢氧化氨混匀。
病理制片技术实验报告
4．实验步骤
制作切片步骤
需用仪器及设备
需用试剂及化学药品
1．取材
取材台，案板，取材刀，一次性包埋盒
甲醛固定液，自来水流水冲洗
2．固定
自动脱水机，脱水篮
甲醛液4%
3．脱水
自动脱水Байду номын сангаас，脱水篮
不同浓度梯度的酒精液
4．透明
自动脱水机，脱水篮
两道二甲苯
5．浸蜡
自动脱水机，脱水篮
三道石蜡
6．包埋
包埋盒或包埋框，自动包埋机，包埋镊，
冷冻台，纱布，电烙铁。
石蜡
7．切片、摊片、漂片
冷冻台、切片机、眼科镊子，摊片烤片机，切片刀，载玻片，染色架，铅笔，清理污物用报纸，冷冻冰块
42度温水
8．烤片
恒温箱，定时钟，铜制染色架。
9．染色
染色缸或自动染色机，染色架
自来水，不同浓度梯度的乙醇，二甲苯，苏木素染色液，伊红染色液。
10．封片
自动封片机，盖玻片，吸管，托盘
二甲苯、中性树胶。
5.实验结果与分析讨论
在制片过程中所用到的相关设备及仪器较多，以上仅介绍我院病理科在工作中实际常用到的一些设备、试剂、药品及工具，具体可根据各自制作过程中的不同而选取。比如染色时是手工染色还是自动染色机染色，封片时是手工封片还是自动盖片机封片等。
病理制片技术实验报告
课程名称：病理检验技术实验项目名称：病理切片制作设备参观
1．实验目的：
参观认识在病理组织切片制作过程中所用到的仪器和设备。
了解各种设备在制作切片过程中的用途及操作方法。
2．实验原理：
参观见习性质，初步了解制作切片的过程和步骤，实物讲解各有关仪器设备的操作方法。
病理常规制片技术各环节注意事项
另外 ， 固定的时间应适 当， 小标 本如肠黏膜等 ２ 小时即可 ， ４ 大
标本 固定时间一 般不少于 ２ 小时 ， ４ 但也不能过久 ， 以免影 响抗
原性。
３ 固定 液 的 配 制
病 理常规制 片技术是临床医学最常用、 最基 础的病理诊断 技术 。切片质量是指导医生作 出准确诊断和治疗 的重要保证 。 切 片质量 的好 坏取决 于取材 、 固定 、 固定 液 的配制、 脱水 及透
病理标本离体后 ，由于环境变化可能发生 自溶或腐败 ， 导 致结构破坏 ，及时 固定可使病 理标本尽量保 持其离体前 的状 态， 故标本离 体后应尽快 固定 ， 对体积 较大 的标本必要 时可剖 开固定 。固定液与标本 的体积 比不得小于 ５１ 有特殊要求时应 ：，
大多数抗原来说有更好 的保存作用 ， 为首选 固定液 。（）Ｆ ４Ａ 液。
通过重组医用电子学实验课题优化实验项目强化技能训练同时细化实验考核项目特别是开展学生自选实验课题等改革措施构筑了学生的技术基础为其今后的学习工作奠定了强有力的基础
维普资讯
ｖ０．６ ｏ Ｎｏ１ １ ２ ０８ ２ ．
病 理 常规 制 片技 术 各环 节注 意 事项
组织等 ， 可适 当切厚一点 ； 而致 密或试剂不易渗透 的组织 ， 如脂 肪组织、 肺组织、 纤维性肿瘤等 ， 可切薄一些。其次 ， 在切除淋 巴 结时应 修掉两侧球冠 ， 并尽量剔 除周围 的脂肪组 织 ； 碰到不 若 可避免 的钙化组织 ， 应进行脱钙处理 。最后 ， 还应避免取材刀来 回拖拉而影响取材质量。
中， 操作项 目 按实验内容再次划分成若干子项目。每个项目给
定标准分值 。实验成绩 为百分制 ， 目分值 为 ： 各项 操作（０ ） ４分 、 实验报告（０ ） ４分 、 平时成绩（０ ） 实验课程设计题 目 ２分 。 要加上 自 行设计的分值 ， 即设计 （０ ） ２ 分 、 （０ ）报告 （０ ） 操作 ３ 分 、 ３分 、 实
组织制片技术-病理检验技术PPT
1.常用固定液
➢ 浓度10%福尔马林（浓度4%甲醛） 配制：取40%的甲醛1份加水9份混合即成。 优点：渗透力强，组织收缩小，固定均匀； 固定后组织硬度适当 ； 可增加组织韧性 ； 成本较低，可用于固定和保存大标本。
1.常用固定液
➢ 浓度10%中性缓冲福尔马林（7.2-7.4）
定效果。 注意：因乙醇的渗透力弱，固定速度慢，细胞核
