高效液相色谱仪(Agilent 1100型)操作步骤
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100series安捷伦⾼效液相⾊谱仪操作规程Agilent1100⾼效液相⾊谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100⾼效液相⾊谱系统主要由⼯作站、在线脱⽓机、柱温箱、输液泵、⾃动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及⼯作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进⼊待机状态，指⽰灯为黄⾊或⽆⾊。
1.2.2打开HP ChemStations,进⼊Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进⼊⼯作站的操作页⾯。
该页⾯主要由以下⼏部分组成：最上⽅为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下⽅为快捷操作图标，由多个样品连续进⾏分析、单个样品进样分析、调⽤⽂件、保存⽂件等；左边为样品信息栏；中部为⼯作站各部件的⼯作流程⽰意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为⾊谱⼯作参数：进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等。
2.⾊谱条件的设定(⾊谱条件的设定可以通过下列⼏种⽅法实现2.1直接设定在操作页⾯的右下部⼀⾊谱⼯作参数中设定。
将⿏标移移⾄要设定的参数如进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等，单击⼀下，即可显⽰该参数的设置页⾯，键⼊设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调⽤已设置好的⽂件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定⽂件名，单击“OK”，此时，⼯作站即调⽤所选⽤⽂件中设定的参数。
如欲进⾏修改，则可同2.1项下，在⾊谱⼯作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新⽂件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新⽂件命名，单击“OK”。
高效液相色谱仪的基本操作和使用
美国赛默飞世尔(Thermo)公司
Finnigan Surveyor Plus 高效液相色谱系统
1、进口仪器
美国戴安公司 SUMMIT高效液相色谱仪
2、国产仪器
大连依利特分析仪器有限公司 P200Ⅱ型液相色谱仪
2、国产仪器
北京市东西电子技术研究所 LC—5500液相色谱仪
2、国产仪器
浙江福立分析仪器有限公司FL2200型高效液相色谱仪
一、基本结构
4、检测器
a.可变波长紫外检测器（VWD）
b.二极管阵列检测器（DAD或PDA） c.荧光检测器（FLD） d.示差折光检测器（RID） e.电化学检测器（ECD）
一、基本结构
4、检测器
f.蒸发光散射检测器（ELSD）
g.质谱检测器（MSD） h.红外检测器（IRD） i.核磁共振检测器（NMRD） j.小角度激光散射检测器（LALLSPD）
2、国产仪器
上海伍丰科学仪器有限公司 LC-100系列智能全控液相色谱系统
2、国产仪器
北京莱伯泰科仪器有限公司 LabTech LC600高效液相色谱仪
2、国产仪器
通微（上海）分析技术有限公司
BiSep-1100 高效液相色谱仪
2、国产仪器
通微（上海）分析技术有限公司
EasySep-1010 高效液相色谱仪
一、基本结构
5、计算机控制系统
色谱工作站软件
6、馏份收集系统（制备型HPLC）
二、简介
1、进口仪器
2、国产仪器 3、新型快速分析仪器 4、色谱工作站软件
1、进口仪器
美国安捷伦科技有限公司 Agilent 1100系列 高效液相色谱系统
1、进口仪器
Agilent 1100型HPLC操作指南
Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤（通常过0.2μm滤膜）、超声脱气5min。
2、更换四元泵流动相，泵头清洗溶剂（10％的异丙醇）。
二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱（根据需要）、检测器电源，等待系统自检通过，黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。
2、打开电脑，双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站，软件会自动检测到开启的所有硬件设备。
3、更换流动相存储瓶，旋松“排气阀（purge阀）”，将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min，进行清洗和排放气泡，至管线中无气泡时关闭排气阀。
4、使用的流动相中含有缓冲盐时，需打开泵头清洗溶剂，使其逐滴流出，防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出，影响系统压力。
5、安装色谱柱：依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱（注意方向，箭头指向检测器）。
设置溶剂比例，1mL/min流速，平衡色谱柱。
三、样品测试及数据分析1、编辑方法。
选择编辑完整方法，依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数，保存方法。
2、运行方法，监测基线至稳定走平。
3、手动单针进样：设定样品名、数据文件存储位置，点击运行方法；将手动进样器扳至“Load”上样，上样完扳至“Inject”，工作站开始记录信号。
