转基因动物PPT
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《动物转基因技术》课件
转基因动物有一些优点和缺点，需要综合考虑确定是否使用此技术。
2 发展现状和前景
转基因动物技术在不断发展中，未来可能在多个领域带来更多创新和进展。
3 人类利益与责任大于一切
在进行转基因动物研究和应用时，我们必须始终将人类利益和责任置于首位。
2 农业应用
转基因动物可以提高农 业产品的质量，并为人 类提供更多高品质的食 品。
3 医学应用
转基因动物在疾病治疗 方面具有潜力，可以帮 助人类更好地应对一些 疾病。
转基因动物的安全性问题
1 人体健康风险
转基因动物可能对人体健康造成风险，例如过敏反应或未知的不良影响。
2 自然环境风险
转基因动物逃逸或繁殖可能对自然环境和生态系统产生潜在的风险。
《动物转基因技术》PPT 课件
转基因技术是一种拓展动物基因组的方法，本课程将详细介绍什么是转基因 动物以及其制备方式、应用、安全性问题和法律法规等方面内容。
什么是转基因动物
定义
转基因动物是通过人工方法将外源基因导入其基因组，改变其遗传特性的动物。
与传统遗传改良的不同
转基因动物与传统遗传改良不同，传统遗传改良只是通过选择和繁殖达到改良目的。
3 社会伦理风险
转基因动物的存在可能引发社会伦1 中国法规现状
中国制定了一系列转基因动物相关的法律法规，包括转基因安全管理条例等。
2 国际法规现状
国际上也有一些与转基因动物相关的法律法规，对转基因动物的研发和应用进行规范。
总结
1 转基因动物的优缺点
转基因动物的制备方式
1
基因敲除
通过敲除目标基因来观察其功能和作用，了解基因的功能和疾病发生的机制。
2
基因插入
将目标基因插入到动物的基因组中，使其表达新的功能或产生新的性状。
2 发展现状和前景
转基因动物技术在不断发展中，未来可能在多个领域带来更多创新和进展。
3 人类利益与责任大于一切
在进行转基因动物研究和应用时，我们必须始终将人类利益和责任置于首位。
2 农业应用
转基因动物可以提高农 业产品的质量，并为人 类提供更多高品质的食 品。
3 医学应用
转基因动物在疾病治疗 方面具有潜力，可以帮 助人类更好地应对一些 疾病。
转基因动物的安全性问题
1 人体健康风险
转基因动物可能对人体健康造成风险，例如过敏反应或未知的不良影响。
2 自然环境风险
转基因动物逃逸或繁殖可能对自然环境和生态系统产生潜在的风险。
《动物转基因技术》PPT 课件
转基因技术是一种拓展动物基因组的方法，本课程将详细介绍什么是转基因 动物以及其制备方式、应用、安全性问题和法律法规等方面内容。
什么是转基因动物
定义
转基因动物是通过人工方法将外源基因导入其基因组，改变其遗传特性的动物。
与传统遗传改良的不同
转基因动物与传统遗传改良不同，传统遗传改良只是通过选择和繁殖达到改良目的。
3 社会伦理风险
转基因动物的存在可能引发社会伦1 中国法规现状
中国制定了一系列转基因动物相关的法律法规，包括转基因安全管理条例等。
2 国际法规现状
国际上也有一些与转基因动物相关的法律法规，对转基因动物的研发和应用进行规范。
总结
1 转基因动物的优缺点
转基因动物的制备方式
1
基因敲除
通过敲除目标基因来观察其功能和作用，了解基因的功能和疾病发生的机制。
2
基因插入
将目标基因插入到动物的基因组中，使其表达新的功能或产生新的性状。
《转基因动物》课件
转基因动物的产业 化
转基因动物的产业化现状
转基因动物在农业、 医药、环保等领域 的应用广泛
转基因动物产业化 面临技术、伦理、 法规等多重挑战
转基因动物产业化 需要加强技术研发 、伦理审查和法规 监管
转基因动物产业化 前景广阔，但需要 解决一系列问题
转基因动物的产业化前景
市场需求：随着人 们对食品、医药等 领域的需求不断增 长，转基因动物产 业化前景广阔。
伦理问题：公众对转基因动物 的接受程度和伦理争议
法规限制：各国对转基因动物 的法规限制和监管政策
市场风险：转基因动物的市场 接受度和竞争压力
转基因动物的社会 影响
转基因动物对人类健康的影响
转基因动物食品：可能含有新的过敏原，引发过敏反应 转基因动物药物：可能产生新的药物，治疗人类疾病 转基因动物实验：可能用于人类疾病的研究，提高医疗水平 转基因动物环境：可能对生态环境产生影响，影响人类健康
转基因动物的研究 进展
转基因动物的研究历程
转基因动物的研究现状
研究领域：基因编辑、基因表达调 控、基因功能研究等
应用领域：农业、医药、环境等领 域
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
