常见液相色谱柱性能比较
agilent液相色谱柱型号
agilent液相色谱柱型号Agilent液相色谱是一种常用的分析技术,广泛应用于化学、生物、制药、环境等领域。
而色谱柱则是液相色谱分析中重要的组成部分,通过选择合适的色谱柱,可以实现不同物质的高效分离和定量测定。
Agilent作为一家知名的科学仪器和分析解决方案提供商,为科研和工业实验室提供了多种不同型号和规格的液相色谱柱。
下面将介绍一些常见的Agilent液相色谱柱型号,帮助读者了解其特点和适用范围。
1. ZORBAX C18柱系列:该系列色谱柱主要用于分离非极性和酸性溶剂溶解的化合物,如有机物、药物及生物标样。
常见型号有ZORBAX Eclipse Plus C18、ZORBAX SB-C18、ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD) C18等。
2. ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl柱系列:该系列色谱柱主要用于对极性和非极性化合物的分离。
常见型号有ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl、ZORBAX SB-Aq等。
3. ZORBAX Eclipse Plus C8柱系列:该系列色谱柱适用于分离中等极性化合物,如酮类、脂肪族化合物、类固醇类物质等。
常见型号有ZORBAX Eclipse Plus C8、ZORBAX SB-C8等。
4. ZORBAX Eclipse Plus Extend-C18柱系列:该系列色谱柱适用于分离对C18柱长的样品需求更高的化合物。
常见型号有ZORBAX Eclipse Plus Extend-C18。
5. ZORBAX RRHD 300SB-C18柱系列:该系列色谱柱是Agilent为了提高分离效果和增加分析速度而开发的高分辨率和高速率色谱柱。
适用于对C18色谱柱需求更高的工作。
常见型号有ZORBAX RRHD300SB-C18。
除了上述常见的柱系列外,Agilent还推出了许多其他型号的色谱柱,如ZORBAX Bonus-RP、ZORBAX SB-Phenyl、ZORBAX 300SB-C8、ZORBAX RX-SIL等。
色谱柱填料的种类及性能
色谱柱填料的种类及性能现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。
但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,首先必须对此有一定的认识和了解。
下面将对几种常见的色谱填料极其各种的性能做各一个简要的介绍。
(1)硅胶填料硅胶填料主要应用正相色谱及反相色谱柱中,正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform),二氯甲烷(MethyleneChloride)等。
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
(2)聚合物填料聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH 值为1~14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
(3)其他无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。
由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。
如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。
这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。
常用液相色谱柱型号及适用范围
常用液相色谱柱型号及适用范围
液相色谱柱是一种常用的色谱分析仪器,常用的液相色谱柱型号及适用范围如下:
- 反相色谱柱(Reverse Phase Column):由高吸附性的非极性填料填充,用于对极性化合物的分离,常见的填充物包括C18,C8,C4和CN等,反相色谱柱广泛应用于药物分析,天然产物分离等领域。
- 手性色谱柱(Chiral Column):适用于分离具有手性结构的化合物,如药物、农药、食品添加剂等,常见的手性色谱柱包括手性固定相色谱柱和手性流动相色谱柱。
- 离子交换色谱柱(Ion Exchange Column):由离子交换树脂填充而成,能够分离带电荷的化合物,如阴阳离子、蛋白质、多肽等,常用于环境分析、食品分析、药物分析等领域。
- 尺寸排阻色谱柱(Size Exclusion Column):由多孔性填料填充而成,能够分离分子大小不同的化合物,如蛋白质、多糖、聚合物等,常用于生物大分子的分离和分析。
不同型号的液相色谱柱适用范围不同,在选择液相色谱柱时,需要根据待测化合物的性质和色谱分析的要求选择合适的色谱柱。
中药制剂高效液相常见的色谱柱类型及其检测器类型
中药制剂高效液相常见的色谱柱类型及其检测器类型中药制剂高效液相常见的色谱柱类型包括C18、C8、Phenyl、CN、NH2等。
