分枝杆菌属PPT课件
合集下载
结核分枝杆菌 ppt课件
病死亡人数已达2亿。
1897年提出结核病的飞沫传染学说。 1908年C.Mantoux提出结核菌素试验方法。 1931年Seibert制成纯蛋白衍化物(PPD)。 1930年Lowenstein氏培养基的出现使结核菌培养生长
成功。
ppt课件
5
全球结核病疫情
每年有1%人口被结核杆菌感染，全球约有
(2) 试验方法：前臂掌侧皮内注射 5 个单位的 OT(0.1
ml)，或PPD-S 0.0001mg，48～72 h后观察红肿硬结直 径。 (3) 结果：红肿硬结>5mm者为阳性， ≥15mm强阳性，
ppt课件 27
<5mm阴性，未感染过。但应考虑 ①感染初期（因感染后需4周以上才出现） ②老年人 ③严重结核患者或正患有其他传染病 ④获得性细胞免疫功能低下。 （4）应用：婴幼儿结核病的辅助诊断，检查BCG接
侵作用）；含多种酶（分解利用营养物质）；保
护（阻止有害物质的进入菌体）。
ppt课件 20
(2) 脂质： ① 索状因子→破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸，抑 制白细胞游走引起慢性肉芽肿,人型结核分枝杆菌强
毒株与弱毒株的区别在于强毒株有索状因子。
② 磷脂→促进单核细胞增生，及结核结节形成。
③ 硫酸脑苷脂(Sulfatide)→抑制吞噬细胞中吞噬体与溶
耐药性结核（MDR-TB)患者增加（全世界约5000万）。
其耐药性变异由染色体突变经选择形成，与质粒无关。
研究发现对不同药物的耐药基因不相连接，可用于指
导临床联合用药治疗。
L型变异。
ppt课件
19
二、致病性
1、致病物质 不产生内、外毒素和侵袭性酶，无鞭 毛、无芽胞，致病物质主要是菌体成分。
《医学免疫学与医学微生物学》课件第十九章分枝杆菌、放线菌、诺卡菌属【67页】
世界防治结核病日
１８８２年３月２４日，德国科学家罗伯特·科赫 （郭霍）宣布发现结核杆菌是导致结核病的病原 菌，从而给防治结核病带来突破。此后，随着抗 结核药物研制成功，结核病的流行得到有效控制， 并在一些地区绝迹。
在纪念郭霍氏发现结核菌100年之际，1982年在 国际防痨和肺病联合会及世界卫生组织的倡议下， 将每年的3月24日定为“世界防治结核病日”。
第一节 结核分枝杆菌
❖ 目前结核病是世界上最普遍和最严重的人类传 染病之一，全球人口的1/3感染了结核菌。死亡 人300万/每年。
❖ 对人有致病性的主要为人型、牛型和非洲型， 我国为结核大国，居世界第二位(解放前为世界 之首)。
❖ 耐药菌的增加、流动人口的增加、艾滋病、吸 毒、贫困、麻痹心理等原因 使结核病在二十 世纪末死灰复燃。
干酪样肺炎
慢性纤维空 洞性肺结核
Im X光N 片a 诊o 断ge
正常胸部 (右侧 )
右侧浸润型肺结核
No Image
2、肺外结核
肠结核，结核性脑膜炎，皮肤结核，肾结核，骨 结核等
双重感染
同时感染人类免疫缺陷病毒（HIV）与 结核菌的人称为双重感染者。其病死率 高，对人类健康与生命均构成严重威胁。
No Image
No Image
生化反应
❖ 不发酵糖类
❖
触酶试验 热触酶试验
结核分枝菌 +
-
非结核分枝菌 +
+
抵抗I 力m ：因N 其细a 胞壁o 中g 含有大e 量的脂质，可防
止菌体水分的丢失，故对干燥有较强的抵抗力，在 干燥的痰内可存活6—8个月。
❖ 四怕 湿热 紫外线 乙醇 抗痨药物（链霉素、 异烟肼、利福平等）
结核分枝杆菌PPT课件
（三）结核菌素试验（ OT或PPD ） 1.原理：迟发型超敏反应 2.试剂： ① 旧结核菌素：结核杆菌蛋白
② 纯蛋白衍生物：5单位 3.方法： 前臂屈侧皮内注射，48～72h后观察结果
结果 阴性：＜5mm 阳性：≥5mm 强阳性：≥15mm
4.结果分析 ①阳性 ：注射部位硬结、红肿直径
皮肤发生水泡与坏死者，强阳性。
※若PPD-C侧红肿大于BCG-PPD侧则为结核杆菌 感染；若BCG-PPD侧红肿大于PPD-C侧，可能系 卡介苗接种所致
6. 意义 阴性需考虑以下情况： ⑴感染初期（产生抗体需3~6周）； ⑵老年人（免疫力弱）； ⑶严重结核患者或正患其他传染病导致细胞免疫力低
下，例麻疹病毒； ⑷获得性细胞免疫低下，例AIDS或免疫抑制剂的应用
分枝杆菌属（Mycobacterium）
又称抗酸分枝杆菌 (acid-fast bacillus) 种类较多（100种），可分为3类
