药物色谱分析ppt课件

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四、硅碳杂化硅胶
1999 年 Waters 公 司
发明了杂交颗粒 技术，制成了 Xterra色谱柱填料 具有分离效率高、 峰形优良、范围 宽、分析速度快，
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五、优化柱床设计 六、苯基丙胺键合固定相 七、以氧化锆为基质的键 合固定相 八、包覆型填料
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2、Agilent公司的 Zorbax BonusRP色谱柱:内嵌酰 胺基和三封端技术， 图9-8
3、内嵌磺胺基官 能团键合相，有更 出色的水解稳定性 如图9-9（Dionex 公司）
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4、Phenomenex 公司的Synergi Fusion-RP色谱柱 E采用极性嵌合及 书疏水链来达到高 选择性的效果
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第三节 非极性键合相色谱法 （non-polar bonded phase
chromatography）
三、非极性键合相色谱法的流动相的基本组成
1、一元溶剂系统：一般不采用纯水系统
2、二元溶剂系统：一般采用洗脱能力较弱的水作为底剂，再加 入一定量与水相混溶的有机溶剂作为调节剂，如甲醇、乙腈， 也可考虑四氢呋喃
药物色谱分析-6 化学键合相色谱法
齐永秀 药物分析教研室
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主
一、化学键合相的特点和分类
要
二、化学键合相填料新进展
内
三、非极性键合相色谱法
容
四、极性键合相色谱法
五、离子交换键合相色谱法
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第一节 化学键合相的特点和分类定义 一、特点： 消除了担体表面活性作用点，清除了某些可能的 催化活性 耐溶剂冲洗，使用过程中固定相流失 热稳定性好 表面改性灵活，容易获得重复性产品 载样量大，溶剂残留效应小，梯度洗脱平衡快
2019/9色谱法 （non-polar bonded phase
chromatography）
一、疏溶剂作用理论
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影响溶质分子色谱保留的因素
溶质分子中的非极性部分总表面积对色谱保留 值的影响。
键合相表面烷基的总表面积对色谱保留值的影 响 烷基的含碳量、键合相表面的含碳量对色 谱行为有重要影响
洗脱液的表面张力对色谱保留值的影响
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第三节 非极性键合相色谱法 （non-polar bonded phase
chromatography）
二、双保留机制
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第三节 非极性键合相色谱法 （non-polar bonded phase
3、三元溶剂系统：在二元溶剂系统基础上添加四氢呋喃、三乙 胺、离子对试剂、缓冲盐、醋酸、磷酸等
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第三节 非极性键合相色谱法 （non-polar bonded phase
chromatography）
四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则
原则 首选溶剂
多元溶剂
洗脱能力
替代溶剂
离子抑制 色谱
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二、化学键相的稳定性 键合相中Si-O-Si键易受Lewis酸、NaOH、KOH等亲电
试剂的进攻而断裂，在低pH和高pH条件下均不稳定。 高温会使硅胶溶解，键合硅胶在150℃下使用为宜 物理吸附的水会与硅烷化试剂作用形成副产物,其在有机
溶剂中溶解,造成表观的键合相流失的现象. 三、化学键合相的分类 极性键合相、非极性键合相、离子交换键合相三种
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第三节 非极性键合相色谱法 （non-polar bonded phase
chromatography）
四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则
（一）中性化合物的分析
减小保留值
增加保留值
使用碳链较短的键合相C8、 使用碳链较长的键合相C18、 C4
使用极性低的流动相，增加 使用极性大的流动相，增加
含有两个硅原子，每个
硅原子含有一个长链硅
烷基官能团，如
Agilent公司的Zorbax
Extend-C18 色 谱 柱 ， 在
高流动相中稳定性极
佳，适于分离游离的强
碱性化合物
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三、内嵌极性基团键合固定相
解决利巴韦林等强水溶
性药物在反相柱中分析
的难题，内嵌极性官能
团是改善固定相和水溶
液兼容能力的途径。
1、1995年Waters公司 推
出专利极性官能团嵌入
技术，如右图
图9-5内嵌极性官能团结构示意图
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三、内嵌极性基团键合固定相
水屏蔽层能够掩蔽解离 后带负电的硅羟基，减 少拖尾，另可降低脱水 现象，使填料和样品作 用完全，在含水量高的 流动相中，样品也有稳 定保留和最佳峰形
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第二节化学键合相填料新进展
发展方向：提高填料的化学稳定性、热稳定性，以及 改善选择性、提高分离度和适用性
一、空间保护键合固定相 在C18烷基的侧链引入较大官能团，阻碍硅羟基与分析 物的相互作用，如异丙基或异丁基取代
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二、双齿键合固定相
每个硅烷化试剂分子中
chromatography）
三、非极性键合相色谱法的流动相的组成
基本要求:纯度高、沸点适中、黏度小、化学稳定性 好、紫外吸收本底小、对样品有较宽的溶解范围、 与所选的色谱系统相匹配
混合溶剂的黏度一般高于纯溶剂的黏度，流动相组 成变化时压力升高的现象在应用梯度洗脱时应特别 注意
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有机溶剂的比例
流动相中水的比例
提高色谱柱温度
提高色谱柱温度
减小色谱柱长度
增加色谱柱长度
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第三节 非极性键合相色谱法 （non-polar bonded phase
chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则
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解释
非极性色谱首选溶剂为甲醇、乙腈、四氢呋喃， 底剂为水
由不同组别的纯溶剂与底剂（或极性调节剂）组 成，一般不同时使用两个相同组别的纯溶剂
以重点组分的容量因子为2~5作为溶剂系统洗脱 能力的量度
当不能达到分离要求时，可用相同洗脱能力的不 同溶剂系统代替原溶剂系统。
在色谱柱耐受范围内，可加入调节剂，抑制弱酸 的解离或弱碱的质子化，增加其分配系数。