秀丽隐杆线虫体内脂肪染色方法的探究
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和 植 物 没 有 危 害 ｌ 。 Ｃ ｅｅ ａ ｓ成 体 内 每 一 个 细 胞 ２ ］ ． ｌｇ ｎ
１－０ ｎ ５３ ｍｉ，然 后 置 于 ８ ℃ 冰 箱 中 冷 冻 １ ｒｉ， 于 ０ ５ ｎ ａ ４ ℃水 浴 中迅 速 解 冻 。低 速 离 心 １ ｎ ３ ｍｉ ，弃 上 清 。
的形 成都 可 以被追踪 ，而且其 胚胎 发育 过程 中细 胞 分裂 、分 化 以及 细胞 的死 亡具 有 高度 的程序 性 ， 因 此 Ｃ ｅｅ ａ ｓ已经 成 为 现代 发 育 生 物 学 、遗 传 学 、 ．ｌ ｎ ｇ
乙 醇 和 丙 酮 ， 目前 被 认 为 是 最 优 良 的 脂 肪 染 色 染
经过 多次 试验 探索 发现 ，在 油 红 Ｏ 染 色 之前 ，
需 要 将 ｌ 多 聚 甲 醛 固 定 液 和 Ｐ Ｓ 冲 洗 液 离 心 弃 Ｂ 去 ，否 则 会 产 生 沉 淀 杂 质 而 影 响 镜 下 观 察 。通 过 分 别设 计对 照 组 ：① 不 用 １ Ｔ ｉ ｎＸ １０ ｒ ｏ 一０ ，仅 用 油 ｔ
探 索性 的使 用 了 １ Ｔｒ ｏ 一 ０ ，利 用 其 透 过 作 ｉ ｎＸ １０ ｔ 用 使油 红 ０ 更 好 的对 虫 体 着 色 ，得 到 了较 好 的效
果 ，为 以 后 研 究 线 虫 脂 肪 调 控 奠 定 了 基 础 。
材 料 和 方 法
Ｘ １ ０和油 红 Ｏ共 同染 色 ３ ｍｉ ，Ｐ Ｓ冲洗后 观察 ０ ０ ｎ Ｂ
秀 丽 隐 杆 线 虫 ， 由 抗 衰 老 中 草 药 安
徽 省工程 技术 研 究 中心 提 供 ；大 肠 杆 菌 ＯＰ ０ Ｓ ，作 为 秀丽 隐杆线 虫 的食饵 。
红 Ｏ 处 理 ，染 色 ３ ｍｉ ０ ｎ、② 用 １ Ｔｒｔ ｎ Ｘ ０ ｉ １ ０处 ｏ
料 ］ ，在 脂 肪 内能 高 度 溶 解 ，从 而 染 色 ，能 保 存
组 织 中 的 脂 肪 滴 ，染 色 效 果 好 ，颜 色 鲜 红 。本 实 验
理 １ ｍｉ ，再 用 油 红 。 染 色 ３ ｍｉ ５ ｎ ０ ｎ和 ③ １ Ｔ ｉ ｎ ｒ ｏ ｔ
拍 照 （ 图 １ 图 ２和 图 ３ ， 相 比之 下 ，图 ３可 显 如 、 ） 示 出 明 显 的 红 色 脂 滴 ，表 明 １ Ｔ ｉ ｎ Ｘ １ ０和 油 ｒ ｏ 一０ ｔ 红 。 浸 泡 ３ ｍｉ 处 理 染 色 效 果 较 好 ，便 于 观 察 。 ０ ｎ的
讨 论
１ ．材 料
第 １ ９卷 第 ６期 ２ｌ Ｏ ０年 １ ２月
中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ Ｊ Ｅ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ Ｓ ＨＩ ＴＯＣＨＥＭ Ｉ ＳＴＲＹ ＡＮＤ ＣＹＴＯＣＨＥＭ Ｉ ＴＲＹ Ｓ