①结核分枝杆菌； ②非结核分枝杆菌； ③麻风分枝杆菌。
20近10几年年全全国国结结核核病病疫疫情情情情况况
2013年
发病 死亡
2012年
发病 死亡
2013年
发病 死亡
0.5-1.5cm之间； ②强阳性 ：硬结直径1.5cm以上； ③阴性： 注射部位有针眼大的红点
或稍有红肿，硬结直径小于0.5cm。
结核菌素试验结果分析
阳性 强阳性 阴性
硬结、红肿直径 出现超敏反应 0.5-1.5cm之间 不表示正患结核病
硬结直径 1.5cm以上
表明可能有活动 性结核，应进一 步检查
蜡质D: 佐剂作用，引起迟发型超敏反应。
2. 蛋白质 ： 结核菌素，与蜡质D共同引起迟发型
兽医微生物学《分枝杆菌属》课件
菌落粗糙，呈颗粒、结节或花
菜样，乳白色或米黄色。
液体培养基中易形成菌膜浮于 液面。
三、抵抗力
对外界环境的抵抗力很强，在干燥的环境中可存活 6～8个月。对紫外线敏感，消毒药作用不大，耐酸耐 碱。对链霉素、利福平等抗生素敏感，但易产生耐药
性。
四、致病性
主要引起牛结核病。细胞内寄生。
五、免疫性
1.机体产生的抗体，无保护作用。
一、形态与染色
细长、微弯的杆菌，无荚膜、芽孢 和鞭毛。
革兰氏阳性菌，细胞壁有特殊的糖
脂。不易着色，而抗酸染色为红色。
糖脂成份有效地刺激哺乳动物的免 疫系统，分枝杆菌因此被制成免疫 佐剂得到普遍应用。
抗酸染色
二、培养与生化特性
专性需氧菌，对营养要求严格，
在添加特殊营养物质的培养基 （罗杰二氏培养基）上才能生 长，但生长缓慢。
2.以细胞免疫为主。
3.传染性免疫(带菌免疫)。
六、变异性
卡介苗（BCG）即将牛分枝杆菌在含甘油、胆汁、 马铃薯的培养基中经13年230代传代而获得的减毒 活疫苗株，现广泛用于预防接种。
七、微生物学诊断
１.涂片镜检 ：抗酸染色红色
２.分离培养 ：强酸或强碱处理后接种罗杰二氏培养基
３.细菌鉴定：培养特性、生化特性
４.动物接种 ：兔有致病性 ５.变态反应 ：PPD皮内注射法
4mm以上为阳性；2-4mm为可疑；2mm以下为阴性。
6.血清学检查 : ELISA检测特异性抗体
复习思考题
牛分支杆菌的主要生物学特性。
第七章
分枝杆菌属Βιβλιοθήκη (Mycobacterium)
本属菌均为细长略弯曲的杆菌，因有分枝生长
结核分枝杆菌PPT课件
❖ 治疗
▪ 白喉抗毒素---皮肤试验、早期使用 ▪ 抗生素
-
第二节 其他棒状杆菌
❖ 大多不产生外毒素 ❖ 很少有异染颗粒 ❖ 大多正常寄生于人体，为条件致病菌
-
分枝杆菌属
(Mycobacterium)
27
-
❖ 一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而命名 ❖ 主要特点
▪ 细长弯曲，分枝状生长 ▪ 细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸） ▪ 常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色阳性 ▪ 引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿
胞 ❖ 多为条件致病菌 ❖ 致病菌：白喉棒状杆菌
-
第一节 白喉棒状杆菌
(Corynebacterium diphtheriae)
12
-
一、 生物学性状
形态与染色
❖ 菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状, 常排列呈V、L形
❖ Albert 染 色 ， 可 出 现 异 染 颗 粒 metachromatic granule，在鉴定时有重 要意义
-
第一节 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis)
31
-
结核分枝杆菌
❖ 俗称结核杆菌，引起人类结核病 ❖ 致病菌主要为结核分枝杆菌（M. tuberculosis)、牛
分枝杆菌(M. bovis) ❖ 世界上1/3人感染，70%在亚洲 ❖ 世界防治结核病日：3月24日
声带麻痹--声音嘶哑
软颌麻痹--吞咽困难
• 心肌---心肌炎
-
白喉假膜
-
三、免疫性
抗毒素免疫
❖感染后机体可获得牢固的免疫力
❖机体还可通过其它方式获得免疫力：
