聚氨酯抗凝血材料探究进展

聚氨酯抗凝血材料的研究进展
摘要：
聚氨酯由于其优良的抗凝血性能和良好的物理机械性能而成为目前研究和应用最广的一种生物医用高分子材料。

本文就经典聚氨酯材料、接枝型聚氨酯、离子型聚氨酯及其它具有良好发展前景的聚氨酯抗凝血材料的研究进展作扼要综述[6]。

关键词：抗凝血材料、聚氨酯、聚醚分子量
1 引言
人类使用天然高分子化合物，如丝、棉、麻、毛、胶、漆……等已有几千年的历史。

古代虽然没有现在化学知识，但许多天然高分子利用过程中都涉及到了化学过程，如大漆、桐油、骨胶、发酵等等[3]。

上百年前，人们已开始利用硫磺与天然橡胶形成弹性体，到了近代，人们开始利用化学知识进行高分子反应，比如，纤维素改性是典型的高分子化学反应，通过它获得了赛璐璐制作的乒乓球、炸药，以其他改性纤维素制作的织物和胶黏剂等，在特殊条件下的选择性高分子化学降解反应使人类得到甲醇、乙醇……在化学的各个领域中，高分子科学是相对年轻的学科。

它的发展，使人类通过合成化学，获得了社会发展必需的且不可替代的高分子，不仅丰富了化学科学，而且为材料科学、生命科学、凝聚态物理和信息科学与技术的发展做出了贡献。

高分子合成化学近年的一些重要进展包括: 可控自由基聚合、树枝状高分子、活性配位聚合、某些芳香化合物可控偶联或缩聚反应、易位( 开环) 聚合、二氧化碳与环氧烷类的交替聚合、点击聚合、动态聚合物等。

我国学者在这些领域都取得重要进展。

生物医用高分子领域是与人类健康与生活质量密切相关的分支学科。

利用合成高分子的特殊性能，研究医用高分子材料的工作已广泛受到重视。

牙科材料是最早研究并获得应用的医用高分子，其难点依然很多，生物相容性与力学性能仍是主要问题，快速光固化高分子单体或预聚物的研究还要求最好能消除聚合收缩，以避免形成缝隙。

从眼科材料来说，用于白内障患者的人工晶体是一种光学性能、生物相容性都很好的高分子材料，最好的是具有形状记忆功能的，只需几毫米的创口; 隐形眼镜也是特殊的合成高分子，至于广泛替换玻璃的树脂镜片，更是视力矫正的首选。

