Waters2410型高效液相色谱仪操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i 手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。
5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。
在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
waters超高效液相色谱仪操作步骤
第一部分：仪器准备1. 确保waters超高效液相色谱仪处于正常工作状态，检查仪器是否连接电源，是否有故障指示灯显示。
2. 打开色谱仪软件，检查仪器参数设置是否符合实验要求，包括流速、温度、检测波长等。
3. 准备所需的色谱柱、色谱柱连接器、进样器以及其他实验所需的耗材。
第二部分：样品准备1. 准备实验所需的样品，确保样品已经滤过或者处理过以去除杂质。
2. 根据实验要求，将样品溶解在适当的溶剂中，并进行稀释或者稀释。
第三部分：超高效液相色谱仪操作步骤1. 开始操作前，先进行系统平衡。
具体操作步骤为：将色谱柱连接至色谱柱连接器上，然后连接至色谱仪，用洗脱液平衡色谱柱。
2. 设置色谱仪的操作参数，包括流速、温度、检测波长等。
3. 进行样品进样，具体操作步骤为：将进样器连接至色谱仪，将稀释好的样品注入进样器中，设置好进样量。
4. 开始进行实验，监控色谱图谱的变化，记录实验数据。
5. 实验结束后，对色谱柱和色谱仪进行清洗和维护，确保仪器干净、整洁。
第四部分：数据处理和分析1. 对实验获得的数据进行处理和分析，比对标准曲线，计算样品中所含物质的浓度或者纯度。
2. 对实验结果进行统计分析，进行数据呈现，如绘制色谱图谱、制作数据统计图表等。
3. 通过数据处理和分析，得出实验结论，对实验结果进行解释和讨论。
第五部分：实验安全及注意事项1. 在操作过程中，注意个人安全，避免发生化学品溅泼或者接触有害物质。
2. 操作过程中需严格按照实验要求和操作规程进行，如有疑问请及时向实验指导老师或专业人士请教。
3. 实验结束后，及时清理实验台面和仪器设备，妥善存放试剂和耗材。
通过以上步骤的操作，可以保证在使用waters超高效液相色谱仪进行实验时，能够得到准确、可靠的实验结果，为科研工作和学术研究提供有力支持。
第六部分：精密控制与调试1. 在进行实验操作前，要确保色谱仪的各项参数已经精确调试完毕。
这包括流速、温度、压力、检测波长等参数的精准控制。
WATERS 2695,2487,2414,2998高效液相色谱仪操作规程
WATERS 2695/2487/2414/2998高效液相色谱仪操作规程1. 目的：为使对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用规范化，特制定本规程。
2. 范围：涉及对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用。
3. 职责：QC检验员应严格遵守本规程。
4. 内容：4.1开机4.1.1接通电源，打开电脑主机、显示器的开关，进入Windows画面。
4.1.2 打开Alliance 2695系统的电源，仪器进行自检，“Idle”状态表示开机测试正常。
4.1.3 Wet Prime冲洗：少量气泡，执行Wet Prime。
A利用方向键将光标移至“composition”字段，将欲Wet Prime的溶剂输入100%。
B按“Direct Function”功能键，选择Wet Prime，按“OK”。
C选择流速和冲洗时间，按“OK”。
D重复上述步骤直至所有溶剂做完Wet Prime。
4.1.4 Dry Prime冲洗：大量气泡或者通道走空，执行Dry Prime。
A按“Direct Function”功能键，选择Dry Prime，按Enter。
B利用方向键将光标移至各通道，选择待Dry Prime的通道。
B同时打开阀门，用注射器帮助排液D重复上述步骤直至所有溶剂做完Dry Prime。
4.1.5设定溶剂：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“composition”字段，将所需溶剂输入适当的百分比。
4.1.6设定流速：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Flow”字段，输入所需流速。
4.1.7脱气：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Degasser”位置，按Enter，利用上下键选择所需要的模式（On:除气装置开启；Off：除气装置关闭）4.1.8置入转盘A打开样品转盘舱门，屏幕会显示A、B、C、D、E五个转盘，按A可取出A盘（每个转盘上可放置24个样品瓶，共计120个）。
Waters超高效液相色谱仪操作规程f
浙江省制药工程重点实验室超高效液相色谱仪安全操作规程一、自检开主机和二极管阵列检测器（PAD），仪器进入自检阶段，自检完成后打开Empower软件。
二、配置系统管理数据（相当于新建文件夹），鼠标右键选新建，设定项目名（设定后将出现在运行样品中）。