▪ 六月以下婴儿---------母亲 ▪ 成人---------------------隐性感染、疫苗
▪ 白喉抗毒素---皮肤试验、早期使用 ▪ 抗生素
-
第二节 其他棒状杆菌
❖ 大多不产生外毒素 ❖ 很少有异染颗粒 ❖ 大多正常寄生于人体，为条件致病菌
-
分枝杆菌属
(Mycobacterium)
27
-
❖ 一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而命名 ❖ 主要特点
▪ 细长弯曲，分枝状生长 ▪ 细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸） ▪ 常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色阳性 ▪ 引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿
胞 ❖ 多为条件致病菌 ❖ 致病菌：白喉棒状杆菌
-
第一节 白喉棒状杆菌
(Corynebacterium diphtheriae)
12
-
一、 生物学性状
形态与染色
❖ 菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状, 常排列呈V、L形
❖ Albert 染 色 ， 可 出 现 异 染 颗 粒 metachromatic granule，在鉴定时有重 要意义
-
第一节 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis)
31
-
结核分枝杆菌
❖ 俗称结核杆菌，引起人类结核病 ❖ 致病菌主要为结核分枝杆菌（M. tuberculosis)、牛
分枝杆菌(M. bovis) ❖ 世界上1/3人感染，70%在亚洲 ❖ 世界防治结核病日：3月24日
声带麻痹--声音嘶哑
软颌麻痹--吞咽困难
• 心肌---心肌炎
-
白喉假膜
-
三、免疫性
抗毒素免疫
❖感染后机体可获得牢固的免疫力
❖机体还可通过其它方式获得免疫力：
▪ 六月以下婴儿---------母亲 ▪ 成人---------------------隐性感染、疫苗
分枝杆菌属 最新ppt演示课件
2. 蛋白质：
与蜡质D结合引起 Ⅳ型超敏反应 ， 并参与结核结节的形成； 3. 多糖：结核杆菌在 巨噬细胞内持续生存；
4. 荚膜：保护。
所致疾病
感染方式： 呼吸道、消化道、破损的皮肤黏膜； 引起结核病，以肺结核最常见。
1.肺部感染 原发感染
继发感染 2.肺外感染
1.肺部感染---好发人群
原发感染：儿童 继发感染：成年
分枝杆菌属 (Mycobacterium)
概述
抗酸杆菌（acid-fast bacillus） 致病性与菌体成分有关； 与人类疾病有关：
结核分枝杆菌 牛型分枝杆菌 麻风分枝杆菌 引起慢性疾病
Case
• 患者，女，19岁。就诊时主诉：近一个多
月来咳嗽，痰中时有血丝，痰少，多为干 咳，无胸痛，但有明显乏力，消瘦，食欲 不振，盗汗，自觉午后微热，心悸。 • 查体：T38 ℃，慢性病容。 • 实验室检查：血白细胞12 ×109/L，血沉为 70mm/h。X线透视右肺尖有小块阴影，边 缘模糊。取咳痰行抗酸染色，镜下可见红 色细长弯曲的杆菌。
方法：取 PPD-C 和 BCG-PPD 各 5 单位 ,
分别注入两前臂皮内 ( 目前仍有沿用单侧 注射 PPD 的方法 )， 48-72h 后观察结果。 结果判定： D≦5mm --- 阴性 D= 6-14mm---阳性 D≧15mm---强阳性
两侧红肿中 , 若 PPD-C 侧大于 BCG-PPD 侧时为感染 , 反之则 为卡介苗接种所致 ;
盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染。
结果：分枝杆菌呈红色，其他细菌和背景物
质为蓝色。
培养特性
1. 专性需氧； 2. 生长缓慢，代时18小时； 3. ※罗氏培养基： 含血清、蛋黄、甘油、马铃薯、天门冬 素、无机盐类以及孔雀绿等。 4. 固体培养基： 颗粒、结节、菜花状菌落，乳白或米黄， 不透明。
第十六章 分枝杆菌属ppt课件
肺结核是结核病中最常见的一种。 从临床上大致可分四种类型：
原发性肺结核、粟粒性肺结核、浸润性肺结核和空洞性肺结核
具有强烈传染性的慢性消耗性疾病
迄今因结核病死亡人数肖邦
林黛玉
李叔同
鲁迅
造成结核病的祸首是谁？