着色不太理想，所以用其固定的标本取材 要薄。
1.常用固定 ➢ 乙液醇-甲醛固定液（A-F固定液）
配制：95%乙醇或无水乙醇9份，加40%甲醛1份混 合而成。
特点：此液同时兼有固定与脱水作用，尤其适用于 皮下组织中肥大细胞的固定。
➢ 乙醇-醋酸-甲醛混合固定液（AAF固定液）
（二）固定的方法
➢ 浸泡固定法：最常用。用于浸泡固定液的体积不 得少于标本体积的5倍。
➢ 注射或灌注法：多用于整个器官或尸体的固定。 ➢ 微波固定法：主要用于少量或小块组织快速制片
时的固定。 ➢ 蒸汽固定法：主要用于可溶性物质、血液或细胞
涂片及某些薄膜组织等小而薄标本的固定。
（三）固定的注意事项
病理检验技术
组织制片技术
学习内容
➢ 组织块的处理 取材 固定及固定液选择 洗涤、脱水、透明 浸蜡、包埋
➢ 组织切片 切片机原理 切片技术
学习目标
取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、脱水
掌
剂等概念
握 脱水、透明、浸蜡、包埋、切片等技术操作
熟 悉
组织切片制作的基本程序
了 常用固定液的配制和应用 解
配制：浓度40%甲醛10ml、冰醋酸5ml加入95%乙 醇85ml混 合而成。
病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24小时。
应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。
带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以1.5×1.5×0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。
整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。
酒精固定的组织材料不需冲洗。
简述病理组织制片的基本技术流程
英文回答：Pathological tissue production is an extremely important technique in clinical pathology and is carried out for in—depth research into the morphology and immunisation of tissue specimens。
The technical processes include specimen collection， tissue fixation， dehydration， transparency，immersion of waxes， wrapping， slices， de waxes， dyes and seals。
The first is sample collection， which is usually taken from surgery or piercing， followed by fixed liquid tissues and cell proteins。
Post—fixed tissues require dehydration to gradually replace moisture in tissues by gradual leaching in increased concentrations of ethanol or isopropanol。
This is followed by transparent treatment， leaching the dehydrated tissue into the transparency agent， removing the dehydration agent and gradually making it transparent。
病理组织制片技术基本流程
病理组织制片技术基本流程病理组织制片技术是病理学中的一项重要技术，它通过将病理标本切片、染色和覆盖玻片，使得细胞和组织的形态结构能够被显微镜观察和分析。