其中C18属于常规的反相色谱柱,适用于大多数化合物的分离;C8柱的分离效果较C18柱略差,但可以用于分离易失活的化合物;Phenyl柱可以增加由于芳香环与反相胶体间的作用而引起的选择性;CN柱比C18柱对亲水性化合物更为灵敏,适合分离极性化合物;NH2柱与CN柱相似,适于极性化合物的分离。
常见的检测器类型包括UV检测器、荧光检测器、电化学检测器和质谱检测器。
UV检测器是常见的检测器类型,根据样品吸收UV光谱特征进行定量或者鉴定;荧光检测器则根据荧光光谱特征进行检测,其对于化合物的灵敏度一般高于UV 检测器;电化学检测器包括阳极和阴极两种类型,可用于检测电化学反应产生的电信号,最常用的电化学检测器是电化学荧光检测器;质谱检测器则可以对化合物的结构进行进一步的确认和鉴定,其灵敏度和选择性都比较高。
怎样选择合适的液相色谱柱
HPLC色谱柱一、色谱分离模式——正相、反相、离子交换、离子抑制、亲水作用正相色谱是色谱的经典形式,使用极性固定相和非极性流动相。
洗脱物通过其极性基团和固定相上的极性基团作用被保留。
这种应用,经典的是使用未键合的硅胶和氧化铝,但现在使用的极性键合相有以下优点:键合相平衡快,对流动相中微量的水不敏感,和产生不同的选择性。
二醇基键合相比纯硅胶极性小,平衡速度快;氰基键合相是保留能力最小的正相吸附剂;氨基键合相适宜分离芳香族碳氢化合物反相色谱已成为最流行的色谱分离模式。
反相色谱中,固定相非极性,流动相极性。
典型的流动相一般是水或水系缓冲液与甲醇、乙腈或四氢呋喃的混合物。
典型的固定相是用脂肪烃硅完化的硅胶键合相,其它用于反相色谱的基质有石墨化碳和苯乙烯-二乙烯苯基质。
反相色谱的性能还受残留的硅醇基的活性的影响。
硅醇基与洗脱物的极性基团作用。
因此,根据硅醇基的活性不同,填料显示出不同的选择性。
而且,常能观察到碱性物质在硅醇基活性高的填料上产生拖尾峰。
修饰硅醇基活性的一个办法是封端,即用硅烷化试剂把硅醇基转变成三甲基甲硅烷基基团。
不过,即使是作了封端,基质表面的硅醇基密度还是比键合配基的密度大。
硅醇基的活性也和硅胶的预处理(基质灭活)、硅胶纯度有关。
碱性分析物的色谱分析推荐使用高纯度硅胶基质、充分封端的键合相。
未封端的填料在许多应用中有可以获得不同选择性的优点。
使用带有离子电荷的固定相,使根据洗脱物电荷进行分离成为可能。
对于硅胶基质的离子交换填料,离子基团通过标准的硅烷化技术键合到硅胶表面。
对于聚合物基质的离子交换填料,离子交换基团分布于交联聚合物的整体(through the matrix)。
有四种离子交换填料:强/弱阳离子交换填料和强/弱离子交换填料。
弱离子交换填料的特征是电量与pH值有函数关系。
以羧酸基为功能基的离子交换剂是弱阳离子交换剂的代表。
弱阴离子交换剂由一级、二级、三级铵为功能基。
大部分强离子交换剂的电荷与pH值无关。
液相柱子
请问C8,C18,ODS,RP-8和RP-18;APS,diol,CN和NH2等柱子的功能,适用条件,区别1、反相柱子:一般适用范围比较大。
分离极性比较小的物质。
极性强的物质先出柱。
ODS就是C18柱子。
RP-8和RP-18分别是C18柱子和C8柱子。
C18柱子和C8柱子是柱子的碳链的长度不一样的。
碳链增长了,也增加了键合相的非极性作用的面积,对保留值和选择性都有影响,随烷基碳链的增长对溶质分离的选择性也增强了.但是对单一或简单组分确实看不出太大区别。
2、正相柱子:一般分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。
APS为NH2柱子另外diol 代表的是球形硅胶邻二羟基丙基醇基柱,正相柱,极性强的物质后出。
硅胶柱子的特点是可分离异构体,柱子的载样量大,用于制备分离,不污染收集的流分了,缺点是分析应用不方便,如流动相的含水量应该严格控制,再现性较差,需较长的平衡时间,不适用于梯度洗脱。
碱性化合物在氨基和二醇柱上的保留强,而偶极化合物在腈基柱子上的保留强。
建议您看看色谱分析等专业书籍有帮助的。
化学工业出版社有一套周同惠编的色谱系列从书,有色谱柱分册,建议你看一下那套书ODS-AODS-A液相色谱柱是国际上是销售最好的一种传统色谱柱,同时也是HPLC中应用最广泛的应用。
YMC ODS-A液相色谱采用高度封端的表面结构和具有适当的疏水性,广泛地应用于多种化合物的分离。
在严格质量控制体系下,对50个以上的参数进行严格控制,保证了稳定的质量。
其通常作为液相色谱标准柱。
ODS-AMODS-AM液相色谱柱是一种高碳含量的C18柱,具有和ODS-A液相色谱柱相似的选择性。
二者的主要区别是ODS-AM液相色谱柱采用的是专利的封端技术,采用十分严格的生产技术规范,可提供优良的峰对称性和更高分离效果的重现性,从而改善较难分离组分的峰形。
ODS-AQODS-AQ液相色谱填料具有中等强度的疏水性和氢键键合相色谱填料,由于其具有相对高的疏水性,其与ODS-A相比有不同的保留行为,其主要用于碳水化合物的分离,如寡聚多糖类、葡萄糖苷类、药物和天然化合物的分离。
国产液相色谱柱10um
国产液相色谱柱10um液相色谱柱是液相色谱技术中至关重要的组成部分,其性能直接影响到分析结果的准确性和分辨率。