Ｖ０１ ９． Ｏ ．１ Ｎ ．６ Ｄｅ ｅ ｂ ｒ ２ ０ ｃ ｍ ｅ ． ０１
［ 图分类号］ 中 Ｒ３ ９ ２ ［ 献标识码） 文 Ａ ＤＯＩ １ ． ８ ０ ｚ ｚｈ ． ０ ０ ０ ． １ ： ０ ３ ７ ／ｇ ｚ ｘ ２ １ ． ６ ０ ７
秀 丽 隐 杆 线 虫 （ ． ｌｇ ｎ ） 属 于 线 形 动 物 门 、 Ｃ ｅ ａｓ ｅ 线 虫 纲 动 物 ，其 成 虫 体 长 １ ｍｍ ， 身 体 透 明 ， 生 活
油 红 ｏ 、异 丙 醇 、 １ Ｔｒｔｎ Ｘ一 。 。 ％ ｉ １ Ｏ ｏ
３ ．方法 用 Ｍ ９缓 冲 液将 秀丽 隐杆线 虫 洗至
１ ５ ｌ的离 心 管 中 ，在 １ 多 聚 甲醛 室 温 或 ４ 固 定 ．肚 ℃
在 世界各 地 的泥土 中，以大肠 杆 菌为食 饵 ，容易 人 工 养殖 ，生命 周期 （ｉ ｙ ｌ） 短ｌ ，对 人 、动 物 １ｅｃｃｅ ｆ 】 ］
秀 丽 隐 杆 线 虫 体 内脂 肪 染 色 方 法 的 探 究
徐林 丽 高 学娟 屈 长 青
（ 阜 阳师 范 学 院生 命 科 学 学 院 ，安 徽 ； 抗 衰 老 中草 药 安 徽 省 工 程 技 术 研 究 中心 ，安 徽 ２ ６ ４ ） ３０ １
［ 要］ 近几 十年 来 ，秀丽 隐杆 线 虫 （ ａ ｎ ｒ ａ ｄｔ ｌ ａ ｓ 因其 结 构 简单 、通 体 透 明 、 生命 周 期 短 和 易 于 培 养 ， 摘 Ｃ ｅ ｏｈ ｂ ｉ ｓｅｅ ｎ ） ｉ ｇ 常 作 为 一种 模 式 生 物 被 广 泛用 于 现 代 发 育 生 物 学 、遗 传 学 、抗 衰 老 和 及 脂 肪 调 控 等 方 面 的 研 究 。本 文 探 索 了一 种 对 秀 丽 隐 杆线 虫 体 内脂 肪 的油 红 Ｏ 染 色 方 法 ，利 用 １ Ｔｒ ｏ 一０ ｉ ｎ Ｘ １ ０的 透 过 作 用 ，线 虫 体 内脂 滴 可 被 油 红 ０更 好 的着 色 ，镜 下 观 察 ｔ 颜 色鲜 红 ，染 色 效 果 较 好 ，为 以后 研 究 线 虫 脂 肪 调 控 奠定 了 基 础 。 ［ 键词］ 秀丽隐杆线虫 ； 关 成 体 ；染 色
抗 衰 老 和 基 因 组 学 研 究 的 重 要 模 式 生 物 ｌ 。 对 线 ３ ］
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
用 Ｐ Ｓ冲洗 ３次 。弃 去 Ｐ Ｓ Ｂ Ｂ ，用 １ Ｔｒ ｏ 一∞ ｉ ｎＸ １ ｔ
、
异 丙 醇 油 红 Ｏ 溶 液 浸 泡 ３ ｍｉ 。 用 Ｐ Ｓ 冲 洗 ３ ０ ｎ Ｂ
次 。用 异 丙 醇 镜 下 分 化 至 清 晰 ，观 察 拍 照 。
结 果
虫成 体 的染 色便 于对 其镜 下观 察 ，利用 特异性 染 色 试剂 对各种 组织 成分 着色 ，可 以对组 织 成分准 确定 位 ，为许 多 实 验 研 究 提 供 了 便 利 。油 红 ０ （ ｌ Ｏｉ Ｒ ｄＯ ）是 一种 油溶 性偶 氮染料 ，易溶 于苯 ，溶 于 ｅ