三、运行样品在采集数据项目栏中选定项目（即将此次实验数据选择存放位置）→确定左栏可以设置有关样品的信息（样品名，功能，方法组，样品瓶，进样体积，运行时间）右栏出图，左下栏给出仪器信息，最下栏显示仪器状态。
步骤：创建方法组→选择仪器方法（新建→编辑仪器方法，包括主机和选定的检测器的参数的设置→设置好选另存为保存此仪器方法→关闭）此时上述编辑的仪器方法出现在列表中→下一步→出现“缺省方法项”对话框，点下一步→出现“命名方法组”，设置方法名（与刚才的仪器方法名相同）对话框→完成。
返回“运行样品”对话框，选方法组和仪器方法。
选定好仪器方法后即可监视基线，基线稳定后→中断按钮→仪器空闲后→点运行按钮，出现运行样品组对话框，设置好后点运行。
（运行过程中可以点中断按钮，也可在编辑下拉菜单中选“改变正在测试的样品”）→运行完后点文件中的“退出”。
四、数据处理点开“浏览项目”，选定要要浏览的项目，确定后进入的界面中有如下内容：样品组、进样、通道、方法、结果组、结果等。
“通道”里存的是原始的数据，这些数据要经过处理后才能得到“结果”，有结果才能打印报告。
PDA数据处理点“通道”→双击要处理的原始数据（点查看图标）→进入查看主窗口（此时点窗口中的工具栏可以看到等高图或3D图）→提取光谱图，找到最大吸收波长→提取色谱图→点“处理方法向导”图标→新建处理方法→用建立的处理方法处理→点“方法组”图标，选好后点“文件”下的“另存为”→“方法组”，设定即可。
至此选好处理方法。
注意事项：每隔24至48小时制备一次新鲜的水溶性流动相；样品进样前要用0.2µm的滤膜过滤以充分去除颗粒杂质；如果所使用的流动相中含有缓冲盐，用10倍柱体积的95%乙腈水溶液冲洗柱子；1。
Waters高效液相色谱仪
1目的规范Waters高效液相色谱仪使用操作。
2适用范围Waters高效液相色谱仪的使用操作。
3责任者质管部QC检验人员。
4内容4.1 系统进入4.1.1 依次开UPS电源、检测器、泵、打印机、电脑主机电源。
4.1.2 电脑进入自检，自检完成后，进入“ Program Ma nager ”窗口。
4.1.3 在“ Program Man ager” 窗口，双击“ Mille nn ium ”图标，进入相应窗口。
4.1.4 在“Millennium ”窗口，双击“ Session Manage” 图标，进入“ Millennium V2.10 ”窗口，进行内存自检。
4.1.5 内存自检完成后，进入“Millennium Login —Version2.10 ”窗口，在“User Name 输入“system”，在“Password”输入“manager”，按“ Login ” 进入“Millinniam Versi on 2.10 —Sessi on Man age—User System” 窗口，双击所选“ Project ”图标，即进入“ Project ”窗口。
4.2 进样4.2.1 在“ Project ”窗口下，按“ Tools ”图标群中“ Quickset ”图标进入“System-open” 窗口，选择“ PCM-410”。
4.2.2 按“OK加以确认，该窗口自动退出，进入自检。
4.2.3 自检完毕，进入“ Quick Set”窗口，按“ Mode'选择“ Quick Start ”进入“ Method Set ”窗口，选择“ Using Exiting Method ”自动进入“ Quick Set Acquisition ”窗口，按“ Set Up Instrument ”，进入仪器安装状态。
4.2.4 安装完毕，按“ Can cel”，退出“ Quick Set Acquisiti on ”窗口，在样品登记表上填写样品名、类别、进样体积、运行时间。
高效液相Waters 2410操作指南
1Waters 2410Differential Refractometer 中文操作说明书2n d F u n c 键 E n t e r 键一. 键盘说明: % Full Scale 显示检测器之输出讯号电压，单位为微伏特(mV),数字之代 表意义为10mV 之百分比; 例如: 显示0001时,代表讯号电 压为0.1mV, 显示0100为10mV,依此类推.Sens设定检测器之感度，连续按压此键可从1-1024以2的次方数来设定,最灵敏为1024,最不灵敏为1,设定完毕后再按Enter键.Scale Factor设定检测器之感度(Sens)的百分比，此设定只对10mV(Rec)输出端子之传统记录器有作用,对1V(Int)输出端子之积分器或以IEEE-488讯号输出者，并无作用.Enter输入值确认键.Clear 清除错误的输入值.2nd Func转换键盘至第二操作功能.2nd 功能键:Ext 1 ℃显示第一号外接式分离管柱加热装置之温度数值(可设定温度范围为室温至150℃),若出现”245.7”,即表示无连接加热装置Ext 2 ℃显示第二号外接式分离管柱加热装置之温度数值(可设定温度范围为室温至150℃),若出现”245.7”,即表示无连接加热装置Int ℃显示检测器内部侦测槽加热装置之温度数值(可设定温度范围为30℃至150℃).Remote当检测器处于被控制状态(例如以IEEE-488联机),此指示灯会亮起.Set ℃设定所有加热装置之温度数值，建议最少设定值须高于室温5℃,以求稳定.Filter设定时间常数(Time Constant)以改善基在线之噪声,连续按压此键可设定值为0.2 ,1.0 ,3.0 ,10.0 秒.Auto Zero设定检测器讯号自动归零.Mark在层析图谱上作记号，但只对10mV输出之传统记录器有作用, 并不影响积分器或软件计算机之输出信号.