苯酚硫酸法测多糖含量

一、硫酸苯酚法测多糖含量

1、试剂配制

1. 浓硫酸：分析纯，95.5%

2. 5%苯酚：取苯酚5 g，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕

色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。

3. 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）或分析纯葡萄糖。准确称取20m g

经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中，蒸馏水溶解定容。

2、制作标准曲线

准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）10mg于250ml容量瓶中，加水至刻度，分

别吸取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8及0.9ml，各以蒸馏水补至1.0ml，

然后加入5%苯酚1ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20min以后于490nm测

光密度，以1.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光

密度值，得标准曲线。

1 2 3 4 5 6 7 8 0

0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 标准葡萄糖溶液

（mL）

蒸馏水（mL）0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 1.0 5%苯酚（mL）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 浓硫酸（mL） 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5