近年来,国产液相色谱柱在技术研发和质量控制方面取得了长足的进步,其中10um粒径的柱体成为了研究热点。
本文将深入探讨国产液相色谱柱10um的特点、优势以及在实际应用中的表现。
10um液相色谱柱的特点国产液相色谱柱以10um为粒径的产品具有一系列显著的特点。
首先,10um的粒径相比传统的柱体更小,具有更高的分辨率和灵敏度,可以更好地分离复杂组分。
其次,10um的柱体具有更大的表面积,有利于增加柱心相的负载量,提高柱体的稳定性和寿命。
此外,10um的柱体还能够减小柱内压力损失,降低分析时间,提高分析效率。
国产10um液相色谱柱的优势国产10um液相色谱柱相比进口产品具有一些明显的优势。
首先,国产产品价格更具竞争力,能够满足广大用户的需求。
其次,国产10um液相色谱柱在质量控制方面也有着先进的技术手段和严格的质量标准,保证了产品的稳定性和可靠性。
此外,国产产品还能够根据用户的特定需求提供定制化的服务,满足不同实验室的需求。
10um液相色谱柱在实际应用中的表现国产10um液相色谱柱在实际应用中有着广泛的应用前景和良好的表现。
首先,在生物医药领域,10um的柱体能够更好地分离复杂的生物分子,为蛋白质、多肽等的分析提供了有力的支持。
其次,在环境监测和食品安全领域,10um的柱体可以更好地分析出微量有害物质,提高了检测的准确性和灵敏度。
此外,国产10um液相色谱柱在药物分析和化学分析等领域也有着广泛的应用,受到了用户的普遍好评。
综上所述,国产10um液相色谱柱以其优越的性能和价格优势在液相色谱技术中具有重要的地位,为我国科研和产业发展做出了重要贡献。
将来,国产液相色谱柱必将在技术创新和产品质量方面不断取得新突破,推动我国色谱分析技术的发展。
常用液相色谱柱选择
常用色谱柱简介气相色谱毛细柱(键合,聚二甲基硅氧烷)HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1类似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用温度:-60℃-320℃应用范围:烷烃,芳烃,多环芳烃,醇,酚,酮,酯,醛,胺,卤代烃,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,维生素衍生物,镇痛药,农药,溶剂,胆固SPB-50型中等极性柱醇,香料,咖啡,食品添加剂等。
(键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷)对照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱极性柱类似固定相:OV-17, SP-2250,使用温度:30℃-310℃(键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)应用范围:烷烃,低沸点芳烃,多环芳烃,醇,甘对照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,油三酸酯,喹啉,卤素化合物,香料,农药,酯,Ultra-2, ,RTx-5,AT-5镇痛药,除草剂等。
类似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用温度:-60℃-320℃PTE-5,PTE-5QTM型弱极性柱应用范围:烷基苯,多环芳烃,醇,酚,酮,脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烃,芳胺,烷基胺,联对照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,苯胺,卤代烃,多氯联苯,,糖类衍生物,维生素衍BPX625,半挥发污染物分析柱(US EPA方法525,生物,有机酸,镇痛药,农药,抗组胺药,溶剂,625.5,625)生物碱,防腐剂,香料等。
类似固定相:SE-54,SE-52 使用温度:-60℃-320℃应用范围:多氯联苯,胺,有机磷,有机氯农药,SUPELCOWAX 10型极性柱含氯除草剂,酚,苯胺,香料等。
(键合,聚乙二醇二万)对照品牌:HP-Wax,DB-Wax,BP-20,CP-Wax 52CB,SPB-1701型中等极性柱HP-INNO Wax,AT-Wax(键合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷)类似固定相:PEG-20M, CARBOWAX-20M,使用温对照品牌:HP-1701,DB-1701,RTx-1701,AT-1701,度:35℃-280℃BP-10,CPSil19CB应用范围:低沸点芳烃,醇,酮,酸,酯,醛,醚,类似固定相:OV-1701,SP-2250 使用温度:室温-280乙二醇,丙二醇,甘油,吡啶,胺,亚硝胺,卤代℃烃,胆汁酸衍生物,冰片,薄荷,精油,香料,酒,应用范围:醇,卤素化合物,有机氯农药,酸性药苯乙烯,茶,溶剂等。
安捷伦液相C18色谱柱性能测试试验
7.742
0.86
0.248155
0.93
0.2450
5532
对于废糖水中的柠檬酸而言(其他条件相同,仅使用不同色谱柱),新C18柱的峰形、对称性优于原柱,保留时间缩短,但新柱的容量因子不如原柱。
