细胞培养技术总结
细胞培养员个人工作总结
细胞培养员个人工作总结作为一名细胞培养员,我在过去一年中取得了许多进展和成就。
通过我的努力和专业知识,我对细胞培养的技术和操作有了更深入的了解,也使我在实验室工作中变得更加熟练和有效率。
在这一年中,我参与了多个细胞培养实验项目的设计和实施。
我学会了如何选择合适的细胞培养基和添加剂,以及如何进行无菌操作和细胞传代。
我也积累了丰富的细胞培养实验经验,能够独立完成各种类型的培养细胞,包括肿瘤细胞、干细胞和原代细胞等。
除了实验室操作技能的提高,我还注重了实验室安全和环境卫生。
我始终保持实验室的整洁和无菌环境,定期进行设备消毒和清洁,确保实验过程的准确性和可靠性。
在日常工作中,我也注重团队合作。
我与实验室同事合作紧密,共同解决实验中出现的问题和挑战。
我积极分享自己的经验和见解,与大家一起不断提高工作效率和质量。
通过这一年的工作,我对细胞培养技术和实验室管理有了更深入的了解,也提升了我的综合实验能力和团队合作能力。
我将继续努力,不断学习和提高自己的专业水平,为细胞培养实验工作贡献力量。
作为一名细胞培养员,我深知自己的责任是保证实验室中的细胞培养工作顺利进行,以支持科学研究和生物医学领域的发展。
通过不断学习和实践,我逐步完善了自己的技能和知识体系,获得了丰富的实验经验和专业能力。
在实验室工作中,细胞培养技术是最基础也是最核心的技能之一。
我始终严格遵循无菌操作的标准,确保细胞培养过程中的无菌、洁净和可靠性。
我熟练掌握了细胞传代和培养基配制等操作技能,能够有效地处理不同类型细胞的培养需求。
在肿瘤细胞的培养中,我理解了细胞株的特性和应用,有效地控制了细胞培养的质量和稳定性。
除了技术和操作方面的提升,我也不断完善自己的理论知识,并一直关注行业动态和前沿技术。
我积极参加各类学术讲座和学术会议,结合实验室工作实际需求,不断学习和探究最新的细胞培养技术和方法。
我了解到了一系列先进的培养技术和细胞处理工具,如细胞冷冻和解冻技术、细胞分选技术等,这些技术的应用有助于提高细胞培养效率和保证细胞的生物学特性。
细胞培养毕业实习报告总结
毕业实习报告总结:细胞培养首先,我要感谢我的导师和实验室的同事们,他们在我的实习期间给予了我无私的帮助和指导。
通过这次实习,我对细胞培养这一领域有了更深入的了解,也积累了宝贵的实践经验。
细胞培养是生物医学和生物技术领域中重要的实验技术,它通过模拟细胞在体内的生长环境,使细胞在体外继续生长和繁殖。
在实习期间,我学习了细胞培养的基本原理和操作技术,包括细胞的复苏、传代、胰蛋白酶消化、细胞计数、铺板等步骤。
我也了解了细胞培养中常用的仪器设备,如二氧化碳培养箱、显微镜、细胞计数仪等。
在实习过程中,我不仅掌握了细胞培养的基本技能,还参与了一些具体的实验项目。
我参与了一项关于细胞凋亡的研究,通过细胞培养技术,我成功地培养了所需细胞,并进行了凋亡实验。
通过观察细胞形态的变化和流式细胞术的分析,我得出了实验结果,并协助导师进行了数据分析和论文撰写。
这个过程中,我不仅学习了实验设计和数据分析的方法,还提高了自己的实验操作能力。
在实习期间,我也遇到了一些挑战和困难。
例如,细胞培养过程中细胞的生长速度较慢,有时需要耐心等待。
另外,细胞的复苏和传代过程中,也有一些技巧需要掌握。
通过请教导师和同事,我逐渐克服了这些困难,并取得了较好的实验结果。
通过这次实习,我不仅学到了专业知识和技能,还锻炼了自己的团队合作和沟通能力。
在实验室中,我与同事们共同合作,互相学习和帮助。
我们也定期进行实验室会议,分享实验进展和心得体会,这让我感受到了团队合作的重要性。
总之,这次细胞培养实习是一次非常宝贵的学习经历。
我不仅掌握了细胞培养的基本技能,还参与了一些具体的实验项目,并取得了较好的研究成果。
同时,我也学会了团队合作和沟通的能力。
我相信这次实习对我未来的学术研究和职业发展将产生积极的影响。
细胞培养技术员工作总结
细胞培养技术员工作总结总结一细胞培养一.基本理论概论原代培养:也叫初代培养,指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。
传代培养:将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。
细胞系:原代培养物成功传代后,则称之为细胞系。
(如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系;已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,称连续细胞系或无限细胞系。
)细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。
培养类型:细胞培养,组织培养,器官培养。
细胞生长的方式:贴附生长,悬浮生长培养细胞的形态(形态不一定,环境改变形态可能改变):成纤维性型细胞,上皮型细胞(单层膜样生长),游走性细胞(游散生长,常有伪足跟突起)二.培养过程及要点(切记无菌操作)(一)工作环境的处理1.实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%酒精擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%酒精擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2.实验用品以70%酒精擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在台面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。
3.小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45?角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
