血清学试验种类
血清学试验的种类及应用
血清学试验的种类及应用血清学试验是一种常见的医学检验方法,通过检测患者的血液中的抗体或抗原等物质来诊断和监测疾病的发生和发展情况。
血清学试验可以分为多个种类,包括免疫荧光试验、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、中和试验、补体结合试验、放射性免疫测定等。
免疫荧光试验是通过将荧光标记的抗体与患者血清中的特定抗原结合来进行检测。
这种试验通过荧光显微镜观察,能够快速、准确地确定特定抗原的存在。
免疫荧光试验常用于检测自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等)、传染病(如流感、结核等)以及其他感染性疾病。
酶联免疫吸附测定法(ELISA)是一种常用的血清学试验方法,通过特定抗原与特异性抗体的结合反应,利用酶标记进行检测。
这种试验可以快速、高效地检测出特定抗原或抗体的存在,并且具有较高的灵敏度和特异性。
ELISA广泛应用于病毒、细菌、肿瘤和药物等领域的疾病诊断、防控和治疗监测。
中和试验是一种用于检验抗体对病原体的中和作用的方法。
病原体感染机体后,机体产生相应的抗体,通过中和试验可以评估抗体对病原体的中和能力。
这种试验广泛应用于检测病毒感染,如乙型流感病毒、登革热病毒等。
补体结合试验是一种通过观察抗体与特定抗原结合而激活补体的反应,来检测体内特定抗体的存在与水平。
这种试验可以用于包括传染病、自身免疫性疾病、过敏反应等多种疾病的诊断和监测。
放射免疫测定是利用放射性同位素标记的抗体对抗原或抗体进行测定的方法。
这种试验具有高灵敏度和高特异性特点,可以用于检测病毒感染、肿瘤标志物、免疫系统疾病、肝肾功能等疾病的诊断、治疗和监测。
除了上述几种常见的血清学试验,还有其他一些血清学试验,如凝集试验、间接血凝试验、免疫电泳等。
这些方法在不同的疾病诊断和监测中具有重要的应用价值。
总之,血清学试验是一种重要的医学检验方法,通过检测患者血液中的抗体或抗原来诊断和监测疾病的发生和发展情况。
根据不同的疾病类型和检测目的,可以选择合适的血清学试验方法,以提供准确的诊断结果,并指导临床治疗和预后评估。
公卫医师考试辅导:血清学诊断
公卫医师考试辅导:血清学诊断
血清学诊断是公卫医师考试大纲所包含的内容,我们搜集整理相关内容供大家学习参考。
(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)
ELISA、RIA及IF均为用于检测感染者血清中特异性抗体或抗原的方法,均为应用标记的抗原检测血清中抗异性抗体,或应用标记的抗体检测血清中特异性抗原。
(2)蛋白印迹试验(Westernblot,WB)
蛋白印迹试验(WB)是在ELISA应用原理基础上发展的一项新技术,用于检测微生物的特异性蛋白抗原或患者相对应的蛋白抗体的实验室诊断方法。
若用此试验检测患者血清特异性抗体,可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特异性抗体,再结合酶标记抗人抗体并观察结果。
我们搜集整理。
(3)中和试验(NT)
中和试验(NT)为在检测病原微生物(病毒、细菌等)的血清学试验过程中,先在被检血清或其他液体标本中加人已知的特异性抗体或抗原,使其发生中和反应后,再检测被检血清中其特异性抗原或抗体。
(4)试管凝集试验
肥达氏试验是辅助诊断伤寒或副伤寒病常用的一种血清学
试验,即用已知伤寒沙门氏菌的菌体抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)及甲型或乙型副伤寒杆菌的鞭毛抗原(PA或PB抗原),
测定人血清中相应抗体效价。
实验室血清学常用检测方法
常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前,该项技术已在兽医学上得到广泛的应用,大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。
1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型:①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。
在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA,就是根据这种原理设计的。
②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。
用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。
与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。
乙肝HBs的检测常采用本法。
本法关键在于酶标抗原的制备,需要根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。
此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于于间接法。
此外,该方法不受被检动物种属差异的限制。