这项技术在医学诊断、研究和教学中起到了关键作用。
下面将介绍病理组织制片技术的基本流程。
1. 标本采集与固定病理组织制片的第一步是标本采集与固定。
医生根据患者的病情，选择合适的组织或细胞标本进行采集。
常见的标本包括切除标本、活检标本等。
采集后，标本需要立即进行固定，以保持组织的形态结构和化学成分的稳定。
最常用的固定剂是10%的中性缓冲福尔马林溶液。
2. 组织处理与包埋固定后的标本需要进行组织处理与包埋。
首先，将固定的标本进行去除固定剂的处理，然后用乙醇逐渐脱水，最后用苯麻油进行透明处理。
透明处理后，标本需要被包埋在石蜡中，以便后续的切片操作。
3. 切片与染色石蜡包埋的标本需要进行切片与染色。
首先，使用组织切片机将石蜡块切割成薄片，通常厚度为4-6微米。
切片后，将切片浸泡在水中，使其展开。
然后，将切片依次浸泡在染色剂中，进行组织染色。
不同的染色剂可以突显不同的细胞和组织结构，例如血液常规染色、免疫组化染色等。
4. 脱脂与覆盖玻片染色后的切片需要进行脱脂与覆盖玻片。
首先，将染色后的切片依次浸泡在醇中，去除多余的染色剂。
然后，使用透明剂将切片与玻片粘结在一起，使其固定。
最后，将覆盖玻片放在切片上，使用压力将其压平，使切片与玻片紧密结合。
5. 干燥与封装覆盖玻片后的切片需要进行干燥与封装。
将覆盖玻片的切片放置在干燥箱中，通过温度和时间控制，将其彻底干燥。
干燥后，将切片放置在干燥剂中，以防止切片吸湿。
最后，将切片放入切片盒中，进行封装，以便长期保存和使用。
病理组织制片技术的基本流程包括标本采集与固定、组织处理与包埋、切片与染色、脱脂与覆盖玻片以及干燥与封装。
这一流程确保了病理标本的形态结构得以保留，并使其能够被显微镜观察和分析。
病理组织制片技术的应用广泛，对于疾病的诊断和治疗具有重要意义，同时也为病理学研究和教学提供了有力支撑。
标准病理组织制片和染色技术
02
１、石蜡：
切片蜡___软蜡50℃以下，酶，保存抗原活性 (纯度高密度好) 硬蜡50℃以上-62∽64℃ 工业石蜡___质地较差，价格便宜 纯度低，熔点不准确
2、根据组织的不同选用：
60∽62℃-----皮肤、骨组织、硬纤维瘤 58℃以下----作免疫组化酶
01
恒温箱温度一般高于石蜡熔点4∽5℃ 浸蜡可分三级 软蜡 54---56℃ 硬蜡 58---60℃ 硬蜡 60—62℃
单击此处添加小标题
02
涂片法－如：血液、精液、痰、胸腹水等
单击此处添加小标题
03
磨片法－主要用有钙盐坚硬材料，牙齿、介壳、坚骨－手工磨
单击此处添加小标题
04
分离法a、压片法－动终板的制备b、撕碎法c压碎法
单击此处添加小标题
二、取材（实验病理、临床病理、尸解诊断）
实验病理取材 动物的杀死：动物杀死方法很多，根据动物大小、种别、观察目的而定。
乙醇结构式 CH3 · CH3 · OH 水的结构式 H2O
···H---O ···H---O ···H---O ···H---O ···H---
H
R
H
R
乙醇的羟基（－OH）和水形成氢键， 水分子与乙醇分子逐步缔合在一起。
乙醇与水相混容的原理：
常用的脱水剂 强，使组织硬化，和二甲苯互溶。 缺点：使组织收缩，变脆。 强，收缩厉害。临床病理用于快速脱水 ，既脱水又透明使组织收缩小不硬化 既脱水又透明皮肤、骨 叔丁醇发松子醇 根据组织大小、类别、种属、分别安排
. 临床活检取材： 注意事项： 请单位姓名与标本一致，防止混乱差错。 查标本是否符合要求—干涸坏变，固定液 多少。 材时描写：大小，形态，色泽，硬度等。 麻或针帽大小组织——染伊红？：镜纸 包好 见肿瘤取材方法：略。
病理标本切片技术
病理标本切片技术病理学作为现代医学的重要组成部分，着重于通过病理学检查以确定疾病诊断及治疗方案。
而病理标本切片技术作为病理学检查中的关键步骤之一，对疾病的诊断及治疗起着不可替代的作用。
一、病理标本切片技术概述病理标本切片技术是将组织样本切割成非常薄的部分，以便进行显微镜检查的过程。
