不同产地地肤子中皂苷的含量分析

ａｎｄ
Ｅｓｔｅｒａｓ Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ
ＨＵＡＮＧＸｈｎ—ｒｏｎ９１，ＸＩＡＮＧＦｅｎｇ－ｎｉｎｇＩ。ＸＩＡＣ，ｕａａｔｇ－ｍｉｎｌ，ＺＨＩ阻ｙｉｎｇｌ，Ｓｉｌｌ
（１
Ｓｈｏｏｌ ｏｆ
Ｊｕｎ－ｙｉｎ９２
Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅ，ＳｈｎｄｏＩｌｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ ２５０１００，Ｓｈｅｎｄｏｎｇ Ｃｈｉａａ；
ｏｕｔ
ａ
ｔｈｅ
ｆｕｒｔｈｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
ｔｈｅ
ｔｒｌａｉｌｌ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
ｓａｉｋｏｓａｐｏｎｉｎ ｏｆ ｓｏｍａｔｉｃ
ｔｈｅ
ｓｃａ＇ｅｅｎｉｎｇ
ｏｆ ｈｉｇｈ－ｍｅｄｉｃｉｎｅ－ｃｏｎｔｅｎｔ ｈｙｂｒｉｄ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｃａｎ．ｔ；Ｂｕｆｌｅｕｒｕｍ ｓｃｏｒｚｏｎｅｒｔｆｏｌｉｕｍ；ｓｏｍａｔｉｃ
万方数据
第２７卷第１２期 ２００２年１２月
中国中药杂志
Ｃｈｉｎａ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ｖｏｌ ２７．Ｎ０１２
Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ
１ｋ。２００２
种不同产地地肤子中ｍｏｍｏｒｄｉｎ ｌｃ的含量，采用比 色法测定了其中总皂苷的含量。
１
２．１．６重现性试验 取同一批样品５份，每份约５０ ｍｇ，精密称定， 分别置１０ ｍＬ量瓶中，按“供试品溶液的制备”项下 处理并测定，结果该批地肤子中地肤子皂苷Ｉｃ平均 含量为２ ７３％，ＲＳＤ为１．５％。
Ｍｏｍｏｒｄｉｎ
Ｉｃ
ｆｍ酬Ｆｒｕｉｔｓ
Ｙ，ｅｔ
ａｎｄ
ｉｔｓ
Ｃ—ｐｏｎｅｎｔ，
Ｂｋ／
ｏｆ
Ｋｏｃｈ／ａ
ｓｃｏｐａｒｉａＬ
ＰｈａｒｍＢｕｌｌ，１９９７，２０（１１）：１１６５ ［３］Ｍａｔｓｕｄａ Ｈ，Ｄａｉ Ｙ，ｌｄｏ
Ａｎｔｉｐｒｕｒｉｔｉｃ
ａｔBiblioteka ＳｔｕｄｉｅｓＡｃｉｄ
Ｏｎ
Ｋｃｃｈｌａｅ Ｆｒｕｃｔｕｓ ａｎｄ
表１ 回收率试验（ｎ＝５）
对照品地肤子皂苷ｍｏｍｏｒｄｉｎ Ｉｃ自制，纯度≥
９９％。
甲醇，色谱纯（淮阴化学试剂厂产）；水为纯净 水；香草醛，分析纯（上海双香助剂厂生产）；其余所 用试剂均为分析纯。 日本岛津ＬＣｌ０Ａ液相色谱仪，法国ＳＥＤＥＸ５５ 型蒸发光散射检测器，日本岛津ＵＶ２５０１可见一紫外 分光光度仪。
ｍＬ，
次，每次１５ ｍＬ，合并正丁醇层，以正丁醇饱和的水
１０
地肤子在全国各地普遍分布，根据我们收集
到的１１批不同产地地肤子药材中ｍｏｍｏｒｄｉｎ Ｉｃ和 总皂苷含量测定结果得知，不同产地药材中皂苷含 量存在一定差异，因此提示我们在用药时应注意产 地与药材质量的关系。 ［参考文献】
【１１
溶解并定容于１０ ｍＬ量瓶中。精密吸取０．２ 总皂苷的含量。结果见表２。
Ｖ
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ Ｂｉｏｌ
Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ
ｔｈｅ Ｓｔｒｕｃ—
ｔＬｌｒ｝ｒｅｑ伍Ｒｍｅｎｔ
ＰｈａｎｎＢｕｌｌ，１９９８，２１（１Ｉ）：１２３１
［４］冯埃生，邹汉法，汪海林，等影响高效液相色谱／挥发激光散 射检测器检浏性能基本因素的考察药物分析杂志，ｔ９９６，１６ ２．２．３