各种医用高分子植入体的研究与应用对医用高分子研究提出了许多挑战。

同时，医疗过程中的用于体外的高分子材料还有许多重要研究需求，如用于血液透析治疗肾病的选择性吸附高分子、血液储存塑料袋、塑料注射器和静脉点滴塑料瓶与管等。

在生物工程中所用的高分子材料一般统称为高分子生物材料[11、12]。

下面本文将重点介绍高分子生物材料的研究进展和发展趋势。

2 血液相容性材料和血液在材料表面的凝血机理
血液相容性材料的研究已持续了几十年。

由于很多体内植入材料和半体内应用的材料均和血液相接触, 这方面研究一直受到广泛的重视。

大量研究表明, 血液与外界材料相互作用的机理十分复杂,当普通的生物医用材料与血液接触时，在1到2分钟内就会在材料表面产生凝血现象。

一般认为：血液的凝血分为两个过程。

首先，血浆在几秒钟内蛋白吸附在材料表面，形成厚度大约20nm 的蛋白质吸附层。

这一过程对血栓的形成起重要作用,而且与材料的表面性质密切相关。

其次，吸附在材料表面的蛋白质变性,在Ca2+存在的条件下,将引起血小板的粘附、聚集、释放反应，结果导致血小板血栓的形成[1]。

与此同时，血液中的凝血酶原通过级联反应的方式被快速激活，生成凝血酶。

凝血酶催化可溶性的纤维蛋白原转化为不溶的纤维蛋白。

纤维蛋白自发地聚合形成纤维网，加上被吸附积淀下来的血小板，使血液的流动
性下降，最后凝结成块状物即形成血栓。

如图1、2[3]。

在形成血栓的整个过程中，蛋白质的吸附和血小板的粘附、聚集及释放反应还有促凝酶的产生，协同作用，相互促进，不断加速血栓的形成。

因此其中最核心的过程是蛋白质吸附层的存在导致血小板粘附而出现的凝血。

图1 材料表面与血液的初始相互作用
图2 可能的凝血机制
根据这一假说, 以各种方式降低材料表面吸附性能, 减少材料与血液中蛋白质细胞相互作用成为重要的研究方向之一。

3 经典聚氨酯材料
聚氨酯材料是指在分子主链上含有较多氨基甲酸酯基团的一类聚合物。

自从1937 年德国Farben公司Bayer等合成聚氨醋以来, 已形成了包括聚氨酯软、硬泡沫、聚氨酯弹性体、聚氨酯塑料等一系列强度和刚性不同的产品。

1967 年, Boretor和Pietrce 等首次将嵌段聚醚聚氨酯(Segmented Polyether一Urethane,简称SPEU) 弹性体植人狗体内, 四周后未发现凝血现象。

并且在血液环境下,SPEU的机械强度也凌有明显变化。

这表明SPEU兼具生物稳定性和抗凝血性能,是一种较为理想的生物医用
高分子材料。

此后, 人们研究开发了大量的聚醚聚氨酯生物医用材料, 并形成了一系列具有实用价值的商品化聚醚聚氨酯生物医用材料(见表l)。

用这些材料制成的人工心脏、人工心脏瓣膜、人造血管、助搏器血囊等均显示出较好的抗凝血性能。

例如，用聚氨酯材料作为心房、心室的Javik一7型人工心脏, 于1982年植人美国犹他州61岁的Clerk 医生体内, 使他多活了112 天。

此后其它几例Javik一7型人工心脏的临床应用也有较好的结果。

表1 具有实用价值的商品化聚醚聚氨醋生物医用材料
从结构上看, 这类嵌段聚氨醋是由软、硬段交替组成的多嵌段共聚物。

硬段包括脲基和氨基甲酸酯, 含量一般小于40%；软段通常为聚醚二元醇、聚丁二烯、聚硅氧烷等。

一般硬段通过氢键作用相互聚集形成微区而分散在构成连续相的软段微区的基体中, 形成微相分离结构。

大量的研究显示经典的聚氨酯抗凝血材料的抗凝血性能与材料表面的这种非均相结构密切相关。

1972 年, Lyman等人用4,4一二苯基甲撑二异氰酸酯(MDI)，聚环氧丙烷(PPG)通过乙二胺扩链合成了嵌段聚醚聚氨酯。

研究表明, PPG 的分子量对血液相容性和血浆蛋白质的吸附都有较大影响, 当PPG的分子量为1025时观察到最佳值。

由此,他们认为嵌段聚氨酯的血液相容性与微区尺寸的大小密切相关。

Takahara进一步研究了软段分子量的影响, 发现随聚醚分子量的降低, 软段与硬段微区间相混合程度增加与材料血液相容性的下降存在良好的对应关系。

因而, 进一步证实了嵌段聚氨酯的血液相容性与材料的微相分离结构密切相关。

Takahara等还用含有不同亚甲基数的脂肪族二胺作扩链剂合成了一系列嵌段聚醚聚氨酯(SPEU), 发现SPEU表面的血小板粘附量与二胺中的亚甲基数存在锯齿形的关系: 即二胺中亚甲基为偶数的SPEU比亚甲基为奇数的SPEU具有较好的血液相容性。