研究进展：基因编辑技术不断成熟， 基因表达调控研究取得重要进展， 基因功能研究逐渐深入
研究挑战：伦理问题、安全性问题、 技术难题等
转基因动物对伦理道德的影响
基因编辑技术：改变动物基因，可能引发伦理道德争议 动物权益：转基因动物是否享有与人类同等的权益 生态平衡：转基因动物可能对生态系统产生影响，引发伦理道德问题 食品安全：转基因动物食品的安全性，可能引发伦理道德争议
转基因动物的未来 展望
转基因动物的技术发展趋势
转基因技术——动植物转基因方法ppt(共22张PPT)
【DAWN_ZX】
•优点:不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，
不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握
。
转基因
技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法 胚胎干细胞介导法
逆转录病毒载体法 精子介导的基因转移
核移植转基因法
体细胞核移植法
线粒体介导法
转基因
技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法（最常用）
【启动子】是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因
转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 【终止子】也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
STEP3：将目的基因导入受体细胞
（1）导入植物细胞一般用农杆菌转化法，也可 用基因枪法或花粉管通道法。 （2）导入动物细胞一般用显微注射法。 （3）导入微生物细胞一般用感受态细胞吸收DNA 分子的方法。
转基因
技术
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
STEP4：目的基因的检测和表达
1.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因
。
方法：采用DNA分子杂交技术。 2.检测目的基因是否转录出了mRNA。
方法：采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。
方法：从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行 抗原－抗体杂交。 4. 进行个体生物学水平的鉴定。
•根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有 一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入 到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目 的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因 向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转 基因植株。 •近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中得到了广 泛应用。
转基因动物与动物生物反应器ppt课件
5
Gordon等首次成功地将含有HSV和SV40 DNA 片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精 卵的雄原核内，得到了带有这种外源DNA顺序小 鼠。
1982年，Palmiter等运用此法得到的所谓“超 级巨鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。
到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、 兔、牛等等大小动物。
4
动物所有细胞均整合有外源基因，则具有将外源 基因遗传给子代的能力，通常被称为转基因动物。
一般用胚胎干细胞法或逆转录病毒载体法制备的 第一代转基因动物均为嵌合体动物，而显微注射 法得到的第一代转基因动物中，也有20％为嵌合 体动物。
当外源基因在转基因动物体内表达，并培育出其 表型与人类疾病症状相似的动物模型，则称其为 转基因动物模型。