这一过程通常被称为“制片”，其一般包括如下步骤：1.组织预处理：该步骤包括固定、清洗、脱水、透明化等几个关键步骤，目的是使组织样本保持原有形态并易于切割。
2.切片：该步骤使用病理切片机将组织样本切割成具有一定厚度的切片，通常在3~10μm之间。
3.染色：该步骤是为了使组织样本结构更易于识别，通常使用的染色剂有常规的血液学染色剂、免疫组织化学染色剂等。
二、病理标本切片技术的重要性正确的病理标本切片技术可以帮助病理学家准确判断疾病病变的类型、性质及病变程度等。
其重要性主要表现在以下三个方面：1.诊断：病理标本切片技术可以提供病理学家直接观察、评估组织标本，从而给出准确的疾病诊断。
例如，肿瘤和白血病等疾病需要进行病理学检查并使用病理标本切片技术来确诊。
2.治疗：病理标本切片技术还可以对病人进行治疗方案的定制。
例如，通过病理标本切片技术可以判断某种瘤细胞是否对某种药物敏感，从而在治疗中选用更加有效的药物。
3.预后：病理标本切片技术还可以帮助病人对病程进行预测和评估。
例如，在肿瘤的治疗过程中，通过病理标本切片技术可以评估肿瘤对治疗的响应并进行预测，从而评估病人的预后。
三、病理标本切片技术中存在的挑战与未来发展方向病理标本切片技术虽然在现代医学中发挥了不可替代的作用，但其在实践中仍然存在一些挑战：1.样本收集限制：某些类型的病理标本很难取得，例如甲状腺和胰腺的病理标本。
2.自动化技术发展不足：虽然近年来出现了许多自动化切片仪器，但其切片精度和效率仍然需要进一步提高。
未来病理标本切片技术的发展方向主要包括：1.数字化技术：该技术可以将制片过程中得到的显微镜图像数字化，实现对图像的分析和存储。
病理组织制片总结
病理组织制片总结一、背景介绍病理组织制片是一项重要的临床辅助诊断技术，通过取得患者组织标本并对其进行加工处理，制备出显微镜下可观察的薄片，以供病理医师进行病变分析和诊断。
本文将对病理组织制片的步骤、注意事项以及常见问题进行总结。
二、病理组织制片步骤1. 标本采集与固定标本采集是制备病理组织制片的第一步，应该准确地选取代表性的病变部位进行采集。
常用的标本采集方式包括手术切除、穿刺采样和切片检查等。
采集后，应迅速进行固定处理，以防止组织成分的破坏和细胞学改变。
2. 组织处理与包埋组织处理包括去除标本中的血液、脂肪和黏液等非组织性成分，并进行组织切片的预处理。
常用的预处理方法包括脱水、清洁和透明化等。
之后，将组织标本置于蜡块中，进行包埋处理，以固定组织结构。
3. 组织切片与染色包埋完成后，使用病理切片机将蜡块切割成薄片，并将其放置在载玻片上。
然后，进行染色处理，常用的染色方式包括血液涂片染色和特殊染色等。
染色后，可以更清晰地观察组织的形态和病变特征。
4. 显微镜观察与诊断将制备好的组织切片放置在显微镜下观察，通过对组织形态、细胞结构和病变特征的分析，病理医师可以得出初步的诊断结论。
对于一些复杂的病变，可能还需要进行免疫组织化学染色、细胞学分析或分子生物学检测等进一步的检查。
三、病理组织制片注意事项1. 标本采集与保存标本采集应准确、全面，避免采集到非病变或代表性不足的组织。
采集后，应尽快放入合适的固定液中进行保存，避免组织变性和细胞改变。
2. 组织处理与包埋组织处理过程中，应注意充分去除标本中的血液、脂肪和黏液等非组织性成分，以避免对组织结构的干扰。
在包埋过程中，应确保组织蜡块的质地均匀，以避免制备出的组织切片质量不佳。
3. 组织切片与染色在进行组织切片时，应遵循操作规范，保证切片的厚度和质量。
染色时，应准确掌握染色剂的使用方法和浸泡时间，避免染色效果不理想。
4. 显微镜观察与诊断显微镜观察是病理组织制片的核心环节，病理医师应具备良好的观察技巧和分析能力。
病理切片技术规范（一）
病理切⽚技术规范（⼀）来源：病理诊断与技术规范病理技术主要包括常规切⽚、冷冻切⽚、组织化学、免疫组织化学及分⼦病理学等技⽊其中常规切⽚是最主要、最基础的⼯作；迄今为⽌，病理切⽚制作过程的许多步骤还需⼿⼯操作，因此，强化技术⼈员的责任意识，加强基本技能训练，严格执⾏规范化操作，是确保病理技术质量稳步提⾼的前提和保证。