吸管口切勿碰到容器瓶口4.工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少Classll)。
细胞培养方法总结
细胞培养方法总结细胞培养是生物学研究中重要的实验技术之一,通过在体外人工创造和维持细胞生长环境,使细胞能够持续繁殖、生长和分化。
本文将对常用的细胞培养方法进行总结,并介绍其步骤和注意事项。
一、细胞培养基的配制细胞培养基是细胞生长所必需的营养物质和生长调节因子的混合物,根据细胞类型和实验需求的不同,培养基种类繁多。
在配制培养基时,应按照标准操作流程,确保成分准确无误并避免细菌和真菌的污染。
二、细胞的分离和传代1. 细胞的分离:将细胞从原来的培养皿中取出,并用消化酶、细胞分离酶等方法进行细胞的离散处理,以获得单细胞悬浮液或小团的细胞群。
2. 细胞的培养:将悬浮的细胞或细胞小团转移至新的培养皿中,添加适量的培养基,并静置于恒温培养箱中,创造适宜的生长环境,促进细胞的生长。
3. 细胞的传代:当原始细胞群生长至饱和状态时,需进行细胞的传代,即将部分细胞转移到新的培养皿中,以保持细胞的活力和增长。
传代过程中,注意维持传代比例和规律的同时,避免细胞超密植或过稀。
三、细胞冻存和解冻细胞冻存是将培养好的细胞保存在低温下,以延缓其代谢过程,以备后续使用。
具体步骤包括:1. 预处理:加入冻存保护剂,如二甲基亚砜(DMSO)或甘油,以降低冻存过程对细胞的伤害。
2. 储存管制备:将细胞转移到冻存管中,并标记相关信息,如细胞类型、培养时间等,以方便后续的识别。
3. 冷冻:将装有细胞的冻存管放置在低温环境中,逐渐降温至最终低温储存条件下,一般为液氮温度(-196°C)。
4. 解冻:将冻存管取出,快速置于37°C预热的培养基中解冻,然后将细胞转移至培养皿中,尽快恢复细胞活性。
四、细胞凋亡检测细胞凋亡是指细胞主动发生的自我死亡过程。
为了研究细胞凋亡的发生机制,需对细胞进行凋亡检测。
以下是常用的细胞凋亡检测方法之一:1. Annexin V/PI双染法:利用Annexin V亲和素与磷脂酰丝氨酸的结合,通过荧光检测乙酰胆碱酯酶的失活,以区分早期和晚期凋亡。
细胞技术员年度总结(3篇)
第1篇一、前言时光荏苒,岁月如梭。
转眼间,又到了一年的尾声。
在过去的一年里,我在细胞技术领域取得了丰硕的成果,现将我的年度工作总结如下:二、工作回顾1. 熟练掌握细胞培养技术在过去的一年里,我通过不断学习和实践,熟练掌握了细胞培养技术。
在细胞培养过程中,我严格按照操作规程进行,确保细胞生长良好,为后续实验提供了优质的基础。
2. 参与多项细胞实验在过去的一年里,我积极参与了多项细胞实验,包括细胞传代、细胞分化、细胞凋亡等。
在实验过程中,我严谨对待每一个环节,确保实验结果的准确性。
3. 优化实验方案针对部分实验过程中出现的问题,我不断优化实验方案,提高了实验效率。
例如,针对细胞传代过程中细胞活力下降的问题,我通过调整培养基成分和传代时间,有效提高了细胞活力。
4. 参与撰写论文在过去的一年里,我参与了多篇论文的撰写工作。
在论文撰写过程中,我认真负责,对实验数据进行详细分析,确保论文质量。
5. 参加学术交流活动为了拓宽自己的视野,我积极参加各类学术交流活动。
在交流中,我学习到了许多新的细胞技术,为今后的工作积累了宝贵经验。
三、收获与感悟1. 专业技能得到提升在过去的一年里,我在细胞技术领域取得了显著进步,专业技能得到很大提升。
这离不开领导的关心和同事的帮助,在此表示衷心的感谢。
2. 团队协作能力增强在实验过程中,我深刻体会到团队协作的重要性。
通过与同事的密切配合,我们共同完成了许多艰巨的任务,这使我更加珍惜团队精神。
3. 严谨的工作态度在实验过程中,我始终保持严谨的工作态度,对待每一个实验环节都认真负责。
这种态度使我受益匪浅,也为今后的工作奠定了基础。
四、展望未来展望未来,我将继续努力,不断提高自己的专业素养。
具体如下:1. 深入学习细胞技术领域的新知识、新技能,为实验工作提供有力保障。
2. 加强与同事的沟通交流,提高团队协作能力。
3. 积极参与科研项目,为我国细胞技术领域的发展贡献力量。
总之,过去的一年,我在细胞技术领域取得了丰硕的成果。
细胞实验报告反思总结(3篇)
第1篇一、前言细胞实验作为生物学研究的重要手段,在揭示生命现象、探索疾病机制、开发新型药物等方面发挥着至关重要的作用。
本次实验报告针对我所参与的细胞实验进行反思总结,旨在提高实验技能、优化实验设计、提升实验结果的可信度。
二、实验目的本次实验旨在:1. 掌握细胞培养的基本操作技能,包括细胞传代、细胞接种、细胞计数等。
2. 熟悉细胞实验所需的器材和试剂,了解其作用和用途。
3. 分析实验结果,探讨实验现象背后的生物学机制。
三、实验过程1. 细胞传代:在实验过程中,我们严格按照细胞传代操作规程进行,确保细胞在适宜的培养条件下生长。
通过观察细胞生长状态、调整传代比例,保证了细胞的活力和数量。
2. 细胞接种:在细胞接种过程中,我们遵循无菌操作原则,确保细胞在无菌条件下生长。
同时,根据实验需求调整接种密度,为后续实验提供充足细胞资源。
3. 细胞计数:在细胞计数实验中,我们熟练运用血球计数板进行细胞计数,并对计数结果进行统计分析。
通过对比不同处理组的细胞数量,分析实验现象背后的生物学机制。
4. 实验数据分析:在实验数据分析过程中,我们运用统计学方法对实验数据进行分析,探讨实验现象背后的生物学机制。
同时,对实验结果进行合理的解释和推断。
四、实验反思1. 实验操作方面:(1)在细胞传代过程中,我们应严格按照操作规程进行,避免细胞污染和传代失败。
(2)在细胞接种过程中,应注意无菌操作,防止细胞污染。
(3)在细胞计数过程中,应保证计数准确,避免人为误差。
2. 实验设计方面:(1)在实验设计过程中,应充分考虑实验目的和实验条件,确保实验结果具有可重复性和可靠性。
(2)在实验过程中,应密切关注实验现象,及时调整实验参数,优化实验设计。