目前, 已经培育出了动脉粥样硬化、镰刀形红细胞 贫血症、痴呆症、自身免疫病、淋巴系统病、真 皮炎及前列腺癌等多种疾病的模型动物,为这类疾 病的研究提供了方便。
35
（3）动物品种改良
通过外源基因的导入，改造动物的基因组,可 达到使家畜、家禽的生长速度加快，肉、蛋或奶 产量及品质提高，饲料利用率提高、抗病力加强 的目的。 目前应用最广的是，通过此技术改变牛奶的品质 和成份。在我国已获得转人乳清白蛋白、人乳铁 蛋白等转基因牛奶，为我国的“人源化牛奶”产 业化定了重要的基础。
2
转基因动物（transgenic animal）的概念
指借助基因工程技术将外源基因导入受体动物染 色体内，外源基因与动物基因整合后，随细胞的 分裂而扩增，在体内表达，并能稳定的遗传给后 代的动物。
即指基因组中整合有外源基因的一类动物。 整入动物基因组的外源基因被称为转基因
(transgene)。
类具有较多的相似性。 因而猪在提供人类移植所用的器官方面成为
Gordon等首次成功地将含有HSV和SV40 DNA 片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精 卵的雄原核内，得到了带有这种外源DNA顺序小 鼠。
1982年，Palmiter等运用此法得到的所谓“超 级巨鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。
到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、 兔、牛等等大小动物。
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动物所有细胞均整合有外源基因，则具有将外源 基因遗传给子代的能力，通常被称为转基因动物。
一般用胚胎干细胞法或逆转录病毒载体法制备的 第一代转基因动物均为嵌合体动物，而显微注射 法得到的第一代转基因动物中，也有20％为嵌合 体动物。
当外源基因在转基因动物体内表达，并培育出其 表型与人类疾病症状相似的动物模型，则称其为 转基因动物模型。
目前, 已经培育出了动脉粥样硬化、镰刀形红细胞 贫血症、痴呆症、自身免疫病、淋巴系统病、真 皮炎及前列腺癌等多种疾病的模型动物,为这类疾 病的研究提供了方便。
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（3）动物品种改良
通过外源基因的导入，改造动物的基因组,可 达到使家畜、家禽的生长速度加快，肉、蛋或奶 产量及品质提高，饲料利用率提高、抗病力加强 的目的。 目前应用最广的是，通过此技术改变牛奶的品质 和成份。在我国已获得转人乳清白蛋白、人乳铁 蛋白等转基因牛奶，为我国的“人源化牛奶”产 业化定了重要的基础。
2
转基因动物（transgenic animal）的概念
指借助基因工程技术将外源基因导入受体动物染 色体内，外源基因与动物基因整合后，随细胞的 分裂而扩增，在体内表达，并能稳定的遗传给后 代的动物。
即指基因组中整合有外源基因的一类动物。 整入动物基因组的外源基因被称为转基因
(transgene)。
类具有较多的相似性。 因而猪在提供人类移植所用的器官方面成为
《动物转基因技术》课件
生物制药与生物反应器
生物制药
利用动物转基因技术，可以生产出具有特定生物活性的蛋白质、酶等生物制品 ，用于治疗、诊断和预防疾病。
生物反应器
动物转基因技术还可以用于构建生物反应器，通过转基因动物的器官或组织作 为生物反应器，生产出大量的生物制品，降低生产成本和提高生产效率。
动物育种与改良
动物育种
利用动物转基因技术，可以对动物的 遗传物质进行改造和优化，培育出具 有优良性状的新品种。例如，转基因 猪、转基因牛等。
动物改良
通过转基因技术，可以改善动物的生 长性能、繁殖性能、抗病性能等性状 ，提高动物的产量和品质，为畜牧业 的发展提供有力支持。
05
动物转基因技术的安全性 问题
转基因动物的安全性评估
01
02
03
转基因动物的安全性评估是确保 转基因技术应用的重要环节，需 要从多个方面进行综合评估，包 括遗传稳定性、生物学特性、生 态影响等方面。
详细描述
转基因猪的实验研究主要通过胚胎移植、体 细胞核移植等技术手段，将外源基因导入猪 的受精卵或胚胎细胞中，从而获得携带外源 基因的转基因猪。这些转基因猪可用于研究 外源基因的表达、功能以及对生长发育、生 产性能等方面的影响。
转基因牛的实验研究
总结词
转基因牛是研究转基因技术的又一重要动物 模型，具有繁殖周期长、生产性能高、经济 价值大等优点，可用于提高牛的抗病能力和 生产性能等方面的研究。
安全性、毒理学等方面的评估。