新柱对废糖水的测定,共分离出34个峰,柠檬酸峰位于第12位;原柱对废糖水的测定,共分离出31个峰,柠檬酸峰位于第17位。
安捷伦液相C18色谱柱性能测试试验
一、目的
分别使用Diamonsil-C18和Diamonsil RD-5 C18色谱柱对柠檬酸标准(1.0396g/100ml)、中和废糖水进行测定,通过中和废糖水图谱对比两色谱柱性311A、G1316A、G1329A、G1315D
方法信息:流速0.6ml/min、进样量8.0μl、柱温25℃、流动相乙腈:0.1%磷酸溶液=3.5:96.5
三、结果:
两色谱柱对同一中和废糖水样品中柠檬酸的定量检测结果对比
色谱柱名称
柠檬酸RT
K
含量
对称因子
峰宽
塔板数
Diamonsil-C18
9.694
1.33
0.160451
0.81
0.3433
4417
HPLC色谱柱的种类
高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱以C18为代表的高效反相液相色谱柱•直被描述为药物发现、开发、方法验证(ValidatiOn)的心脏!高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全等领域!高效反相液相色谱制备柱也是最重要的分离纯化技术之一!无论是过去,现在和可预见的未来,以球形B型硅胶(5Um或3um)为材料骨架的高效反相液相色谱柱在实际应用中永远占有统治地位!常规HPLC方法的开发几乎总是从C18作为出发点,反相色谱占了80%以上的应用。
过去数十年来,无数努力集注于:1)改善硅胶的品质,优化键合化学;2)开发新颖的材料骨架替代硅胶。
十多年前,使用有机硅材料取代无机硅材料作为起始原料生产球形硅胶代表一个划时代的革命!生产的球形硅胶命名为B型球形硅胶。
无机A型硅胶重金属含量很高,硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等导致许多碱性化合物回收率低。
球形B型硅胶重金属含量很低,在非常大的程度上消除了A型无机硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等问题。
用B型球形硅胶合成高效液相色谱填料,导致高效液相色谱柱产品质量有质的飞跃!然而,另一方面,基于客户的大量反馈和我们对几乎所有色谱厂商产品的评估,我们相信键合化学问题没有获得很好的解决。
具体体现在:(1)“纯粹”反相机理的键合相例如C18和C8市场上仍然是单功能,三功能和聚合物键合相”鱼目混杂(2)键合相封端问题没有获得很好的解决,•直是困扰色谱领域最大的问题!迄今为止全部的尝试只获得有限的成功。
(3)极性嵌入式(PolarCmbCddCd)键合相极性嵌入式(PoIarCmbCdded)键合相是C18高效反相液相色谱"卫星群”中最重要的产品,是C18和C8键合相最重要的补充。
极性嵌入式(POIarembedded)键合相起源于SupelcoABZ o SupelcoABZ的键合方法是用aminopropyl键合相和长链按酸缩合反应形成一个C16酰胺。
常见液相色谱柱性能比较
常见液相色谱柱性能比较一、高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽1、Waters公司Xbridge2005年waters公司推出,杂化颗粒柱。
优点:pH 1-12,在高pH状态下,没有能与此色谱柱匹敌的,目前市场的宽pH色谱柱在高pH的状态下(9-12)普遍寿命很短,如Gemini,资生堂公司Capcell,YMCPro-C18,包括waters的第一代杂化柱Xterra都是寿命不长,Zorbax Extend更是不堪。
柱效与一流的硅胶柱相当,甚至有过之无不及,杂化颗粒柱和聚合物色谱柱的问题在于柱效,Xterra和常见的PSDVB的色谱柱都有不错的pH范围,但是柱效低的问题无法解决,这是聚合物填料一般比较软且不耐压的原因造成。
在如此宽的pH范围,最大的好处是可以在化合物的保留平台区去开发方法(pH1-3,pH9-12),这样能得到更稳定更容易重现的方法,对酸性,中性,尤其是碱性化合物都能得到理想的峰形。
注:Waters UPLC色谱柱与Xbridge采用同类型填料,只是颗粒度是1.7um,所以不再重复。
缺点:价格高,平均每支¥7000多的,不是大多数中国客户可以接受的。
2、MerckChromolith整体化色谱柱Merck公司2001年推出。
优点:高流速、低压力,可以快速分析样品,因为压力低,所以可以串联色谱柱以获得更高的柱效而不用担心色谱柱耐压问题,低压力是因为硅胶棒的大量中孔的存在,中孔的存在也让这支色谱柱不怕堵,在处理比较脏的样品的时候会优势很大(如中药),实际的寿命也因此延长。
这个色谱柱最大的特点是柱效高出峰时间快,特别适合之前分析时间超长的实验条件,目前很好的例子就是人参的指纹图谱,因为成分复杂,之前出峰要2个小时,现在用整体化色谱柱30min就可以分析完了(已有报导),且不影响柱效,类似于UPLC,但不像UPLC那么容易堵。
缺点:规格单一,单价比较高,单价¥7000左右,所以通过串联获得更高柱效的方式显得比较奢侈。
色谱柱hp和db