红外分析结果显示: 与亚甲基为偶数的二胺相对应的SPEU中, 氢键浓度高, 即硬段间结合较强, 微相分离明显。

DSC分析也显示与奇数亚甲基二胺对应的SPEU有较高的玻璃化转变温度, 转变区也较宽, 微相分离较不明显, 即软段和硬段微区间的相混合程度较大。

因此, 血液相容性与扩链剂中亚甲基数的锯齿形关系本质上还是和软、硬链段间的微相分离程度有关。

关于微相分离结构材料对抗凝血性的贡献, Nakajilna提出了覆盖控制模型(capping control) 理论(图3)。

当微相分离材料和血液接触时, 立即就会吸附血浆蛋白质。

而这种血浆蛋白质的吸附是为材料表面微相结构所控制的, 亲疏水性不同的蛋白质被选择性地吸附
在不同微区。

这种特定的蛋白质吸附层结构不会激活血小板表面的糖蛋白,血小板的异体识别能力就体现不出来, 从而阻碍凝血的发生(图3(b))。

图3 覆盖控制模型(capping control)
此外, 在研究由司司软段合成的嵌段聚氮醋的抗凝血性能时, Takahara 发现对不同的聚醚软段, 聚氨酯表现最佳抗凝血性的聚醚分子量是各不相同的。

在PEG一PEU(聚二亚甲基醚聚氨酯)，PPG一PEU, PTMG 一PEU (聚四亚甲基醚聚氨酯) 材料表面,聚醚分子量分别为600, 1000和1900时变形的血小板数目出现最低值。

同时, 吸水量的测定表明:聚醚材料表面亲水性的递增次序为PTMG < PPG < PEG。

也就是说随聚醚表面亲水性的增加, 聚氨酯呈现最佳抗凝血性的聚醚分子量降低, 这表明除了嵌段的微相分离程度和微区尺寸对材料的抗凝血性有影响外, 嵌段聚氨酯的表面亲水一疏水平衡对材料的抗凝血性也有影响。

4 接枝型聚氨酯抗凝血材料
由于生物医用材料本身特点的局限性, 对材料的表面进行接枝改性, 也就成为提高其抗凝血性的一种重要手段。

鉴于聚氨酯材料的抗凝血性能本质上取决于材料的表面性质, 那么就可以通过表面接枝反应, 在聚氨酯表面接枝各种功能性侧链, 以对经典的聚氨酯抗凝血材料进行改性。

这样可在保留聚氨酯基材本体优越性能的基础上, 进一步提高聚氨酯材料表面的抗凝血性能。

提高材料表面的亲水性，可以降低表面自由能。

表面的亲水性及自由能与血液成分的吸附、变性等有密切联系。

提高材料表面亲水性，使表面自由能降低到接近血管内膜的表面自由能值，可取得抗血栓性能。

聚氧乙烯(PEO) 由于其独特的高亲水性和高流动性，呈现出良好的生物惰性，可阻抗多种蛋白质和血细胞的黏附，是一种改善高分子材料血液相容性的理想材料。

乙二醇聚合物( PEG、OEG) 因具有高亲水性、柔韧性、无毒性及无免疫原性等特点，被广泛地应用于表面改性。

PEG 因为在溶液中具有很高的链稳定性以及很大的排斥体积，能阻抗其他分子的影响。

分子模拟能在分子水平上研究表面的蛋白质吸附，模拟结果是实验结果的补充。

Ikaka在研究材料一血液相互作用的表面物理化学行为基础上, 指出极端亲水性的表面和极端疏水性的表面都具有良好的血液相容性。

极端亲水性表面由于与界面的亲合性较大, 从而使界面自由能大大降低, 减少了材料表面对血液中多种组份的作用, 因而呈现优良抗凝
血性能。

而具有极端疏水性表面的材料, 由于其表面自由能低, 与血液各组份的作用小同样可能呈现优良抗凝血性能。

此后人们通过铈盐引发、过氧化物引、辐射接枝聚合、光引发接枝聚合等各种表面接枝方法将丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺及其它一些亲水性单体接枝聚合到聚氨酯及其它一些生物医用材料表面(表2), 形成了一系列亲水性聚氨酯表面。