4、测试完毕，点击桌面的“仪器脱机”打开工作站，进行数据处理，积分，定量分析方法建立、报告输出等。
四、实验结束、关机。
1、实验结束，冲洗系统、色谱柱。
冲洗原则（以反相C18为例）：先用90％水，10％乙腈（或其它有机相）冲洗水溶性物质；30min后改为50％水，50％乙腈；再过30min 后，改为100％乙腈，再冲洗30min后结束。
2、实验结束，停止泵，关闭化学工作站，关闭电脑，关闭仪器的四部分电源。
3、卸下色谱柱，清理流动相，将各个抽滤头浸泡在有机相中，整理桌面、地面杂物。
注意事项：1、挥发性有毒有机相（甲醇、乙腈、正己烷等）需尽量包严实。
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪（Agilent HPLC）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
其操作流程和注意事项如下：
操作流程：
1. 准备样品溶液：根据分析目的选择适当的溶剂，将样品溶解或稀释至所需浓度。
2. 准备色谱柱：根据分析需求选择合适的色谱柱，并按照柱床规定的要求进行预处理，如洗涤、调pH等。
3. 连接系统：将色谱柱安装在仪器上，连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件，确保连接紧密无漏。
4. 设置方法参数：根据分析需求，设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。
5. 系统平衡：启动泵和检测器，运行空白试验，确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。
6. 样品进样：将样品进样器插入样品瓶中，抽取足够的样品并注入进样器，按下进样按钮进行进样。
7. 进行分离：启动泵，使流动相通过柱床，样品分离过程中不断采集检测器的信号。
8. 数据处理：分析和处理检测器输出的信号，得出对应的峰面积、峰高度等结果，进行数据分析和解释。
注意事项：
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器，遵循操作规程，避免误操作和事故发生。
- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好，防止泄漏和污染。
- 选择适当的溶剂和流动相，避免与柱材和样品相互作用，影响分析结果。
- 定期检查和维护仪器，如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等，确保仪器正常运行。
- 样品处理过程中，注意避免光线、温度和湿度的影响，尽量保持稳定的分析环境。
- 使用仪器前，需提前熟悉相关方法和仪器操作，做好实验前的准备工作。
高效液相色谱仪(Agilent1100型)操作步骤
一、开机1、开机前准备:流动相使用前必须过0.45um的滤膜(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜注射用水,不能使用超过3天的注射用水,以防止长菌或长藻类);把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶:为水相;B瓶:为有机相。
2、打开电脑,选Win 2000,进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标,放大CAG Boodp server小图标,出现窗口, 5min内打开液相各部件电源开关,等待1100广播信息后,表示通讯成功连接,关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标,仪器自检,进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrumen…等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法:从“Method”菜单中选择“New method”,出现DEF-LC.M,从“Method”菜单中选择“Edit entire method”,选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项,单击OK,进入下一画面。
2、方法信息:在“Method Comments”中加入方法的信息,如方法的用途等。
单击OK,进入下一画面。
3、泵参数设定:进入“Setup pump”画面,在“Flow” 处输入流量,如1ml/min;在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0,(A=100-B),也可在Insert 一行“Timetable”,编辑梯度;输入保留时间;在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。
安捷伦1100操作规程
安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程1、操作前的准备流动相的配制，流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤，超声。
2、仪器的操作2.1接通电源，打开电脑，双击桌面上的“仪器1联机”，进入工作站；单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”；将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。
2.2排气逆时针旋松排空阀，将流速设为5ml/min，四个通道逐个进行排液，排液至整个管路没有气泡为止。