⼀、标本的接收与清点制度(1)巨检结束后，病理医师应向技术组当⾯交付组织块，点清块数，记录并签收。
有特殊要求的标本(如脱钙、糖原染⾊等)应当⾯向技术组说明，以便进⾏特殊处理。
(2)组织包埋完成后必须清点蜡块数量，以防组织块在脱⽔、包埋过程中遗失。
(3)切⽚完成后交付医师时，必须按照记录当⾯清点验收。
⼆、制⽚过程中的注意事项1、组织处理：此过程包括固定、脱⽔、透明、浸蜡和包埋，是制作优质切⽚的关键，⼀旦组织处理有⽋缺，往往导致⽆法挽回的后果。
(1)制⽚过程按操作流程进⾏。
(2)有条件的单位应将⼿术⼤标本与活检⼩标本分开固定、脱⽔。
(3)取材后组织应补充固定。
⼿术标本不应少于6h，活检标本不应少于3h；固定液必须及时更换，固定后组织宜流⽔冲洗处理。
(4)固定、脱⽔温度不得⾼于37℃。
(5)包埋⽤⽯蜡必须过滤。
(6)试剂必须及时更换(详见试剂的配制及更换制度)。
2、切⽚：是制⽚技术中技能要求很⾼的步骤，即使是同⼀蜡块，使⽤同⼀台切⽚机和同⼀切⽚⼑，不同的操作者也会切出不同质量的⽚⼦。
(1)切⽚⼑必须锋利，⽤⼒均匀；切⽚厚度以4um为宜，切⽚必须完整，⽆污染、皱褶和⼑痕。
(2)组织⽚贴附应在除去标签位置后居玻⽚的中间，各块组织的⽅向应⼀致。
(3)胃镜、⽀⽓管镜、穿刺等⼩活检组织须做间断连续切⽚，⼀般数量不少于8张。
3、染⾊封⽚(1)烤⽚温度应在60-62℃左右，不得⾼于65℃，时间不能少于20min。
(2)染⾊试剂必须根据切⽚染⾊质量按要求及时更换。
(3)切⽚封固前必须经⼄醇充分脱⽔、⼆甲苯透明，湿封。
病理组织制片技术流程
病理组织制片技术流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!病理组织制片技术流程1. 标本采集: 从患者身上获取组织标本，如活检或手术切除标本。
病理制片技术――包埋
病理制片技术――包埋一、意义组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后，用包埋剂(如石蜡、树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。
不同的包埋方法有不同的要求，经包埋后，组织可达到一定的硬度和韧度，有利于切成理想的薄片。
二、包埋步骤先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具)，而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱水盒中取出，放入包埋托中央，放在小冷台上，用镊子轻按组织块，以达到组织块平整，盖上脱水盒底，再加好石蜡，移至冷冻台上，待冷冻好后，卸下组织蜡块待切。
包埋时应根据组织的不同，选择大小型号适合的包埋托；有要求直立包埋的组织要用镊子将组织固定在蜡块中央稍停片刻，以使组织在蜡凝时立住，达到立埋的要求。
三、注意事项1．每次夹取组织块时，镊子用乙醇灯加热至温度适中。
2．包埋托内不要有水、碎蜡等异物，以免影响包埋质量。
3．包埋蜡的温度要控制好，包埋蜡的熔点应为58~60℃。
4．包埋蜡加入少量蜂蜡(蜜蜡)，可以增加韧度，利于切片。
5．夹取组织块放人包埋托内时，一定要注意包埋面。
6．包埋好的蜡块，用刀修整时，一定要适当保留蜡块中组织周边的白蜡边，以利于连续切片。
7．每包埋完一块组织，镊子必须擦干净或用乙醇灯烧。
四、自动包埋机简介自动包埋机是对组织经脱水、浸蜡后进行包埋处理的设备。
有多种类型，其设计具有人性化，一般整机由包埋部分和冷冻部分组合而成(一体化简洁紧凑)，全自动程序控制，具有延时自动开机功能，加热快速，温控准确，安全可靠，包埋效果好等特点，冷台最低温度可达一5℃，可进行快速冷冻处理包埋块，具有大冷台，冷冻面积大，可放置超大包埋盒或多个包埋盒。
包埋部分温度可以从55～70℃，可储存3～5 L石蜡，自动熔解石蜡，可容纳70～100个样品包埋盒。
