不同产地地肤子中皂苷的含量分析
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Chinese
2.Shendong
Medicine University,Jinan 250014,Shandong China)
[Abstract]
data
Objective:To transfer the effective elements of Bupleurum scorzonerifolium into ca.vrot,and provide tbecfetical
万方数据
第27卷第12期 2002年12月
中国中药杂志
China Journal of
vol 27.N012
Chinese
Materia Medica
1k。2002
种不同产地地肤子中momordin lc的含量,采用比 色法测定了其中总皂苷的含量。
1
2.1.6重现性试验 取同一批样品5份,每份约50 mg,精密称定, 分别置10 mL量瓶中,按“供试品溶液的制备”项下 处理并测定,结果该批地肤子中地肤子皂苷Ic平均 含量为2 73%,RSD为1.5%。
mL,
次,每次15 mL,合并正丁醇层,以正丁醇饱和的水
10
地肤子在全国各地普遍分布,根据我们收集
到的11批不同产地地肤子药材中momordin Ic和 总皂苷含量测定结果得知,不同产地药材中皂苷含 量存在一定差异,因此提示我们在用药时应注意产 地与药材质量的关系。 [参考文献】
【11
溶解并定容于10 mL量瓶中。精密吸取0.2 总皂苷的含量。结果见表2。
V
Effects of Oleanolic Biol
Glycosides
the Struc—
tLlr}req伍Rment
PhannBull,1998,21(1I):1231
[4]冯埃生,邹汉法,汪海林,等影响高效液相色谱/挥发激光散 射检测器检浏性能基本因素的考察药物分析杂志,t996,16 2.2.3
and
Esteras Isoenzyme Analysis
HUANGXhn—ron91,XIANGFeng-ningI。XIAC,uaatg-minl,ZHI阻yingl,Sill
(1
Shool of
Jun-yin92
Lifescience,ShndoIlg University,Jinan 250100,Shendong Chiaa;
mPa。 2.1.2
件下迸样,每次20以,按外标两点法对数方程计
算,所得结果见表2,样品和对照品色谱图见图1。
对照品溶液的制备
2.98
精密称取对照品地肤子皂苷Ic 的溶液。
2.1.3
nag,置5
mL量瓶中用甲醇溶解定容,配成0.596 mg・mL_1 供试品溶液的制备
5
称取经粉碎的地肤子药材约0
g,精密称定。
2 2.1 2.1.1
测定方法与结果 地肤子皂苷(momordin Ic)的含量测定 色谱条件 2.1.8样品测定 取11批地肤子药材供试品溶液在上述色谱条
色谱柱Lichrospher C18(4.6 mill×250 rnnR); 流动相甲醇.水.冰醋酸(85:15:0.2);流速1.0 mL・ rain。1;ELSD参数漂移管温度7012;氮气压力0.21
纵坐标,以进样量(”g)的常用对数值为横坐标进行 线性回归,得回归方程为:Y=1.53X+5.01,
r=0
地肤子药材供试品色谱图
9995,线性范围1.19~11.92飕。
2 2
2.1.5精密度试验 精密吸取上述对照品溶液,连续重复迸样5次, 每次20 pL,RSD为1.3%。
总皂苷的含量测定 标准曲线的制备
2
讨论 前期研究曾考察了直接回流法、索氏提取法、
超声法等不同提取方法,通过含量测定结果得知,超 声法提取最完全,故选择超声法提取。
3.2
86.5旭,回归方程:Y=3.601
0.01262.r=0.9998。
7
x
10~X~
地肤子中所含皂苷为三萜皂苷类成分,紫外
2.2.2
供试品溶液的制备及测定
吸收差,如用紫外检测灵敏度低,而ELSD是一种质 量型通用检测器,其响应值与被测物质的官能团和 光学性质无关,通用于各种物质¨J。检测结果表 明,其灵敏度与稳定性均能满足要求,ELSD对于无 紫外吸收或紫外吸收差的样品的检测,显示出了极 大的优越性。
[中硼分类号]R 282.5;R 284.1[文献标识码】B[文章编号]1001—5302(2002)12—0890—04
地肤子为常用中药,系藜科植物地肤Kochia scoparia(L)Schrad.的干燥成熟果实,始载于《神
【收稿日期]2002*054)9 [基金项目】国家新药基金资助项目(96_9014)5—210) 【通讯作者】电话:(025)5391253
按标准曲线项下方法进行测定,以外标两点法计算
表2地肤子皂苷Ic和总皂苷的含量(”=3)%
MataudaH,瓯Y,I出Y,etd
Extract
Biblioteka Baidu
StudiesoaKcdxlaeFrcEtusIII
of 70%Ethanol Fruits