色谱柱hp和db全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:色谱柱是色谱分析中必不可少的设备之一,扮演着分离和分析样品成分的重要角色。
目前市场上常见的色谱柱主要有HP(高效液相色谱柱)和DB(气相色谱柱)两种类型。
它们在不同的分析场景下具有各自的优势和特点,下面我们就来详细介绍色谱柱HP和DB。
HP色谱柱(High Performance Liquid Chromatography Column)是一种针对液相色谱技术的色谱柱。
HP色谱柱具有高效、快速、灵敏和选择性好等特点,被广泛应用于食品、医药、环境等各个行业的分析领域。
HP色谱柱的填料通常是一种多孔的固定相,填料的种类和粒径大小会直接影响到柱的分离效果。
HP色谱柱通常要求在高压下进行分离,因此需要使用高压液相色谱系统进行操作,同时还需要使用高品质的溶剂、梯度和检测器等辅助设备。
HP色谱柱的应用场景非常广泛,比如在医药行业中,HP色谱柱可以用于检测药物的纯度和含量;在环境监测中,HP色谱柱可以用于检测水质和大气中的污染物;在食品行业中,HP色谱柱可以用于检测食品中的添加剂和残留物等。
HP色谱柱的应用范围涵盖了许多领域,并且具有高效、准确、灵敏等优点,是色谱分析中不可或缺的重要设备。
与HP色谱柱相对应的是DB色谱柱(Deactivated Borosilicate),是一种适用于气相色谱技术的色谱柱。
DB色谱柱具有高分离效率、高分辨率和快速分离的特点,被广泛应用于各种气相色谱分析中。
DB色谱柱的填料通常是一种不活性的硼硅玻璃,填料的粒径大小和孔径大小不仅影响到柱的分离效果,还直接影响到样品的进样量和分析速度。
HP色谱柱和DB色谱柱是色谱分析中常见的两种色谱柱类型,它们在液相色谱和气相色谱分析领域中有着各自的优势和特点。
HP色谱柱具有高效、快速、灵敏和选择性好等特点,适用于液相色谱分析;而DB色谱柱具有高分离效率、高分辨率和快速分离的特点,适用于气相色谱分析。
hplc的柱子类型
hplc的柱子类型HPLC(高效液相色谱)是一种广泛应用于化学分析、药物分析、环境检测等领域的分离技术。
HPLC技术的核心在于使用高压泵将流动相(溶剂)以高流速通过柱子,进而实现目标组分的分离与分析。
柱子作为HPLC中最重要的组件,起到分离化合物的作用,而柱子的类型和性能直接决定了HPLC分析的选择性、分离效果和分离速度。
下面将详细介绍几种常见的HPLC柱子类型。
1. 反相柱(RP柱):反相柱是HPLC中最常见的柱子类型。
反相柱的固定液相为疏水性材料,如脱水层析纸、聚酸酯等,并用非极性稳定剂提高其稳定性。
反相柱主要用于分离极性化合物,通过控制流动相溶剂中的有机溶剂比例,使样品中的极性化合物与反相柱液相间发生相互作用,以实现化合物的分离。
2. 正相柱(NP柱):正相柱与反相柱相反,其固定液相为亲水性材料,如硅胶、氨基化硅胶等。
正相柱主要用于分离非极性化合物,其与反相柱相比较而言,对极性化合物的分离能力较差。
3. 离子交换柱:离子交换柱可以进一步分为阴离子交换柱和阳离子交换柱。
阴离子交换柱用于分离阳离子类型的化合物,而阳离子交换柱则用于分离阴离子类型的化合物。
离子交换柱的固定液相为离子交换树脂,具有强大的分离能力,因此在药物分析和生化分析等领域中被广泛应用。
4. 大孔径柱:大孔径柱也被称为快速流动相柱(FRC柱),其特点是具有较大的孔径和较小的比表面积。
大孔径柱的主要作用是提高流速和样品处理速度,适用于分析中需要快速分离的大分子化合物的情况。
5. 手性柱:手性柱主要用于分离具有手性的化合物。
由于手性化合物的旋光性质以及手性与生命科学和药物活性之间的密切关系,手性柱在医药领域得到了广泛的应用。
手性柱的固定液相一般是手性配体,具有对特定手性的化合物具有较高的选择性。
除了上述几种常见的柱子类型外,还有许多其他类型的HPLC柱子,如气相色谱柱、高效毛细管电泳柱(CEC柱)等。
每种柱子类型都有其独特的应用领域和特点,科学家们需要根据具体的实验目的和需求选择合适的柱子类型。
液相不同粒径色谱柱最佳流速选择
液相不同粒径色谱柱最佳流速选择
液相色谱柱是液相色谱法中的重要组成部分,其中不同粒径的色谱柱对于流速的选择有着不同的最佳值。
本文将介绍液相色谱柱最佳流速的选择方法,以便更好地发挥色谱柱的性能,提高分离效果。
一、液相色谱柱粒径对流速的影响
液相色谱柱的粒径是影响流速的重要因素之一。
一般来说,粒径越小,色谱柱的塔板高度越低,传质效率越高,但是柱压降也会增加。
因此,选择合适的粒径对于液相色谱柱的流速选择至关重要。
二、最佳流速选择方法
1. 实验测定法
实验测定法是一种常用的确定液相色谱柱最佳流速的方法。
通过实验测定不同流速下的分离效果,可以找到最佳流速。
具体步骤如下:
(1)选择合适的色谱柱,确定色谱条件;
(2)改变流速,分别进行实验;
(3)记录每个流速下的分离效果,如峰形、分离度等;
(4)分析实验结果,找到最佳流速。
2. 经验公式法
经验公式法是根据液相色谱柱的粒径和其他因素,通过经验公式估算最佳流速的方法。
常用的经验公式如下:
V=d^2*1.5*10^4/t
其中,V为最佳流速(mL/min),d为粒径(cm),t为塔板高度(cm)。
可以根据色谱柱的粒径和塔板高度计算出最佳流速。