是它
分枝杆菌属 Mycobacterium
分枝杆菌属
分支杆菌属 是一类细长略带弯 曲的杆菌，有分支生长的趋势。 细胞壁含有大量脂质，故又称抗酸杆菌。 无鞭毛、无芽胞，不产生内、外毒素
其间，小儿基本上不具有抗结核病的免疫力。
另外，对大量、反复、毒性较强的结核杆菌感染，卡介
苗不一定能抵御，要让孩子避免接触病人
治疗
联合应用 长期用药 要正规彻底治疗结核病必须有6至8个月的疗程，
且必须要多种药物联合使用，才能彻底治愈。
肺结核病是怎样传染的
咳嗽 打噴 嚏
说 话
吐痰
病人的衣 物、被褥 等传染
• 四不怕 • 四怕 –干燥 –乙醇 –酸（3% HCl或6% –湿热 H2SO4) 或碱（4% –紫外线 NaOH) 有抵抗力 –抗痨药物（链 –碱性染料 霉素、异烟肼、 –青霉素等抗生素 利福平等）
4、变异性
形态、菌落、毒力、免疫原性及耐药性均可变异
卡介苗（Bacilli Calmette-Guè rin，BCG）：毒 力减弱，对人无致病性，但仍然保持良好的免 疫原性可用于结核杆菌预防的疫苗株。 结核分枝杆菌易发生耐药
肺外感染
• 免疫力低下患者
• 常见于脑、肾、骨、关节、生
殖系统
• 少数形成全身粟粒性结核或播
散性结核
免疫性
• 机体抗感染免疫主要是细胞免疫，属于 传染性免疫，又称有菌免疫——即结核分枝 杆菌或其组分在体内存在时才有免疫力，一 旦体内病菌或其组分全部消失，免疫力也随 之消失。机体在产生抗结核免疫的同时，也
分枝杆菌PPT课件
• 耐药性变异：
– 耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益
增多
编辑版ppt
21
致病性和免疫性
结核杆菌无侵袭性酶，不产生内、外
毒素，其致病性主要由于:
• 菌体成分---尤其是大量脂质 • 细菌繁殖引起炎症 • 诱导机体产生迟发型变态反应性损伤 • 代谢产物毒性作用
编辑版ppt
22
(一)致病物质
1.荚膜：与细胞表面受体结合（粘附与入侵作用）
编辑版ppt
9
二．中国：呈现“五高一低”
• 感染多：全人口的结核感染率为44.5%，全国 有4-5亿人受感染
• 患病多：居世界第二，西太区居首位，全国有 450万，传染性病人200万，青壮年患病多,活 动性肺结核占53%，涂阳肺结核占61.6%
• 死亡多：每年死于肺结核患者15万，为各种其 他传染病和寄生虫病死亡总和的2倍,青壮年死 亡比例高,占48%
编辑版ppt
14
编辑版ppt
15
编辑版ppt
16
编辑版ppt
17
• 培养特性
– 专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.5-6.8
– 营养要求高，罗氏培养基（蛋黄、甘油、天门 冬素、马铃薯、无机盐、孔雀绿等）
– 生长缓慢，18h分裂
一次，3-4W形成R
型菌落，“菜花样菌落”，
乳酪色干燥不透明，
表面坚硬呈颗粒结节，
进入21世纪是结核病控制的最好时期， 国家向WHO承诺加快结核病控制、颁布 了法规、政策、十年规划，进行了重点 投入及支持，对结核病的认识也极大地 提高。但是要实现《全国结核病防治规 划（2001－2010年）》仍有一定的难度， 结核病防治任重而道远。
编辑版ppt
第十一部分分枝杆菌属Mycobacterium
蛋白质 引起迟发性超敏反应
糖类 细胞壁表面，类似荚膜，抗吞噬作用
(二)所致疾病
传播与扩散 通过各种途径，引起各种结核
细 呼吸道 菌 消化道
破损皮肤粘膜
体 内
血液 淋巴管 消化道 支气管
侵犯多种组织和器官 引起相应的结核病 扩散
1.肺部感染
原发感染——外源性感染 （反应一般，渗出性炎症）
– 多发生于儿童，无免疫力，原发综合征 (原发病灶、淋巴管 炎和肿大的肺门淋巴结 )。 – 90% 以上的原发感染形成纤维化或钙化，不治自愈。少数 病灶扩散，引起肺外结核病。
和蜡质 D 共同引起的。
综述之：
机体抗结核免疫特点：
传染、免疫、超敏反应
共存
( 五 ) 结核菌素试验
概念
应用结核菌素进行皮肤试验,来测定机体对结核杆菌 是否能发生迟发型（IV）超敏反应的一种试验。
材料
旧结核菌素 ( old tuberculin, OT)： 结核杆菌加热处理后提取的粗制品，主要为结核
继发感染——外源性或内源（原发感染遗留）性感染 – 多见成人，有免疫力 – 病灶局限，引起局部TB、开放性TB （反应剧烈，干酪性坏死、空洞）