Antinocieeptive and Antiinflmnmatory Effects and
第27椭12期
1竺竺!!里
中国中药杂志
vO.竹,№L2
生!竺!竺竺!堕壁!竺!!塑塑!!型塑——土竺竺L
杜,1985 96
【6 1嘏能书,万贤国.同工爵技术厦其应用长沙:湖甫科技出版
Somatic Hybridization between Carrot and Bupleurum scorzonerifolium
3.3
取经粉碎的地肤子药材约0.5 g,精密称定。置
50
mL量瓶中,加甲醇至刻度,按2.1.3项下方法超
声提取后,过滤,取续滤液10 mL,水浴上挥干甲醇 后,残渣加10 nlL水溶解,以石油醚萃取2次,每次
10
mL,弃去醚层,水层再以水饱和的正丁醇萃取3 rnL萃取1次,弃水层,回收正丁醇至干,加甲醇
out
a
the
further analysis of
the
trlaill active components
saikosaponin of somatic
the
sca'eening
of high-medicine-content hybrid cell lines
[Key words]can.t;Bufleurum scorzonertfolium;somatic
hybrid
nature
by phenotype and Estea'aze iscenzyme analysis
and
identified∞the somatic hybrids between B
scorzonemfolium
calTot.Conclusion:m
hybrids
and
provides
置50 mL量瓶中,加甲醇至刻度,密塞,称重,静置 过夜,超声提取30 min,称重并补足原重。测定时 过0.45tan微孔滤膜,取20"L进样。 2.1.4线性关系考察 精密吸取对照品溶液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,
1.0
l
~J
图2
mL,置于1 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇
匀,进样量20血,以对照品峰面积的常用对数值为
农本草经》,列为上品。具有清热利湿、祛风止痒等 功效。地肤子主要含三萜皂苷、生物碱、黄酮类和脂 肪油等成分,其中地肤子皂苷Ic(momordin lc)为其 抗瘙痒、抗炎和抗过敏作用的主要有效成分【1q J。 为探讨生长环境对药材品质的影响,本文采用反相 高效液相色谱法,利用蒸发光散射检测器测定了】1
1.91
2.2.1
精密称取对照品地肤子皂苷le
mg,置于
・891・
万方数据
第27卷第12期 2呻2年12月
中国中药杂志
China Journal of Chinese
Vol
27.No
12
Materia Medica
Dec.2002
1
rnL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成对照
取已知含量的药材细粉约25 nag,共5份,精密 称定,各精密加入浓度为1.046 mg・mLl的对照品 溶液1 mL,按供试品溶液的制备及测定方法操作, 加样回收率平均值为96.6%,RSD为2.5%,样品 吸收度值在30 rnin内测定基本稳定。
Momordin
Ic
fm酬Fruits
Y,et
and
its
C—ponent,
Bk/
of
Koch/a
scopariaL
PharmBull,1997,20(11):1165 [3]Matsuda H,Dai Y,ldo
Antipruritic
at
Studies
Acid
On
Kcchlae Fructus and
hybridization;H㈣iⅢmyme
[责任嗣辑袁桂京]
不同产地地肤子中皂苷的含量分析
夏玉凤,王强,戴岳,裴铠
(中国药科大学中药学院,江苏南京210038)
[摘要] 目的:比较了不同产地地肤子中单体皂苷(rnomccdin Ic)和总皂苷的含量差异。方法:分另0采用高效
液相色谱一蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法和比色法测定了地肤子中naom口'dln Ic及总皂苷的含量。结果:地肤 子中momordin lc与总皂苷的含量存在一定的相关性,即momordin Ic含量高,其总皂苷含量亦较高。11种地肤子 中,安徽毫州、河北保定、河北安国、黑龙江哈尔滨等地产地肤子中皂苷的含量较高。结论:不同产地地肤子中皂苷 的含量存在一定的差异,应注意生长环境对药材质量的影响。 [关■词】 地肤子;皂苷;高效液相色谱
pl㈣seorzonerifolitrnirradiated
fused with thc8e of
carrot
for the exploitation.improvefnent and selection of the germplasm of Chin8e
by
n砌inal
plants.Method:The