+/-改变检测器输出讯号之正负方向,内设在正向之位置.Purge以移动相冲洗参考液槽使与样品液槽之溶剂组成一致，当设定冲洗状态时，屏幕会出现”PgE”字样; 再按一次此键，即解除冲洗状态.23Waters 2410 Refractometer Fluidic Paths二. 操作说明1. 打开电源开关至ON(1)的位置，机器开始作自我检查，注意是否有任何故障讯息出现.2. LED 屏幕上出现之数字意义是代表相对于下方键盘周围红色小灯号所亮起之功能键数值.3. 设定内部侦测槽温控: 按一下2nd Func 键⇒再按3键,屏幕会出现目前之 温度数值; 按一下2nd Func 键⇒再按4键⇒紧接着输入温度数值⇒Enter. 通常此温度数值须设定比室温高5℃(约35℃).4. 设定外接式分离管柱加热装置温控: 按一下2nd Func 键⇒再按1键,屏幕会出现目前之温度数值; 按一下2nd Func 键⇒再按4键⇒紧接着输入温度数值⇒Enter.建议温度: THF (40℃) Toluene (75℃)D M F (85℃) W a t e r (40℃)5. 设定Sens 至4或8之感度，有必要的话再提升感度.6. 按一下% Full Scale 键,使屏幕显示检测器输出讯号电压.7. 等HPLC 或GPC 系统平衡稳定后，按一下2nd Func 键⇒再按9键,以移动相冲洗参考液槽,冲洗约10分钟后，按一下2nd Func 键⇒再按9键,以解除冲洗状态,等待约1至2分钟后,看屏幕讯号数值是否已固定不变; 若讯号数值仍跳动不稳，则继续做Purge.8. 若基线讯号稳定，于注入检体前，按一下2nd Func 键⇒再按6键,使检测器自动归零,再开始进样.9.每次更换移动相后，等HPLC或GPC系统平衡稳定后，请重复7至8步骤,再开始做分析检测.※注意事项:<1>. 建议于做分析检测前，至少有让检测器热机达24小时以上; 因此平常待机时，无须关机，只要降低Pump流速至0.1ml/min,使其继续保持平衡稳定即可.<2>. 当使用水性塩类移动相后，需以超纯水冲洗，再以甲醇冲洗.<3>. RI检测器之样品侦测槽最高耐压值为100psi,请注意流速与出口管路所造成之逆压不得超过此上限值,否则将造成侦测槽破损.<4>. 若此检测器是以IEEE-488联机做计算机控制时，以上之操作条件参数必须在Millennium 32计算机软件操作方法内加以储存设定,才得以作有效之控制.三. 关机方法:1.直接关闭电源开关至OFF(0)的位置即可.2.所有的输入设定值将被保持至下次开机时.4。
Waters高效液相色谱系统操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程一. 准备1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）。
2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
3. 接通电源，依次打开1525泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
4. 打开Breeze软件，进入系统主界面。
二. 操作步骤1.更换流动相。
2.在主界面中点击“Manage Breeze”按钮，选择system选项，出现系统连接示意图，观察各个部件是否连接好。
若未连接好，则需点击“Diagnostics/Reconfigure”进行诊断。
3.回到主界面，选择“Manage Breeze”中的project选项，单击“Make a new project”，“Next”，在“Project Name”中输入名称，单击“Finish”。
单击“Change a project/User”，在“Project”中选择输入的名称，单击“OK”。
4.单击“View Method”按钮，点击“Pump”图标，设置泵的参数。
点击“UV Det”图标，设置紫外检测器的波长。
单击“Save Method”按钮保存设置方法。
5. 打开泵的抽液阀，使用灌注注射器抽取一定量的洗脱剂。
单击Purge图标，出现“Purge Wizard”对话框，选中“Purge Pump”选项，点击“Next”“Next”，调节A、B泵的流量分别为约3ml/min。
打开泵的参考阀，点击“Next”。
Purge结束后关闭参考阀。
6.点击主界面中的“press to equilibrate system/ monitor baseline”按钮，平衡系统0.5－1h，直至基线稳定。
7.点击“press to make a single injection”按钮，进入“Specify Single Inject Parameters”对话框，设置参数，点击“inject”。
Waters液相色谱仪操作规程doc