2. 肺外感染
• 经淋巴、血液循环引起其它部位感染： 脑、肾、骨、关节等结核
• 带菌痰液被咽入消化道引起肠结核、腹膜炎 • 免疫力极度低下着可引起全身粟粒状结核
麻风分枝杆菌－－临床意义与微检
• 经呼吸道，破损皮肤、粘膜，接触传播 • 引起麻风病 • 微检：标本涂片抗酸染色是诊断麻风的主要依据
细菌主要侵犯 皮肤、神经
根据机体的免疫状态、病理变化、 临床表现分为——二型二类
二型
瘤型（开放性）：
结核样型（闭锁性）：
糖类 细胞壁表面，类似荚膜，抗吞噬作用
(二)所致疾病
传播与扩散 通过各种途径，引起各种结核
细 呼吸道 菌 消化道
破损皮肤粘膜
体 内
血液 淋巴管 消化道 支气管
侵犯多种组织和器官 引起相应的结核病 扩散
1.肺部感染
原发感染——外源性感染 （反应一般，渗出性炎症）
– 多发生于儿童，无免疫力，原发综合征 (原发病灶、淋巴管 炎和肿大的肺门淋巴结 )。 – 90% 以上的原发感染形成纤维化或钙化，不治自愈。少数 病灶扩散，引起肺外结核病。
和蜡质 D 共同引起的。
综述之：
机体抗结核免疫特点：
传染、免疫、超敏反应
共存
( 五 ) 结核菌素试验
概念
应用结核菌素进行皮肤试验,来测定机体对结核杆菌 是否能发生迟发型（IV）超敏反应的一种试验。
材料
旧结核菌素 ( old tuberculin, OT)： 结核杆菌加热处理后提取的粗制品，主要为结核
继发感染——外源性或内源（原发感染遗留）性感染 – 多见成人，有免疫力 – 病灶局限，引起局部TB、开放性TB （反应剧烈，干酪性坏死、空洞）
2. 肺外感染
• 经淋巴、血液循环引起其它部位感染： 脑、肾、骨、关节等结核
• 带菌痰液被咽入消化道引起肠结核、腹膜炎 • 免疫力极度低下着可引起全身粟粒状结核
麻风分枝杆菌－－临床意义与微检
• 经呼吸道，破损皮肤、粘膜，接触传播 • 引起麻风病 • 微检：标本涂片抗酸染色是诊断麻风的主要依据
细菌主要侵犯 皮肤、神经
根据机体的免疫状态、病理变化、 临床表现分为——二型二类
二型
瘤型（开放性）：
结核样型（闭锁性）：
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
为抗酸杆菌 细胞内寄生 有麻风杆菌寄生的细胞呈泡沫状，称为 麻风细胞 体外人工培养尚未成功 犰狳是动物感染模型
课件制作 陆曙梅
麻风分枝杆菌－－临床意义与微检
经呼吸道、接触感染 引起麻风病 瘤型麻风（开放型）：传染性强 结核样型（闭锁性）：传染性弱 微检：标本涂片抗酸染色是诊断麻风的 主要依据
课件制作 陆曙梅
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－检验程序
涂片抗酸 染色镜检
标本 标本前处理
核酸 检测
抗体 检测
接种液体 培养基
接种固体培养基 可疑菌落
慢性生长菌
快速生长菌
接种小白鼠 豚鼠
脏器涂片 镜检
菌种鉴定
抗酸染色
鉴定试验
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－涂片检查
直接涂片 薄涂片 厚涂片 集菌涂片 沉淀集菌法 漂浮集菌法 荧光显微镜检查法：
分
枝
杆
非典型分枝杆菌
菌
属
结核分枝杆菌 牛分枝杆菌、 非洲分枝杆菌 田鼠分枝杆菌
光产色分枝杆菌 暗产色分枝杆菌 不产色分枝杆菌 迅速生长分枝杆菌
麻风分枝杆菌
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－形态染色
细长略弯，分枝生长 趋势 无芽孢，无鞭毛，部 分菌株有荚膜 革兰染色阳性，不易 着色 抗酸染色阳性
课件制作 陆曙梅
麻风杆菌
课件制作 陆曙梅
犰狳
课件制作 陆曙梅
抗酸染色
染液组成： 石炭酸复红、3％盐酸酒精、美兰 染色步骤 ※石炭酸加温染5分钟，水洗 ※ 3％盐酸酒精脱色致无红色脱下为止，水洗 ※美蓝染1分钟，水洗，干后镜检 染色结果 ※抗酸菌：红色 ※非抗酸菌：蓝色 染色意义：区别抗酸菌与非抗酸菌
课件制作 陆曙梅
局部形成厌氧微环境 局部或全身免疫功能下降 菌群失调 寄居部位发生改变
课件制作 陆曙梅
厌氧菌－－标本采集与送检
采集 部位恰当 正确采集 避免污染 严格厌氧 及时送检
运送 针筒运送法 无氧小瓶运送法 标本充盈运送法 组织块运送法 厌氧袋运送法 棉拭运送法
课件制作 陆曙梅
厌氧菌－－常用培养基