3 3.1
品溶液,精密吸取30,60,90,120,150止置具塞试
管中,挥去甲醇,精密加入新鲜配制的5%香草醛一 冰醋酸溶液0.2 rTlL,随即在冰浴中加入高氯酸0.8 mL,摇匀,在60℃水浴中加热15 min后取出,冷 却,精密加入冰醋酸5.0 mL,摇匀。作随行试剂空 白,在Uv.2501分光光度仪上,于548 nm处比色测 定吸收度,绘制标准曲线。线性范围57.3~
Its
Component,Momordin
L
Ic
from Dried
of
Kochiaxoparia
Nol PharmBull,1997,20(10):1086
[2]MatsudaH,DatY,IdoY.et al
Studies∞KochmeFructusIV
Extract
Anti—atlergic Effects of 70%Ethanol
回收率及稳定性试验
(6):414
Determination of the Content of Saponin in Kochia scoparia
Fruits from Different Producing Areas
2.1.7
实验材料与仪器 样品收集了山西太原、安徽毫州、江苏南京、浙
江宁波、吉林四平、陕西西安、山东荷泽、河北保定、 河南安阳、河北安国、黑龙江哈尔滨等地地肤子药材 共11批,各批药材均经作者鉴定为正品K.¥C0一
paria。
回收率试验
rng,
取上述已知含量的地肤子药材样品约25
共5份,精密称定,每份各精密加人一定量的对照 品,按“供试品溶液的制备”项下处理并测定,得平 均回收率为99.3%,RSD为1.6%(n=5)。结果 见表1。
表1 回收率试验(n=5)
对照品地肤子皂苷momordin Ic自制,纯度≥
99%。
甲醇,色谱纯(淮阴化学试剂厂产);水为纯净 水;香草醛,分析纯(上海双香助剂厂生产);其余所 用试剂均为分析纯。 日本岛津LCl0A液相色谱仪,法国SEDEX55 型蒸发光散射检测器,日本岛津UV2501可见一紫外 分光光度仪。
protoplasta of Bu—
ultravioletlight(UV)at
The
Fiseh by PEG method
8nintensity of 300 Pw‘(clwl2)~for 0,1,2min respectivelywere regenerated clones。derived form a ingIe fused cell,were examined for their Result:Nine clones were firm fotmdation for
2.Shendong
Medicine University,Jinan 250014,Shandong China)
[Abstract]
data
Objective:To transfer the effective elements of Bupleurum scorzonerifolium into ca.vrot,and provide tbecfetical
万方数据
第27卷第12期 2002年12月
中国中药杂志
China Journal of
vol 27.N012
Chinese
Materia Medica
1k。2002
种不同产地地肤子中momordin lc的含量,采用比 色法测定了其中总皂苷的含量。
1
2.1.6重现性试验 取同一批样品5份,每份约50 mg,精密称定, 分别置10 mL量瓶中,按“供试品溶液的制备”项下 处理并测定,结果该批地肤子中地肤子皂苷Ic平均 含量为2 73%,RSD为1.5%。
mL,
次,每次15 mL,合并正丁醇层,以正丁醇饱和的水
10
地肤子在全国各地普遍分布,根据我们收集
到的11批不同产地地肤子药材中momordin Ic和 总皂苷含量测定结果得知,不同产地药材中皂苷含 量存在一定差异,因此提示我们在用药时应注意产 地与药材质量的关系。 [参考文献】
【11
溶解并定容于10 mL量瓶中。精密吸取0.2 总皂苷的含量。结果见表2。
V
Effects of Oleanolic Biol
Glycosides
the Struc—
tLlr}req伍Rment
PhannBull,1998,21(1I):1231
[4]冯埃生,邹汉法,汪海林,等影响高效液相色谱/挥发激光散 射检测器检浏性能基本因素的考察药物分析杂志,t996,16 2.2.3
and
Esteras Isoenzyme Analysis
HUANGXhn—ron91,XIANGFeng-ningI。XIAC,uaatg-minl,ZHI阻yingl,Sill
(1
Shool of
Jun-yin92
Lifescience,ShndoIlg University,Jinan 250100,Shendong Chiaa;
mPa。 2.1.2
件下迸样,每次20以,按外标两点法对数方程计
算,所得结果见表2,样品和对照品色谱图见图1。
对照品溶液的制备
2.98
精密称取对照品地肤子皂苷Ic 的溶液。
2.1.3
