血清甘油三酯测定

Biochemistry Experiments
5
加入物(ml) 上清液
空白管 —
标准管 —
测定管 0.2
参考血清
蒸馏水 抽提液 硫酸溶液
—
0.2 2.5 0.5
0.2
— 2.5 0.5 充分摇匀剧烈震荡15秒 静止分层 取0.3ml 上层液
—
— 2.5 0.5
异丙醇 皂化试剂
1.0 0.3 混匀56度6分钟
7
1.0 0.3
1.0 0.3
氧化试剂
乙酰丙酮
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
2016/6/3
Biochemistry Experiments
6
3.注意事项
• 提取时,充分震荡,吸量上层液时注意不要吸到
到下层液;
• 每一步骤均应混匀,保温时间要准确;
2016/6/3
Biochemistry Experiments
2016/6/3
Fra Baidu bibliotek
Biochemistry Experiments
2
甘油三酯(TG)的结构：
2016/6/3
Biochemistry Experiments
3
1.实验原理
抽提:正庚烷一异丙醇 皂化 氧化 显色 比色计算
0.2 × 100 0.2 ＝ mg% ×
测定管吸光度 标准管吸光度
2016/6/3
Biochemistry Experiments
4
2.操作
测定管 标准管 空白管
正庚烷一异丙醇
抽提 充分摇匀 准确抽吸0.3ml
上层液至
测定管 加皂化试剂 标准管 混匀56度6分钟 空白管
显色剂
混匀56度25分钟
测定管 标准管 空白管
冷却 420nm 分别比色 计算
2016/6/3
血清甘油三酯测定
血清甘油三酯测定
血清中甘油三酯经正庚烷一异丙醇混合
溶剂抽提后，用氢氧化钾溶液皂化成甘油，
并进一步用过碘酸氧化成甲醛，在NH4＋的
存入下，甲醛与乙酰丙酮反应生成3,5—二乙 酰—1,4—二氢二甲基吡啶，后者为带荧光的 黄色物质。与同样处理的标准液比色计算， 即得血清中甘油三酯的含量。