2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”，再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”，在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”，（具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可）单击“确定”。
2.4编辑仪器方法2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”，根据需要钩选项目，“方法信息”，“仪器/采集”，“数据分析”，“运行时选项表”，单击“确定”。
2.4.2 出现“方法信息”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“确定”。
2.4.3出现“设置泵”窗口，根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”，将压力上限设为400bar，单击“确定”。
2.4.4出现“设置进样器”窗口，根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”（一般选择“标准进样”），输入相应的“进样量”，单击“确定”。
2.4.5出现“柱温箱温控方法”，输入“柱温”或“不控制”，单击“确定”。
2.4.6出现“VWD信号”窗口，输入所要的检测波长，单击“确定”。
2.4.7出现“信号细节”窗口，单击“确定”。
2.4.8出现“编辑积分事件”窗口，单击“确定”。
2.4.9出现“报告设定”窗口，选择所需的“报告格式”，“信号选项”中设定好图谱的量程，单击“确定”。
2.4.10出现“仪器曲线”窗口，单击“确定”。
2.4.11出现“运行时选项表”，根据需要设定相关的参数，一般在设定方法时，只要单击“确定”即可。
岛津LC-10ATvp液相色谱仪操作规程
1.适用范围本标准操作规程规定了Agilent LC-1100型高效液相色谱仪的操作要求，是进行标准操作的依据。
本标准操作规程适用于公司内对Agilent LC-1100型高效液相色谱仪的操作。
2.技术参数:2.1波长 190～900 nm2.2温度 -5～80℃2.3流速 0.000～100 ml/min；压力 0～400bar2.4电压 1～10v3.操作3.1仪器组成四元输液泵、蒸发光散射检测器、自动进样器、柱温箱、脱气机、微机和打印机。
3.2开机（电源）顺序:脱气机→输液泵→柱温箱→检测器→微机3.3准备工作3.3.1打开微机→双击联机→显示工作界面3.3.2打开脱气阀，点击泵图标，选择设置泵，进入泵编辑画面，设置泵流量5ml/min,点击确定。
点击泵图标，选择控制，点击泵开，系统开始排气，使泵运行大约5分钟，直至所有要用的通道无气泡为止。
3.3.4点击泵图标，选择设置泵，设置流速为1ml/min。
3.3.5在方法菜单中选择编辑完整方法，在全部四项前选“√”，单击“OK”；键入方法注释内容，单击“OK”；在此对话框中，在流速处输入所需要的流速，选择设置四个通道的溶剂及相应的比例，也可以选择编辑梯度。
在最大柱压处输入柱子的最高耐压。
全部设置结束点击确定。
3.3.6在出现的新对话框中选择自动进样方式，“标准进样”只能输入进样体积，没有洗针功能，“洗针进样”此方式在输入样品后，会在洗瓶中洗针，“使用进样器程序”，点击“编辑”进行进样程序的编辑。
选择好进样方式后，点击确定。
3.3.7在出现的柱温箱对话框中，输入要控制的温度，点击“更多”按钮，选择“与左侧一致”选项，点击确定进入下一界面。
3.3.8DAD参数设定：在方法菜单中，选择“保存为…”，在弹出的菜单中键入新方法名。
如果选择“保存”，此选项将覆盖当前方法。
3.3.6点击Control→点击Single Run→输入样品批号或对照品, 完毕点击Start准备进样。
高效液相色谱仪操作步骤
高效液相色谱仪操作步骤1.准备工作：a.检查设备是否正常运转，所有零件是否安装和连接正确。
b.检查每个必需的溶液和试剂是否充足并且符合规定的质量标准。
c.检查色谱柱是否装配完好，并根据要进行的分析校准适当的流量和压力范围。
d.打开色谱软件，并设置所需的分析方法和参数。
e.开始预热色谱柱直到达到所需的温度。
2.样品制备：a.准备待检测样品的溶液或提取物，并进行必要的预处理步骤，例如固相萃取、浓缩、稀释或离心等。
b.将样品溶液通过0.22微米滤膜过滤，以去除杂质、微粒和可能堵塞色谱柱的颗粒。
3.样品进样：a.打开进样器，并选择合适的样品进样模式（如定量进样或自动进样）。
b.使用微量注射器或自动进样器将样品注入进样器，并确定进样量符合分析方法的要求。
4.色谱柱选择：a.根据样品特性和分析目的选择合适的色谱柱类型（如反相、离子交换、大小排阻等），尺寸（长度和内径）和填充材料等。
b.根据样品的pH值调节移动相的酸碱度，以满足分析要求和保护色谱柱。
5.色谱条件设置：a.设置流量速率，根据色谱柱的额定最大流速和样品的分离要求来确定。
一般来说，较高的流速可提高分离速度，但也会降低分离效果。
b.设置柱温，并确保温度稳定在所需的分析条件下。
c.设置检测器的参数，如波长、增益、灵敏度等，以适应待测试样品的检测需求。
6.分析运行：a.开始进样和运行色谱，确保流量和压力稳定。
b.监测色谱峰形的变化和信号强度，以评估分离速度和效果。
c.记录每个样品的保留时间和峰高（面积），并进行相应的数据处理和分析。
7.数据处理：a.使用色谱软件导出和处理分析数据，如生成色谱图、峰面积测定、峰高度测定、定量计算等。
b.根据实验目的和要求，对分析数据进行统计学分析、校正和解释。
c.对数据进行结果汇总、报告撰写和存档。
8.后期维护：a.定期检查和维护仪器，如清洁色谱柱、更换零件、校准仪器、更换溶液等，以确保仪器的正常运行和结果的准确性。
b.对废液和废品进行妥善处理，符合环境保护要求。
Agilent1100液相色谱-基本使用方法
基本操作：1.开机：先打开电脑电源，然后开启液相各组件电源，boopt sever显示电脑与仪器联接的情况。