非选择性培养基 心脑浸液＋％5脱纤维羊血＋氯化血红素＋维 生素K 选择培养基 七叶苷胆汁平板－－培养脆弱类杆菌 卡那万古冻溶血琼脂平板－－培养 FS培养基－－培养梭杆菌属 VS培养基－－培养韦容球菌 CCFA培养基－－培养艰难梭菌
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－致病物质
脂质 索状因子:与该菌毒力有密切关系 磷脂: 分枝菌酸：与抗酸性有关 蜡质D:具有佐剂作用 硫酸脑苷脂 蛋白质 糖类 结核杆菌不产生内、外毒素，不产生侵袭性酶
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－所致疾病与免疫性
经多途径感染，引起结核病，以肺结核 多见 类型：原发感染和继发感染 免疫性 ※抗结核免疫以细胞免疫为主 ※抗结核免疫属带菌免疫 ※抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应同时出现
结核分枝杆菌－－培养特性
生长条件： 专性需氧、细胞内寄生菌、最适pH6.5～6.8、 营养要求高、培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、 孔雀绿等 生长现象： ※生长缓慢 ※改良罗氏培养基菌落特征：干燥、淡黄色、
质地较硬的R型菌落 ※液体培养基：形成菌膜，有毒株呈索状生长
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－生化反应
生化反应不活泼，不发酵糖类 与非结核分枝杆菌鉴别：
耐热触酶试验－；（非结核分枝杆菌＋）
与牛分枝杆菌鉴别 烟酸试验＋；（牛分枝杆菌－）
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－抵抗力与变异性
抵抗力特点：“三耐四敏” ※耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿（1：13000）
※对湿热、70％乙醇、紫外线、常用抗结核药物 （但长期使用易产生耐药性） 变异性 ※典型形态－→多形性 ※ R型菌落－→S型菌落 ※有毒－→无毒（用于制备疫苗） ※抗结核药敏感－→耐药
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－结核菌素试验
原理：用结核菌素进行皮肤试验，以检测受试 者对结核杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反 应的试验。 结果：根据注射部位是否出现红肿判断结果
＜5mm为阴性≥ ＞ 5mm为阳性 ＞ 15mm为强阳性 应用：选择卡介苗接种对象；判断卡介苗接种 效果；辅助诊断婴幼儿结核病；测定肿瘤患者 细胞免疫状态
结核分枝杆菌菌落
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌（抗酸染色）
课件制作 陆曙梅
麻风病人
课件制作 陆曙梅
厌氧菌
概念: 是一大群必须在无氧环境条件下才能生 长繁殖的细菌 特点: 种类多 分布广 感染可发生于人体各个部位
课件制作 陆曙梅
厌氧菌特点
特点 种类 分布 致病
芽胞厌氧菌 1个菌属 自然界 外源性感染 多以外毒素致病
分枝杆菌属
1
分枝杆菌属主要特点
是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的 杆菌。 细胞壁脂质含量高，主要为分枝菌酸。 具有抗酸性，革兰染色不易着色，常用 抗酸染色。 专性需氧营养要求特殊，大多数生长缓 慢。 不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质， 所致疾病呈慢性。
课件制作 陆曙梅
分枝杆菌属种类
结核分枝杆菌复合群
结核分枝杆菌－－分离培养
标本前处理： ※目的：杀死杂菌；液化标本 ※方法：
4％NaOH法； 4％H2SO2法； 胰酶-新洁尔灭法等 培养基选择：罗氏培养基、米氏培养基、小川 培养基等 接种 培养
课件制作 陆曙梅
培养结果记录与报告方法
报告方式
培养结果
＋ 斜面20个菌落以上，占斜面1/4以下
2＋ 斜面上菌落生长面积占1/4以上，1/2以下
无芽孢厌氧菌 40多属 人和动物体内 内源性感染 多为条件致病菌