评估过程中需要关注转基因食品的原料 来源、生产工艺、成分含量等方面的变
化，以及可能对人类健康的影响。
评估结果需经过严格的科学论证和审查 ，确保转基因食品的安全性和可控性。
转基因技术的伦理与法律问题
转基因动植物ppt课件
18
19
20
第二节 构建转基因的农作物
提高农作物质量和产量的有两方法。一是杂交育种， 但不可能将所有的优良性状组合到一种植物中。二 是用杀虫剂和除草剂。长期使用化学药物会导致环 境的破坏。而用转基因的方法能克服以上的问题。 达到增加产量，改进质量并可抗病虫害以及抗干旱、 盐碱等。有两种产生转基因农作物的常用方法： （1）通过根癌农杆菌的Ti质粒转化双子叶植物； （2）用基因抢等装置发出高速粒子轰击单子叶植物 等。
4
一、P因子介导的转化
转座因子含有两个功能区：
（1）转座因子两端的DNA重复序列，此是整合和切 离所需要的；
（2）编码转座酶的DNA序列，此是转座所需要的。
A.Spradling 和G.Rubin根据在其他系统中转座因子 的研究，论述了克隆的P因子序列可用于构建果蝇 的表达载体，诱导克隆的DNA的“终末”转座到果 蝇的生殖细胞中。他们使用的技术是用鉴别转座基 因的标记基因和待测定的实验基因取代克隆P因子 中的转座酶编码序列。
SB是水手转座因子超家族中的一员，长1.6kb, 两侧是 231bp的IR。中央区编码一个转座酶和DNA识别区。它 能够将自己插入到基因或基因之间，活化或关闭一个基 因的正常功能。实验证明，SB能将外源基因插入到脊椎 动物培养细胞中，包括小鼠的胚胎干细胞及人类细胞。
转座因子睡美人的结构特点
15
（三）、PB(piggy back )因子
（1）T-DNA，携带植物激素 基因和章鱼碱基因；
（2）是毒性基因vir
(virulence)区域。
（3）携带接合基因，与细 菌间质粒的转移有关。
（4）编码功能与冠缨碱利 用有关。
26
天然的Ti质粒不能使用。 （1）可产生肿瘤。
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第二节 构建转基因的农作物
提高农作物质量和产量的有两方法。一是杂交育种， 但不可能将所有的优良性状组合到一种植物中。二 是用杀虫剂和除草剂。长期使用化学药物会导致环 境的破坏。而用转基因的方法能克服以上的问题。 达到增加产量，改进质量并可抗病虫害以及抗干旱、 盐碱等。有两种产生转基因农作物的常用方法： （1）通过根癌农杆菌的Ti质粒转化双子叶植物； （2）用基因抢等装置发出高速粒子轰击单子叶植物 等。
4
一、P因子介导的转化
转座因子含有两个功能区：
（1）转座因子两端的DNA重复序列，此是整合和切 离所需要的；
（2）编码转座酶的DNA序列，此是转座所需要的。
A.Spradling 和G.Rubin根据在其他系统中转座因子 的研究，论述了克隆的P因子序列可用于构建果蝇 的表达载体，诱导克隆的DNA的“终末”转座到果 蝇的生殖细胞中。他们使用的技术是用鉴别转座基 因的标记基因和待测定的实验基因取代克隆P因子 中的转座酶编码序列。
SB是水手转座因子超家族中的一员，长1.6kb, 两侧是 231bp的IR。中央区编码一个转座酶和DNA识别区。它 能够将自己插入到基因或基因之间，活化或关闭一个基 因的正常功能。实验证明，SB能将外源基因插入到脊椎 动物培养细胞中，包括小鼠的胚胎干细胞及人类细胞。
转座因子睡美人的结构特点
15
（三）、PB(piggy back )因子
（1）T-DNA，携带植物激素 基因和章鱼碱基因；
（2）是毒性基因vir
(virulence)区域。
（3）携带接合基因，与细 菌间质粒的转移有关。
（4）编码功能与冠缨碱利 用有关。
26
天然的Ti质粒不能使用。 （1）可产生肿瘤。
转基因动物的生产 PPT课件
16
转基因动物所面临的问题
1.技术性问题
（一）转基因动物的效率
目前转基因动物研究领域尚存在制备效率低的问题，转基因小鼠有效率只有4%。 注 射 外 源 基 因 后 的 存 活 率 为 86% ， 移 植 到 母 体 子 宫 后 存 活 率 25% ， 母 鼠 怀 孕 率 为 80%，基因在染色体上的整合率24%。
据不完全统计，制备一只转基因小鼠，需40个注射过的受精卵，而绵羊、山羊、 猪、牛分别为110，90，110个和1,600个，而转基因个体的后代中只有50%表达基 因，不能表达或表达混乱，不能遗传给后代等问题。随着这一技术的成熟，许多问 题有望得到逐步解决。
（二）转基因的整合造成宿主细胞基因的突变 （三）转基因的表达问题
杂交、筛选
嵌合小鼠
纯合转基因小鼠
6
2．逆转录病毒载体技术