（注：电脑与液相之间通过DAD上接口联接；若未连接上，在boopt sever打开的情况下，仅关开一次DAD 即可联接成功），然后再打开“仪器1 联机”。
2.脱气：拧松purge阀（逆时针旋开2圈），在溶剂瓶中加入足够量的流动相，开泵，流速设为5ml/min约5分钟。
（注：脱气时需单个进行，如脱A则设置A为100%，脱B则设B为100%；所需用到的流动相都须脱气）3.溶剂过渡：以0.8ml/min 的流速用10%甲醇水，拧紧purge阀，跑至压力恒定不变，约10min。
（过渡的作用是冲稀流路内的有机溶剂，使水的比例占搞使缓冲盐不易析出堵塞系统损坏色谱柱，当使用Na、K、磷酸盐等在有机溶剂中溶解度低的缓冲盐时，此步十分重要）（先将流速调低再拧紧purge阀）4.跑基线：调用分析样品的方法跑基线，然后拧紧purge阀，以平衡柱子，约30min左右。
（为延长检测器灯的寿命，可在跑基线20min后再开检测器电源，直接点开开关即可）5.进样分析：将样品液过0.45um过滤器注入样品瓶，置于自动进样器样品盘上，设置序列（样品瓶位置，名称，分析方法，进样次数。
其中后两者为必须的，缺一则报告错误，前两者非必须，当样品瓶位置空缺时只运行方法不进样；设置时将鼠标指针置于样品序列视图上，左键单击即可弹出对话框。
）6.洗柱：样品分析完毕，对于反相柱使用10%甲醇、100%甲醇各冲稀30min，最后柱子须充满100%甲醇保存。
（洗柱方法：洗柱.M；使用洗柱方法时，最好设定自动关机。
序列/序列参数/后运行：macro “shutdown .MAC”，go。
也可以在样品序列上添加洗柱程序）。
7.关机：关闭电脑和仪器各组件电源。
（关闭操作界面时要注意弹出对话框内容，关闭灯等）（先关闭电脑，然后再关闭液相各开关）编辑完整方法1.点击方法/编辑完整方法：点击确定2.进入泵参数设置界面：设置流速、分析时间、溶剂比例梯度洗脱设置：3.点击确定进入进样器设置界面：设置进样方式，进样量。
高效液相色谱仪使用与操作规程学生用
水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。 5、 色谱柱在不使用时，应用甲醇冲洗，取下后紧密封闭两端保存； 6、 不要高压冲洗柱子； 7、 不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱；
使用过程中注意轻拿轻放。
2 、用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量即可以进 样了。
3、含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少注样2次 。
五）谱图的判断及结果计算
1、系统适用性实验：
①分离度：一般应≥1.5。 ②重复性：两次谱图的峰面积应相差不的过1%。 ③理论塔板数：应≥规定的理论塔板数目。 ④拖尾因子：0.95＜T＜1.05 ⑤保留时间：对照与样品的主成分保留时间应大致一致。 ⑥RSD： 精密度＜3% 。
4.柱内烧结不锈钢失效 5.柱塌陷或形成短路通道 6.死体积或柱外体积过大
7.柱效下降
1.降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相 2.清洁样品,调整流动相 3.加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度
降低流动相PH值,钝化样品 4.更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品 5.更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件 6.连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可
3、建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他 人的方法及实验结果；
4、使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒， 洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针 筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；
5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过 滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗 涤；
Agilent 1100 LC_MSD 液相色谱质谱联用仪作业指导书
本细则根据高效液相色谱仪方法通则（JY∕T 024－1996）、有机质谱分析方法通则（JY∕T 003－1996）和美国Agilent 公司液相色谱质谱联用仪操作说明书制定。
1．适用范围本方法适用于有机样品定性及定量分析。
样品要求：待测样品必须能溶解于水或其它有机溶剂中。
若样品或配制的样品溶液发生沉淀，挥发，变质等异常现象时，应重新取样或重新配制溶液。
分子量范围：（100 ～2300）amu（单电荷）分析前要求：在液相色谱仪上确定分离条件，使待测组分能完全分离，且该色谱条件中流动相不应含有不挥发性盐。
2．引用标准有机质谱分析方法通则（JJG003－1996）3．术语、符号、代号详见《有机质谱分析方法通则》（JJG003－1996）4．方法、原理详见《有机质谱分析方法通则》（JJG003－1996）5．试剂和材料所有的溶剂均选用色谱级试剂，所用水的电导率应大于18KΩ，其余试剂为分析纯。
6．仪器设备仪器：Agilent 1100 LC/MSD SL（液相色谱-质联用仪），配有ESI及APCI离子源分子量范围：（100 ～2300）amu（单电荷）扫描分辨率：半峰宽小于1；检测灵敏度：SIM S∕N ≥10∶1；1 pg Reserpine；SCAN S∕N ≥10∶1；50 pg Reserpine。