课件制作 陆曙梅
厌氧菌感染的临床及细菌学特征
感染发生于黏膜附近 深部外伤 感染局部有气体产生 分泌物有恶臭或暗血红色 某些抗生素治疗无效的感染 标本直接涂片细菌染色不均 镜检见细菌,需氧培养无细菌培养
课件制作 陆曙梅
厌氧菌感染的原因
金刚胺O染色→荧光显微镜下检查
课件制作 陆曙梅
抗酸染色－－报告方式
报告方式
镜检结果
-
仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌
± 300个视野内发现1~2条抗酸菌
＋ 100个视野内发现1~9条抗酸菌
2＋ 10个视野内发现1~9条抗酸菌
3＋ 每个视野内发现1~9条抗酸菌
4＋ 每个视野内发现9条以上抗酸菌
课件制作 陆曙梅
3＋ 斜面上菌落面积占斜面1/2以上，3/4以下
4＋ 斜面上菌落生长密集，成菌苔
课件制作 陆曙梅
非典型分枝杆菌
是指结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外 的分枝杆菌。 大多为环境中的腐生菌 对酸碱比较敏感 对常用抗结核药耐受 为条件致病菌，艾滋病患者易感染鸟复 合分枝杆菌
课件制作 陆曙梅
麻风分枝杆菌－－生物学性状
课件制作 陆曙梅
麻风分枝杆菌－－临床意义与微检
经呼吸道、接触感染 引起麻风病 瘤型麻风（开放型）：传染性强 结核样型（闭锁性）：传染性弱 微检：标本涂片抗酸染色是诊断麻风的 主要依据
课件制作 陆曙梅
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－检验程序
涂片抗酸 染色镜检
标本 标本前处理
核酸 检测
抗体 检测
接种液体 培养基
接种固体培养基 可疑菌落
慢性生长菌
快速生长菌
接种小白鼠 豚鼠
脏器涂片 镜检
菌种鉴定
抗酸染色
鉴定试验
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－涂片检查
直接涂片 薄涂片 厚涂片 集菌涂片 沉淀集菌法 漂浮集菌法 荧光显微镜检查法：
分
枝
杆
非典型分枝杆菌
菌
属
结核分枝杆菌 牛分枝杆菌、 非洲分枝杆菌 田鼠分枝杆菌
光产色分枝杆菌 暗产色分枝杆菌 不产色分枝杆菌 迅速生长分枝杆菌
麻风分枝杆菌
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－形态染色
细长略弯，分枝生长 趋势 无芽孢，无鞭毛，部 分菌株有荚膜 革兰染色阳性，不易 着色 抗酸染色阳性
课件制作 陆曙梅
麻风杆菌
课件制作 陆曙梅
犰狳
课件制作 陆曙梅
抗酸染色
染液组成： 石炭酸复红、3％盐酸酒精、美兰 染色步骤 ※石炭酸加温染5分钟，水洗 ※ 3％盐酸酒精脱色致无红色脱下为止，水洗 ※美蓝染1分钟，水洗，干后镜检 染色结果 ※抗酸菌：红色 ※非抗酸菌：蓝色 染色意义：区别抗酸菌与非抗酸菌
课件制作 陆曙梅
局部形成厌氧微环境 局部或全身免疫功能下降 菌群失调 寄居部位发生改变
课件制作 陆曙梅
厌氧菌－－标本采集与送检
采集 部位恰当 正确采集 避免污染 严格厌氧 及时送检
运送 针筒运送法 无氧小瓶运送法 标本充盈运送法 组织块运送法 厌氧袋运送法 棉拭运送法
课件制作 陆曙梅
厌氧菌－－常用培养基
非选择性培养基 心脑浸液＋％5脱纤维羊血＋氯化血红素＋维 生素K 选择培养基 七叶苷胆汁平板－－培养脆弱类杆菌 卡那万古冻溶血琼脂平板－－培养 FS培养基－－培养梭杆菌属 VS培养基－－培养韦容球菌 CCFA培养基－－培养艰难梭菌
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－致病物质
脂质 索状因子:与该菌毒力有密切关系 磷脂: 分枝菌酸：与抗酸性有关 蜡质D:具有佐剂作用 硫酸脑苷脂 蛋白质 糖类 结核杆菌不产生内、外毒素，不产生侵袭性酶
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－所致疾病与免疫性
经多途径感染，引起结核病，以肺结核 多见 类型：原发感染和继发感染 免疫性 ※抗结核免疫以细胞免疫为主 ※抗结核免疫属带菌免疫 ※抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应同时出现
结核分枝杆菌－－培养特性