原理：据逆转录病毒cDNA能整合到宿主染色体内这一特 性，克隆、构建重组逆转录病毒载体，通过转染，实现 生殖细胞的基因转移。
缺点： 逆转录病毒具有潜在致癌性； 载体构建复杂，容纳外源基因的大小有限（<10Kb)； 嵌合体比例大； 病毒载体序列可能干扰目的基因的表达。
2
转基因技术的概念
转基因技术就是用实验室的 方法将所需的目的基因导入 动物的受精卵，使外源基因 与动物本身的基因整合在一 起，在动物发育过程中表达， 并能稳定遗传给后代的技术。 这种在基因组中稳定地整合 有人工的外源基因的动物称 为转基因动物。
含有荧光水母基因的小猪
3
转基因动物技术
转基因动物技术的核心，是把遗 传的功能单位──基因转移到动 物体内，使它成为动物体内的一 部分。被转移的基因可以来自同 种或异种动物，也可以来自植物 或微生物。这样一来，就打破了 物种之间的界线。
转基因动物所面临的问题
1.技术性问题
（一）转基因动物的效率
目前转基因动物研究领域尚存在制备效率低的问题，转基因小鼠有效率只有4%。 注 射 外 源 基 因 后 的 存 活 率 为 86% ， 移 植 到 母 体 子 宫 后 存 活 率 25% ， 母 鼠 怀 孕 率 为 80%，基因在染色体上的整合率24%。
据不完全统计，制备一只转基因小鼠，需40个注射过的受精卵，而绵羊、山羊、 猪、牛分别为110，90，110个和1,600个，而转基因个体的后代中只有50%表达基 因，不能表达或表达混乱，不能遗传给后代等问题。随着这一技术的成熟，许多问 题有望得到逐步解决。
（二）转基因的整合造成宿主细胞基因的突变 （三）转基因的表达问题
杂交、筛选
嵌合小鼠
纯合转基因小鼠
6
2．逆转录病毒载体技术
原理：据逆转录病毒cDNA能整合到宿主染色体内这一特 性，克隆、构建重组逆转录病毒载体，通过转染，实现 生殖细胞的基因转移。
缺点： 逆转录病毒具有潜在致癌性； 载体构建复杂，容纳外源基因的大小有限（<10Kb)； 嵌合体比例大； 病毒载体序列可能干扰目的基因的表达。
2
转基因技术的概念
转基因技术就是用实验室的 方法将所需的目的基因导入 动物的受精卵，使外源基因 与动物本身的基因整合在一 起，在动物发育过程中表达， 并能稳定遗传给后代的技术。 这种在基因组中稳定地整合 有人工的外源基因的动物称 为转基因动物。
含有荧光水母基因的小猪
3
转基因动物技术
转基因动物技术的核心，是把遗 传的功能单位──基因转移到动 物体内，使它成为动物体内的一 部分。被转移的基因可以来自同 种或异种动物，也可以来自植物 或微生物。这样一来，就打破了 物种之间的界线。
转基因.动物技术ppt
四 转基因动物技术的应用现状
目前，转基因动物技术主要应用于以 下个方面：
（一）促进动物生长、提高产量、改善品质 （二）生产药用蛋白 （三）生产移植动物器官 （四）提高抗病性 （五）动物育种 （六）建立诊断和治疗人类疾病的动物模型
五 转基因动物技术研究中出现的 问题
（一）制作转基因动物效率低 （二）外源基因在宿主基因组中的行为难以控 制 （三）转基因表达水平低 （四）一些环境和社会安全问题 （五）转基因动物死亡率高
1.优点：
物种适用面广 无需经过嵌合体育种就可直接获得纯合 个体 实验周期短 2. 缺点： 实验的成功率较低。
（五）精子栽体法
一种直接利用 精子作为外源DNA 载体的基因转移方 法。其方法是利用 精子可以俘获外源 DNA的特点，将成 熟的精子直接与外 源DNA混合培养， 外源DNA可以直接 进入精子的头部， 再经受精后，并使 外源DNA整合于受 精卵中,再将受精卵 发育成转基因动物。
1.步骤：
逆转录病毒载体的构建 选择和培养包装细胞系 重组病毒DNA导入包装 细胞 收集重组病毒颗粒 感染胚细胞，使细胞转 化 此法是目前制备转基因 鸡最有效和最成功的方 法。
2. 优点：
操作简单 外源基因的整合率较高 动物病毒所具有的启动子既可引发一些选择标记 基因的表达，还能引发所导人的外源基因的表达
（三）逆转录病毒法（Retrovirus mediated gene transfer）
主要是利用逆转录病毒DNA的长末端重复顺 序（LTR）区域具有转录启动子活性这一特点 ， 将外源基因连接到LTR下部进行重组后，包装成 高滴度病毒颗粒，去直接感染受精卵，或微注入 囊胚腔中，携带外源基因的逆转录病毒DNA可以 整合到宿主染色体。在各种基因转移方法中,通过 反转录病毒载体把基因整合到受体细胞核基因组 中是最有效的;1 0 kb ) 并且外源基因难以植人生殖系统，成功率较低。 携带外源基因的病毒载体在导入受体细胞基因组 过程中有可能激活细胞DNA序列上的原癌基因或 其他有害基因。
转基因动物PPT.