血液相容性评价表明, 这类表面确实具有优良抗凝血性能。

而Han等采用表面化学接枝反应在SPU表面接枝上全氟代烷基后, 发现这种极端疏水性的聚氨酯表面也具有和极端亲水性的PEG 链接枝聚氨酯相当的抗凝血性能。

在接枝型聚氨酯的一系列研究中, 具有长PEG 接枝链表面的抗凝血性能尤其引人注目。

事实上, 不仅在SPU 表面, 而且在硅橡胶、聚氯乙烯、聚乙烯表面, 接枝PEG 链均不同程度地提高了材料的抗凝血性能, 因此具有长PEG 接枝链的表面被普遍认为是一种改善材料抗凝血性能的理想表面。

Nagaoka 等通过研究, 对PEG 接枝链的抗凝血机理提出了以下假设: 由于PEG 是一种高度亲水性和柔顺性的分子链, 因而PEG 一方面可与水结合形成水合PEG链, 以通过位阻排斥作用阻碍血液组份的吸附。

这种阻碍作用随PEG 链的增长而增大(图4(a))。

另一方面, 水合PEG 链的快速运动可影响血液一材料界面的微区流体力学性质, 即与柔性PEG 链段结合的水微流阻止了蛋白质在材料表面的停滞、粘附与变性(图4(b))。

基于这种假设, 单端接枝的PE G 链由于具有长的、自由运动的亲水链, 应是一种理想的抗凝血表面。

实验结果与此假设基本相符, 如Kim 等人在Biomer : 上接枝PEG 后, 确实发现这种单端接枝的模型化合物大大降低了血小板在材料表面的粘附。

当接枝PEG 分子量为1000 时, 在Biomer一PEG 表面的血小板粘附量仅为Biomer 基材的l/2。

其它一些接枝PEG 链的SPEU 也同样显示出较好的抗凝血性能 (见表3)。

表3
Jiang 及其同事通过分子模拟研究发现，PEG 的长链通过构象的弹性变化阻碍蛋白质吸附到材料表面。

高表面密度和长链的PEG 表现出较好的阻抗蛋白质吸附性能。

OEG 链短，堆积密度厚，不易通过构象变化来阻抗蛋白质吸附。

但是OEG 通过氢键作用，其表面极易形成一层牢固结合的水屏障，并且当OEG 表面密度适中时，水分子与OEG 链之间的氢键越多，OEG 链的弹性越大，阻抗蛋白质吸附的能力越强。

因此，很多研究者都用PEG 作间隔臂连接其他具有抗凝血性能的生物活性大分子对材料表面改性。

Salchert 等将苯甲酰胺衍生物以羧基-PEG 链为间隔臂共价接枝在马来酸酐共聚物表面，研究表明膜的厚度以及羧基的含量与共聚物的亲/ 疏水性及PEG 的性质有关。

苯甲酰胺对凝血酶的抑制作用与PEG 的高亲水性、柔韧性和空间位阻效应相互协助，使得改性后的表面膜能高度结合凝血酶，使凝血酶失活，显示出极好的抗凝血效果。

5 离子型聚氨酯抗凝血材料[7、9]
大量的研究表明, 血液中的多种组份(如血红蛋白、血小板、部分血浆蛋白质等) 在血液环境中呈负电性, 血管内壁也是呈负电性的。