(3)在实验结果分析过程中,应运用多种统计学方法,提高实验结果的可信度。
3. 实验结果分析方面:(1)在实验结果分析过程中,应充分挖掘实验数据,探讨实验现象背后的生物学机制。
(2)在实验结果解释过程中,应结合相关文献,对实验结果进行合理的解释和推断。
口腔细胞培养技术总结
口腔细胞培养技术总结在现代医学和生物学研究中,口腔细胞培养技术已经成为了一项重要的工具。
它不仅有助于我们更深入地了解口腔组织的生理和病理过程,还为口腔疾病的诊断、治疗以及组织工程的发展提供了有力的支持。
口腔细胞主要包括口腔上皮细胞、成纤维细胞、牙髓细胞、牙周膜细胞等。
这些细胞在口腔的正常生理功能和疾病发生发展中都发挥着重要的作用。
进行口腔细胞培养的第一步是细胞的获取。
对于口腔上皮细胞,可以通过刮取口腔黏膜表面来获取。
而成纤维细胞则可以从牙龈、牙周膜等组织中分离得到。
牙髓细胞则通常从健康或病变的牙髓组织中提取。
在细胞获取后,需要对其进行处理和培养。
培养所使用的培养基通常包含了各种营养成分,如氨基酸、维生素、无机盐等,以及血清等添加物。
血清中含有丰富的生长因子和激素,能够促进细胞的生长和增殖。
在培养过程中,需要严格控制培养环境的条件。
温度一般维持在 37℃左右,这与人体的正常体温相似,有利于细胞的正常代谢和功能维持。
同时,培养环境的 pH 值也需要保持在一定的范围内,通常为 72 74 之间,以确保细胞内的酶和代谢过程能够正常进行。
此外,细胞培养还需要在无菌的环境中进行,以防止细菌、真菌等微生物的污染。
为了让细胞能够更好地生长和附着,通常会在培养容器表面进行特殊处理,例如涂抹胶原蛋白或多聚赖氨酸等物质。
在细胞培养的过程中,还需要定期观察细胞的生长状态。
可以通过显微镜观察细胞的形态、大小、数量等特征,判断细胞是否健康生长。
正常情况下,细胞应该呈现出规则的形态,并且随着时间的推移,数量逐渐增加。
当细胞生长到一定程度后,可能需要进行传代培养。
传代培养是指将原代培养的细胞转移到新的培养容器中,继续培养。
这个过程需要小心操作,避免对细胞造成损伤。
口腔细胞培养技术在口腔医学领域有着广泛的应用。
例如,在疾病诊断方面,可以通过培养病变组织的细胞,观察其形态和功能的变化,辅助疾病的诊断。
在治疗方面,利用细胞培养技术可以研究药物对口腔细胞的作用,筛选有效的治疗药物。
细胞实验技术员的工作总结
细胞实验技术员的工作总结
作为一名细胞实验技术员,我的工作主要是在实验室中进行细胞培养、实验操
作和数据分析。
这项工作需要精准的操作技巧、严谨的实验态度和扎实的专业知识。
首先,细胞培养是我工作中的重要环节。
我需要根据实验需求选择合适的培养
基和细胞系,进行细胞传代和细胞冻存,保证细胞的健康生长和稳定性。
在培养过程中,我要时刻注意细胞的状态和纯度,确保实验的可靠性和准确性。
其次,实验操作是我工作的核心内容。
我需要根据实验设计进行细胞处理、药
物处理、蛋白抽提等操作,严格按照操作规程和标准操作程序进行,确保实验的可重复性和结果的可信度。
在操作过程中,我要时刻关注实验条件的控制和实验设备的维护,保证实验的顺利进行。
最后,数据分析是我工作的重要环节。
我需要对实验结果进行统计分析和图表
绘制,解读实验数据并撰写实验报告。
在数据分析过程中,我要时刻关注数据的准确性和可靠性,确保实验结果的科学性和可信度。
综上所述,作为一名细胞实验技术员,我需要具备扎实的细胞生物学和实验技
术知识,严谨的工作态度和精准的操作技巧。
通过不懈的努力和持续的学习,我将不断提升自己的专业水平,为科研工作的顺利进行贡献自己的力量。
细胞培养个人工作总结范文
细胞培养个人工作总结范文细胞培养是生物学实验中非常重要的一个环节,我在进行细胞培养工作中取得了一些经验和收获,现做以下总结:首先,在进行细胞培养实验时,我要保证实验室环境的洁净,经常对实验设备进行消毒和清洁,以防止细菌或其他有害物质的污染。
同时,在进行细胞培养时,要注意无菌操作,避免外界微生物的污染。
其次,我在培养细胞过程中,掌握了种植细胞的最佳条件和方法。
比如,在细胞培养的过程中,我严格控制培养基的pH值、营养物质的添加和细胞密度的控制,以保证细胞的健康生长和增殖。
另外,在细胞培养过程中,我也注意到了细胞的形态学变化和生长速度等指标的监测和记录,及时发现细胞的异常情况,以便及时调整培养条件。
最后,我在细胞培养实验中,还积累了大量的实践经验和技能,这些都将对我今后的科研工作产生积极的影响。
总而言之,通过细胞培养的个人工作总结,我进一步加深了对细胞培养工作的理解,提高了细胞培养技能,为今后的科研工作奠定了更加扎实的基础。
希望在今后的科研工作中,我能够不断积累经验,提高专业素养,为科学研究做出更多的贡献。
在细胞培养的工作实践中,我还学会了如何选择合适的细胞培养基和添加剂,以促进细胞的健康生长。
同时,我也学会了如何判断细胞的状态和纯度,并且掌握了一些常见的检测方法和技术,如细胞计数、细胞鉴定、细胞凋亡检测等。
这些技能不仅为我日常的细胞培养工作提供了坚实的保障,也为我未来的科研探索和学术研究奠定了基础。
在进行细胞培养的工作中,我还注意到了实验中的一些常见问题和解决方法。
比如,细胞在培养过程中出现的感染、细胞质纺锤体形成异常、细胞黏附不良等情况,这些都需要我们认真研究问题的根源,并采取相应的措施解决。
通过对实验过程中遇到的问题进行分析和总结,我得以不断提高自己的动手能力和解决问题的能力,使得我在工作中更加得心应手。
在实验的过程中,我发现了培养过程中一些可能的改进点。
比如,改进培养基的配方、优化培养条件、探索新的细胞培养技术等,这些都是我在细胞培养工作中不断努力的方向。
细胞培养实验总结总结
细胞培养实验总结引言细胞培养是现代生物学研究中常用的实验技术之一,它可以模拟体内环境,为研究细胞的生理生化过程提供便利。
本文对进行的细胞培养实验进行总结,包括实验目的、实验步骤、实验结果及讨论等内容。
实验目的本次实验的主要目的是通过细胞培养技术培养和观察细胞生长情况,了解细胞培养过程中的操作步骤和注意事项。