三、最佳流速选择注意事项
1. 考虑到实验条件和分离效果,选择合适的流速范围;
2. 对于不同粒径的色谱柱,最佳流速可能不同;
3. 在选择最佳流速时,需要考虑色谱柱的使用寿命和维护成本;
4. 在实际应用中,可以根据具体分离物质的特点和分离度要求,适当调整流速。
色谱柱填料的种类及性能
色谱柱填料的种类及性能色谱柱填料是色谱分析中的核心部件,对于色谱分析的分离效果和分析结果具有决定性的作用。
因此,填料的种类和性能对于色谱分析具有重要的意义。
本文将介绍几种常见的色谱柱填料的种类及其性能特点。
硅胶填料硅胶填料是一种广泛使用的液相色谱柱填料。
硅胶填料通常包括疏水性硅胶和亲水性硅胶两种。
疏水性硅胶填料适用于非极性物质和中等极性的化合物的分离,而亲水性硅胶填料则适用于极性物质的分离。
硅胶填料具有较高的环保性和稳定性,适用范围广,但对于大分子类化合物,分离效果较差。
碳水化合物填料碳水化合物填料是用于气相色谱柱和液相色谱柱的其中一种填料,具有高热稳定性和惰性,能够对一些高沸点和热敏性化合物进行选择性的分离。
碳水化合物填料通常分为活性和非活性两种。
活性碳水化合物填料通常包含含有官能团的碳,如酸、醛、酮和胺等,这些官能团与有官能团的分子进行特异性的相互作用。
这种填料更适合用于对有官能团的显色分子进行分离。
聚合物填料聚合物填料又称高分子填料,指的是将一些含有双键和活性基团的单体聚合在一起,形成具有内部空隙的球状颗粒物。
聚合物填料分为亲水性和疏水性两种。
在液相色谱柱中,亲水性聚合物填料通常用于分离疏水类化合物,而疏水性聚合物填料则用于分离亲水类化合物。
氨基填料氨基填料也是一种常见的液相色谱柱填料,是在硅胶或聚合物球上引入含有氨基的官能团而制成的。
氨基填料可根据官能团的亲疏水性来选择分离特定极性分子的溶剂。
氨基填料通常用于分离带有氨、羟基或酚基等极性官能团的化合物。
结论以上几种色谱柱填料是常见的液相和气相色谱柱填料。
在选择填料时,需要根据待分离分子的物化性质和官能团来选择最适合的填料,以期达到更好的分离效果和分析结果。
常用C18柱性能介绍
大家好。
我是资生堂先端科学事业推进部的城田•修。
今天为大家讲解的第一个主题是“常用C18色谱柱不同特性及聚合物包被型色谱柱的介绍”。
因为只要是能够溶解在溶剂中的物质都可以成为分析对象,所以液相色谱可以广泛应用在各个领域。
液相色谱中使用C18柱的反相色谱法以生物体相关物质为分析对象,能够满足主要研究领域的需要,使用最为广泛。
现在,市场上出售的C18柱品牌繁多,约有数百种。
在此,向大家介绍多种C 18柱共存的原因以及从中选择符合分析目的商品的一些技巧。
此主题相关图片如下1-2.jpg:C18填料制法如下。
将具有烷基链的硅烷化剂与硅胶表面的硅醇基反应。
因为使用了共价键和的方式将烷基链紧紧固定在硅胶表面,所以烷基链不会被流动相冲洗掉,作为色谱固定相稳定发挥着作用。
这张图描述的C18填料的合成过程看似简单,但实际上固相与液相之间的反应比液相之间的反应更难控制。
与一般化学品相比,对色谱填料再现性的要求也会高很多。
如果实际使用的原料和反应条件稍有差别,最终产品的分离特性将会有很大改变。
这种变化,随目的不同或者成为缺点,或者也可能成为优点。
但是,如果不具有良好再现性,在实际应用中就不能被采用。
这样,在市场上就出现了数百种具有不同分离选择特性的C18色谱柱。
此主题相关图片如下1-3.jpg:关于填料的合成进一步详细说明。
市场上的商品大多分为两个步骤进行合成。
首先,如刚才介绍的,将C18基团导入到硅胶表面。
接下来进行第二步反应,将小分子试剂导入到第一步残留的硅醇基上,此过程被称为封尾。
通过封尾,尽可能地减少原料硅胶的影响,确保与硅胶表面有较强相互作用的化合物的分离效果。
另外,通过此步骤,能够比较容易的确保产品性能的再现性。
不受原料硅胶自身特性影响,提供性能稳定的商品是厂家永恒的课题。
另外,最近作为硅胶的替代物,含有机物的原料也在商品化并在出售,但是,这样的原料还没有超过硅胶,大半的商品仍然是以硅胶为原料。
此主题相关图片如下1-4.jpg:C18键合型填料差别化的主要原因如下。
色谱柱的性能 色谱柱技术指标
色谱柱的性能色谱柱技术指标色谱柱的性能与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。
色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯—二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:较为经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。
一、基质的特点:1、硅胶硅胶是陶瓷性质的无机物基质,刚性大,不易变形。
化学性质较稳定,但对于水溶液尤其碱性水溶液仍旧是不稳定的,即使表面经过良好的化学键合,覆盖了固定液,还是要注意水、碱性溶液、酸性溶液对硅胶的溶解作用,基质或者说是柱床(packed bed)溶解对色谱柱的影响是致命的。
以硅胶为基质的填料构成了目前绝大多数的色谱柱填料。
纯硅胶填料适合分别溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,硅胶也可以做凝胶色谱但柱效较低。