生长条件： 专性需氧、细胞内寄生菌、最适pH6.5～6.8、 营养要求高、培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、 孔雀绿等 生长现象： ※生长缓慢 ※改良罗氏培养基菌落特征：干燥、淡黄色、
质地较硬的R型菌落 ※液体培养基：形成菌膜，有毒株呈索状生长
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－生化反应
生化反应不活泼，不发酵糖类 与非结核分枝杆菌鉴别：
耐热触酶试验－；（非结核分枝杆菌＋）
与牛分枝杆菌鉴别 烟酸试验＋；（牛分枝杆菌－）
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－抵抗力与变异性
抵抗力特点：“三耐四敏” ※耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿（1：13000）
※对湿热、70％乙醇、紫外线、常用抗结核药物 （但长期使用易产生耐药性） 变异性 ※典型形态－→多形性 ※ R型菌落－→S型菌落 ※有毒－→无毒（用于制备疫苗） ※抗结核药敏感－→耐药
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌－－结核菌素试验
原理：用结核菌素进行皮肤试验，以检测受试 者对结核杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反 应的试验。 结果：根据注射部位是否出现红肿判断结果
＜5mm为阴性≥ ＞ 5mm为阳性 ＞ 15mm为强阳性 应用：选择卡介苗接种对象；判断卡介苗接种 效果；辅助诊断婴幼儿结核病；测定肿瘤患者 细胞免疫状态
结核分枝杆菌菌落
课件制作 陆曙梅
结核分枝杆菌（抗酸染色）
课件制作 陆曙梅
麻风病人
课件制作 陆曙梅
厌氧菌
概念: 是一大群必须在无氧环境条件下才能生 长繁殖的细菌 特点: 种类多 分布广 感染可发生于人体各个部位
课件制作 陆曙梅
厌氧菌特点
特点 种类 分布 致病
芽胞厌氧菌 1个菌属 自然界 外源性感染 多以外毒素致病
分枝杆菌属
1
分枝杆菌属主要特点
是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的 杆菌。 细胞壁脂质含量高，主要为分枝菌酸。 具有抗酸性，革兰染色不易着色，常用 抗酸染色。 专性需氧营养要求特殊，大多数生长缓 慢。 不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质， 所致疾病呈慢性。
课件制作 陆曙梅
分枝杆菌属种类
结核分枝杆菌复合群
结核分枝杆菌－－分离培养
标本前处理： ※目的：杀死杂菌；液化标本 ※方法：
4％NaOH法； 4％H2SO2法； 胰酶-新洁尔灭法等 培养基选择：罗氏培养基、米氏培养基、小川 培养基等 接种 培养
课件制作 陆曙梅
培养结果记录与报告方法
报告方式
培养结果
＋ 斜面20个菌落以上，占斜面1/4以下
2＋ 斜面上菌落生长面积占1/4以上，1/2以下
无芽孢厌氧菌 40多属 人和动物体内 内源性感染 多为条件致病菌
课件制作 陆曙梅
厌氧菌感染的临床及细菌学特征
感染发生于黏膜附近 深部外伤 感染局部有气体产生 分泌物有恶臭或暗血红色 某些抗生素治疗无效的感染 标本直接涂片细菌染色不均 镜检见细菌,需氧培养无细菌培养
课件制作 陆曙梅
厌氧菌感染的原因
金刚胺O染色→荧光显微镜下检查
课件制作 陆曙梅
抗酸染色－－报告方式
报告方式
镜检结果
-
仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌
± 300个视野内发现1~2条抗酸菌
＋ 100个视野内发现1~9条抗酸菌
2＋ 10个视野内发现1~9条抗酸菌
3＋ 每个视野内发现1~9条抗酸菌
4＋ 每个视野内发现9条以上抗酸菌
课件制作 陆曙梅
3＋ 斜面上菌落面积占斜面1/2以上，3/4以下
4＋ 斜面上菌落生长密集，成菌苔
课件制作 陆曙梅
非典型分枝杆菌
是指结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外 的分枝杆菌。 大多为环境中的腐生菌 对酸碱比较敏感 对常用抗结核药耐受 为条件致病菌，艾滋病患者易感染鸟复 合分枝杆菌
课件制作 陆曙梅
麻风分枝杆菌－－生物学性状