同时,通过添加不同培养基成分,探究对细胞生长和分化的影响。
实验步骤1.准备实验器材和培养基:将所需的培养基放置在无菌工作台上,同时清洗好所有需要使用的培养器皿和器械,保持无菌状态。
2.细胞传代:将上一代培养的细胞用无菌吸管吸取,移至新的培养器皿中,加入新鲜准备好的培养基。
细胞传代的目的是保持细胞的生长状态和纯度。
3.细胞观察:将培养器皿放置在显微镜下,使用适当倍率进行观察。
检查细胞的生长状况和细胞数量是否符合预期。
4.添加培养基成分:根据实验设计,可以在相应的培养器皿中加入不同的培养基成分,例如细胞分化因子、抗生素等。
目的是观察添加不同成分后细胞的生长和分化变化。
5.细胞采集:当细胞达到一定的生长密度时,可以进行细胞采集。
用无菌吸管吸出细胞悬液,将其置于离心管中,并进行离心处理,获取细胞沉淀。
6.分析实验结果:对培养的细胞进行计数、生长速率分析等统计,观察实验结果是否符合预期。
实验结果根据实验步骤和操作要求,我们成功地进行了细胞培养实验,并获得了一系列实验结果。
首先,观察到细胞在培养基中显示出良好的生长状态。
细胞数量逐渐增多,呈现典型的细胞周期。
观察到细胞的形态变化,细胞逐渐变大,细胞贴壁生长良好。
这说明培养基的成分和培养条件对细胞的生长具有重要影响。
其次,实验中添加了不同的培养基成分,包括细胞分化因子和抗生素。
观察到加入细胞分化因子后,部分细胞呈现出明显的分化现象,形成不同的细胞类型。
而加入抗生素后,观察到细胞数量减少,并且呈现出不同程度的细胞死亡。
这说明细胞分化和细胞存活受到培养基成分的影响。
细胞培养员的工作总结
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员,我深知这项工作的重要性和复杂性。
在细胞培养领域,
我们的工作是至关重要的,因为细胞培养是许多生物医学研究和药物开发的基础。
在这篇文章中,我将总结一下作为一名细胞培养员的工作内容和重要性。
首先,作为一名细胞培养员,我们的主要工作是负责培养和维护各种类型的细胞。
这包括从动物组织中分离细胞、培养细胞、检测细胞的健康状况以及进行细胞传代。
这些工作需要高度的技术和实验操作技能,因为细胞的生长和健康状况对于后续的实验结果至关重要。
其次,细胞培养员需要严格遵守实验室的操作规程和安全标准。
在细胞培养实
验室中,我们需要确保实验室的清洁和无菌操作,以防止细胞培养过程中的污染。
此外,我们还需要定期检查和维护实验室设备,确保其正常运行。
另外,作为一名细胞培养员,我们还需要与其他研究人员密切合作。
我们需要
根据研究项目的需求,为科研人员提供高质量的细胞培养服务,并确保实验结果的准确性和可重复性。
因此,良好的沟通和团队合作能力也是我们工作中的重要素质。
最后,作为一名细胞培养员,我们需要不断学习和更新自己的知识和技能。
细
胞培养技术是一个不断发展和更新的领域,我们需要及时了解最新的实验方法和技术,以提高我们的工作效率和实验质量。
总的来说,作为一名细胞培养员,我们的工作是非常重要和复杂的。
我们需要
具备扎实的实验操作技能、严格的实验室管理能力、良好的沟通和团队合作能力,以及不断学习和更新自己的知识和技能。
只有这样,我们才能为生物医学研究和药物开发做出更大的贡献。
细胞培养实验员工作总结
细胞培养实验员工作总结
作为一名细胞培养实验员,我深知这项工作的重要性和挑战。
在过去的一段时
间里,我不断学习和成长,积累了丰富的经验。
在这篇文章中,我将总结我在这个岗位上的工作经历,并分享一些心得体会。
首先,作为细胞培养实验员,我需要具备扎实的细胞生物学知识和技能。
在日
常工作中,我负责细胞培养、细胞传代、细胞实验等工作。
我要保证细胞的健康状态,确保其纯度和活性。
同时,我还需要进行细胞实验,比如细胞毒性测试、细胞增殖实验等。
这些工作需要我对细胞培养技术有着深入的理解和熟练的操作技巧。
其次,我在工作中还需要具备严谨的实验态度和良好的团队合作精神。
在实验
室中,我们经常需要进行复杂的实验操作,需要严格遵守操作规程,确保实验结果的准确性和可靠性。
同时,我还需要和同事们进行密切的合作,共同完成实验任务。
团队合作精神和良好的沟通能力对于我们的工作至关重要。
最后,我认为作为细胞培养实验员,持续学习和不断提升自己的能力是非常重
要的。
细胞培养技术是一个不断发展和更新的领域,我们需要不断学习新知识,跟上最新的技术进展。
我会经常参加相关的学术会议和培训课程,不断提升自己的专业水平。
总的来说,作为一名细胞培养实验员,我深知这项工作的重要性和挑战。
通过
不懈的努力和持续的学习,我相信我可以不断提升自己的能力,为细胞培养实验工作做出更大的贡献。
希望我的经验总结能够对其他同行有所帮助,也希望在未来的工作中能够继续发挥自己的专业优势,为科学研究做出更多的贡献。
细胞培养员工作总结范文(3篇)
第1篇一、前言细胞培养技术作为生物技术领域的基础性技术,在医学、生物学、制药等多个领域发挥着重要作用。
作为细胞培养员,我在过去的工作中,不仅积累了丰富的实践操作经验,也深刻体会到了细胞培养技术在科研和产业中的重要性。
现将我的工作总结如下:一、工作内容1. 细胞培养操作(1)细胞复苏:按照标准操作流程,对冻存细胞进行复苏,确保细胞活力。
(2)细胞传代:根据细胞生长状态,进行细胞传代,保证细胞数量。
(3)细胞冻存:将细胞按照一定比例分装,进行冻存,以便后续实验需求。
(4)细胞培养条件调控:控制温度、湿度、二氧化碳浓度等,确保细胞生长环境稳定。
(5)细胞培养质量监控:定期检测细胞活力、生长状态等,确保细胞质量。
2. 细胞实验(1)细胞实验设计:根据实验目的,设计实验方案,包括实验材料、实验方法、实验步骤等。
(2)细胞实验操作:按照实验方案,进行细胞实验操作,包括细胞接种、培养、处理、检测等。
(3)实验数据记录与分析:对实验数据进行记录、整理、分析,得出实验结论。
3. 实验室管理(1)实验室环境维护:保持实验室干净、整洁,确保实验环境安全。
(2)实验室仪器设备维护:定期检查、保养实验仪器设备,确保其正常运行。
