【教学课件】第三章-细菌的生长繁殖与培养

阴性
阳性
(2) 吲哚试验
大肠杆菌 变形杆菌
色氨酸
靛基质
靛基质试剂
Kovacs试剂
红色的玫瑰吲哚
霍乱弧菌
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阴性
阳性
(3)甲基红试验
葡萄糖 甲基红 大肠杆菌 丙酮酸 PH≤4.5 红色(+) + 葡萄糖 脱羧 产气杆菌 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 + 甲基红 PH＞5.4
橘黄色(-)
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一.分解代谢产物和生化反应


各种细菌有不同的酶，对营养物质分解能力不 同代谢产物各异 细菌对糖、蛋白质的分解能力的不同，因而代 谢产物各异，利用生物化学方法鉴别不同细菌 细菌的生化反应
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（一）细菌对糖和蛋白质的分解

分为：1.对糖的分解
2.对蛋白质的分解
细菌的新陈代谢包括分解代谢与合成代谢
营养物质分解和转化为能量的过程-----分解代谢 所产生的能量用于细胞组分的合成-----合成代谢


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（二） 细菌的生化反应
（1）糖发酵试验 大肠埃希菌分解 乳糖，产酸； 伤寒沙门菌不分 解乳糖。

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混浊生长
沿穿刺线生长
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（3）在固体培养基中的生长现象
菌落： 细菌在固体培养基上 培养一定时间后， 由单个细菌生长繁殖形成肉眼可见的细菌集团。
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菌落分类
1 光滑型 2 粗糙型 3 粘液型
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固体培养基用于
纯培养 菌落计数
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三. 人工培养细菌的意义和应用
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二.细菌的合成代谢产物及其意义

（1）热原质
细菌合成的一种注入人体内引起发热反应 的物质。 大多数是G-菌的脂多糖。 首先，热原质耐高温，高压蒸汽灭菌不能 破坏（121℃ ，20min），250℃ 高温干烤才 能破坏
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液体培养基中
沉 淀 生 长
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混 浊 生 长
表 面 生 长
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（2）在半固体培养基中生长现象
穿刺接种 有鞭毛细菌： 扩散生长，周围浑浊 无鞭毛细菌： 沿穿刺线生长，周围透明

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半 固 体 培 养 基
有鞭毛 细菌
无鞭毛 细菌
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（一)医学：
（1） 传染病的诊断和治疗 病原菌的分离鉴定，药物敏感试验 （2） 细菌的鉴定与研究 细菌生理、遗传变异、致病性、耐药性等 （3） 生物制品的制备 菌苗、类毒素、抗毒素、诊断血清等
(二)工农业生产：抗生素、 氨基酸、 酒 （三）基因工程应用：疫苗、胰岛素
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第三节 细菌的代谢及其意义
•温度
•气体
多数病原菌生长最适温度为37℃
据代谢时对分子氧的需要与否，
分专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌
氧菌、专性厌氧菌
•渗透压 一般培养基渗透压适于大多数细菌。
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为什么专性厌氧菌在有氧环境中不能生存？
1. 缺乏氧化还原电势高的呼吸酶 有氧培养基Eh 300mV 无氧培养基Eh＜120mV 厌氧菌呼吸酶Eh 120mV 2.缺乏分解有毒氧基团（O2-，H2O2)的酶 SOD、过氧化氢酶、过氧化物酶、触酶
带电现象
半透性 渗透压
中性环境带负电荷
细胞壁、膜有半透性 革兰阳性菌 20~25大气压 革兰阴性菌 5~6大气压
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细菌的营养物质

水：营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需
有水才能进行。

氮源：来源于氨基酸、蛋白质等，合成菌体成分。 碳源：来源于糖类，提供能量。 无机盐：钾、钠、钙、镁、磷、硫等。 生长因子：生长必需但自身不能合成的物质，
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第二节 细菌的人工培养
一、培养基
* * 概念：由人工方法经灭菌后制成，专供微生物
生长使用的混合营养制品。一般PH为7.2-7.6。 营养培养基 分类： 选择培养基
厌氧培养基
基础培养基
鉴别培养基
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二、 细菌在培养基中的生长现象

（1）液体培养基中生长现象 混浊生长--大多数细菌 沉淀生长—厌氧菌、链状生长的细菌 菌膜生长--专性需氧菌，如结核杆菌、 枯草杆菌
第三章 细菌的生理
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第一节 细菌的生长与繁殖
一、细菌的理化性状
（一）细菌的化学组成
水： 占细胞总重量75%-90% 有机物： 碳、氢、氮、氧、磷、硫等 无机离子： 钾、钠、铁、镁、钙等 特有成分： 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等
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（二）细菌的物理性状 光学性质 表面积 半透明 体积小、表面积大 革兰阳性菌 pI 2~3 革兰阴性菌 pI 4~5
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二 细菌的繁殖方式与速度
* 1.细菌个体的生长繁殖方式 —— 二分裂方式 2.细菌的繁殖速度 -----多数细菌20-30分 钟分裂一次 3.细菌群体的繁殖规律 ——生长曲线
*
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③ ④
⑤
① ② 迟缓期：适应阶段
对数期：对抗生素敏感，细菌鉴定选此期
稳定期：代谢产物形成（如外毒素、抗生 素、芽胞等） 衰亡期：菌体细胞呈现多种形态
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阳性
阴性
(4)V-P 试验:
大肠杆菌
葡萄糖
+
葡萄糖
丙酮酸
脱羧
终止
产气杆菌
+
丙酮酸
乙酰甲基甲醇
碱性环境
红色化合物
胍基化合物
二乙酰
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阳性
阴性
(5)枸橼酸盐利用试验
枸橼酸盐
碳酸盐 氨
产气杆菌
溴麝香 培养基 草酚蓝
铵盐
变碱性
淡绿为深蓝
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如维生素、氨基酸等。
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细菌摄取营养物质的机制
被动扩散 主动转运系统
1.依赖于周浆间隙结合蛋白的转运系统 2.化学渗透驱使转运系统 3.基团转移
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三、 细菌的生长与繁殖
一 影响细菌生长繁殖的条件
•营养物质 人工培养 •酸碱度 多数病原菌最适pH为7.2~7.6
（6）尿素分解试验

变形杆菌有尿素酶，可分解尿素产生氨 变形杆菌、乙型副伤寒杆菌分解胱氨酸产生硫化氢
（7）硫化氢试验

பைடு நூலகம்2016/12/23
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IMViC试验



I:吲哚试验 M:甲基红试验 Vi:VP试验 C:枸橼酸盐利用实验 常用于鉴定肠道杆菌， 大肠埃希菌：+ + - 产气肠杆菌：- - + +