7．分析步骤7. 1 环境：10℃～30℃，相对湿度小于70％。
7. 2 仪器校正：按仪器操作说明书进行调整，使得到的标准谱图在允许误差之内关注质量轴精度，质量轴稳定度，扫描分辨率，灵敏度。
7. 3 测定过程7. 3. 1 开机：（1）开空气泵、液相色谱和质谱仪电源开关,开PC机后使其联机成功，之后打开真空泵阀门。
（2）真空度达到2╳10-5Pa后，通过调谐系统检查质谱运行情况。
7. 3. 2 设定液相色谱和质谱参数:选择合适的色谱柱、流动相，设置梯度程序及柱温。
选择离子源模式，设置质谱参数。
数据采集的范围及条件设置。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程一、引言Agilent 1100高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本文将详细介绍Agilent 1100高效液相色谱仪的操作规程，以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
二、仪器准备1. 检查仪器是否处于正常工作状态，包括电源是否连接、仪器是否通电等。
2. 检查仪器各部件的完整性，如进样器、泵、柱箱、检测器等。
3. 检查进样器的进样针是否干净，如有污染应及时清洗。
4. 检查溶剂瓶是否充足，必要时更换。
三、样品准备1. 根据实验要求准备样品，并确保样品的纯度和浓度符合要求。
2. 准备样品溶液，注意溶解度和稳定性。
3. 如需稀释样品，请使用纯净溶剂，并按照一定比例稀释样品。
四、仪器操作1. 打开Agilent 1100高效液相色谱仪的电源，确保仪器处于正常工作状态。
2. 打开色谱软件，并进行系统初始化。
3. 在色谱软件中设置实验方法，包括进样量、流速、梯度程序等。
4. 打开进样器盖，将样品注射器插入样品瓶中，吸取适量的样品溶液。
5. 关闭进样器盖，将样品注射器插入进样器，并按下进样按钮进行进样。
6. 打开泵的开关，调节流速至所需数值。
7. 检查柱箱的温度设置，根据实验要求进行调节。
8. 打开检测器，并设置检测器的参数，如波长、灵敏度等。
9. 开始实验运行，观察色谱图的变化并记录实验数据。
10. 实验结束后，关闭泵、检测器等设备。
11. 关闭色谱软件，并保存实验数据。
五、日常维护1. 每次使用后，及时清洗进样器和柱箱，避免样品残留。
2. 定期检查泵的密封件，如有磨损应及时更换。
3. 定期校准检测器，确保准确性和稳定性。
4. 定期更换柱子，避免柱子老化影响实验结果。
5. 清洗仪器外壳，保持仪器的整洁。
六、故障排除1. 若发现仪器无法正常启动，检查电源和连接线是否正常。
2. 若发现进样器无法正常工作，检查进样针是否堵塞或损坏。
Agress1100高效液相色谱系统操作规程(紫外可见检测器)
Agress1100高效液相色谱操作规程（紫外可见检测器）1. 目的规范Agress1100高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Agress1100高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责仪器室分析人员负责Agress1100高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由P1100高压恒流泵、D1100紫外-可见检测器、Rheodyne 7725i手动进样阀、Elitapex色谱工作站、计算机以组成。
5. 程序5.1.准备（1）使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（色谱纯；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、配置样品和标准品（必须用0.45μm滤膜过滤）、选择合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）、与7725i进样阀配套的进样器和定量管。
（2）通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作（一）开机1. 接通电源，依次打开P1100泵、D1100检测器，待仪器自检结束显示正常状态后，打开电脑显示器、计算机。
（二）排气1. 打开P1201泵后，打开放空阀(逆时针转动放空阀手柄至90度)；2. 按冲洗键使泵用最大流量对流动相进行排气，若流动相管路中存在明显的空气要使用配件中的20ml吸液针管连接到放空阀出口管处进行抽取，直至抽出液体，然后关闭放空阀，拔下针管，连接好管路，拧开放空阀重新排气；3. 排气完毕后将放空阀顺时针拧紧；（三）打开工作站1.点击Elitapex启动图标，按[确定」，进入系统主界面。
点击仪器控制菜单，弹出系统配置、仪器控制及光谱扫描选项，点击系统配置，将仪器列表中的仪器选项添加到系统配置选项中去后，（以实际仪器配置为准）点击验证系统配置，如显示结果与系统配置中选顶一致，证明系统连接正常，电脑可对仪器进行反控。
点击仪器控制选项，对泵的流量、梯度曲线进行设置，同时对检测器波长设定及柱温箱温度设定确认后，启动数据采集。
高效液相色谱仪操作方法
一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve 窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow”处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
Agilent 1100液相色谱仪使用操作指导
Agilent 1100液相色谱仪使用操作指导书一、目的：规范液相色谱仪使用，保证检验结果的准确性。
二、适用范围：适用于我司的液相色谱仪日常使用及维护。
三、职责：理化检验员负责该作业指导书的执行。
理化组组长负责监督指导。