１－０ ｎ ５３ ｍｉ，然 后 置 于 ８ ℃ 冰 箱 中 冷 冻 １ ｒｉ， 于 ０ ５ ｎ ａ ４ ℃水 浴 中迅 速 解 冻 。低 速 离 心 １ ｎ ３ ｍｉ ，弃 上 清 。
的形 成都 可 以被追踪 ，而且其 胚胎 发育 过程 中细 胞 分裂 、分 化 以及 细胞 的死 亡具 有 高度 的程序 性 ， 因 此 Ｃ ｅｅ ａ ｓ已经 成 为 现代 发 育 生 物 学 、遗 传 学 、 ．ｌ ｎ ｇ
乙 醇 和 丙 酮 ， 目前 被 认 为 是 最 优 良 的 脂 肪 染 色 染
经过 多次 试验 探索 发现 ，在 油 红 Ｏ 染 色 之前 ，
需 要 将 ｌ 多 聚 甲 醛 固 定 液 和 Ｐ Ｓ 冲 洗 液 离 心 弃 Ｂ 去 ，否 则 会 产 生 沉 淀 杂 质 而 影 响 镜 下 观 察 。通 过 分 别设 计对 照 组 ：① 不 用 １ Ｔ ｉ ｎＸ １０ ｒ ｏ 一０ ，仅 用 油 ｔ
探 索性 的使 用 了 １ Ｔｒ ｏ 一 ０ ，利 用 其 透 过 作 ｉ ｎＸ １０ ｔ 用 使油 红 ０ 更 好 的对 虫 体 着 色 ，得 到 了较 好 的效
果 ，为 以 后 研 究 线 虫 脂 肪 调 控 奠 定 了 基 础 。
材 料 和 方 法
Ｘ １ ０和油 红 Ｏ共 同染 色 ３ ｍｉ ，Ｐ Ｓ冲洗后 观察 ０ ０ ｎ Ｂ
秀 丽 隐 杆 线 虫 ， 由 抗 衰 老 中 草 药 安
徽 省工程 技术 研 究 中心 提 供 ；大 肠 杆 菌 ＯＰ ０ Ｓ ，作 为 秀丽 隐杆线 虫 的食饵 。
红 Ｏ 处 理 ，染 色 ３ ｍｉ ０ ｎ、② 用 １ Ｔｒｔ ｎ Ｘ ０ ｉ １ ０处 ｏ
料 ］ ，在 脂 肪 内能 高 度 溶 解 ，从 而 染 色 ，能 保 存
组 织 中 的 脂 肪 滴 ，染 色 效 果 好 ，颜 色 鲜 红 。本 实 验
理 １ ｍｉ ，再 用 油 红 。 染 色 ３ ｍｉ ５ ｎ ０ ｎ和 ③ １ Ｔ ｉ ｎ ｒ ｏ ｔ
拍 照 （ 图 １ 图 ２和 图 ３ ， 相 比之 下 ，图 ３可 显 如 、 ） 示 出 明 显 的 红 色 脂 滴 ，表 明 １ Ｔ ｉ ｎ Ｘ １ ０和 油 ｒ ｏ 一０ ｔ 红 。 浸 泡 ３ ｍｉ 处 理 染 色 效 果 较 好 ，便 于 观 察 。 ０ ｎ的
讨 论
１ ．材 料
第 １ ９卷 第 ６期 ２ｌ Ｏ ０年 １ ２月
中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ Ｊ Ｅ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ Ｓ ＨＩ ＴＯＣＨＥＭ Ｉ ＳＴＲＹ ＡＮＤ ＣＹＴＯＣＨＥＭ Ｉ ＴＲＹ Ｓ
Ｖ０１ ９． Ｏ ．１ Ｎ ．６ Ｄｅ ｅ ｂ ｒ ２ ０ ｃ ｍ ｅ ． ０１