本章目录
6.1 动物转基因技术 显微注射法 逆转录病毒法 胚胎干细胞法 精子载体法 体细胞核移植法
6.2 提高转基因效率的策略 6.3 转基因动物的应用 转基因动物在生命科学基础研究中的应用 转基因技术在动物育种中的应用 转基因动物在医药科学研究中的应用
6.4 转基因动物研究存在的问题及展望
毒。
受体 吞噬 脱外壳 逆转录 核蛋白复合
体
有丝分裂 复合体进入
核
病毒DNA－蛋白复合体中含有由一个病毒DNA的pol基因
所编码的内切酶，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，
而病毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂
的S期。 不吃腐烂变质的食物
主要面试者应严格控制面试的进程，为了在有限的时间内详细了解应聘者及其知识背景，一定要禁止任何人游离面试主题。（主要面试者的问题围绕简 历展开，技术方面的专家主要询问相关经验，人事经理对细节进行核实。） 与客户建立互信关系 a冬眠期间的蛇、青蛙等突然出洞。 b白天，猫头鹰、黄鼠狼会频繁活动。 客户不希望什么
一. 显微注射法
在显微镜下将体外构建的外源目的基因，用注射针注射到动物受 精卵中，使之与动物基因组整合，从而得到转基因动物的方法。
1、目的DNA的准备
构建目的基因的表达载体：目的基因应包含完整的ORF,顺式调控
序列，加尾信号。
线性DNA分子的准备
DNA浓度：1-3μg/ml .
2、小鼠的准备和要求
标记性状
标记性状鉴 定转基因果 蝇
显微注射法的效率
每天可注射几百个卵，但大约只有66%能存活；移入 子宫后，大约25%的受精卵能发育成幼鼠；其中又有 大约25%左右的幼鼠是转基因鼠。
理想情况下，30－50/1000 一般情况下， 1/1000
6.1 动物转基因技术 显微注射法 逆转录病毒法 胚胎干细胞法 精子载体法 体细胞核移植法
6.2 提高转基因效率的策略 6.3 转基因动物的应用 转基因动物在生命科学基础研究中的应用 转基因技术在动物育种中的应用 转基因动物在医药科学研究中的应用
6.4 转基因动物研究存在的问题及展望
毒。
受体 吞噬 脱外壳 逆转录 核蛋白复合
体
有丝分裂 复合体进入
核
病毒DNA－蛋白复合体中含有由一个病毒DNA的pol基因
所编码的内切酶，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，
而病毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂
的S期。 不吃腐烂变质的食物
主要面试者应严格控制面试的进程，为了在有限的时间内详细了解应聘者及其知识背景，一定要禁止任何人游离面试主题。（主要面试者的问题围绕简 历展开，技术方面的专家主要询问相关经验，人事经理对细节进行核实。） 与客户建立互信关系 a冬眠期间的蛇、青蛙等突然出洞。 b白天，猫头鹰、黄鼠狼会频繁活动。 客户不希望什么
一. 显微注射法
在显微镜下将体外构建的外源目的基因，用注射针注射到动物受 精卵中，使之与动物基因组整合，从而得到转基因动物的方法。
1、目的DNA的准备
构建目的基因的表达载体：目的基因应包含完整的ORF,顺式调控
序列，加尾信号。
线性DNA分子的准备
DNA浓度：1-3μg/ml .
