实验3
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培养基：普通平板 方法：药片扩散法
按照无菌操作原则，用接种环取少量纯培养物 接种于平板上，反复交叉密集划线
A
C
B D
镊子灭菌，冷却，分别取4种药片，平贴于平板上，轻轻压实
药片间距>24mm、药片距平板边缘>15mm 静置15min，平板倒置培养16-18h，观察结果
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
纯种培养结果观察
※ 定向鉴定
甘露醇发酵实验
血浆凝固酶实验
药敏试验
致病肠道杆菌的分离鉴定
纯种培养结果观察 ※ 因子血清实验
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
化脓性球菌的分离鉴定
可疑菌落纯培养结果
普通斜面培养基 均匀一致的湿润菌苔
实验三
化脓性球菌和致病性肠杆菌的
分离鉴定 (三)
化脓性球菌的分离鉴定
实验流程-G+球菌
涂片染色
(革兰染色)
形态、结构、排列、染色性 (油浸镜) 菌落特点
标本 (脓汁) 分离培养
(血平板)
观察细菌生长状态
溶血性
色素情况 涂片染色镜检
(革兰染色)
挑选可疑菌落
Baidu Nhomakorabea
纯培养
(斜面培养基)
定向鉴定
药敏试验
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
化脓性球菌的分离鉴定
甘露醇发酵实验
培养基：甘露醇发酵管 接种工具：接种针 方法
灭菌接种针 从斜面沾取菌落 接种至培养基液面下 灭菌接种针 培养18-24h
血浆凝固酶实验
玻片凝集试验 方法
致病性肠道杆菌的分离鉴定
纯培养结果观察
1#：接种前 2#-3#：埃希菌 4#：志贺菌或某些沙门菌 5#：某些沙门菌
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
致病性肠道杆菌的分离鉴定
因子血清鉴定
步骤
鉴定属：A-E多价血清 鉴定组：A-E单价0抗体血清
血浆凝固酶试验(+) 甘露醇发酵试验：下次课观察结果 药敏试验：下次课观察结果
致病肠道杆菌的分离鉴定(三)
生化反应：葡萄糖发酵(+)、乳糖发酵(+)、H2S(+) 因子血清试验：伤寒沙门菌 致病性肠杆菌的分离鉴定程序
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
CTX—头孢噻圬
K—卡那霉素 AN—阿米卡星 TM—妥布霉素 N—新霉素（无字药片） FT—呋喃妥因（无字） CX30—头孢氨苄 PB300—多粘霉素B AM/SU—同8
P 10—青霉素
AMC/CA—澳格门丁
SMX—磺胺甲基异恶唑 CM—克林霉素 TM—妥布霉素 OFL—氧氟沙星
AM/SU—氨苄青霉素/青霉烷砜
致病性肠道杆菌的分离鉴定
分离鉴定程序
菌落大小
观察菌落特征 标本 (粪便) 分离培养
(SS平板)
菌落颜色 透明程度 涂片染色镜检
(革兰染色)
挑选可疑菌落
纯培养
(双糖铁培养基)
生化反应 因子血清鉴定
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
实验内容
化脓性球菌的分离鉴定
玻片划分两格 灭菌接种环 分别取盐水或兔血浆于两格内 取待检菌，盐水中研磨 灭菌接种环 取待检菌，兔血浆中研磨 摇动玻片，2min内观察结果
结果判定
阳性：蓝→黄 致病性葡萄球菌
结果判断
阳性：出现凝集 致病性葡萄球菌常(+)
化脓性球菌的分离鉴定
药敏试验
生理盐水 A-E多价血清
O2
O4
Hd
O6
O9
Hgm
O3
鉴定种：H抗体血清
注意事项
血清量足够，避免干燥
每格研磨后，灭菌接种环，避免交叉污染 2min内观察结果
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
小结
化脓性球菌的分离鉴定 (三)
药物名称
S—链霉素 FT—呋喃妥因 AM—氨苄西林 CB—羧苄青霉素 OX—苯唑西林 AZT—氨曲南 NOR—诺氟沙星 洁—妥布霉素 灭—灭滴灵
PIP—哌拉西林
CXM—头孢呋新 RA—利复平 TM—妥布霉素 CRO—头孢曲松
GM—庆大霉素
CIP—环丙沙星
链—链霉素
氨—氨苄青霉素 B0.04—杆菌肽 N—新霉素
思考题
致病性葡萄球菌的定向鉴定试验是什么？
某患者疑似伤寒沙门菌感染，应该用哪些试验确
定其感染的病原体？