nag,置5
mL量瓶中用甲醇溶解定容,配成0.596 mg・mL_1 供试品溶液的制备
5
称取经粉碎的地肤子药材约0
g,精密称定。
2 2.1 2.1.1
测定方法与结果 地肤子皂苷(momordin Ic)的含量测定 色谱条件 2.1.8样品测定 取11批地肤子药材供试品溶液在上述色谱条
色谱柱Lichrospher C18(4.6 mill×250 rnnR); 流动相甲醇.水.冰醋酸(85:15:0.2);流速1.0 mL・ rain。1;ELSD参数漂移管温度7012;氮气压力0.21
纵坐标,以进样量(”g)的常用对数值为横坐标进行 线性回归,得回归方程为:Y=1.53X+5.01,
r=0
地肤子药材供试品色谱图
9995,线性范围1.19~11.92飕。
2 2
2.1.5精密度试验 精密吸取上述对照品溶液,连续重复迸样5次, 每次20 pL,RSD为1.3%。
总皂苷的含量测定 标准曲线的制备
2
讨论 前期研究曾考察了直接回流法、索氏提取法、
超声法等不同提取方法,通过含量测定结果得知,超 声法提取最完全,故选择超声法提取。
3.2
86.5旭,回归方程:Y=3.601
0.01262.r=0.9998。
7
x
10~X~
地肤子中所含皂苷为三萜皂苷类成分,紫外
2.2.2
供试品溶液的制备及测定
吸收差,如用紫外检测灵敏度低,而ELSD是一种质 量型通用检测器,其响应值与被测物质的官能团和 光学性质无关,通用于各种物质¨J。检测结果表 明,其灵敏度与稳定性均能满足要求,ELSD对于无 紫外吸收或紫外吸收差的样品的检测,显示出了极 大的优越性。
[中硼分类号]R 282.5;R 284.1[文献标识码】B[文章编号]1001—5302(2002)12—0890—04
地肤子为常用中药,系藜科植物地肤Kochia scoparia(L)Schrad.的干燥成熟果实,始载于《神
【收稿日期]2002*054)9 [基金项目】国家新药基金资助项目(96_9014)5—210) 【通讯作者】电话:(025)5391253
按标准曲线项下方法进行测定,以外标两点法计算
表2地肤子皂苷Ic和总皂苷的含量(”=3)%
MataudaH,瓯Y,I出Y,etd
Extract
Biblioteka Baidu
StudiesoaKcdxlaeFrcEtusIII
of 70%Ethanol Fruits
Antinocieeptive and Antiinflmnmatory Effects and
第27椭12期
1竺竺!!里
中国中药杂志
vO.竹,№L2
生!竺!竺竺!堕壁!竺!!塑塑!!型塑——土竺竺L
杜,1985 96
【6 1嘏能书,万贤国.同工爵技术厦其应用长沙:湖甫科技出版
Somatic Hybridization between Carrot and Bupleurum scorzonerifolium
3.3
取经粉碎的地肤子药材约0.5 g,精密称定。置
50
mL量瓶中,加甲醇至刻度,按2.1.3项下方法超
声提取后,过滤,取续滤液10 mL,水浴上挥干甲醇 后,残渣加10 nlL水溶解,以石油醚萃取2次,每次
10
mL,弃去醚层,水层再以水饱和的正丁醇萃取3 rnL萃取1次,弃水层,回收正丁醇至干,加甲醇
out
a
the
further analysis of
the
trlaill active components
saikosaponin of somatic
the
sca'eening
of high-medicine-content hybrid cell lines
[Key words]can.t;Bufleurum scorzonertfolium;somatic
hybrid
nature
by phenotype and Estea'aze iscenzyme analysis
and
identified∞the somatic hybrids between B
scorzonemfolium
calTot.Conclusion:m
hybrids
and
provides
置50 mL量瓶中,加甲醇至刻度,密塞,称重,静置 过夜,超声提取30 min,称重并补足原重。测定时 过0.45tan微孔滤膜,取20"L进样。 2.1.4线性关系考察 精密吸取对照品溶液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,
1.0
l
~J
图2
mL,置于1 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇
匀,进样量20血,以对照品峰面积的常用对数值为
农本草经》,列为上品。具有清热利湿、祛风止痒等 功效。地肤子主要含三萜皂苷、生物碱、黄酮类和脂 肪油等成分,其中地肤子皂苷Ic(momordin lc)为其 抗瘙痒、抗炎和抗过敏作用的主要有效成分【1q J。 为探讨生长环境对药材品质的影响,本文采用反相 高效液相色谱法,利用蒸发光散射检测器测定了】1
1.91
2.2.1