2、小鼠的准备和要求
标记性状
标记性状鉴 定转基因果 蝇
显微注射法的效率
每天可注射几百个卵，但大约只有66%能存活；移入 子宫后，大约25%的受精卵能发育成幼鼠；其中又有 大约25%左右的幼鼠是转基因鼠。
理想情况下，30－50/1000 一般情况下， 1/1000
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一、发病机制
（一）抗原
（二）免疫复合物沉积的条件 （三）IC引起炎症损伤的机制
（一）抗原诱导特异性抗体生
内源性抗原：如变性 DNA ，核抗原；
外源性抗原：病原微生物抗原、寄 生虫感染； 生物制剂（如抗毒素 血清）；药物等。
免疫复合物沉积的条件
1．抗原抗体的比例
抗原或抗体过剩 形成小的 IC； 抗原抗体比例适当 抗原抗 体交联 形成大的IC； 抗原略多于抗体（抗原决定簇 有剩余） 形成中等大小的IC。
５．影响IC沉积的其他因素： ▲ 吞噬功能降低； ▲ 补体功能异常。
(三) 免疫复合物引起组织损伤机制
1．补体的作用 免疫复合物 激活补体经典途径 C3a 、C5a ★
与C3a 、C5a受体(肥大细胞或嗜碱 性粒细胞 ) 结合 炎性介质 毛细血 管通透性增加、渗出、水肿。
★
★
吸引中性粒细胞趋化至IC沉积部位。
变性IgG(抗原) 抗变性IgG 的抗体(IgM类，称为类风湿因 子) 形成免疫复合物 积于全 身小关节滑膜处 小关节红肿、 变形僵直、失去运动功能。
2. 链球菌感染后肾小球肾炎（免疫 复合物型肾炎） 溶血性链球菌（可溶性抗原 ） 机体 产生抗体 形成免疫复 合物 主要沉积于肾小球基底膜 肾小球肾炎。
3.系统性红斑狼疮
细胞核物质(如DNA、RNA、核内
可溶性蛋白)抗原 抗核抗体 沉
积于全身各个部位 引起损伤。
4.类风湿性关节炎
二 、 Ⅲ型超敏反应的常见疾病 (一)局部免疫复合物病 1 ． Arthus 反应 ( 实验性局部超 敏反应) 同一抗原 动物 产生 IgG 皮内、皮下再次注入抗原 局 部激烈的红肿、出血及坏死。在3-6 小时达高峰。
2．人类局部免疫复合物病
（ 1 ）局部反复多次注射胰岛素、抗毒素、 狂犬病疫苗及其他生物制剂 出现局 部红肿。
2．中性粒细胞的作用
中性粒细胞 吞噬IC 释
放溶酶体酶(包括蛋白水解酶、胶
原酶和弹力纤维酶) 水解周围 组织
3．血小板的作用
肥大细胞及嗜碱性粒细胞活化
释放血小板活化因子 激活血
小板 释放血管活性胺 形成血
栓，引起局部出血、坏死。
组织损伤特点：
◆ ◆ ◆
血管扩张、渗出； 中性粒细胞浸润； 出血坏死及血栓为特征的血管炎。
（ 2 ）吸入霉菌孢子或动物排泄物中的蛋 白、粉尘等 IC沉积于肺脏 过敏 性肺炎，如农民肺。
（二）全身免疫复合物病 1．血清病 抗毒素血清(大量) 机体 产 生相应抗体 与抗原(局部尚未被完全 排除 ) 结合 局部红肿、全身皮疹、 发热、关节肿痛、淋巴结肿大、肾损伤 等一系列症状及体征。
2.抗原成分在体内长期滞留
抗原 机体 抗体（IgG、
IgM）免疫复合物
3．免疫复合物的性质
颗粒性抗原(细菌、细胞等)+抗体 免 疫复合物 易被吞噬细胞清除；
