安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训
Agilent 1200高效液相色谱培训材料使用说明书
Agilent 1200 LC[Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、 目录二、 培训目的 (3)三、 培训准备 (3)1. 仪器准备 (3)2. 溶剂准备 (3)四、 方法建立 (3)1. 开机准备 (3)2. 数据采集方法编辑 (5)9 G1310A(单元泵) (5)9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7)9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)9 G1328A(手动进样器) (11)9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15)9 G1362A(示差检测器) (17)9 G1321A(荧光检测器) (19)9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)3. 数据分析方法编辑 (25)9 谱图优化 (25)9 积分参数优化 (25)9 校正 (27)9 打印报告 (28)9 光谱 (29)4. 建立全新完整方法向导 (31)9 新建完整方法： (32)9 保存方法： (36)9 保存即时改变的方法 (36)9 调用方法： (36)5. 进样 (36)9 单针进样 (36)9 序列进样 (37)五、 关机 (37)1. 关闭检测器的灯 (41)2. 冲洗系统 (41)3. 封存色谱柱 (41)4. 关闭电脑 (41)5. 关闭模块 (41)六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)七、 Agilent 1200保养维护 (43)八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)二、 培训目的9基本了解1200LC硬件操作。
安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项
安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项
安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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安捷伦1100高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作目的：规范Agilent1100高效液相色谱仪操作程序范围：适用于实验中心Agilent1100高效液相色谱仪的使用责任：实验中心相关人员对此程序负责内容：1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现)2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。
为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器，以下是一些规范操作的步骤和注意事项。
1.仪器准备-开启仪器电源，并等待仪器自检完成。
-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。
-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净，并按需更换柱筒。
2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品，并确保其纯度和浓度符合实验要求。
-制备规范的稀释液或内标溶液，以便进行质量控制和校准。
3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。
-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。
-根据实验要求选择合适的检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）。
4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱，并将柱安装在柱底座上。
-将导线连接到柱温控制系统，并设置柱温。
-选择适当的流动相溶剂，用它们预平衡柱，以确保柱达到稳定状态。
5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。
-定期进行质控分析，以检验仪器的准确性和精确性。
-根据需要，进行合适的质量控制和校正操作。
6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式（如自动进样器、手动进样器等）。
-通过进样器吸取样品，并确保进样量准确无误。
-进行一定的进样准备，如过滤、稀释等。
7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置，样品进样准备完毕，并进行柱的平衡。
-点击“开始”按钮，启动分析程序。
-监测分离曲线或结果，确保分析结果的准确性与可靠性。
8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。
-对结果进行后处理和数据分析，如绘制色谱图、峰面积计算等。
-存储数据，以备后续分析和查阅。
9.仪器维护与清洁-使用完毕后，关闭仪器并断开电源。
-清洗注射器和柱等关键部位，以防止残留的样品引起交叉污染。
安捷伦1100高效液相色谱仪标准操作规程
目的：规范AgilentllOO高效液相色谱仪操作程序范围：适用于实验中心AgilentllOO高效液相色谱仪的使用责任：实验中心相关人员对此程序负责内容：1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agile ntllOO高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2 打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online 状态，约30 秒钟后, 计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Con trol,I nstrume nt 等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器—输液泵—柱温箱—检测器—数据处理—报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定（色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现）2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“ 0K，即完成。