精密称取对照品地肤子皂苷le
mg,置于
・891・
万方数据
第27卷第12期 2呻2年12月
中国中药杂志
China Journal of Chinese
Vol
27.No
12
Materia Medica
Dec.2002
1
rnL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成对照
取已知含量的药材细粉约25 nag,共5份,精密 称定,各精密加入浓度为1.046 mg・mLl的对照品 溶液1 mL,按供试品溶液的制备及测定方法操作, 加样回收率平均值为96.6%,RSD为2.5%,样品 吸收度值在30 rnin内测定基本稳定。
Momordin
Ic
fm酬Fruits
Y,et
and
its
C—ponent,
Bk/
of
Koch/a
scopariaL
PharmBull,1997,20(11):1165 [3]Matsuda H,Dai Y,ldo
Antipruritic
at
Studies
Acid
On
Kcchlae Fructus and
hybridization;H㈣iⅢmyme
[责任嗣辑袁桂京]
不同产地地肤子中皂苷的含量分析
夏玉凤,王强,戴岳,裴铠
(中国药科大学中药学院,江苏南京210038)
[摘要] 目的:比较了不同产地地肤子中单体皂苷(rnomccdin Ic)和总皂苷的含量差异。方法:分另0采用高效
液相色谱一蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法和比色法测定了地肤子中naom口'dln Ic及总皂苷的含量。结果:地肤 子中momordin lc与总皂苷的含量存在一定的相关性,即momordin Ic含量高,其总皂苷含量亦较高。11种地肤子 中,安徽毫州、河北保定、河北安国、黑龙江哈尔滨等地产地肤子中皂苷的含量较高。结论:不同产地地肤子中皂苷 的含量存在一定的差异,应注意生长环境对药材质量的影响。 [关■词】 地肤子;皂苷;高效液相色谱
pl㈣seorzonerifolitrnirradiated
fused with thc8e of
carrot
for the exploitation.improvefnent and selection of the germplasm of Chin8e
by
n砌inal
plants.Method:The
3 3.1
品溶液,精密吸取30,60,90,120,150止置具塞试
管中,挥去甲醇,精密加入新鲜配制的5%香草醛一 冰醋酸溶液0.2 rTlL,随即在冰浴中加入高氯酸0.8 mL,摇匀,在60℃水浴中加热15 min后取出,冷 却,精密加入冰醋酸5.0 mL,摇匀。作随行试剂空 白,在Uv.2501分光光度仪上,于548 nm处比色测 定吸收度,绘制标准曲线。线性范围57.3~
Its
Component,Momordin
L
Ic
from Dried
of
Kochiaxoparia
Nol PharmBull,1997,20(10):1086
[2]MatsudaH,DatY,IdoY.et al
Studies∞KochmeFructusIV
Extract
Anti—atlergic Effects of 70%Ethanol
回收率及稳定性试验
(6):414
Determination of the Content of Saponin in Kochia scoparia
Fruits from Different Producing Areas
2.1.7
实验材料与仪器 样品收集了山西太原、安徽毫州、江苏南京、浙
江宁波、吉林四平、陕西西安、山东荷泽、河北保定、 河南安阳、河北安国、黑龙江哈尔滨等地地肤子药材 共11批,各批药材均经作者鉴定为正品K.¥C0一
paria。
回收率试验
rng,
取上述已知含量的地肤子药材样品约25
共5份,精密称定,每份各精密加人一定量的对照 品,按“供试品溶液的制备”项下处理并测定,得平 均回收率为99.3%,RSD为1.6%(n=5)。结果 见表1。
表1 回收率试验(n=5)
对照品地肤子皂苷momordin Ic自制,纯度≥
99%。
甲醇,色谱纯(淮阴化学试剂厂产);水为纯净 水;香草醛,分析纯(上海双香助剂厂生产);其余所 用试剂均为分析纯。 日本岛津LCl0A液相色谱仪,法国SEDEX55 型蒸发光散射检测器,日本岛津UV2501可见一紫外 分光光度仪。
protoplasta of Bu—
ultravioletlight(UV)at
The
Fiseh by PEG method
8nintensity of 300 Pw‘(clwl2)~for 0,1,2min respectivelywere regenerated clones。derived form a ingIe fused cell,were examined for their Result:Nine clones were firm fotmdation for