(3)实验室耗材管理:合理采购、使用实验室耗材,降低成本。
二、工作心得1. 严谨的工作态度细胞培养员的工作要求严谨,从细胞复苏到实验操作,每一个环节都关系到实验结果的准确性。
因此,在工作中,我始终保持严谨的态度,严格按照操作规程进行实验,确保实验数据的可靠性。
2. 持续学习,提升技能细胞培养技术不断更新,作为细胞培养员,我深知自己需要不断学习,提升自己的技能。
在工作中,我积极参加各类培训,学习新的实验技术和方法,提高自己的业务水平。
3. 团队协作,共同进步细胞培养员的工作往往需要团队协作完成,我深知团队的力量。
在工作中,我与同事们相互支持、相互学习,共同解决实验中的问题,共同提高。
4. 注重细节,追求完美细胞培养实验过程中,细节决定成败。
细胞培养年度总结范文(3篇)
第1篇一、前言随着生物科学技术的不断发展,细胞培养技术在医学、生物学、药物研发等领域发挥着越来越重要的作用。
在过去的一年里,我国细胞培养技术取得了显著成果,为我国生物科技事业的发展做出了重要贡献。
现将本年度细胞培养工作总结如下:一、工作回顾1. 技术研究与创新(1)成功研发了新型细胞培养支架,提高了细胞贴壁生长能力,为细胞培养提供了更好的条件。
(2)优化了细胞培养培养基配方,提高了细胞生长速度和稳定性。
(3)创新了细胞培养方法,实现了细胞在高密度培养条件下的稳定生长。
2. 项目实施(1)承担了多项国家级、省部级细胞培养相关科研项目,取得了良好的研究成果。
(2)与国内外知名高校、科研院所建立了良好的合作关系,共同开展细胞培养技术研究。
(3)积极参与国内外学术交流活动,推广我国细胞培养技术。
3. 人才培养与团队建设(1)组织开展了细胞培养技术培训,提高了团队成员的专业技能。
(2)选拔优秀人才参加国内外学术会议,拓宽了团队成员的视野。
(3)加强团队内部沟通与协作,形成了良好的团队氛围。
二、工作亮点1. 成功培养了多种细胞系,为我国生物科技事业提供了丰富的细胞资源。
2. 在细胞培养技术领域取得了一系列创新成果,为相关研究提供了有力支持。
3. 培养了一批高素质的细胞培养技术人才,为我国生物科技事业的发展奠定了基础。
三、存在问题及改进措施1. 存在问题(1)细胞培养技术设备更新换代较慢,影响实验结果的准确性。
(2)部分细胞培养技术人才储备不足,制约了细胞培养技术的发展。
(3)细胞培养技术在国际竞争中的地位有待提高。
2. 改进措施(1)加大资金投入,更新细胞培养技术设备,提高实验水平。
(2)加强人才培养,提高细胞培养技术人才的整体素质。
(3)积极参与国际合作,提升我国细胞培养技术在国际竞争中的地位。
四、展望展望未来,细胞培养技术在医学、生物学、药物研发等领域将发挥更加重要的作用。
我们将继续努力,不断提高细胞培养技术水平,为我国生物科技事业的发展贡献力量。
细胞培养个人工作总结
细胞培养个人工作总结在过去的几个月中,我一直在实验室进行细胞培养工作,并取得了一些令人满意的成果。
在这段时间里,我克服了很多挑战,积累了许多宝贵的经验,我认为有必要进行一次个人工作总结。
首先,我在细胞培养方面取得了一定的技术进步。
我熟练掌握了细胞培养的基本操作流程,包括细胞传代、细胞分离和细胞冻存等技术。
我还学会了如何对细胞进行鉴定和检测,确保它们的健康和纯度。
其次,我在实验室管理和协作方面也有所提高。
我学会了如何合理安排实验时间,避免交叉污染和实验失败。
我还跟实验室的同事们建立了良好的合作关系,我们互相学习,共同进步,取得了很好的研究成果。
最后,我在实验设计和结果分析方面也有了不小的进步。
通过参与实验方案的设计和实施,我积累了丰富的实验经验,提高了自己的科研水平。
同时,我还学会了如何正确地分析实验结果,总结经验教训,不断完善自己的工作。
总的来说,这段时间的细胞培养工作对我来说是一次宝贵的经历。
通过努力学习和实践,我取得了一些成绩,也积累了一些经验。
我相信在未来的工作中,我会继续努力,不断提高自己的专业能力,为科研事业贡献我的一份力量。
在细胞培养的工作中,我还遇到了一些挑战和困难,但通过努力和不断的实践,逐渐克服了这些问题。
其中一个挑战是细胞培养的环境和条件对细胞生长的影响。
在实验室中,细胞培养需要严格控制温度、湿度和细菌的污染,以确保细胞的生长环境符合其生长的要求。
我通过认真观察和实验不断调整培养条件,最终找到了适合细胞生长的最佳条件。
另外一个挑战是细胞传代过程中的技术要求,细胞培养中需要进行细胞的传代操作,以维持细胞的生长状态。
但在传代过程中,需要非常细致和精确的操作,以避免引入细菌或其他微生物的污染,同时要确保细胞的生长和分裂情况。
在实验过程中,我通过不断的练习和借鉴他人的经验,逐渐掌握了传代操作的技术要领,取得了令人满意的效果。
在实验设计和结果分析方面,我也遇到了一些困难。
由于细胞培养实验的复杂性和实验结果的多样性,对实验结果的分析需要细致入微和严谨的态度。
细胞培养个人工作总结报告
细胞培养个人工作总结报告一、前言在过去的一年里,我有幸参与了细胞培养实验室的工作,在此期间,我不仅掌握了细胞培养的基本技能,还对细胞生物学有了更深入的了解。
在此,我将对我在细胞培养工作中的个人总结进行汇报,以期为今后的研究和工作提供借鉴。
二、工作内容1. 细胞培养基本技能的掌握在实验室中,我先后接受了细胞培养基本技能的培训,包括细胞的复苏、传代、悬浮、贴壁生长等。
通过对不同细胞系的培养,我熟练掌握了细胞培养的操作流程,并学会了使用细胞培养箱、显微镜等实验设备。
2. 细胞生物学实验操作在细胞培养的基础上,我参与了多项细胞生物学实验,如细胞增殖实验、细胞周期检测、 Western blot等。
通过这些实验,我对细胞生物学的研究方法有了更深入的了解,为今后的研究打下了坚实的基础。
3. 团队协作与交流在实验室工作中,我充分体会到团队协作的重要性。
与导师、同学间的密切配合,使我在解决问题和分享成果时取得了很大的进步。
此外,我还积极参加实验室的学术交流活动,拓宽了自己的学术视野。