2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下，选择“ Load Method ”，或直接单击快捷键操作的“ Load Method'图标，选定文件名，单击“0K，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，贝何同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method'下，选择“ Edit Entire Method,在每个页面中键入设定值，单击“ 0K。
安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训
安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训作为一种重要的分析技术，高效液相色谱（HPLC）在实验室中被广泛应用于各种化学、生物和环境领域的分析。
而安捷伦高效液相色谱工作站作为常用的HPLC设备，其高级操作技巧的掌握对于提高实验效率和结果的准确性至关重要。
以下是安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训的主要内容：1.仪器介绍：详细介绍设备的基本结构和主要部件，包括进样器、分离柱、检测器等，并对各个部件的功能和操作方法进行说明。
2.方法开发：介绍如何根据实验需求选择合适的柱和流动相，调整流速、梯度程序、温度等参数，以达到最佳的分离效果和分析结果。
3.样品处理：讲解样品的前处理方法，如提取、净化、稀释等，以及常用的样品制备技巧，如固相萃取、离心等，以确保样品的准确性和稳定性。
4.数据处理：教授如何使用工作站软件进行数据采集、分析和处理，包括峰识别、峰面积计算、定量分析等，以及如何导出和保存数据结果。
5.故障排除：介绍常见的仪器故障及其解决方法，如柱堵塞、泵压不稳定、峰形不对称等，提供具体的故障诊断和维修指南。
6.方法验证：讲解常用的方法验证和质量控制技巧，包括标准曲线的建立和验证、精密度和准确度的评估等，以确保实验结果的可靠性和准确性。
该培训旨在使参与者掌握安捷伦高效液相色谱工作站的高级操作技巧，提高实验效率和分析结果的准确性。
通过实践操作和案例分析，培训参与者将能够熟练使用工作站进行方法开发、样品处理、数据处理和故障排除，并能够进行方法验证和质量控制。
总结：安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训是一项重要的培训活动，对于提高实验效率、保证实验结果的准确性和可靠性具有重要意义。
通过该培训，参与者将能够全面掌握安捷伦高效液相色谱工作站的操作技巧，并能够独立开展高效液相色谱分析实验。
Agilent1200型高效液相色谱仪操作手册
Agilent 1200 LC（中文版 B01.01）现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的：●基本了解1200LC硬件操作。
●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1200LC●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
●色谱柱: Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column P/N 993967-9022、溶剂准备：●色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“显示顶部工具栏”，“显示状态工具栏”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。
8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：1.0ml/min。
AgilentHPLC1100ChemStation高级操作培训(安捷伦科技公司)
2020年9月25日
授课教师 纪学海
2005-3-212020/9/25
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HPLC 1100 Advance操作培训日程安排
第一天 第二天
上午： 1 课程简介及相互介绍 2 化学工作站各个工作界面介绍 3 完整方法的编辑、修改、存储及运行 4 HPLC 1100 仪器配置及参数设置
进样和运行位置
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标准自动进样器的程序进样
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Wellplate自动进样器参数
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柱温箱参数设置
控温范围：低于室温10℃～80℃ 两个单独的加热区 安装切换阀可以进行柱切换 可以容纳30 cm长色谱柱 安装柱识别可以自动记录进样次 数
从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook 显示当前Logbook内容。
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第二章 方法编辑、保存
•方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品所需要 的所有参数。
•方法文件名：xxx.m。
•方法的组成： 方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist)
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化学工作站Views菜单
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
安捷伦液相色谱
Agilent(安捷伦)1200液相色谱仪培训教程一、培训目的：●基本了解1200LC硬件操作。
●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1200LC● G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
● G1315A/B (DAD检测器)。
● G1321A (FLD检测器)。
●色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。
2、溶剂准备：●色谱级纯或优级纯乙腈（ACN）或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
安捷伦液相高级操作培训课件
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Full menu/short menu切换
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化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗
第一章 化学工作站各个工作界面介绍
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
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高效液相仪器培训 ppt课件
