紫甘蓝中花青素提取实验报告

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xxxxxxxx的提取

(xx农业大学12青年农场主班)

花青素具有很强的抗氧化作用,具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能,引起了国内外学者广泛关注。目前抗变异、抗肿瘤、抗,对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。

1、实验原理

紫甘蓝花青素或花色素属于黄酮类化合物,极性较高,可溶于水或甲醇乙醇等有机溶剂中。根据相似相溶的原则,本实验选用乙醇作为紫甘蓝花色素的浸提剂,采用大孔吸附树脂法分离提纯。大孔吸附树脂具有吸附性能和分子筛的作用,使相对分子质量和吸附能力不同的混合物的不同成分得到分离。紫甘蓝叶片与60%乙醇混合在组织捣碎机中破坏紫甘蓝细胞,使花色素尽可能多的溶解。为了防止花色素的降解以提高其溶出率,可在其中加入1%盐酸。八层纱布过滤后,留一小烧杯备用,剩余的用大孔树脂除杂,加入200ml15%的乙醇溶液除去其他可溶性杂质,让树脂吸附花色素,再用60%乙醇洗脱,解析得到乙醇和花色素的混合液。将过柱的溶液以HCl:

混合液=1:4的比例混合至烧杯中,在90。C的水浴锅中水解一小时,以破坏花色素的糖苷键,使花色素均以花青素的形式存在。

此时,用20ml纯水除杂,用无水乙醇洗脱,得到较为单一的花青素与乙醇混合液。在旋转蒸发仪上蒸干。

2、材料、药品与仪器

xxxxxx

15%乙醇、60%乙醇+1%HCl混合液、弄HCl、无水乙醇、AB-8打孔吸附树脂电子天平、组织捣碎机、交换柱、玻璃棒、50ml量筒漏斗、烧杯、圆底烧瓶、纱布、比色皿、分光光度计、旋转蒸发仪

3、实验步骤

配制60%+1%HCl混合液与15%乙醇溶液备用

称取

100.0g新鲜紫甘蓝叶片,量取60%+1%HCl混合液300ml(浸提剂),同时放入组织捣碎机中捣碎,浸提

所得固液混合物用8层纱布过滤,取一点滤液备用,剩余滤液1:5加水稀释得色素原液

将备用滤液再用滤纸过滤,用浸提剂做空白,测定其对520nm光的吸光度,并作标准曲线。

装柱上样,相交换柱加入大孔吸附树脂,向其中加入色素原液分离色素,然后加入15%乙醇除杂,最后加入60%乙醇洗脱得到花青素+花色素苷+乙醇混合液

43.4ml

按盐酸:

混合液=1:4的比例将混合液与盐酸混合,90。C水浴加热一小时,得到花青素与乙醇混合液

用无水乙醇洗脱,转移至圆底烧瓶,置于旋转蒸发仪上蒸干,干重为

0.1g

4、实验结果

xx含量标准曲线为

紫甘蓝捣碎榨汁后得到深紫色溶液,过滤静置稀释测得OD值为

0.823由曲线可得到xx含量为

0.507g/L。干重xx为

0.1g,得率为

0.1%纯化率=实测干重/理论干重= 0.1/

0.507×

0.3=

66.2%。

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