金属板表面容易清洗，有2个加热的抽屉，可收集多余的石蜡，进行重新利用，避免石蜡浪费。
具有冷却镊子架，方便使用。
可配放大镜利于小活检标本的包埋；可配脚踏：石蜡注入由脚踏开关控制或上手工控制。
病理检验技术
一、取材
按照病理检查的目的和要求，切去适当大小和数量的组织 块，用于制作组织切片的过程，称为取材 注意事项：1.避免组织结构变形 2.组织块大小适当 3.及 时取材 4.标明包埋方向 5.染色包裹小标本 6.充分暴露病 灶 7.确定取材部位 8.清除多余组织 9.重复取材（补材） 10.认真核对
五、透明
使用某些化学剂（如二甲苯等）将组织中的脱水剂置换出 来，以利于浸蜡和包埋，因组织块浸入这些试剂后常呈半 透明状，故称透明（或媒浸）。使用的化学药剂称为透明 剂 透明剂：二甲苯：是最为常用的一种透明剂，它能与酒精， 丙酮相混合，又是石蜡的溶剂。在透明过程中，组织继续 发生硬化，由于二甲苯对组织的收缩性强，作用迅速，因 此，组织在二甲苯中时间不宜过长，否则组织容易变脆变 硬，一般是达到组织的透明为度，小块组织在半至一小时 内透明。
八、切片
切片的步骤： 1、将蜡块固定于切片机头上的夹座内，调整到稍离开切片能够切到 的位置上，注意蜡块组织切面与切片刀口要垂直平行。 2、再调整蜡块组织切面恰好与刀口接触，旋紧刀架，固定好机头。 3、根据需要调整切片厚度。 4、摇动切片机手轮先进行修整切片，直到切出完整的最大组织切面 后，再进行切制。 5、实践中可用右手转动切片机手轮，左手用毛笔托起蜡片，协调地 进行切片操作。 6、切下的切片带，一端用镊子轻轻拉起，应尽可能将切片带拉直展 开，用毛笔将切片带从刀口向上挑起，拉下切片带，然后轻拖铺于恒 温水面上。
二、固定
将组织浸入某些化学试剂，使组织细胞内所含物质尽量保 持在生活状态时的形态结构和位置的过程，称为固定 固定方法： 1浸泡固定法 2.注射、灌注固定法 3.微波固 定法 4.蒸汽固定法 常用固定液有：甲醛（10%） 乙醇（80%） 乙酸 （0.3%~5%）
病理科技术制片工作制度
病理科技术制片工作制度一、制片原则1. 病理制片应遵循标准化、规范化、精细化的原则，确保制片质量符合临床诊断需求。
2. 病理制片过程中，应严格遵守无菌操作规程，防止交叉感染。
3. 病理制片应根据病例的紧急程度、复杂程度和诊断需求，合理制定制片计划，确保高效、高质量地完成制片任务。
二、制片流程1. 收片：接收临床送检的病理标本，核对病人信息、标本种类、组织块数量等，确保信息准确无误。
2. 预处理：根据标本种类和诊断需求，对组织块进行固定、脱水、透明化等预处理。
3. 切片：将预处理后的组织块进行切片，确保切片厚度、厚度和均匀度符合要求。
4. 染色：根据诊断需求，选择合适的染色方法（如苏木精-伊红染色、免疫组化染色等）对切片进行染色。
5. 脱水：将染色后的切片进行脱水，确保切片干燥、透明。
6. 封片：将脱水后的切片进行封片，防止切片污染和褪色。
7. 镜检：病理医师对制片后的切片进行镜检，评价制片质量，确保制片质量符合诊断要求。
8. 发放：将制片合格的切片发放给临床医师，便于进行病理诊断。
三、制片质量控制1. 定期检查制片设备，确保设备性能稳定，满足制片需求。
2. 病理技术人员应具备专业知识和技能，定期进行培训和考核，提高制片技术水平。
3. 建立制片质量控制体系，对制片过程进行全程监控，确保制片质量。
4. 设立制片质量评价标准，定期对制片质量进行评估，对存在的问题进行改进。
四、制片安全与环保1. 遵守生物安全规定，加强个人防护，防止生物危害。
2. 妥善处理废弃物，遵循环保法规，防止环境污染。
3. 建立应急预案，应对突发事件，确保制片工作顺利进行。
五、制片工作纪律1. 病理技术人员应遵守工作纪律，按时上下班，确保制片工作正常开展。
2. 认真记录制片过程的相关信息，便于追踪和查询。
3. 保守病人隐私，遵守保密规定。
4. 积极参加业务学习和交流，提高制片技术水平。