构造：由储液器、泵、自动进样器、色谱 柱、检测器、工作站等几个部分组成。
原理：工作时储液器中的流动相被高压泵
打入系统，样品溶液经样品进样器进入流动 相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由 于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的 分配系数，在两相中做相对运动时，经过反 复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在 移动速度上产生较大的差别，被分离成单个 组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品 浓度被转换成电信号传送到工作站，数据以 图谱形式打印出来。
泵头组件
ppt课件
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过滤白头的更换
打开冲洗阀，以纯化水为流动相， 设置流量为5ml/min，此时系统压力如果 超过10bar，则需更换过滤白头。 更换步骤： 1，关闭泵电源； 2，用扳手去掉通往进样器上的毛细管， 拔掉废液管； 3，用专用扳手小心把清洗阀卸下来； 4，轻轻去掉聚四氟乙烯密封垫和金密封 垫，将过滤白头拿出； 5，更换新的过滤白头，装上聚四氟乙烯 密封垫和金密封垫； 6，装上清洗阀； 7，连接管路。
四元泵： 四元泵多通道比
例阀使用时注意，缓 冲溶液要放下面的通 道，有机相放在上面 的通道。
ppt课件
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流通进样阀
ppt课件
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手动进样：
进样针：平头微量进样器 进样量：满环进样，需推入3-5倍定量环体积的样品 动作：在充样（Load）状态下推针，动作要平缓、匀速，以防止样 品冲出。进样后先切换到进样（Inject）状态再拔针，以防止倒吸 或产生气泡 清洗进样口：在进样（Inject）状态下清洗进样口 废液口：废液管的出口末端应与进样口平行，防止样品的倒流泄漏 和虹吸
➢柱温箱：色谱柱安装与此，维持恒定温度， 使样品在稳定的条件下分离。
➢检测器：对分离后的各组分进行检测，产 生响应信号
安捷伦（agilent1260）高效液相色谱仪操作规程
安捷伦（agilent1260）高效液相色谱仪操作规程1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。
2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。
3.有关责任：化验室精密仪器室4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容：5.1开机前准备5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。
5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。
5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。
5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。
5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。
5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。
(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。
)5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。
安捷伦1260高效液相色谱培训课件
D、选择使用适宜的流动相（尤其是PH值），以避免固 定相被破坏。有时候可以在进样器前面连接一预柱， 分析柱是键合硅胶，预柱为硅胶，可是流动相在进入 分析柱之前预先被硅胶饱和，避免分析柱中的硅胶基 质被溶解。
概述
高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年 代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技 术，随着不断改进与发展，目前已成为应用极 为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在经 典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论， 在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏 度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度 高、操作自动化的特点。
•9 •安捷伦1260高效液相色谱培训
E、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接进入柱内， 需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一 个保护柱，保护柱一般是填有固定相的短柱，保护柱可以 经常更换。 F、经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质 G、保存色谱柱时应将色谱柱中充满乙腈或甲醇，柱接
•4 •安捷伦1260高效液相色谱培训
2、输液泵的使用和维护注意事项 A、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质 微粒都能磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先 除去流动相中的任何固体微粒； B、流动相不应含有任何腐性物质含有缓冲液的流动相不应 保留在柱内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如 果含有缓冲溶液的流动相在柱内，由于蒸发或泄漏，甚至 由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体。这些晶粒将 损坏密封环和柱塞等。因此，仪器在关机前必须将泵清洗 干净，再换成适合色谱柱保存的和有利于泵维护的溶剂。 C、泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空 泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。 D、输液泵的最高压力不要超过规定的最高压力值，否则会 使高压密封环变形。 E、流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的 稳定。
安捷伦液相色谱培训教材
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意味着本次对该部分内容不进行编辑，使用原方法中设置的参数。还有，仪器参数 设置——四元泵的参数设置。1、停止时间：是仪器停止采集数据的时间，并不是 泵停止工作的时间。本例中工作站仅采集0～10分钟的色谱图，10分钟后，不再采 集数据，但泵仍然继续工作，向系统提供流动相。使用自动进样器