农本草经》，列为上品。具有清热利湿、祛风止痒等 功效。地肤子主要含三萜皂苷、生物碱、黄酮类和脂 肪油等成分，其中地肤子皂苷Ｉｃ（ｍｏｍｏｒｄｉｎ ｌｃ）为其 抗瘙痒、抗炎和抗过敏作用的主要有效成分【１ｑ Ｊ。 为探讨生长环境对药材品质的影响，本文采用反相 高效液相色谱法，利用蒸发光散射检测器测定了】１
［中硼分类号］Ｒ ２８２．５；Ｒ ２８４．１［文献标识码】Ｂ［文章编号］１００１—５３０２（２００２）１２—０８９０—０４
地肤子为常用中药，系藜科植物地肤Ｋｏｃｈｉａ ｓｃｏｐａｒｉａ（Ｌ）Ｓｃｈｒａｄ．的干燥成熟果实，始载于《神
【收稿日期］２００２＊０５４）９ ［基金项目】国家新药基金资助项目（９６＿９０１４）５—２１０） 【通讯作者】电话：（０２５）５３９１２５３
ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ；Ｈ㈣ｉⅢｍｙｍｅ
［责任嗣辑袁桂京］
不同产地地肤子中皂苷的含量分析
夏玉凤，王强，戴岳，裴铠
（中国药科大学中药学院，江苏南京２１００３８）
［摘要］ 目的：比较了不同产地地肤子中单体皂苷（ｒｎｏｍｃｃｄｉｎ Ｉｃ）和总皂苷的含量差异。方法：分另０采用高效
液相色谱一蒸发光散射检测器（ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ）法和比色法测定了地肤子中ｎａｏｍ口＇ｄｌｎ Ｉｃ及总皂苷的含量。结果：地肤 子中ｍｏｍｏｒｄｉｎ ｌｃ与总皂苷的含量存在一定的相关性，即ｍｏｍｏｒｄｉｎ Ｉｃ含量高，其总皂苷含量亦较高。１１种地肤子 中，安徽毫州、河北保定、河北安国、黑龙江哈尔滨等地产地肤子中皂苷的含量较高。结论：不同产地地肤子中皂苷 的含量存在一定的差异，应注意生长环境对药材质量的影响。 ［关■词】 地肤子；皂苷；高效液相色谱
ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔａ ｏｆ Ｂｕ—
ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｌｉｇｈｔ（ＵＶ）ａｔ
Ｔｈｅ
Ｆｉｓｅｈ ｂｙ ＰＥＧ ｍｅｔｈｏｄ
８ｎｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ３００ Ｐｗ‘（ｃｌｗｌ２）～ｆｏｒ ０，１，２ｍｉｎ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｗｅｒｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｃｌｏｎｅｓ。ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｏｒｍ ａ ｉｎｇＩｅ ｆｕｓｅｄ ｃｅｌｌ，ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅｉｒ Ｒｅｓｕｌｔ：Ｎｉｎｅ ｃｌｏｎｅｓ ｗｅｒｅ ｆｉｒｍ ｆｏｔｍｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ
按标准曲线项下方法进行测定，以外标两点法计算
表２地肤子皂苷Ｉｃ和总皂苷的含量（”＝３）％
ＭａｔａｕｄａＨ，瓯Ｙ，Ｉ出Ｙ，ｅｔｄ
Ｅｘｔｒａｃｔ
ＳｔｕｄｉｅｓｏａＫｃｄｘｌａｅＦｒｃＥｔｕｓＩＩＩ
ｏｆ ７０％Ｅｔｈａｎｏｌ Ｆｒｕｉｔｓ
Ａｎｔｉｎｏｃｉｅｅｐｔｉｖｅ ａｎｄ Ａｎｔｉｉｎｆｌｍｎｍａｔｏｒｙ Ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ
纵坐标，以进样量（”ｇ）的常用对数值为横坐标进行 线性回归，得回归方程为：Ｙ＝１．５３Ｘ＋５．０１，
ｒ＝０
地肤子药材供试品色谱图
９９９５，线性范围１．１９～１１．９２飕。
２ ２
２．１．５精密度试验 精密吸取上述对照品溶液，连续重复迸样５次， 每次２０ ｐＬ，ＲＳＤ为１．３％。
总皂苷的含量测定 标准曲线的制备
２
讨论 前期研究曾考察了直接回流法、索氏提取法、
超声法等不同提取方法，通过含量测定结果得知，超 声法提取最完全，故选择超声法提取。