Waters液相色谱仪操作规程1、开机：打开脱气机、泵、检测器和电脑开关（如需控制温度，还要打开柱温箱开关）2、脱气：点击Setup键，—clirect键进入isocratic窗口，拔掉废液出口堵头，接上废液杯，打开排气阀，设定流速5ml/min，调流动相比例，按光标键“▲”至光标出现在A%（甲醇）下方，按数字键，输入输入数字如80，按Enter键，光标出现在B%（水）的下方，按数字键，输入数字如20，按Enter键继续按Enter键，一直到使光标出现在左下角的OFF为止，进行排气（若气泡太多，短时间内排不完就用针管抽气：将旋钮旋至DRAW位，抽气至气泡没有为止，然后将旋钮旋至RUN位），排完气泡后，将流速调至0，关闭排气阀，然后将流速设置为1ml/min。
3、双击桌面上的Empower图标，输入用户名和密码①创建新项目：双击“配置系统”—新项目（选择菜单“文件—新建—项目）—选择父项目（选”项目”文件夹）—“下一步”—表空间100，不选“支持，全面审计追踪”—“下一步”—“下一步”（接受默认选项）—“下一步”（接受默认选项）—“下一步”（接受默认选项）—输入项目名—“完成”②运行样品双击“运行样品”—选“项目名***”—“确定”输入样品名：***功能：方法组：样品瓶：进样体积：进样时间：点击“创建方法组”—“新建”（出现仪器方法编辑器）点击“W600”图标—“流量”—泵模式：等度；流量比例设定—“事件”—启用事件监视—点击“W2998”图标，—点“通用”—启用3D数据设定“采样速度1—2”—“2D通道”—选“通道1”设定波长（编辑完成后保存）击“文件”—“另存为”—输入仪器方法名称—“保存”关闭“仪器方法编辑器”窗口选中所要的“仪器方法”—单击“下一步”—“下一步”—完成在“运行样品”页选中刚建立的“仪器方法”—点“监视器”（观察基线平滑无毛刺）待系统平衡后，即基线平滑无毛刺时，单击“终止监测”图标，（此时屏幕下边显示”系统空闲”),点击“进样图标”，屏幕下部出现“正在设置”—“等待进样”—这是扳动进样阀可以进样—进样后屏幕下边出现“正在运行”③数据处理A 双击“浏览项目”—项目—“确定”B在“通道”中查看，选中要处理的数据C选择“工具”—“查看”—打开（出现“查看”主窗口）D单击菜单中“文件”—“新建”—“处理方法”（出现新处理方法对话框）选使用处理方法向导—“确定”（出现“积分—峰检测1”）—设定“峰宽”—“下一步”（出现“积分—峰检测2”）—设定“阈值”（50）—“下一步”（出现“积分—积分区域”），输入保留时间：“开始时间—结束时间”—“下一步”（出现“积分—剔除峰”）—设定最小面积，最小高度，（或不做任何改动）—“下一步”—“下一步”，选择“否”，在“名称”栏中输入组分的名称（或不改动）—“下一步”—“下一步”输入“方法名”—”完成“。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1．开关机顺序●开机顺序：打开LC各单元电源－控制器电源－电脑－LC-Solution工作站，开机后能听到“哔”声。
●关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭LC-Solution工作站－控制器－LC各单元电源2．流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水。
流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。
水和有机相所用的微孔滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用F膜，水用水膜。
●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。
3．工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标，选择“operation”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。
●首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟，然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min，BCONC 0％，并设置合适的检测波长，柱温，停止时间。
在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。
●分析方法的保存：选择file－save method file as－取名保存文件●系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作。
4．进样准备●观察基线及柱压，待基线平直（－5～80mv），压力稳定（0.5Mpa内）时方可进样。
5. 进样●点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。
●填完后点击“start”，出现触发窗口，进样，仪器开始自动采样分析。
6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。
●打开文件搜索器，定位至数据文件所在文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。
waters高效液相的标准操作规程（sop）
