系统进化树绘制
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MEGA:系统进化树绘制
1.从测序公司获取可以用TXT格式打开的菌株16SrDNA序列文本信息;
2.打开NCBI网站(https:///),依次点击BlAST—>Microbes,进入最下图所示界面。
3.将序列信息粘贴到黄色文本框内,点击BLAST按钮,进入比对结果页面,根据所需选择20条(参考)相似序列信息,点击Download,下载FASTA(aligned sequences)格式序列信息到电脑;
4.将测序所得序列信息与Blast所得序列信息合并到同一个Text文件中;
5.打开MEGA软件(以MEGA
6.06为例),点击Align—>Edit/Build Alignment,选择Creat a new alignment并点击OK,点击DNA,进入最下图界面,最大化子界面;
6.点击下图红线圈出的图标或通过Edit—>Insert Sequence From File Ctrl+I,进入第二个图所示界面,将文件格式由ABI改为Text,选择所选序列信息文件,点击打开;
7.按住Shift,鼠标点击首条和最后一条多余的序列信息,即可选择某一需要删除的序列信息区域,点击Delete删除多余序列信息,并编辑各序列名称,点击保存编辑好的序列信息;
8.点击Data—>Phylogenetic Analysis(系统进化分析),点击“Yes”完成系统进化分析;
9.回到MEGA主页面,依次点击Analysis—>Phylogeny—>Construct/Test Neighbor-Joining Tree...,在跳出的界面中点击“Yes”,接着将跳出页面中的Test of Phylogeny项的None改为Bootstrap method,点击Compute,系统完成运算,生成系统进化树;
10.依次点击Image—>Save as PDF file,保存成PDF格式系统发育树图谱。