可溶性抗原（小分子）+ 抗体形成可 溶性免疫复合物 吞噬细胞吞噬清除或肾小球基底膜滤出； 沉积于血管基底膜。
４．组织的解剖学及血流动力学 IC 易沉积于静脉压较高的毛细血 管迂回处，如肾小球基底膜及关节滑 膜、肝、脾、血管等部位。
（一）抗原
（二）免疫复合物沉积的条件 （三）IC引起炎症损伤的机制
（一）抗原诱导特异性抗体生
内源性抗原：如变性 DNA ，核抗原；
外源性抗原：病原微生物抗原、寄 生虫感染； 生物制剂（如抗毒素 血清）；药物等。
免疫复合物沉积的条件
1．抗原抗体的比例
抗原或抗体过剩 形成小的 IC； 抗原抗体比例适当 抗原抗 体交联 形成大的IC； 抗原略多于抗体（抗原决定簇 有剩余） 形成中等大小的IC。
５．影响IC沉积的其他因素： ▲ 吞噬功能降低； ▲ 补体功能异常。
(三) 免疫复合物引起组织损伤机制
1．补体的作用 免疫复合物 激活补体经典途径 C3a 、C5a ★
与C3a 、C5a受体(肥大细胞或嗜碱 性粒细胞 ) 结合 炎性介质 毛细血 管通透性增加、渗出、水肿。
★
★
吸引中性粒细胞趋化至IC沉积部位。
变性IgG(抗原) 抗变性IgG 的抗体(IgM类，称为类风湿因 子) 形成免疫复合物 积于全 身小关节滑膜处 小关节红肿、 变形僵直、失去运动功能。
2. 链球菌感染后肾小球肾炎（免疫 复合物型肾炎） 溶血性链球菌（可溶性抗原 ） 机体 产生抗体 形成免疫复 合物 主要沉积于肾小球基底膜 肾小球肾炎。
3.系统性红斑狼疮
细胞核物质(如DNA、RNA、核内
可溶性蛋白)抗原 抗核抗体 沉
积于全身各个部位 引起损伤。
4.类风湿性关节炎
二 、 Ⅲ型超敏反应的常见疾病 (一)局部免疫复合物病 1 ． Arthus 反应 ( 实验性局部超 敏反应) 同一抗原 动物 产生 IgG 皮内、皮下再次注入抗原 局 部激烈的红肿、出血及坏死。在3-6 小时达高峰。
2．人类局部免疫复合物病
（ 1 ）局部反复多次注射胰岛素、抗毒素、 狂犬病疫苗及其他生物制剂 出现局 部红肿。
2．中性粒细胞的作用
中性粒细胞 吞噬IC 释
放溶酶体酶(包括蛋白水解酶、胶
原酶和弹力纤维酶) 水解周围 组织
3．血小板的作用
肥大细胞及嗜碱性粒细胞活化
释放血小板活化因子 激活血
小板 释放血管活性胺 形成血
栓，引起局部出血、坏死。
组织损伤特点：
◆ ◆ ◆
血管扩张、渗出； 中性粒细胞浸润； 出血坏死及血栓为特征的血管炎。
（ 2 ）吸入霉菌孢子或动物排泄物中的蛋 白、粉尘等 IC沉积于肺脏 过敏 性肺炎，如农民肺。
（二）全身免疫复合物病 1．血清病 抗毒素血清(大量) 机体 产 生相应抗体 与抗原(局部尚未被完全 排除 ) 结合 局部红肿、全身皮疹、 发热、关节肿痛、淋巴结肿大、肾损伤 等一系列症状及体征。
2.抗原成分在体内长期滞留
抗原 机体 抗体（IgG、
IgM）免疫复合物
3．免疫复合物的性质
颗粒性抗原(细菌、细胞等)+抗体 免 疫复合物 易被吞噬细胞清除；
可溶性抗原（小分子）+ 抗体形成可 溶性免疫复合物 吞噬细胞吞噬清除或肾小球基底膜滤出； 沉积于血管基底膜。
４．组织的解剖学及血流动力学 IC 易沉积于静脉压较高的毛细血 管迂回处，如肾小球基底膜及关节滑 膜、肝、脾、血管等部位。