WATERS高效液相的标准操作规程（SOP）适用于所有使用此仪器者1 流动相的处理1.1 过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。
本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择（反光面朝上），过滤水溶性流动相时（如甲醇/水），先用1-2ml甲醇润湿过滤膜，有助于快速抽滤。
1.2 保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3 保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合为系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
过滤器被微粒所阻塞或长霉，去掉过滤器后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的过滤器则可。
有时候换上新的过滤器仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的过滤器。
不管如何，流动相都需要重新过滤。
流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。
如果流速大于10ml/min，常会出现这种现象。
使用下列方法解决：（1）使用低流速；（2）换大孔径的过滤器；（3）增加进液管道内径；（4）抬高或加压储液器；（5）不用过滤器，但流动相一定要先过滤；（6）储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。
WATERS高效液相色谱仪操作规程
建立W ATERS高效液相色谱仪的使用操作规程，保证检验人员使用仪器的规范化、标准化，保证企业产品质量。
2．依据中华人民共和国药典(2010年版附录)3．范围适用于W ATERS高效液相色谱仪使用。
4．责任QC科化验员。
5．内容5.1仪器的组成和一般要求：5.1.1仪器的组成：高压输液泵；色谱柱；柱温箱；紫外检测器；蒸发光散射检测器。
5.1.2对仪器的一般要求：所用的仪器为高效液相色谱仪。
色谱柱的填充剂和流动相的组分应按各品种项下的规定。
除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。
在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符合紫外分光光度法(药典2010年版附录IV A)项下对溶剂的要求。
正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。
5.2.操作方法5.2.1.首先制备新鲜流动相，清洗液以及样品5.2.1.1.对流动相的要求有机溶剂要求用色谱纯，经0.45μm微孔滤膜（有机膜）过滤；水或缓冲盐溶液要用纯化水（当天制备），经0.45μm微孔滤膜（水膜）过滤；超声波脱气约2分钟。
5.2.1.2.对样品的要求经0.45μm微孔滤膜（有机膜）过滤5.2.2.打开计算机电源，进入电脑操作系统5.2.3.打开仪器硬件电源蒸发光散射检测器还需打开气源。
5.2.4.进行仪器的操作5.2.4.1.打开泵抽液阀，逆时针转一到两圈，用注射器抽出液体8到10ml。
切记完成后将抽液阀关闭；5.2.4.2.设定流速如果用缓冲盐流动相，需要先用10%甲醇溶液（或乙腈）冲洗色谱柱至少15分钟，再用方法平衡系统约30分钟；如果不用缓冲盐做流动相，只是用水和甲醇或者乙腈做流动相，就可以直接调用方法平衡系统30分钟。
等待系统压力稳定后就可以进样。
高效液相色谱仪的基本操作和使用
高效液相色谱仪的基本操作和使用1.准备工作：-确保高效液相色谱仪的设备和耗材齐全。
-检查色谱柱，确保色谱柱选择正确并在有效使用期内。
-检查溶剂的质量和纯度，确保溶剂无杂质。
-设置所需的操作温度。
2.连接高效液相色谱仪：-将进样器连接到色谱柱，并将进样针座固定住。
- 将固相柱插入色谱柱座，然后将电导/ UV-Vis检测器连接到色谱柱座。
3.样品制备：-将待测样品溶解于合适的溶剂中，并进行必要的前处理步骤（如过滤、稀释等）。
-对于固体样品，可以采用适当的溶解方法，如超声波处理等。
4.设置色谱仪参数：-开启电源，等待色谱仪预热稳定。
- 打开色谱仪的软件，并设置所需的参数，包括流速、波长（对于UV-Vis检测器）、进样量、运行时间等。
5.校准仪器和程序：-制备标准品溶液，并用标准曲线法对色谱仪进行校准，以确保仪器输出的结果准确可靠。
-确认色谱仪的波长和检测器的线性范围，并根据需要进行修正。
6.进样：-打开进样器盖，用吸尘器吸出残液，然后用纯溶剂将针清洗干净。
-分别进行空白样品和待测样品的进样，保证进样量准确。
7.开始运行：-在软件界面上点击“开始运行”，观察色谱图输出的曲线形状和峰的出现。
-根据需要，可以进行多次重复运行。
8.结果分析：-对于定性分析，根据色谱图的特征峰形状、保留时间和波长，进行物质的鉴别。
-对于定量分析，根据标准曲线和色谱图的峰面积，计算出待测样品中目标物质的浓度。
9.清洗仪器：-运行结束后，关闭仪器，并将进样器和色谱柱进行清洗。
10.维护：-定期检查仪器的性能和功能是否正常。
-及时更换色谱柱、固相柱和检测器，确保仪器的正常运行。