３．２
８６．５旭，回归方程：Ｙ＝３．６０１
０．０１２６２．ｒ＝０．９９９８。
７
ｘ
１０～Ｘ～
地肤子中所含皂苷为三萜皂苷类成分，紫外
２．２．２
供试品溶液的制备及测定
吸收差，如用紫外检测灵敏度低，而ＥＬＳＤ是一种质 量型通用检测器，其响应值与被测物质的官能团和 光学性质无关，通用于各种物质¨Ｊ。检测结果表 明，其灵敏度与稳定性均能满足要求，ＥＬＳＤ对于无 紫外吸收或紫外吸收差的样品的检测，显示出了极 大的优越性。
ｐｌ㈣ｓｅｏｒｚｏｎｅｒｉｆｏｌｉｔｒｎｉｒｒａｄｉａｔｅｄ
ｆｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｃ８ｅ ｏｆ
ｃａｒｒｏｔ
ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ．ｉｍｐｒｏｖｅｆｎｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ｏｆ Ｃｈｉｎ８ｅ
ｂｙ
ｎ砌ｉｎａｌ
ｐｌａｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ
置５０ ｍＬ量瓶中，加甲醇至刻度，密塞，称重，静置 过夜，超声提取３０ ｍｉｎ，称重并补足原重。测定时 过０．４５ｔａｎ微孔滤膜，取２０＂Ｌ进样。 ２．１．４线性关系考察 精密吸取对照品溶液０．１，０．２，０．４，０．６，０．８，
１．０
ｌ
～Ｊ
图２
ｍＬ，置于１ ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇
匀，进样量２０血，以对照品峰面积的常用对数值为
第２７椭１２期
１竺竺！！里
中国中药杂志
ｖＯ．竹，№Ｌ２
生！竺！竺竺！堕壁！竺！！塑塑！！型塑——土竺竺Ｌ
杜，１９８５ ９６
【６ １嘏能书，万贤国．同工爵技术厦其应用长沙：湖甫科技出版
Ｓｏｍａｔｉｃ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｃａｒｒｏｔ ａｎｄ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｓｃｏｒｚｏｎｅｒｉｆｏｌｉｕｍ
Ｉｔｓ
Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，Ｍｏｍｏｒｄｉｎ
Ｌ
Ｉｃ
ｆｒｏｍ Ｄｒｉｅｄ
ｏｆ
Ｋｏｃｈｉａｘｏｐａｒｉａ
Ｎｏｌ ＰｈａｒｍＢｕｌｌ，１９９７，２０（１０）：１０８６
［２］ＭａｔｓｕｄａＨ，ＤａｔＹ，ＩｄｏＹ．ｅｔ ａｌ
Ｓｔｕｄｉｅｓ∞ＫｏｃｈｍｅＦｒｕｃｔｕｓＩＶ
Ｅｘｔｒａｃｔ
Ａｎｔｉ—ａｔｌｅｒｇｉｃ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ７０％Ｅｔｈａｎｏｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅ
２．Ｓｈｅｎｄｏｎｇ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ ２５００１４，Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］
ｄａｔａ
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｓｃｏｒｚｏｎｅｒｉｆｏｌｉｕｍ ｉｎｔｏ ｃａ．ｖｒｏｔ，ａｎｄ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｂｅｃｆｅｔｉｃａｌ
２ ２．１ ２．１．１
测定方法与结果 地肤子皂苷（ｍｏｍｏｒｄｉｎ Ｉｃ）的含量测定 色谱条件 ２．１．８样品测定 取１１批地肤子药材供试品溶液在上述色谱条
色谱柱Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ Ｃ１８（４．６ ｍｉｌｌ×２５０ ｒｎｎＲ）； 流动相甲醇．水．冰醋酸（８５：１５：０．２）；流速１．０ ｍＬ・ ｒａｉｎ。１；ＥＬＳＤ参数漂移管温度７０１２；氮气压力０．２１