三、工作收获1. 技能提升通过细胞培养工作的实践,我熟练掌握了细胞培养的基本技能,提高了自己的实验操作能力。
同时,我也学会了如何查阅文献、设计实验、分析数据,为今后的研究工作奠定了基础。
2. 学术成长在实验室的工作中,我参与了多项细胞生物学实验,积累了丰富的实验经验。
此外,我还学会了如何撰写实验报告、发表学术论文,为今后的学术生涯打下了基础。
3. 团队协作能力的培养在实验室中,我与导师、同学紧密合作,共同推进实验项目的进展。
通过团队协作,我学会了如何与他人沟通、解决问题,提高了自己的团队协作能力。
四、工作展望在今后的工作中,我将继续深入研究细胞生物学领域,提高自己的专业素养。
同时,我将充分发挥团队协作精神,与他人共同推进实验室的研究工作。
此外,我还计划积极参与国内外学术交流,拓宽自己的学术视野,为我国细胞生物学研究贡献力量。
五、结语通过一年的细胞培养工作,我不仅在技能和学术上取得了显著的进步,还培养了团队协作能力。
细胞培养员的工作总结
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员,我的工作涉及到细胞培养的各个方面,包括细胞的培养、传代、检测和记录等。
在这个过程中,我需要严格遵守实验室的操作规程,确保细胞培养的质量和稳定性。
首先,我需要准备培养基和其他所需的试剂和材料。
然后,我会从冷冻保存的
细胞中解冻并进行传代,以确保细胞的健康和活力。
在培养的过程中,我需要定期观察细胞的形态和生长状态,及时调整培养条件,以保证细胞的正常生长和增殖。
除了细胞的培养,我还需要进行细胞的检测和分析,包括细胞的纯度、活性和
稳定性等。
这些检测需要使用各种细胞生物学和分子生物学的实验技术,如细胞计数、细胞染色、PCR等。
通过这些检测,我可以及时发现细胞的异常情况,并采
取相应的措施进行处理。
在工作中,我也需要做好实验记录和数据整理工作,确保实验数据的准确性和
可靠性。
同时,我也需要与其他实验人员和研究人员进行合作,共同完成科研项目和实验任务。
总的来说,作为一名细胞培养员,我需要具备扎实的细胞生物学和实验技术的
知识,严格遵守实验室的操作规程,细心观察和记录实验数据,保证实验的顺利进行。
同时,我也需要具备团队合作的精神,与其他实验人员和研究人员进行良好的沟通和合作,共同完成科研任务。
希望通过我的努力,能为科学研究和医学发展做出一些贡献。
各种细胞培养 方案 总结
各种细胞培养方案总结细胞培养是现代生物科学中的重要技术手段之一,它可以用于研究细胞的生理、生化过程、疾病机制等方面。
下面将介绍几种常用的细胞培养方案。
1. 培养基的选择细胞培养基是细胞培养的基础,不同类型的细胞需要选择适合其生长和增殖的培养基。
常用的培养基有DMEM、RPMI 1640、MEM等。
此外,还可以根据需要添加生长因子、激素和抗生素等。
2. 细胞的传代细胞在培养过程中会不断增殖,当细胞密度达到一定程度时,需要进行细胞的传代。
传代时,首先将细胞从培养瓶中取出,用PBS洗涤,然后用胰蛋白酶等消化酶将细胞与培养瓶表面的细胞结合物消化,最后将细胞重新分装到新的培养瓶中。
3. 细胞的冻存细胞的冻存是为了长期保存细胞,以备后续实验使用。
冻存前,需要将细胞用冷冻保护剂进行保护,然后将细胞悬液分装到冻存管中,放入液氮中进行冷冻保存。
4. 细胞的鉴定细胞的鉴定是为了确认细胞的纯度和种属。
常用的鉴定方法有形态学观察、生长特性观察、免疫细胞化学染色等。
5. 细胞的感染细胞培养过程中,常常需要感染细胞以进行病毒或细菌相关的实验。
感染时,可以将病毒悬液或细菌悬液添加到培养基中,与细胞共同培养一段时间,观察感染效果。
6. 细胞的转染细胞转染是将外源基因导入细胞中的过程。
常用的转染方法有磷酸钙共沉淀法、电穿孔法、脂质体转染法等。
7. 细胞的分化诱导细胞分化诱导是将未分化的细胞转变为特定细胞类型的过程。
常用的分化诱导方法有添加特定培养因子、改变培养基成分等。
8. 细胞的凋亡检测细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式,常用于研究细胞生命周期、疾病发生机制等。
常用的凋亡检测方法有流式细胞术、DNA凝胶电泳等。
以上是几种常用的细胞培养方案的介绍。
在实际应用中,我们需要根据具体实验目的和要求选择合适的方案,并严格按照操作规程进行操作,以保证实验的准确性和可靠性。
细胞培养技术的不断发展和完善,为细胞生物学和医学研究提供了重要的工具和手段。
细胞培养_年度总结范文(3篇)
第1篇一、前言在过去的一年里,我国细胞培养技术取得了显著的进步,不仅在基础研究方面取得了丰硕成果,而且在临床应用上也取得了重要突破。
本年度总结旨在回顾过去一年的工作,总结经验,分析不足,为下一年的工作提供参考。
二、年度工作回顾(一)基础研究方面1. 细胞培养技术优化与创新本年度,我们针对传统细胞培养技术存在的不足,开展了一系列的优化与创新工作。
主要包括:(1)开发新型细胞培养基,提高细胞生长速度和活力;(2)改进细胞培养设备,提高细胞培养的稳定性和安全性;(3)优化细胞传代方法,降低细胞污染风险。
2. 细胞模型构建与应用本年度,我们成功构建了多种细胞模型,包括肿瘤细胞模型、神经细胞模型、心肌细胞模型等。
这些细胞模型在基础研究、药物筛选、疾病机制研究等方面发挥了重要作用。
3. 细胞培养相关基础研究本年度,我们围绕细胞培养技术开展了多项基础研究,包括细胞信号传导、细胞周期调控、细胞凋亡等。
这些研究成果为细胞培养技术的进一步发展奠定了基础。
(二)临床应用方面1. 细胞治疗技术发展本年度,我国细胞治疗技术取得了显著进展,包括:(1)干细胞移植治疗血液系统疾病;(2)间充质干细胞治疗骨关节疾病;(3)免疫细胞治疗肿瘤。
2. 细胞治疗临床试验本年度,我们积极参与了多项细胞治疗临床试验,包括干细胞移植、免疫细胞治疗等。
这些临床试验为细胞治疗技术的临床应用提供了有力支持。
(三)人才培养与交流1. 人才培养本年度,我们培养了一大批细胞培养领域的专业人才,包括本科生、研究生和博士后。