-做好仪器维护和维修记录。
高效液相色谱仪的使用方法及注意事项
高效液相色谱仪操作步骤：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。
2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3)．打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。
4)．进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。
5)．有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。
冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。
冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10 ml/min。
6)．调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。
点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。
7)．设计走样方法。
点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各种走样方法。
若需建立一个新的方法，点击new method。
选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。
选完后，点击protocol。
一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。
8)．进样和进样后操作。
选定走样方法，点击start。
进样，所有的样品均需过滤。
方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。
全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。
9)．关机时，先关计算机，再关液相色谱。
10)．填写登记本，由负责人签字。
高效液相色谱仪使用注意事项：1、泵正常工作时，在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的，当然在换流动相时压力变化是正常的，正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的（只有更换色谱柱），如果正常情况下压力突然降低有可能是（1）接头处有漏液的地方，采取的方法是有滤纸检查，如有漏液的地方用扳手拧紧即可。
waters 高效液相操作规程
waters 高效液相操作规程
《waters高效液相操作规程》
在液相色谱分析中，waters高效液相技术被广泛应用。
为了保证色谱分析的准确性和可靠性，操作规程至关重要。
下面是waters高效液相操作规程的一般步骤：
1. 样品准备：准备样品并将其溶解在合适的溶剂中。
2. 色谱柱准备：根据分析的要求选择合适的色谱柱，并进行适当的洗涤和平衡。
3. 色谱条件设置：设置流速、温度、检测波长等色谱条件。
4. 样品进样：按照预定的体积和条件将样品进样进入色谱仪。
5. 色谱分离：启动色谱仪进行色谱分离，并记录相关数据。
6. 数据处理：对色谱数据进行处理和分析，得出结果。
7. 清洗设备：分析结束后，对色谱柱和仪器进行彻底的清洗。
以上是waters高效液相操作规程的一般步骤，具体操作还需根据实验室的具体情况和分析要求进行调整和完善。
这些步骤的严格执行和规范操作将有助于提高色谱分析的准确性和可靠性，确保实验结果的有效性和科学性。
Waters高效液相色谱系统操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程一. 准备1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）。
2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
3. 接通电源，依次打开1525泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
4. 打开Breeze软件，进入系统主界面。
二. 操作步骤1.更换流动相。
2.在主界面中点击“Manage Breeze”按钮，选择system选项，出现系统连接示意图，观察各个部件是否连接好。
若未连接好，则需点击“Diagnostics/Reconfigure”进行诊断。
3.回到主界面，选择“Manage Breeze”中的project选项，单击“Make a new project”，“Next”，在“Project Name”中输入名称，单击“Finish”。
单击“Change a project/User”，在“Project”中选择输入的名称，单击“OK”。
4.单击“View Method”按钮，点击“Pump”图标，设置泵的参数。
点击“UV Det”图标，设置紫外检测器的波长。
单击“Save Method”按钮保存设置方法。