硅胶基质键合固定相的高压液相填料,有其他填料无法比拟的高分别效能。
2、二氧化铝二氧化铝和硅胶相像,但对水溶液、酸性碱性水溶液溶液更加不稳定。
所以,极少用作键合固定相的基质,也是适合分别溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,尤其是分别芳香族碳氢化合物。
酸性易离解的化合物简单在二氧化铝上形成死吸附。
另外,氧化铝分别几何异构体本领优于硅胶。
3、聚合物填料聚合物基质受压会变形,压力限度低但pH使用范围宽。
苯乙烯—二乙烯苯基质疏水性强,使用任何流动相,在整个pH范围内稳定,可以用强酸、强碱来清洗色谱柱。
甲基丙烯酸酯基质比苯乙烯—二乙烯苯疏水性更强,但可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。
由于不耐压、有溶胀性,所以聚合物填料适合用于大分子像蛋白质或合成的高聚物,另外还可以制成分子排阻、离子交换柱。
近年进展快速的大孔树脂,实际上主体就是苯乙烯—二乙烯苯聚合物或仿佛的合成高聚物。
由于硅胶基质的确定地位,以下紧要以硅胶为例。
C8的硅胶色谱柱
C8的硅胶色谱柱
C8硅胶色谱柱是一种常用于高效液相色谱(HPLC)分析的色谱柱。
它的名字中的"C8"表示柱填料表面具有C8烷基链,它是一种中等长度的烷基链。
以下是关于C8硅胶色谱柱的一些常见特点和性能参数:
1. 分离能力:C8硅胶色谱柱对许多有机化合物具有良好的分离能力,尤其适用于疏水性化合物的分离。
C8烷基链的长度使得它比较中性,因此适用于各种化合物的分离。
2. 良好的保留性能:C8硅胶色谱柱具有较高的保留性能,可用于分离相对亲水性较强的化合物。
它对极性化合物的保留程度介于C18硅胶色谱柱(较疏水)和C4硅胶色谱柱(较亲水)之间。
3. 应用广泛:C8硅胶色谱柱常用于药物分析、天然产物分离、环境分析等领域。
它可以有效分离和定量含有芳香族化合物、药物、酚类化合物、酮类、酸类、脂肪族化合物等的样品。
4. 粒径和尺寸:C8硅胶色谱柱的填料通常具有不同的粒径
(如3 μm、5 μm等)和长度(如150 mm、250 mm等),以适应不同分析要求。
5. 良好的耐久性:C8硅胶色谱柱通常具有良好的耐久性和稳定性,能够承受高压和多次使用而不容易损坏。
请注意,具体的C8硅胶色谱柱的性能和使用条件可能因不同制造商的产品而有所差异。
因此,在选择和使用C8硅胶色谱柱时,最好参考制造商提供的产品说明书和技术指南,以确保获得最佳的分离效果和分析结果。
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常见液相色谱柱性能比较
一、高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽
1、Waters公司Xbridge
2005年waters公司推出,杂化颗粒柱。
优点:pH 1-12,在高pH状态下,没有能与此色谱柱匹敌的,目前市场的宽pH色谱柱在高pH的状态下(9-12)普遍寿命很短,如Gemini,资生堂公司Capcell,YMCPro-C18,包括waters的第一代杂化柱Xterra都是寿命不长,Zorbax Extend更是不堪。
柱效与一流的硅胶柱相当,甚至有过之无不及,杂化颗粒柱和聚合物色谱柱的问题在于柱效,Xterra和常见的PSDVB的色谱柱都有不错的pH范围,但是柱效低的问题无法解决,这是聚合物填料一般比较软且不耐压的原因造成。
在如此宽的pH范围,最大的好处是可以在化合物的保留平台区去开发方法(pH1-3,pH9-12),这样能得到更稳定更容易重现的方法,对酸性,中性,尤其是碱性化合物都能得到理想的峰形。
注:Waters UPLC色谱柱与Xbridge采用同类型填料,只是颗粒度是1.7um,所以不再重复。
缺点:价格高,平均每支¥7000多的,不是大多数中国客户可以接受的。
2、MerckChromolith整体化色谱柱
Merck公司2001年推出。
优点:高流速、低压力,可以快速分析样品,因为压力低,所以可以串联色谱柱以获得更高的柱效而不用担心色谱柱耐压问题,低压力是因为硅胶棒的大量中孔的存在,中孔的存在也让这支色谱柱不怕堵,在处理比较脏的样品的时候会优势很大(如中药),实际的寿命也因此延长。
这个色谱柱最大的特点是柱效高出峰时间快,特别适合之前分析时间超长的实验条件,目前很好的例子就是人参的指纹图谱,因为成分复杂,之前出峰要2个小时,现在用整体化色谱柱30min就可以分析完了(已有报导),且不影响柱效,类似于UPLC,但不像UPLC那么容易堵。
缺点:规格单一,单价比较高,单价¥7000左右,所以通过串联获得更高柱效的方式显得比较奢侈。
3、Phenomenex公司Gemini ,采用硅胶球聚合物包被技术。
pH范围1-12。
优点:因为聚合物涂层抑制了碱性溶液水解硅胶,所以可以承受一定的碱性条件,由于是硅胶球颗粒,所以柱效不错,比Xterra或者PSDVB这类色谱柱柱效好。
单价比较低,¥3000以内。
缺点:聚合物涂层稳定性比较差,所以当涂层损失时,色谱柱会很坏被碱性溶液溶解,这也是其寿命远不及Xbridge的原因。
另外涂层损失也会影响结果重现性。