［ 图分类号］ 中 Ｒ３ ９ ２ ［ 献标识码） 文 Ａ ＤＯＩ １ ． ８ ０ ｚ ｚｈ ． ０ ０ ０ ． １ ： ０ ３ ７ ／ｇ ｚ ｘ ２ １ ． ６ ０ ７
秀 丽 隐 杆 线 虫 （ ． ｌｇ ｎ ） 属 于 线 形 动 物 门 、 Ｃ ｅ ａｓ ｅ 线 虫 纲 动 物 ，其 成 虫 体 长 １ ｍｍ ， 身 体 透 明 ， 生 活
油 红 ｏ 、异 丙 醇 、 １ Ｔｒｔｎ Ｘ一 。 。 ％ ｉ １ Ｏ ｏ
３ ．方法 用 Ｍ ９缓 冲 液将 秀丽 隐杆线 虫 洗至
１ ５ ｌ的离 心 管 中 ，在 １ 多 聚 甲醛 室 温 或 ４ 固 定 ．肚 ℃
在 世界各 地 的泥土 中，以大肠 杆 菌为食 饵 ，容易 人 工 养殖 ，生命 周期 （ｉ ｙ ｌ） 短ｌ ，对 人 、动 物 １ｅｃｃｅ ｆ 】 ］
秀 丽 隐 杆 线 虫 体 内脂 肪 染 色 方 法 的 探 究
徐林 丽 高 学娟 屈 长 青
（ 阜 阳师 范 学 院生 命 科 学 学 院 ，安 徽 ； 抗 衰 老 中草 药 安 徽 省 工 程 技 术 研 究 中心 ，安 徽 ２ ６ ４ ） ３０ １
［ 要］ 近几 十年 来 ，秀丽 隐杆 线 虫 （ ａ ｎ ｒ ａ ｄｔ ｌ ａ ｓ 因其 结 构 简单 、通 体 透 明 、 生命 周 期 短 和 易 于 培 养 ， 摘 Ｃ ｅ ｏｈ ｂ ｉ ｓｅｅ ｎ ） ｉ ｇ 常 作 为 一种 模 式 生 物 被 广 泛用 于 现 代 发 育 生 物 学 、遗 传 学 、抗 衰 老 和 及 脂 肪 调 控 等 方 面 的 研 究 。本 文 探 索 了一 种 对 秀 丽 隐 杆线 虫 体 内脂 肪 的油 红 Ｏ 染 色 方 法 ，利 用 １ Ｔｒ ｏ 一０ ｉ ｎ Ｘ １ ０的 透 过 作 用 ，线 虫 体 内脂 滴 可 被 油 红 ０更 好 的着 色 ，镜 下 观 察 ｔ 颜 色鲜 红 ，染 色 效 果 较 好 ，为 以后 研 究 线 虫 脂 肪 调 控 奠定 了 基 础 。 ［ 键词］ 秀丽隐杆线虫 ； 关 成 体 ；染 色
抗 衰 老 和 基 因 组 学 研 究 的 重 要 模 式 生 物 ｌ 。 对 线 ３ ］
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
用 Ｐ Ｓ冲洗 ３次 。弃 去 Ｐ Ｓ Ｂ Ｂ ，用 １ Ｔｒ ｏ 一∞ ｉ ｎＸ １ ｔ
、
异 丙 醇 油 红 Ｏ 溶 液 浸 泡 ３ ｍｉ 。 用 Ｐ Ｓ 冲 洗 ３ ０ ｎ Ｂ
次 。用 异 丙 醇 镜 下 分 化 至 清 晰 ，观 察 拍 照 。
结 果
虫成 体 的染 色便 于对 其镜 下观 察 ，利用 特异性 染 色 试剂 对各种 组织 成分 着色 ，可 以对组 织 成分准 确定 位 ，为许 多 实 验 研 究 提 供 了 便 利 。油 红 ０ （ ｌ Ｏｉ Ｒ ｄＯ ）是 一种 油溶 性偶 氮染料 ，易溶 于苯 ，溶 于 ｅ