六、制片工作考核与奖惩1. 定期对病理技术人员进行制片工作考核，评价工作质量、效率和安全状况。
病理制片技术――冷冻切片的制作
病理制片技术――冷冻切片的制作一、概述冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。
与石蜡切片相比，由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度快，是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。
此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜组织，因此冷冻切片也是脂肪染色、酶组织化学染色以及某些免疫组织化学染色和原位分子杂交的理想制片方法。
冷冻切片的不足是组织细胞的形态略逊于石蜡切片。
二、冷冻切片的制作方法利用氯乙烷喷洒、二氧化碳喷射、半导体制冷的方法均可制作普通的冷冻切片，用于术中的病理诊断。
恒冷箱冷冻切片机可以制作适用于各种目地的冷冻切片，是目前最为常用的理想冷冻切片制片方式。
1.冷冻切片的技术操作方法(1)将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适宜的切温度，一般情况下为一18～一25℃。
(2)在标本冷冻托上涂布一层冷冻包埋剂一OCT，然后将取材后新鲜标本安放在标本冷冻托上并用OCT覆盖标本。
(3)标本冷冻完成后将标本托固定在切片机的机头上，调整机头位置使其恰好位于切片刀的后方。
(4)使用粗切削方式进行标本的粗切削至暴露标本的最大平面，使用自动推进方式连续切削2～3刀后用毛笔清除机头、标本托及切片刀上的组织碎屑。
(5)调整并确认切片的厚度，一般为4～8 um，染脂肪和神经组织应控制在12~25 u m。
(6)放下防卷板使防卷板的位置恰好与切片刀的刀刃完全平行并略突出于刀刃。
(7)以自动推进的方式进行切片，良好的切片将在防卷板的下方形成一张完整平整的薄片，如切片略有弯曲可用小毛笔轻轻展平切片。
(8)打开防卷板，用载玻片平稳地轻压切片使其平整地吸附到载玻片上。
三、冷冻切片的染色切好的冷冻切片立即投入丙酮中进行固定，一般固定1～2 min即可进行染色，用于免疫组化染色的冷冻切片应在切片略干时即刻投入冷甲醇中固定10~15 rmin然后进行相应的组织化学染色程序。
1．冷冻切片的HE染色程序。
病理制片技术质控标准与完成时限规定
病理制片技术质控标准与完成时限规定一、石蜡切片质控标准：1、组织块位置适当1～3块/片，组织切面完整，内镜咬检、穿刺标本切面数与取材数一致。
小组织（内镜咬检等）连续切片3-6片，排列整齐。
2、切片薄（3-5µm），厚薄均匀。
3、切片无刀痕、裂隙、颤痕。
4、切片平坦，无皱褶、折叠；无切片时因刀不锋利而致的挤压和细胞舒展不良。
5、切片无污染物。
6、及时更换刀片。
7、盖玻片大小适度（组织不外露）。
封片无溢胶、无缺胶、无气泡。
8、切片清洁透明度好。
9、切片染色适度，细胞核与细胞质对比清晰，核染色质清晰。
10、切片无松散，裱贴位置适当。
11、切片整洁，标签端正粘贴牢固、编号清晰、字迹工整。
完成时限：取材后第一天。
二、冰冻切片质控标准：1、切片薄（6-8µm），厚薄均匀。
2、切片无刀痕、裂隙、颤痕。
3、切片平坦，无皱褶、折叠，污染物。
4、及时更换刀片。
5、盖玻片大小适度（组织不外露），封片无溢胶、无缺胶、无气泡。
6、标本组织内脂肪、坏死组织不易过多。
7、标本组织固定应平整集中。
8、标本组织冷冻时间适当，不易过短或过长，否则不利于切片。
9、恒温冷冻切片机冰室温度不易过高。
10、及时更换染色试剂。
11、标记正确。
完成时限：单体标本的冰冻制片应在15分钟完成；同一时间段内相继收到的多例患者标本或是同一例患者的多次标本，其制片的时间依次退后。
三、细胞学涂片质控标准：1、标本必须新鲜，细胞数量适当（8000-12000个），细胞过多则易重叠影响观察；细胞过少则难做肯定诊断。