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
按照无菌操作原则，用接种环取少量纯培养物 接种于平板上，反复交叉密集划线
A
C
B D
镊子灭菌，冷却，分别取4种药片，平贴于平板上，轻轻压实
药片间距>24mm、药片距平板边缘>15mm 静置15min，平板倒置培养16-18h，观察结果
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纯种培养结果观察
※ 定向鉴定
甘露醇发酵实验
血浆凝固酶实验
药敏试验
致病肠道杆菌的分离鉴定
纯种培养结果观察 ※ 因子血清实验
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化脓性球菌的分离鉴定
可疑菌落纯培养结果
普通斜面培养基 均匀一致的湿润菌苔
实验三
化脓性球菌和致病性肠杆菌的
分离鉴定 (三)
化脓性球菌的分离鉴定
实验流程-G+球菌
涂片染色
(革兰染色)
形态、结构、排列、染色性 (油浸镜) 菌落特点
标本 (脓汁) 分离培养
(血平板)
观察细菌生长状态
溶血性
色素情况 涂片染色镜检
(革兰染色)
挑选可疑菌落
Baidu Nhomakorabea
纯培养
(斜面培养基)
定向鉴定
药敏试验
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
化脓性球菌的分离鉴定
甘露醇发酵实验
培养基：甘露醇发酵管 接种工具：接种针 方法
灭菌接种针 从斜面沾取菌落 接种至培养基液面下 灭菌接种针 培养18-24h
血浆凝固酶实验
玻片凝集试验 方法
致病性肠道杆菌的分离鉴定
纯培养结果观察
1#：接种前 2#-3#：埃希菌 4#：志贺菌或某些沙门菌 5#：某些沙门菌
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致病性肠道杆菌的分离鉴定
因子血清鉴定
步骤
鉴定属：A-E多价血清 鉴定组：A-E单价0抗体血清
血浆凝固酶试验(+) 甘露醇发酵试验：下次课观察结果 药敏试验：下次课观察结果
致病肠道杆菌的分离鉴定(三)
生化反应：葡萄糖发酵(+)、乳糖发酵(+)、H2S(+) 因子血清试验：伤寒沙门菌 致病性肠杆菌的分离鉴定程序
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
CTX—头孢噻圬
K—卡那霉素 AN—阿米卡星 TM—妥布霉素 N—新霉素（无字药片） FT—呋喃妥因（无字） CX30—头孢氨苄 PB300—多粘霉素B AM/SU—同8
P 10—青霉素
AMC/CA—澳格门丁
SMX—磺胺甲基异恶唑 CM—克林霉素 TM—妥布霉素 OFL—氧氟沙星
AM/SU—氨苄青霉素/青霉烷砜
致病性肠道杆菌的分离鉴定
分离鉴定程序
菌落大小
观察菌落特征 标本 (粪便) 分离培养
(SS平板)
菌落颜色 透明程度 涂片染色镜检
(革兰染色)
挑选可疑菌落
纯培养
(双糖铁培养基)
生化反应 因子血清鉴定
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
实验内容
化脓性球菌的分离鉴定
玻片划分两格 灭菌接种环 分别取盐水或兔血浆于两格内 取待检菌，盐水中研磨 灭菌接种环 取待检菌，兔血浆中研磨 摇动玻片，2min内观察结果
结果判定
阳性：蓝→黄 致病性葡萄球菌
结果判断
阳性：出现凝集 致病性葡萄球菌常(+)
化脓性球菌的分离鉴定
药敏试验
生理盐水 A-E多价血清
O2
O4
Hd
O6
O9
Hgm
O3
鉴定种：H抗体血清
注意事项
血清量足够，避免干燥
每格研磨后，灭菌接种环，避免交叉污染 2min内观察结果
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU
小结
化脓性球菌的分离鉴定 (三)
药物名称
S—链霉素 FT—呋喃妥因 AM—氨苄西林 CB—羧苄青霉素 OX—苯唑西林 AZT—氨曲南 NOR—诺氟沙星 洁—妥布霉素 灭—灭滴灵
PIP—哌拉西林
CXM—头孢呋新 RA—利复平 TM—妥布霉素 CRO—头孢曲松
GM—庆大霉素
CIP—环丙沙星
链—链霉素
氨—氨苄青霉素 B0.04—杆菌肽 N—新霉素
思考题
致病性葡萄球菌的定向鉴定试验是什么？
某患者疑似伤寒沙门菌感染，应该用哪些试验确
定其感染的病原体？
Jia-Ye Wang. Department of Microbiology, HMU