回收率及稳定性试验
（６）：４１４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｓａｐｏｎｉｎ ｉｎ Ｋｏｃｈｉａ ｓｃｏｐａｒｉａ
Ｆｒｕｉｔｓ ｆｒｏｍ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ａｒｅａｓ
３．３
取经粉碎的地肤子药材约０．５ ｇ，精密称定。置
５０
ｍＬ量瓶中，加甲醇至刻度，按２．１．３项下方法超
声提取后，过滤，取续滤液１０ ｍＬ，水浴上挥干甲醇 后，残渣加１０ ｎｌＬ水溶解，以石油醚萃取２次，每次
１０
ｍＬ，弃去醚层，水层再以水饱和的正丁醇萃取３ ｒｎＬ萃取１次，弃水层，回收正丁醇至干，加甲醇
ｍＰａ。 ２．１．２
件下迸样，每次２０以，按外标两点法对数方程计
算，所得结果见表２，样品和对照品色谱图见图１。
对照品溶液的制备
２．９８
精密称取对照品地肤子皂苷Ｉｃ 的溶液。
２．１．３
ｎａｇ，置５
ｍＬ量瓶中用甲醇溶解定容，配成０．５９６ ｍｇ・ｍＬ＿１ 供试品溶液的制备
５
称取经粉碎的地肤子药材约０
ｇ，精密称定。
３ ３．１
品溶液，精密吸取３０，６０，９０，１２０，１５０止置具塞试
管中，挥去甲醇，精密加入新鲜配制的５％香草醛一 冰醋酸溶液０．２ ｒＴｌＬ，随即在冰浴中加入高氯酸０．８ ｍＬ，摇匀，在６０℃水浴中加热１５ ｍｉｎ后取出，冷 却，精密加入冰醋酸５．０ ｍＬ，摇匀。作随行试剂空 白，在Ｕｖ．２５０１分光光度仪上，于５４８ ｎｍ处比色测 定吸收度，绘制标准曲线。线性范围５７．３～
１．９１
２．２．１
精密称取对照品地肤子皂苷ｌｅ
ｍｇ，置于
・８９１・
万方数据
第２７卷第１２期 ２呻２年１２月
中国中药杂志
Ｃｈｉｎａ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｖｏｌ
２７．Ｎｏ
１２
Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ
Ｄｅｃ．２００２
１
ｒｎＬ量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成对照
取已知含量的药材细粉约２５ ｎａｇ，共５份，精密 称定，各精密加入浓度为１．０４６ ｍｇ・ｍＬｌ的对照品 溶液１ ｍＬ，按供试品溶液的制备及测定方法操作， 加样回收率平均值为９６．６％，ＲＳＤ为２．５％，样品 吸收度值在３０ ｒｎｉｎ内测定基本稳定。
２．１．７
实验材料与仪器 样品收集了山西太原、安徽毫州、江苏南京、浙
江宁波、吉林四平、陕西西安、山东荷泽、河北保定、 河南安阳、河北安国、黑龙江哈尔滨等地地肤子药材 共１１批，各批药材均经作者鉴定为正品Ｋ．￥Ｃ０一
ｐａｒｉａ。
回收率试验
ｒｎｇ，
取上述已知含量的地肤子药材样品约２５
共５份，精密称定，每份各精密加人一定量的对照 品，按“供试品溶液的制备”项下处理并测定，得平 均回收率为９９．３％，ＲＳＤ为１．６％（ｎ＝５）。结果 见表１。
ｈｙｂｒｉｄ
ｎａｔｕｒｅ
ｂｙ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ａｎｄ Ｅｓｔｅａ＇ａｚｅ ｉｓｃｅｎｚｙｍｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
ａｎｄ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ∞ｔｈｅ ｓｏｍａｔｉｃ ｈｙｂｒｉｄｓ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｂ
ｓｃｏｒｚｏｎｅｍｆｏｌｉｕｍ
ｃａｌＴｏｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ｍ
ｈｙｂｒｉｄｓ
ａｎｄ
ｐｒｏｖｉｄｅｓ