2、涂片面积占玻片的1/2或2/3。
3、盖玻片大小适度（组织不外露）。
封片无溢胶、无缺胶、无气泡。
4、涂片无污染物，清洁透明度好。
5、染色适度，细胞核与细胞质对比清晰，核染色质清晰。
6、片子无松散，裱贴位置适当。
7、片子整洁，标签端正粘贴牢固、编号清晰、字迹工整8、及时更换染色试剂。
9、标记正确。
完成时限：接受送检标本当天。
四、免疫组化染色及特殊染色质控标准：1、切片薄（3-5µm），厚薄均匀。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
病理制片技术——常用特殊染色
一、六胺银染色
1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。
2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。
3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。
4．注葸事项
(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色
1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入5 0％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。
2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。
3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．
4．注意事项
(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色
1．第一步准备工作
(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。
(2)配制石碳酸水溶液：将石碳酸结晶放入热水浴溶解后取5 ml与事先预热的蒸馏水95ml 匀备用．(以上二种液体可单独保存)。
(3)石碳酸品红染液：取盐基性品红溶液10 ml与5％石碳酸水溶液90 ml混合，使用前过滤。
2．第二步染色方法
切片厚度为6 um，脱蜡至水，石碳酸品红染色30 min至1 h，(或用微波炉高档加热10~ 20 s)，水洗，用1％盐酸乙醇分化洗掉切片上多余染液，水洗，0.1％美蓝浅染，背景为淡蓝色、冲水、晾干、封固。
3．图示结果：抗酸杆菌呈亮红色，背景呈淡蓝色。
4．注意事项
(1)用微波染色时切片容易脱落．
(2)美蓝染色宜浅。
四、奥辛蓝一PAS染色
1．第一步准备工作
(1)配制奥辛蓝染液；将奥辛蓝1 g溶解于3％的醋酸溶液，调整液体PH值为2.5。
(2)配制PAS染液：将碱性品红1 g加人煮沸的蒸馏水内溶解，温度降至50℃时加入亚硫
酰氯1 ml(加亚硫酰氯时要在通风厨内进行)放入冰箱过夜。
加入活性碳2 g，摇动混合液1 min，静止10 min后，过滤于棕色瓶内，放置冰箱保存。
2．第二步染色方法
(1)奥辛蓝染色：切片脱蜡至水经3％醋酸溶液l10min，切片直接进入1％的奥辛蓝染色10
min，水洗，必要时用1％的中性红对比染色，水洗。
(2)PAS染色切片厚5um，脱蜡至水，用0.5％过碘酸氧化10min后流水冲洗1 min，用纸
吸干切片周围水分，用干燥的吸管吸取PAS染液，滴染10~20 min，流水冲洗1 min，用苏木精浅染1 min，水洗、分化、返蓝、然后进行脱水、透明、封固。
3．图示结果：PAS阳性物质呈玫瑰红色，胞核呈蓝色。
4．注意事项
(1)加亚硫酰氯时要在通风厨内进行。
(2)过碘酸恢复室温才能使用(20℃以内)。
(3)染色时要加对照片。
(4)氧化时间要限制在10 min内。
(5)PAS染液易挥发使染色反应迟缓或红色太浅，加入数滴亚硫酰氯即可。
(6)如果染奥辛蓝-PAS时，省略染苏木精步骤。