四、操作方法：1.首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系。
（有机系用尼绒的，水系用纤维素的）2.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3.开机：（1）打开计算机,进入Windows画面。
（2）把脱气后的流动相放入溶剂瓶中。
（3）打开1100LC各模块电源。
（4）待各模块自检完成后，双击Instrument1Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入工作站画面。
（5）从“视图”菜单中分别选择“方法和运行控制”、“显示顶部工具栏”、“显示状态工具栏”、“系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
（6）打开冲洗阀。
（7）单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“设置泵”选项，进入泵编辑画面。
（8）设流速：1ml/min，单击“确定”。
（9）单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“启动”，单击“确定”，则系统开始运行，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止。
（10）关闭冲洗阀。
（11）单击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶填充量”，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击“确定”。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：●从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，全部选中，单击“确定”，进入下一画面。
2、方法信息：在“方法信息”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
单击确定。
3、泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂B”处输入40,(C=100-B),也可在时间表中插入一行时间表,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
单击“确定”。
4、MWD检测器参数设定:●在”波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如618nm,在”Peakwidth(Responsetime)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.2min(4s)。
Agilent 1100原理及操作
工作原理：
性 能：
流量范围0.2~10ml/min； 四通路可灵活进行等度或梯 度洗脱； 自动冲程调节，混合均匀， 降低基线噪音。
泵头结构图
Agilent 1100 系列自动进样器
技术指标：
样品容量： 100 x 2 ml vials in 1 tray 进 样 量: Standard: 0.1~100 µ l Up to 1.8 ml using multi draw option Expanded injection range : 0.1~900 µ l 精 度: 1~5 µ l <1% RSD 5~100 µ l <0.5% RSD 残 留: Without needle wash <1% With needle wash <0.05% 延迟体积: Standard mode : 300 µ l + injection volume In by pass mode : 6.2 µ l
Agilent 1100 HPLC 系统 组成及基本操作
赵晓莉
2003.10
汇 报 提 纲
第一部分 液相色谱的基本原理及主要参数
第二部分 Agilent 1100 的仪器组成及工作 原理（硬件部分） 第三部分 Agilent 1100 化学工作站及其操 作系统（软件部分）
高效液相色谱仪Agilent 1100仪器结构和操作
Agilent 1100 型高效液相色谱仪[美国Agilent公司]一．仪器原理及结构高效液相色谱（简称HPLC）是色谱法中最重要的一个分支。
与气相色谱相比，HPLC 的分离模式更为多样化，适用样品范围更广。
它不仅能分离高沸点、强极性和热不稳定的化合物，而且适合于离子性、大分子及具有生物活性的化合物的分离。
据估计，自然界20%的已知化合物能用气相色谱直接分析，而70%以上都可用HPLC分析。
另外，经HPLC分离后的样品组分很容易收集，故能用于制备分离。
HPLC有多种分离模式，但其仪器结构都基本相同，仪器流程如下：流动相置于储液瓶，由四元泵输入系统，样品用自动进样器从进样阀引入，经色谱柱分离后进入检测器进流动池，吸光度信号经放大后由记录仪记录。
检测器则主要有UV-VIS、二极管阵列、示差折光、荧光、电化学及质谱等。
图3-4为Agilent 1100 HPLC仪器的结构示意图，它主要由下面几部分组成：（1）真空脱气机：高性能脱气，避免了烦琐的操作，可提高仪器的稳定性。
（2）四元输液泵：Agilent 1100泵是采用新的单向结构的活塞泵。
流量设定范围从0.2至10mL·min-1，精度0.1mL·min-1。
该泵可自动监测压缩性补偿值，保持高压条件下的流量准确度。
其压力上限可在0-4×104kPa(0-6000psi)的范围内调节。
（3）自动进样器：样品盘容量100×2mL，样品进样体积为0.1-1500µL。
具有操作简便，准确度高，重现性好的特点。
（4）柱温箱：控温范围：低于室温10℃-80℃，可容纳30cm长的色谱柱，样品在此分离。
根据样品类型和分离模式，可选用各种不同的液相色谱柱。