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特别是在VWD设置中更不可选特殊设置中勾选“当关灯时可进行分析”，不然我们 的实验操作就没有意义了。这是为什么，大家一想就知道啦。 还有，在运行时选项表中要注意的问题是，除非有特殊要求，一般不建议选择“保 存GLP数据”、“将方法和数据保存在一起”选项，GLP
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数据是最原始的数据，不允许改动。一般情 况下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。 泵的设置方面，特别是梯度洗脱设置中建议 先预览一下，看看是不是我们想要的突变或 浙变效果。 数据分析中重点在于图谱的处理，以及如何 建立校正表。 有时我们得到的色谱图并不很理想，
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溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂，类似四元比例阀，但并不完全一样， 只能同时混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高，而且由于为高压混合，产生的气泡 也更少，所以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵，流速稳定性相对较差，低压 混合容易产生气泡，在实验中常会遇到这样的问题，多元
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这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常重要，一定要使用适当出口连接管， 出口管线要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不得私自将废液管截短，以防 气泡进入流通池。但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。
在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液相色谱仪正确的操作方法和定期的维 护保养的是很重要的。
参加广州安捷伦1200 高效液相色谱仪工作站培训班学习总结(颜)
GLP
数据是最原始的数据，不允许改动。一般情况
下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。
泵的设置方面，特别是梯度洗脱设置中建议先
预览一下，看看是不是我们想要的突变或浙变
效果。
数据分析中重点在于图谱的处理，以及如何建
立校正表。 有时我们得到的色谱图并不很理想，
那如何对它进行合理积分以得到比较准确的数
据这是个关键，这可以从积分事件中进行设置。
二元泵，有两个泵头，特点是高压混合，无需 脱气；对于有强紫外吸收的流动相，使用静态 混合器可以降低基线噪声；可以选择溶剂切换 阀自动进行溶剂切换；对于高盐流动相，可选 择泵头密封垫清洗装置。所以脱气机不是标准 配置，但增加真空脱气机，流量范围可以从
0.5～5ml/min扩展至0.05～5ml/min；加入静态
压力的上下限也要合理设置。压力上限不要高
于柱子能够承受的压力最大值，一般比正常分 析压力高20bar左右；而压力下限的数值一般比 正常分析压力低20bar左右；4、时间表：此处 可以编辑梯度洗脱程序，规定溶剂比例变化方 式。要注意程序时间与停止时间和后运行时间 之间的协调关系。单元泵的参数设置界面与四 元泵相比少了溶剂选择项，参数设置的要求
真空脱气机脱气原理
泵 安捷伦1200系列泵有：
单元泵：G1310A、
四元泵：G1311A、
二元泵：G1312A、
二元泵SL型：G1212B。
单独一个泵腔无法满足溶剂传输系统的要
求：连续性、稳定性都不符合标准，现在新购 仪器中已很少考虑。
单元泵，按溶剂的传输系统有两种，一种是并
联柱塞泵，另一种是串连柱塞泵。并联柱塞泵
工作站运行界面：单针进样
工作站运行界面：多针进样
最新【培训总结】 参加广州安捷伦1200 高效液相色谱仪工作站培训班学习总结讲学课件
地执行用户的进样程序要求，如多种样品自动 混合，自动进样等高级功能的自由设置，但是， 由于进样针的扩散，所以进样量越小，受到扩 散的影响也越大，所以自动混合的准确度还是 难以达到容量瓶的混合方式。这在做标准由线 时得注意的问题，如为定量则不推荐小样量的 混合方式。
程序进样方式设置如下图：
第一步：设置进样 器
可以利用诊断方式来检测氘灯的能量，当然， 发现氘灯能量降低时不要马上得出氘灯应该更 换的结论，这也许是流通池脏或有气泡造成的 能量降低，所以必须用诊断方式检测流通池。 诊断结果大于0.6说明流通池很干净，小于0.2则 说明流通池该清洗了。更换氘灯后要在诊断日 志中填写更换氘灯，这样氘灯的使用时数便从 零开始。
压力的上下限也要合理设置。压力上限不要高 于柱子能够承受的压力最大值，一般比正常分 析压力高20bar左右；而压力下限的数值一般比 正常分析压力低20bar左右；4、时间表：此处 可以编辑梯度洗脱程序，规定溶剂比例变化方 式。要注意程序时间与停止时间和后运行时间 之间的协调关系。单元泵的参数设置界面与四 元泵相比少了溶剂选择项，参数设置的要求
开首语
本人在2008年1月8日至1月11日参加广州 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 化学工作站的学习培训，几天学习培训，使 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 面的了解和更多的认识，现在做个总结向大 家介绍如下。
硬件篇
安捷伦高效液相色谱仪1200由几部分 组成，脱气机，泵、进样器、柱温箱和检测器。 安捷伦1200HPLC系统采用积木式堆积结构，方 便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整 个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系 统的死体积和延迟体积。
二元泵的工作原理
进样器，安捷伦1200系列进样器有： 标准自动进样器G1329A、 高性能进样器G1367A、 高性能进样器SL型G1367B、 手动进样器G1328B。
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编辑一个完整的方法
使用 Edit Entire Method 编辑一个完整的方法
单击图标，也可以开始 编辑一个完整的方法。
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选择所要编辑的内容
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方法信息 (Method Information)
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泵的操作参数