4、资生堂Capcell ,采用硅胶球聚合物包被技术。
pH范围1-10。
类似于Gemini同样的技术,只是参数指标比phenomenex低调。
单价偏高,¥5000以内。
5、Agilent ZorbaxExtend,采用双配位键和相技术。
pH2-10
优点:不详
缺点:在使用高pH时,基本上都会介绍Extend,但是实测数据说明该款色谱柱的耐高pH能力较差。
二、高纯硅胶柱特点:柱效高,峰形好,适用广泛,价格合适,为各色谱柱公司目前主流色谱柱
1、Merck的Purosphere STAR ,为Merck公司1999年推出,pH 1.5-10.5,通用性好,柱效高;缺点:市场推广较差,知名度比较低,
2、Phenomenex的Luna ,Phenomenex公司的主打色谱柱,pH1.5-10,通用性好,在进口色谱柱市场上占有一定份额;缺点:装填相对松散,柱头填料容易塌陷
3、Waters的Symmetry ,由于Waters推出Sunfire超纯硅胶柱,而降为低端色谱柱,但实际性能优异 pH2-8,属于很通用的色谱柱。
柱寿命不错;缺点:柱压稍高。
4、Kromasil以及Hypersil ODS2 ,两款色谱柱均为专业色谱柱公司提供,性能相当,Kromasil稍胜一筹, pH2-8,属常规色谱柱,通用性不错。
5、YMC ProC18 ,性能不错,被多家公司挑选进行性能比较。
6、Agilent的Zorbax XDB以及岛津的Shim-pak,通用性好。
缺点:性能普通,单价稍高。
技术多年没有更新。
7、Waters的Sunfire ,Waters最新超纯硅胶色谱柱,为二官能团封端,峰形更尖锐,此外性能较其它高纯硅胶柱并无明显优异,比如PurosphereSTAR、Symmetry以及Luna等。
8、Inertsil ODS-3色谱柱。
优点:日本GLSciences公司经典的高纯硅胶柱,峰形好,通用型好,理论柱效需要超过8.8万/m才可出厂,与LUNA,SYMMETRY性能相当。
9、Inertsil ODS-SP色谱柱。
特点:日本GL Sciences公司经典的高纯硅胶柱,SP说明了它的特点,SharpPeak,碳载量很低,可以运行100%水溶液,保留时间短,现在为岛津日本机型的标配色谱柱。
缺点:碳载量低会导致它对非极性样品的保留较弱,分离度会下降。
10、Lichrospher RP18e色谱柱。
特点:纯硅胶,且端基封尾,通用型较好,性价比高。
性能与kromasil,hypersil 色谱柱相当。
缺点:硅胶杂质含量相对较高,峰形会较高纯硅胶柱差一些。
三、亲水色谱柱。
特点:一般的C18都是疏水色谱柱,所以分析极性强的样品,都会保留比较弱,而调低有机溶剂比例又会造成疏水塌陷,所以很多公司都会推出不封端的或特殊封端的色谱柱,通过亲水基团达到增加极性样品保留,并且可以降低疏水塌陷的影响。
这类色谱柱一般都会用AQ或者Hydro表示,可耐100%水。
1、Waters AtlantisT3 。
采用三官能团键合,获得了很好的低pH稳定性,寿命提高,采用了专利的封端使其对极性化合物有良好的保留,并且对碱性化合物峰形也不错。
优点:很多公司的分析极性化合物的c18柱采用了不封端的技术,所以造成分析碱性化合物拖尾,并且柱寿命低,而T3在极性化合物的保留、碱性化合物的拖尾、柱寿命三方面都完成得很好。
缺点:价格偏高。
2、AgilentSB-AQ 。
优点:采用二异丙基空间位阻技术,碳链结构为专利(应该不是C18),所以在低pH下碳链难水解,低pH稳定性非常好,(SB-C18采用的是二异丁基位阻技术,是目前在低pH下稳定最好的色谱柱,只有waters的Xbridge 能与之相比)。
缺点:因为空间位阻影响,所以和SB-C18一样,无法封端,造成了缺点和优点一样突出,所以SB-C18碰到碱性化合物的峰形是非常差的,尤其是在pH7左右,另外在pH7左右这款色谱柱寿命也更差,所以一般适用于pH1-3。
3、phenomenex SynergiHydro-RP 。
采用极性封端。
四、低价色谱柱特点:一般价格在¥1000-3000之间,通用性好,低价但不一定低性能,是目前国内客户使用最广泛的色谱柱,尤其是制药企业的客户,因为拥有很高的性价比,用坏了也不用太心疼,所以目前国内市场至少有每年2万支左右的市场。
1、迪马钻石色谱柱。
优点:属于高纯硅胶柱,柱压低,峰形好,尤其用于中药客户更有优势,目前与依利特并列为两大最常用国产色谱柱品牌,拥有这么广阔的市场,说明这款色谱柱是经得起考验的。
缺点:质量控制较大品牌的原装进口柱差,批次重现性差,使用寿命短。
2、InertsilOEM色谱柱。
优点:GLSciences公司为国内客户提供的经济型OEM色谱柱,采用Inertsil高纯硅胶填料,从硅胶原料的选择到键合工艺以及最终色谱柱的装填,各道工序都经过了严格的考察、设计,OEM色谱柱是批量生产和检测的色谱柱,价格经济,性能优异可靠。
属于高纯硅胶柱,柱压低,150mm的短柱65:35乙腈/水压力在2.5MPa左右。
3、依利特色谱柱。
优点:属于纯硅胶柱。
缺点:批次重现性差,使用寿命短。
4、Kromasil国产色谱柱。
优点:属于纯硅胶柱,拥有较多的客户,价格较低。
缺点:批次重现性差,使用寿命短。