这些人才为我国细胞培养技术的发展提供了有力支持。
2. 学术交流本年度,我们积极参加国内外学术交流活动,与国内外同行分享研究成果,拓展学术视野。
三、年度工作亮点(一)研究成果丰硕本年度,我们共发表高水平论文50余篇,其中SCI论文30余篇。
这些研究成果为我国细胞培养技术的发展提供了有力支持。
(二)人才培养成果显著本年度,我们培养的本科生、研究生和博士后在国内外学术竞赛中取得了优异成绩。
细胞培养大总结范文
细胞培养大总结范文细胞培养是一种在体外条件下培育和繁殖细胞的技术,它已成为生物学、医学和药物研发的重要工具。
通过细胞培养,研究人员可以对细胞的生理活动、生长和分化等过程进行研究。
在本文中,我们将对细胞培养的步骤、技术和应用进行总结。
细胞培养的步骤主要包括:细胞准备、培养液制备、细胞种植、培养和观察。
首先,研究人员从动物或植物组织中获得细胞样本,并通过离心等方法将细胞分离出来。
然后,培养基是细胞培养中必不可少的组成部分,它提供了细胞所需的营养物质和环境因子。
接下来,将细胞种植在预先准备好的培养皿或培养瓶中,在适当的温度和湿度条件下进行培养。
在培养的过程中,需要定期更换培养基,以保持细胞的正常生长和代谢。
最后,通过显微镜或其他方法对细胞进行观察和分析。
细胞培养中使用的培养基通常包括营养基、生长因子、抗生素和血清。
营养基是培养基中提供能量和物质的主要成分,常见的营养基有DMEM、RPMI-1640和MEM等。
生长因子是指能促进细胞增殖和分化的蛋白质,例如表皮生长因子(EGF)和基本纤维生长因子(bFGF)。
抗生素的添加有助于防止细菌和真菌的污染。
血清是一种重要的培养基补充物,其中含有细胞黏附蛋白、生长因子和其他生物活性物质。
细胞培养的技术包括原代培养、细胞系培养和细胞凋亡检测。
原代培养是从组织中直接分离的细胞进行的短期培养,通常使用酶消化的方法分离细胞,并将其种植在培养皿中。
细胞系培养是指长期培养和传代的细胞,如HEK293和HeLa细胞系。
细胞系培养可以提供大量的细胞用于实验和研究。
细胞凋亡是一种程序性细胞死亡,通过检测DNA片段化和细胞膜外翻等指标可以判断细胞是否发生凋亡。
细胞培养在多个领域中得到了广泛的应用。
在基础研究中,细胞培养可以用于探索细胞生理学、分子生物学和免疫学等领域。
研究人员可以通过调节培养条件和添加适当的生长因子来模拟体内环境,研究细胞的生长、分化和转化等过程。
在药物研发中,细胞培养可以用于药物筛选和毒理学研究。
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细胞培养技术总结
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1·培养环境的要求(切记无菌操作)
工作环境的处理
1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2. 实验用品以70 %酒精擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在台面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。
3. 小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45° 角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
吸管口切勿碰到容器瓶口
4. 工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒。
感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。
操作过程中,应避免引起aerosol 之产生,小心毒性药品,例如DMSO 及TPA 等,并避免尖锐针头之伤害等。
2·仪器设备的要求
定期检测下列项目:
CO2 钢瓶之CO2 压力。
CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。
无菌操作台内之airflow 压力,定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜,预滤网(300 小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。
水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750),定期更换水槽的水。
3·无菌处理
1)器具的无菌操作
试验用玻璃塑料用品清洗及其消毒灭菌
清洗:
a玻璃器皿的清洗(酸液由重铬酸钾,浓硫酸,蒸馏水配置)
浸泡—刷洗—浸酸—冲洗
b胶塞的清洗
刚买回的常含滑石粉等杂质,先用自来水冲洗后再按常规方法处理。
2%NaoH或洗衣粉煮沸10-20分钟---1%稀Hcl浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟—晾干备用
c塑料制品的清洗
2%NaoH浸泡过夜—自来水冲洗--5%稀Hcl浸泡30分钟—自来水和蒸馏水冲干备用。
2)消毒灭菌:
a物理消毒法(紫外线,湿热,烘干,过滤)含碳酸氢钠溶液要过滤,高压会分解,培养液、平衡盐溶液及其它需要灭菌的液体:121℃, 15 磅, 20 分钟;布类、玻璃制品、金属器械等物品:先121℃, 15 磅, 20 分钟,然后在烘箱中烘干;玻璃瓶:干热灭菌170℃,4小时
b化学消毒法(70%酒精,千分之一的新洁尔灭)
c抗生素:培养用液灭菌或预防培养物污染
3)无菌的操作技术
培养物的污染及控制
污染种类:
(1)细菌污染:培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。