人们由此认为负电性的血管内壁与负电性的血液组份的静电排斥作用是有利于抗凝血的。

因此, 用阴离子修饰聚氨酯作为提高材料抗凝血性能的又一手段而被广泛研究。

Ito 等合成了带羧酸根基团的SPEU, 发现由于阴离子的静电排斥作用, 在材料界面的纤维蛋白原和血小板吸附量及变形程度均减小了。

进一步的研究表明用羧酸基、磺酸基和磺胺基团修饰的聚氨酯材料表面均显示出较好的抗凝血性能。

而这类基团正是天然抗凝血物质——肝素的重要成分。

在血液环境中, 这些用阴离子修饰的表面可以显示出和肝素化表面类似的抗凝血作用(如直接络合凝血因子、干扰不溶性纤维蛋白网络的形成、促进凝血因子和抗凝血因子的结合等),具有较好的抗凝血性. 因而这类用磺酸基、磺胺基、羧酸基修饰的材料也常被称为“类肝素(Heparin一like)”抗凝血材料。

Han 等在单端PEG 接枝聚氨酯的模型基础上, 在PEG 末端接上一个具有类肝素活性的阴
SO 的聚氨酯材料(如图5)。

血液相容性评离子磺酸基团, 制备了分子结构为PEU-g一PEO一
3
价表明, 这种材料与PEU-g一PEO相比有较小的血小板粘附与活化能力, 抗凝血时间较长。

显然, 这种模型化合物将聚氨酯基体的优良物理机械性能和抗凝血性能、PEG 链的高亲水性和柔顺性、磺酸根的负电性和类肝素活性等多种有利因素集于同一材料表面, 使其抗凝血性能较PEU-g一PEO又有进一步提高。

林思聪等分别在不同的生物材料表面构建了含磷铵、磺铵、羧铵结构的聚合物，研究这些聚合物表面抗血小板的黏附性能，他们认为优异的抗凝血性是聚两性离子材料的共性。

材料表面10ng·cm－2的纤维蛋白原吸附就可以引发所有血小板的黏附，形成血栓。

Zhang 等在玻璃表面接枝了pSBMA 和pCBMA，通过酶联免疫吸附实验测定表面的纤维蛋白原吸附量，约为玻璃表面的3% 和4%。

不同材料、不同接枝密度也会对纤维蛋白原的吸附产生影响，Feng 等在硅表面制备了2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(MPC) 的聚合物刷，发现接枝表面的纤维蛋白原吸附量随MPC 接枝链密度和链长度的增加而明显减少，当接枝链密度为0.29个·nm－2、链长度为100 单位时，纤维蛋白原吸附量小于10ng·cm－2。

吴楠等将MPC 共价结合到Fe3O4
纳米粒子表面，大大减少了蛋白质的非特异性吸附，延长了复钙化凝血时间，并具有优良的生物相容性。

6 其它抗凝血生物活性物质
除肝素[5]外, 其它抗凝血生物活性物质, 如前列腺素、尿激酶、白蛋白等也被用来修饰聚氨酯生物材料, 以改善材料的抗凝血性能。

此外, 由于凝血过程中血小板粘附、凝血因子的激活及不溶性纤维蛋白网络的形成是三个相互关联的过程, 因而人们将两种或两种以上生物活性物质的复合物, 如: 白蛋白( 阻抗血小板粘附) 和肝素( 阻抗凝血因子激活) 的复合物、尿激酶( 促进纤维蛋白溶解) 和肝素的复合物、前列腺素( 阻抗血小板粘附) 和肝素的复合物负载于聚氨酯材料表面, 制成复合
型抗凝血高分子材料, 多方位地阻碍凝血过程的发生, 显示出良好的发展前景。

7 抗凝血功能高分子材料的发展与展望
近几十年来, 尽管血液相容性高分子材料的研究开发己经取得了很多进展, 但是由于血浆蛋白、血细胞与异物表面间的相互作用机制十分复杂, 在机理研究（如材料表面模型的确立、材料与机体生化反应的机理等）方面仍有许多不足之处。

迄今为止还没有找到一种高分子材料, 其表面具有天然血管壁内皮细胞所特有的抗凝血和止血功能, 可以直接应用到临床医学方面, 来治疗心血管病、脑血管病等。

但随着生物、化学、医学等学科的相互渗透, 这些问题都将会逐一解决, 医用高分子材料必将对提高人类生活质量和保障人类健康发挥重大作用。

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