1. 溶剂柜2. 真空脱气机3. 排液阀4. 四元泵5.自动进样器6. 柱温箱7. 检测器图3-4 Agilent 1100 HPLC仪器结构示意图（5）DAD检测器：波长范围190-950nm，可变狭缝，可进行自动峰检索，利用紫外谱图进行峰确认。
[知识]Aglent1100型液相色谱仪操作规程
![[知识]Aglent1100型液相色谱仪操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/514a14b6294ac850ad02de80d4d8d15abe2300f5.png)
Aglent1100型液相色谱仪操作规程Aglent1100型液相色谱仪操作规程1. 目的：建立安捷伦1100型高效液相色谱仪的标准操作规程，确保操作的准确与可靠。
2. 依据：安捷伦1100型高效液相色谱仪使用说明书。
3. 范围：适用于安捷伦1100型高效液相色谱仪的操作管理。
4. 责任：仪器使用者对本规程的实施负责，QC主任负责监督该操作规程的正确执行。
5. 正文：5.1.操作步骤5.1.1.打开计算机，进入windows英文操作系统，并运行Bootp Sever 程序。
5.1.2.开启液相色谱仪主机5.1.3.依次打开1100 LC自动进样器、泵及所需要使用的检测器等各模块的电源开关。
待各模块自检完毕后，双击Instrument Online 图标，色谱工作站自动与1100LC接通，并出现Configuration对话框，选中左测栏内需用的模块图标，单击add，便可进入右测的使用状态；选中右测栏内不需用模块的图标，单击remove，便可使之进入左测栏内的不使用状态。
5.1.4.把所需要的流动相经过过滤后放入溶剂瓶中。
5.1.5.单击pump图标，出现参数设定菜单，选中Setup pump，设置流速Flow为5.0ml/min、Stop Time、以及流动相的比例，逆时针打开Purge阀。
单击Pump Control选项，选中on，单击OK，开始脱气至通道无气泡为止。
5.1.6.开启泵的在线洗脱，用10%异丙醇溶液清洗，必要时从清洗液的流出管口用注射器抽一下，使得其流速为3～5滴/分钟。
5.1.7.单击Pump Control选中off，关泵，顺时针旋转关闭Purge阀。
5.1.8.单击Pump图标，单击Setup Pump选项，进入pump编辑画面，设流速、Stop Time（要超过组分的保留时间）、以及流动相在各个通道的比例、最高柱压和最低柱压等，单击“OK”。
5.1.9.单击泵下面的图标，输入各个溶剂瓶内的实际体积（SolventBottles Filling），以及Prevent Analysis if Level Falls Below Liter，单击“OK”。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相；B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
单击OK，进入下一画面。
4、DAD检测器参数设定：进入“DAD signals”画面，输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽（参比波长带宽默认值为100nm）；选择Stoptime：as Pupm；在“Spectrum”中输入采集光谱方式“store”：选All；如只进行正常检测，则可选None；范围Range：可选范围为190~950nm；步长Step可选2.0nm；阀值：选择需要的灯；Peak width（Response time）即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽，可选“2s”或4s；Slit-：狭窄缝，光谱分辨率高；宽时，噪音低。
可选4nm单击OK，进入下一画面。
5、进入“Signal Details”画面，单击OK，进入下一画面。
6、进入“Edit Integration Events”（编辑积分结果）画面，单击OK，进入下一画面。
7、进入“Specify report”（积分参数）画面，单击OK，进入下一画面。
8、进入“Instrument curves”画面，单击OK，进入下一画面。
9、进入“Run Time checklist”（运行时间表）画面，选择“Date Acquistition”和“Standard Date Analsis”，单击OK，完成参数设定，回到工作站画面。
10、单击“Method”菜单，选中“Save method as”，输入文件名，单击OK。
（路径：e\HPCHEM\1\methods\***）注：如果调用一个方法，则在“Method”菜单，选中“Load method”，选方法名，单击OK。
11、从菜单“View”中选择“Online signal”，选中Window 1 ，然后单击Change 钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点OK。
（如同时检测二个信号，则重复11，选中Window 2）。
三、运行样品1、单击泵（Pump）图标下面的小瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，并且选停泵体积。
单击OK。
2、手动打开Purge阀：逆时针转2~3圈。
3、单击泵（Pump）图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
设Flow：5ml/min，单击OK。
4、开泵：直接点Pump图标下面的泵开关小图标，或单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump contrlo选项，选中On，单击OK。
5、系统开始排液（Purge），直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续排液，直到所有通道无气泡为止。