污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡。
(2)真菌污染:培养细胞受真菌污染后,可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点,有的散在生长,培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中,有的呈链状排列。
(3)支原体污染:培养细胞受支原体污染后,部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢,部分细胞变圆,从瓶壁脱落。
但多数细胞污染后无明显变化,或略有变化,若不及时处理,还会产生交叉污染。
(4)病毒污染:尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。
因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。
(5)非同种细胞污染:
污染来源:
(1)不洁的动物组织标本:正常情况下组织来源是不带菌的,但由于取材不小心也会染菌,也有可能动物体本身带菌,不用浓的抗生素清洗,会导致培养污染。
(2)空气:如果无菌操作区与外界隔离不严,空气中会带菌。
其次,超净台使用过久,滤板堵塞也会污染。
工作时不带口罩外界气流过强会污染。
再者,南方空气潮湿,空气中容易带菌,操作不注意会染菌。
(3)清洗消毒:培养用液除菌不彻底,培养器具清洗消毒不彻底。
(4)操作不过关
4试剂及器材的准备
1)培养基 1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37 oC 水槽中温热。
2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine(谷氨酰胺)可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。
3. 粉末培养基配制(以1 升为例): 3.1. 细胞培养基通常须添加10 % 血清,因此粉末培养基之配制体积为900 ml,pH 为7.2 - 7.4。
NaHCO3 为另外添加,若将NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成pH之误差,或局部过碱。
因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH 易发生改变。
2)PBS:0.01M,PH=7.4的PBS配方,500ml.
Na2HPO4 0.575g;
NaH2PO4 0.148g;
Nacl 4.25g.
3)胰酶:对一般细胞0.25% 胰酶
4)水:新鲜配制的三蒸水或去离子水
5)细胞冻存液:培养基(无血清):血清:DMSO 比例7:2:1
DMSO常温避光保存,不能高温高压灭菌。
DMEM也不能高温高压,可以过虑除菌。
6)其他:HEPES液生物缓冲液,化学性质稳定,在PH7.2~7.6范围内,比NaHCO3缓冲液的缓冲能力更强。
7)培养器材:超净台、恒温培养箱、倒置显微镜、液氮储存罐、电热鼓风干燥箱、冰柜、电子天平、恒温水浴槽、离心机、压力蒸汽消毒器。
a玻璃器材:无菌室培养皿、滴流瓶、刻读吸管、离心管、培养瓶、烧杯、量筒、三角烧瓶
b塑料器材:多孔培养板、培养皿、培养瓶
c橡皮器材:橡皮制品(最好是硅制品)做各种瓶或试管的塞子、盖子。
d金属器材:剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头
e其他物品:纱布、注射器和针头
5.实验操作方法
1)细胞复苏:冻存复苏后的状态主要与冻存保护种类、浓度、以及细胞复苏方法和复苏后培养液中小血清浓度等有关。
二甲基亚砜是一种分子量小、非常强的溶解能力和非凡渗透能力的化学物质用最广泛的体外培养细胞冻存保护剂[7] , 其常用浓度为10%~20%,不同种属细胞的最适浓度也存在一定差别,例如,10%二甲基亚砜浓度对长期冻存K562细胞较为适宜。
2)细胞传代:细胞在原代培养1~4周后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,影响细胞的生长繁殖。
贴壁型细胞的传代:传代时需要用胰酶将细胞消化,使其从支持物上脱落,或用EDTA溶液与胰酶按1:1或1:2比例混合后联合使用。
过滤除菌后,小量分装,保
存与-20 ℃。
消化时吸去培养瓶内的培养液,加入适量的EDTA溶液与胰酶的混合液,以能覆盖细胞层为度,将培养瓶平放,37 ℃作用3~5 min,加入Hanks液,1 000 r/min离心5 min即可除去消化液,洗1~2次后加入完全培养液,计数,置培养皿或培养瓶中培养
悬浮型细胞的传代:传代时用吸管将细胞吹打均匀,特别是一些成团生长的细胞,应将细胞团块打散。
根据细胞生长状况的不同,用吸管将细胞悬液吸去适当的量,然后再加入完全培养液至原体积。
3)细胞冻存:传代培养的细胞, 如果暂时不用,, 可以冷冻保存,需要时再复苏。
冷冻前一日更换半量或全量培养液,观察细胞生长状态。
冷冻细胞时,所用的冷冻保存液需新鲜配制,在新鲜培养液中加入DMSO 至终浓度5%-10%,加入血清至终浓度20%,混合均匀即成冷冻保存液,室温待用。
将待保存的细胞离心(3000 转以下3~5min ),去除上清,加入适量冷冻保存液,混匀,分装于冷冻保存管中。
冷冻的方法有两种,一种是传统方法,按以下程序进行:4℃10min~-20℃30min~-80℃16~18 小时或隔夜,放入液氮长期保存。
另一种是程序降温法:用等速降温机以~1-3℃/min 的速度由室温降至-120℃,放于液氮罐长期保存。
注意事项
1、实验前未检查器械和液体是否污染
2、操作者未带口罩帽子,呼出空气中含细菌和支原体
3、培养瓶未用75%酒精擦拭和灼烧
4、操作不当吸管或培养用品接触到污染物,如皮肤,瓶壁
5、操作者说话大声,来回走动,扬起灰尘。
实验结果。