实验一细胞凝集反应 和细胞膜的渗透性解析
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未溶血
溶血
【实验结果】
• 1.土豆凝集素能使鸡红细胞凝集,PBS对 照液中红细胞分散均匀
未凝血
凝血
2.细胞膜渗透性实验结果比较和分 析
• 【实验报告】 • 1.简图表示凝集素使血细胞凝集原理 • 2.怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确 定物质进入细胞的速度?物质进入细胞的 快慢有什么规律? • 3、记录观察到的现象,并列表对实验结果 进行分析和比较
• 2. 细胞膜的渗透性
• 在低渗液中,红细胞很快吸水胀裂,称为 溶血。在等渗液中,由于有些溶质会进入 红细胞内、引起细胞渗透压升高,细胞也 会吸水胀裂,由于各种物质透入细胞的速 度不同,溶血的时间不同
三、实验用品
• 1. 器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、
试管、试管架 • 2. 材料: 土豆块茎 • 3. 试剂: 2%鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、0.85%生理 盐水、2%鸡红细胞、PBS缓冲液、Alsever溶液、 • 等渗液:0.17 mol/L氯化钠、0.17 mol/L氯化铵、0.17 mol/L醋酸胺、 0.17 mol/L硝酸钠、0.12 mol/L草酸铵、0.12 mol/L硫酸钠、0.32
mol/L葡萄糖、.0.32 mol/L甘油、.0.32 mol/L乙醇、00.32 mol/L丙酮
• 低渗液 :0.032 mol/L葡萄糖 0.017 mol/L 氯化钠
四、实验步骤
• (一) 细胞凝集反应
• 1. 2%鸡血红细胞悬液制备
• 新鲜鸡血加抗凝剂,生理盐水洗5次,每次 2000r/min,离心5min,按红细胞压积用生理盐水 配成2%鸡血红细胞悬液。(为什么) • 2. 土豆凝集素制备 • 土豆2克,加10ml PBS,浸泡2h。
实验一 细胞凝集反应
和细胞膜的渗透性
【课前预习】
• 1.土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的 原理? • 2.在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态 吗? • 3.预测红细胞在各种溶液中的溶血速度?
一、实验目的
• 1 了解细胞膜的表面结构; • 2了解细胞糖被的特点和功能,了解植物凝 集素的作用 • 3了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞 的速度
• 【实验报告】 • 1.简图表示凝集素使血细胞凝集原理 • 2.怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确 定物质进入细胞的速度?物质进入细胞的 快慢有什么规律?
二、实验的原理
• 1. 细胞凝集反应
• 细胞膜表面的有分支状糖外被,细胞间的联系、细胞的生 长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支 状糖分子有关。凝集素(lectin)是一类含糖并能与糖分 子专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的 作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连 接,在细胞表面间形成“桥”的结果,ຫໍສະໝຸດ Baidu入与凝集素互补 的糖可以抑制细胞的凝集。
– 土豆凝集素1滴、2%鸡血红细胞液1滴。
– 载玻片上混匀,静置20min。
• 3. 细胞凝集反应
• 4. 对照 分别用肉眼观察和显微镜下观察
– PBS1滴、2%鸡血红细胞液1滴。
• (二)细胞膜的渗透性 • 1、50 %的鸡红细胞悬液的制备 • 新鲜鸡血加抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2000r/min,离 心5min,按红细胞压积用生理盐水配成50%鸡血红细胞 悬液。 • 1. 溶血现象的观察 • 试管3支: • 分别加入0.032 mol/L葡萄糖 0.017 mol/L 氯化钠、水 10ml 再加入鸡血红细胞液1ml;观察现象 结果溶血,溶液变透明。 • 2. 红细胞对不同物质的渗透性 • (1)取一只试管加入0.17 mol/L氯化钠10ml ,再加入鸡 血红细胞液1ml;观察现象颜色变化 • (2)分别在以下几种等渗液中进行实验,步骤同上 • 0.17 mol/L氯化铵、0.17 mol/L醋酸胺、0.17 mol/L硝酸钠、 0.12 mol/L草酸铵、0.12 mol/L硫酸钠、0.32 mol/L葡萄 糖、.0.32 mol/L甘油、.0.32 mol/L乙醇、00.32 mol/L丙酮