包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运 行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等
HPLC 1100 ChemStation 高级操作培训
HPLC 1100 Advance操作培训日程安排
第一天 上午： 1 2 3 4 课程简介及相互介绍 化学工作站各个工作界面介绍 完整方法的编辑、修改、存储及运行 HPLC 1100 仪器配置及参数设置
下午：1 数据分析参数设置 2 色谱图的优化处理 3 积分事件及手动积分的选择和应用 4 高级校正表的编辑和设置 第二天 上午：1 报告格式的选择及设定 2 光谱的提取、光谱库的建立及检索 3 色谱峰纯度检测 4 色谱条件的优化及色谱图的提取 下午：1 序列参数的设置以及统计功能的使用 2 批处理功能的设置及应用
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Sample Signal and Reference Signal:
设置样品吸收波长与参比波长遵从下列规则：
•样品吸收波长选择在样品的最大吸收波长，而且在此吸收波长下没有流动相吸收的 干扰。 •选择样品信号的谱带宽度应覆盖样品吸收谱带的半峰宽（假设样品吸收谱带为高斯 峰）。
•参比吸收谱带应选择在尽量靠近样品吸收谱带，而且在此区域没有或尽量低的吸收 强度。
•参比峰谱带宽度要大于或等于样品谱带宽度。 注意：增加样品谱带宽度，会降低样品的吸收强度，但会降低噪音。
选择合适的参比吸收波长可以减小梯度洗脱过程中的基线漂移。
Peak Supression（峰抑制）:
DAD检测器一个非常有趣的功能是进行峰抑制。例如有两个样品没有分开，共同洗 脱出来，可以设置某一个样品的等吸收波长为参比波长，则被设为参比峰的样品被 抑制，而另一个样品峰被分离。不过，此样品峰的吸收强度要损失10％～30％。
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化学工作站Views菜单
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
Full menu/short menu切换
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化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
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化学工作站Scheduler的使用
使用时要注意保存，否则工作 站不予以执行。
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标准自动进样器参数
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标准进样过程原理示意图
Metering device
Sampling unit
From pump To calve
To waste
抓取样品瓶 吸取样品
进样和运行位置
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标准自动进样器的程序进样
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Wellplate自动进样器参数
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柱温箱参数设置
控温范围：低于室温10℃～80℃ 两个单独的加热区 安装切换阀可以进行柱切换 可以容纳30 cm长色谱柱 安装柱识别可以自动记录进样次数
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DAD检测器参数设置
可以选择存储 5 个信号 信号波长范围 191 - 949 nm 可变狭缝： 1, 2, 4, 8, 16 nm 可以时间编程 可以保存数张或所有光谱
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VWD检测器参数设置
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运行时间表(Run Time Checklist)
选择在方法中要执行的项目 可以选择保存GLP数据 可以将方法和数据保存在一起
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存储方法
从Method菜单选择Save Method / Save Method as或从存贮方法 工具图标存贮方法。
Peak Width:
增加响应时间（峰宽）可以增加组成色谱信号中每个数据点的采集次数。因为检 测器的噪音与采集次数平方根成反比，所以增加响应时间可以降低噪音。但增加 响应时间（峰宽）会降低定量分析的重复性。一般对于精确的定量分析，一个色 谱峰要求采集20个数据点。设置峰宽的经验：设置峰宽等于实际色谱峰的最窄峰 宽。
单击本图标可以 保存方法，务必 注意不要发生方 法覆盖、丢失
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查看Logbook
从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook 显示当前Logbook内容。
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第二章 方法编辑、保存
•方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品所需要 的所有参数。 •方法文件名：xxx.m。 •方法的组成： 方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist)
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DAD参数优化
Step and Slit:
Agilent 1100 DAD 狭缝宽度可以程序变化，变化步径1，2，4，8，16nm。如果样 品浓度较高，而需要精细的光谱结构，建议使用1或2nm的狭缝宽度。如果样品浓 度较稀，建议使用8或16nm宽度狭缝。采集样品的谱带宽度至少要与狭缝宽度一 样。
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试 结业午餐 下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
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第一章 化学工作站各个工作界面介绍
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
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化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗 口中选择要监控的信号。
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在线信号显示