5. 打开泵的抽液阀，使用灌注注射器抽取一定量的洗脱剂。
单击Purge图标，出现“Purge Wizard”对话框，选中“Purge Pump”选项，点击“Next”“Next”，调节A、B泵的流量分别为约3ml/min。
打开泵的参考阀，点击“Next”。
Purge结束后关闭参考阀。
6.点击主界面中的“press to equilibrate system/ monitor baseline”按钮，平衡系统0.5－1h，直至基线稳定。
7.点击“press to make a single injection”按钮，进入“Specify Single Inject Parameters”对话框，设置参数，点击“inject”。
(完整)Waters高效液相色谱仪标准操作规程
1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。
2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。
4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。
5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。
5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。
6.规程6.1.Waters HPLC的组成：贮液器输液泵自动进样器分离柱 (柱温箱 )紫外检测器控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。
6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序•对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。
泵与色谱工作站的连接：对于 510 泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是Loca ，按 Edit/Enter 键，在 Local 的L 前有闪动的光标显示，按键，Local 转换成Rem，再按Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键，使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。
泵的任何动作都可由工作站来控制。
还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。
对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进入 Millennium 32化学工作站。
对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45m 的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。
高效液相色谱使用方法
高效液相色谱使用方法一、流动相准备将流动相按比例混合，注意混合的流动相必须相互溶解，最好能将流动相混合在一起，若相互溶解性不好，可分成两种。
流动相配好后，将管路放入，注意不要将瓶口密封。
二、开机首先将真空泵打开，待泵的指示灯由黄变绿打；打开600泵开关，按Direct键，进入操作菜单。
三、抽气抽取管路A液体：先将注射器旋转插入，将旋钮由Run转至 Draw,抽液，完成后将旋钮由Draw至Run，再将注射器旋转取下，反复1-2次，抽至管路内无气泡。
抽取管路B液体：在泵操作菜单上将B设为100%，给0.2ml/min的流速，听到泵转换的声音后，将流速设为0，以抽取管路A的步骤进行抽气。
四、调节流动相比例与流速在泵操作菜单上设定流动相比例，并以0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml/min的速度逐步升高流速，每次间隔3-5分钟。
五、2410示差检测器的使用1、打开2410示差检测器开关2、调整检测器内、外温度3、实验前一天晚上，使用“purge”状态平衡过夜，若第二天还要做实验，结束工作后不关机，节省第二天的平衡时间，保持0.2ml/min的流速。
六、2487紫外检测器的使用1、打开2487示差检测器开关，机器自动进入自检过程，约需7分钟。
2、设置检测波长3、预热30分钟左右，即可注样测定。
试验四、番茄内源激素高效液相色谱法测定一、样品准备取新鲜番茄根、茎、叶5克左右，液氮冷冻，放入冰箱储存。
配80％甲醇，冰箱冷冻。
二、提取样品放入预冷研钵，加l0ml 80％的冰冻甲醇研磨至匀浆，转入小烧杯中，再用甲醇清洗研钵2次，每次l0ml，转入小烧杯中。
小烧杯放入冰箱(0～4℃)冷藏14小时以上。
三、过滤取出用漏斗滤纸过滤，并用10m180％甲醇清洗残渣，合并滤液；如果提取液中沉淀物或色素多，则用10000g离心l0~12min，上清液转入冻干瓶中。
四、浓缩将冻干瓶中的液体用减压蒸干机蒸干(至瓶中液体结冰)，然后用2m1 80％的甲醇冲洗，如果有浑浊物，再次用离心机12000g离心l0min，倒入带有刻度的试管中，为保证试管中的液体有5ml左右，将不足5ml的试管中再加入一些甲醇。