（每个管线内液体约20ml，在5ml/min的流速下，均需4~5min才能排完）6、单击泵（Pump）图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
把Flow改为0.5~1.0ml/min，单击OK。
7、等待流速降下来后，关闭排液阀。
8、待压力稳定后，从“Instrument”菜单中选择“System on”或单击GUI图标的On图标启动系统。
开始走基线，并可选择观察信号。
注：仪器运行过程，画面颜色由灰色转变成黄色或绿色，当各部件都达到所设参数时，画面均变为绿色，左上角红色的“not ready”变为绿色“ready”，表明可以进行分析。
（此时如果要终止仪器的运行，可单击流程图右下角的“off”，再单击“Yes”，关闭输液泵和检测器氘灯）。
9、单击最大化按钮，将online Plot窗口放大。
待基线平稳后，点信号窗口的“Banlance”，调至零点。
10、等仪器Ready ，从“Runcontrol”菜单中选择F5或“Run method”。
11、编辑样品信息：从“Run control”菜单中选择“Sample into”选项，选择“Sample Info…..”，即打开了样品信息页面，输入操作者（Operator Name）、数据存贮通道（Subdirectory）、样品名（Sample Name）、进样瓶号（Vial）、浓缩因子（Multipline）、稀释因子（Dilution）、，“Data file”中选择“Prefix”，在Prefix框中输入批号或日期等，在Counter框中输入计算器的起始位，仪器会自动命名。
（样品量（Sample Amount）、内标量（ISID Amount）可不选，Location 只对自动进样器有用，不填则走空白，检查干扰峰的来源。
）单击OK。
12、进样分析：进样阀扳到Load位置，插入注射器，注样品，进样后扳动阀至Inject位置。
13、进样分析结束，点Close键退出样品分析。
（注意：检测完尽量要关DAD的灯，以保持灯的寿命。
单击DAD图标，出现参数设定菜单，单击control ，选择关灯。
）四、数据分析方法编辑（可在offline下操作）1、从“View” 菜单中选“Date analysis”进入数据分析画面。
该页面最上方为命令栏，依次为File ，Graphics，Integration……等。
命令栏下为快捷操作图标，如积分、校正、色谱图、单一色谱图调用、多色谱图调用、调用方法、保存等。
2、从“File”菜单中选“Load signal”，或单击快捷操作的“单一色谱图调用”图标，选择色谱图文件名，单击“ＯＫ”，画面中即出现所调用的色谱图。
3、做图谱优化，从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项。
从Ranges 中选择Auao scale及合适的显示时间，单击OK，或选择“Use Ranges”调整。
反复进行，直到图的比例合适为止。
4、积分（1）先调用所要分析的色谱图，从“Integration”中选择“Auto integrate”，从“Integration”中选择“Integration Results”，此时仪器将内置的积分参数给出积分结果。
如积分结果不理想，再从“Integration”菜单中选择“Integration Events”选项，或单击快捷操作的“编辑/设定积分表”图标，此时，在屏幕下方左侧出现积分参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数，如斜率（Slope sensitivity）、峰宽（Peak width）、最小峰面积（Area reject）、最低峰高（Height reject）等。
（2）从“Integration”中选择“Integrate”选项或单击快捷操作的“对现有色谱图积分”图标，仪器即按照新设定的积分参数重新积分。
（3）若积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
（4）完成后，单击左边的“ˇ”图标，将积分参数存入方法。
5、打印报告：（1）从“Report”菜单中选择“Specify report”选项，或单击最右侧快捷操作的“定义报告及打印格式”（右下角带叉的报告画面）图标，进入打印画面。
（2）根据实际要求选择报告的格式和输出形式等。
可在“Calculate”右则的黑三角中选“Percent”（面积百分比），其它项不变。
（如“Destination”项下选择“Screen”；“Based On”选“Area”；“Sorted By”选“Signal”；“Repirt Style”选“Short”；选择“Add chromatogram Output（打印色谱图）”；选择“With Calibrated Peaks”；选择“Portrait”；可根据需要选择“Size”）。
（3）单击OK。
（4）选择快捷操作的“报告预览”图标，可预览报告的全貌。
从“Report”菜单中，选择“Print Report”，则报告打印到屏幕上，如想输出到打字机上，则单击“Print”，即可进行报告的打印。
最后，单击“close”退出此操作页面。
6、定量分析如果需要进行标准曲线制备，可按此项进行操作。
（1）一级校正表的建立：在“Data Analysis”界面下，调用最低浓度的色谱图，在“栏“Calibration”下，选择“Ｎew Calibration Table”，选择“Automatic Setup Level”，并设校正级数为“1”，单击“ＯＫ”。
在画下方左侧出现校正表，右侧为校正图。
在画面左下侧的校正表中选择所要的色谱峰，输入校正级数、化学物名称及浓度，如果采用内标法，需对内标峰进行标记。
单击ＯＫ，工作站提示是否删除0浓度行，单击Yes 。
（2）二级校正表的建立：调用第二个色谱图，在命令栏“Calibration”下，选择“Add Level”，设为“2”，单击“ＯＫ”，在画面左下侧的校正表中输入校正级数、化学物名称及样品浓度。