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部门
分发
目的：规范Waters2410型高效液相色谱仪操作规程，确保仪器的正常操作和检测结果的可靠性。
范围： Waters2410型型高效液相色谱仪
职责人：操作员
规程：
1 仪器的组成
Waters 2410是由输液泵、手动进样器、色谱柱、2410示差检测器、柱温箱和色谱数据处理系统组成。
2 操作前的准备
2. 1准备好流动相，换上色谱柱用Peek接头拧紧。
2.3 操作
2.3.1 开启电脑，打开HS2000色谱数据工作站（通用版），打开通道B。
2.3.2按打开仪器各部件电源开关（515泵、柱温箱、2410示差检测器）。
2.3.3泵排气
2.3.3.1 排液阀逆时针180度，在515泵LCD面板按▼选择到PURGE出现，按【Run/Stop】，开始排气泡，5分钟后自动停止，排液阀顺时针180度拧紧，在LCD面板按▲选择到FLOW。
2.3.4 设置流速
按【Edit/Enter】至光标出现在需改动的数字位置上，用“▼”或“▲”键增加或减少数字，流速设定后按【Menu】，存贮设定值
2.3.5 设置温度
在示差检测器的LCD面板上，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换到温度界面（面板左上角指示灯亮），按【2nd/Func】和【Set℃/4】，然后输入设定温度，按【Enter】确定。
2.3.6 运行
按【Run/Sotp】，则泵开始运行, 在示差检测器的LCD面板上，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换P9E（即参比池），运行3h左右，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换
部门
分发
温度界面（即流通池），按【Remote/%Full scale】（面板右上角指示灯亮）运行平衡即可进行实验操作。
2.3.7 数据处理
点击【文件】选择【打开】选择需要处理的图谱，处理完毕，按【文件】下拉菜单的【打印】，即打印图谱。
2.4 冲洗和关机
2.4.1、流动相如果有缓冲盐，先用20%甲醇水冲洗以1mol/min流速冲洗60分钟，然后再用有机溶剂如甲醇或乙睛，用1.0ml/min流速冲洗60分钟，如无缓冲盐则直接用有机溶剂冲洗。
2.4.2冲洗进样阀流动相如果有缓冲盐，吸取20%甲醇水约10ml冲洗进样口3次，然后再吸取有机溶剂如甲醇或乙睛约10ml冲洗进样口3次，如无缓冲盐则直接用有机溶剂冲洗。
2.4.3 停泵，Waters515、Waters2410面板右下角的电源开关扳到【OFF】即将仪器关闭。
2.5.2填写仪器使用记录。
3 维护保养和注意事项
3.1 色谱柱的出口端与检测器之间应为无死体积连接，以免试样扩散影响分离。
3.2 新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时，应将其出口端与检测器脱开，避免污染。
3.3 使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶，如不互溶，则先取下上次
的色谱柱，用异丙醇冲洗过渡，进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行过渡，过渡完毕后，接上相应的色谱柱，换上本次使用的流动相，再操作。
3.4 压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析，应检查泵中气泡是否已排除，
各连结处有无漏液，排除故障后方能进行操作。
如压力升高，甚至自动停泵，应检查柱端有无污染堵塞。
3.5 发现记录基线波动，出现毛刺等现象，首先应考虑检测器流通池中是否有气
泡或污染，如不是流通池引起，可等待氘灯稳定，同时检查仪器的接地是否良好，必要时，换上新的氘灯，仪器稳定后方能进行操作。
3.6 进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡，如系统适用性不符合规定，或填充剂已
部门
分发
损坏，则应更换新的同类色谱柱进行分析，由于同类填充剂的化学键合相的键合
度及性能等存在一定差异，往往依法操作达不到预定的分离时，可更换另一牌号的同类色谱柱进行试验。
3.7 以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流动相pH值的影响，使用时，应详细参阅色谱柱说明书，在规定的pH值范围内选用流动相，一般的pH 值范围为2~8
使用高pH值流动相时，可在泵与进样器之间连接一硅胶短柱，以饱和流动相，保护分析柱，并尽可能缩短在高pH值下的使用时间，用后立即冲洗。
3.8 各色谱柱的使用应予登记，应包括本次测试药品及柱中的保存溶剂。
3.9 色谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱到检测器流通池，在分析完毕后，应充分冲洗，特别是用过含盐流动相的，更应注意先用20%甲醇水，再用有机溶剂如甲醇或乙睛充分冲洗，如发现泵漏液等较严重的情况，应请有经验的维修人员进行检查、维修。
3本文件产生的记录和表格：无
4文件的修订历史。