③.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。
其原理为利用酶标记的抗体(抗免疫球蛋白抗体),检测与固相抗原结合的受检抗体(见图1)。
血清学鉴定实验
抗原
o
H
1,2,12 1,4,5,12 1,4,12 1,4,5,12
a:b:1,2 f,g:i:1,2
6,7,(Vi) c:1,5
9,12,Vi 3,10 11
d:e,h:1,6
i:1,2
注意事项
1.生理盐水端应不出现凝集颗粒。 2.沙门菌Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体
体Vi荚膜后再继续鉴定其他抗原成分。
沙门氏菌属常见菌型诊断抗原表
群别 A
B
C D E F
菌型
甲型副伤寒沙门菌 乙型副伤寒沙门菌 德比沙门菌 鼠伤寒沙门菌 猪霍乱(或丙型副伤寒) 沙门菌
伤寒沙门氏菌 鸭沙门氏菌
阿伯丁沙门氏菌
抗 o 1,2,12 1,4,5,12 1,4,12 1,4,5,12
6,7,(Vi)
实验材料
1.菌种 待检细菌 2.试剂 多价沙门菌O(A-F)诊断血清 3.其他 载玻片
沙门氏菌诊断血清(11种)
O2
O4
O7
O9
Ha
Hb
Hc
Hd
A-F群多价 A-F群多价
Hi
Vi
O
O
O抗原、H抗原和Vi抗原
❖ O抗原:是一种沙门氏菌细胞壁表面的 耐热多糖抗原 ,100 ℃,2.5 h不被破 坏,它的特异性依赖于细胞壁脂多糖 侧链多糖的组成。
9,12,Vi 3,10 11
原 H
a:b:1,2 f,g:i:1,2
c:1,5
d:e,h:1,6
i:1,2
位相变异的解释
❖ 将一个双相沙门氏菌的菌株在琼脂平板上划线分离,所得的 菌落中,有的有第1相H抗原,有的则有第2相H抗原。若任 意挑取一个菌落在培养基上多次传代,其后代又可出现部分 是第1相而另一部分是第2相的菌落。这种两个相的H抗原可 以交相产生的现象称为位相变异。
第九章血清学试验
第九章血清学试验§9-1血清学试验概述一、血清学试验的概念概念:抗原抗体反应是指抗原与相应的抗体之间发生的特异性结合反应。
因抗体主要存在于血清中,所以将体外发生的抗原抗体结合反应称为血清学反应或血清学试验。
在体内发生的抗原抗体反应是体液免疫应答的效应作用。
二、血清学试验的特点(一)特异性和交叉性(二)敏感性(三)可逆性(四)反应的二阶段性(五)最适比例与带现象(六)用已知测未知三、影响血清学试验的因素(一)电解质常用0.85%~0.9%(人、畜)或8%~10%(禽)的氯化钠或各种缓冲液(免疫标记技术)作为抗原和抗体的稀释液或反应液。
(二)温度在一定温度范围内,温度越高,加速抗原抗体结合和反应现象的出现。
(三)酸碱度血清学试验要求在一定的pH下进行,常用的pH值为6~8,(四)振荡适当的机械振荡能加速抗原抗体的结合反应(五)杂质和异物每批血清学试验都应设阳性对照和阴性对照试验。
四、血清学试验的应用及发展趋向(一)血清学试验的应用传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病、变态反应性疾病的确诊。
在动物疫病的群体检疫、疫苗免疫效果监测和流行病学调查。
生物活性物质的超微定量、物种及微生物鉴定和分型等方面。
基因分离,克隆筛选,表达产物的定性、定量分析和纯化等,已经成为现代分子生物学研究的重要手段。
(二)血清学试验的发展趋向反应的微量化和自动化方法的标准化和试剂的商品化技术的敏感特异和精密化检测技术的系列化方法简便快速。
§9-2凝集试验一、凝集试验的概念凝集试验:细菌、红细胞等颗粒性抗原,或吸附在红细胞、乳胶等颗粒性载体表面的可溶性抗原,与相应抗体结合后,在有适量电解质存在下,经过一定时间,复合物互相凝聚形成肉眼可见的凝集团块,称为凝集试验(Agglutination test)。
参与凝集试验的抗原称凝集原,抗体称凝集素。
二、凝集试验的类型(一)直接凝集试验(Direct agglutination test)颗粒性抗原与相应抗体直接结合并出现凝集现象的试验称直接凝集试验。
简述血清学实验的特点
简述血清学实验的特点血清学实验是研究免疫应答的重要实验方法之一,通过检测和分析血清中的抗体水平和抗体效价,可以评估机体的免疫状态、抗体产生的程度和质量,为疾病的诊断、预防和治疗提供重要依据。
血清学实验具有以下几个特点。
1. 高度特异性:血清学实验能够对特定抗原与抗体的相互作用进行检测,具有高度的特异性。
使用特定的抗原作为检测物质,可以针对特定疾病或病原体进行检测,避免了对其他无关因素的干扰。
2. 高灵敏度:血清学实验能够检测到非常低浓度的抗体,具有高灵敏度。
通过采用特定的抗原和检测方法,可以在血清中检测到非常微量的抗体,即使是在感染初期或抗体水平较低的情况下,也能够准确地检测到。
3. 多样性:血清学实验可以根据需要选择不同的检测方法和指标。
根据研究目的和实验要求,可以选择不同的检测方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光试验(IFA)、中和试验、凝集试验等。
同时,还可以根据需要检测不同的指标,如总抗体水平、特异性抗体水平、中和抗体效价等。
4. 可靠性:血清学实验具有较高的可靠性和重复性。
通过严格的实验操作和标准化的检测方法,可以保证实验结果的准确性和可靠性。
同时,血清学实验还可以进行质控,通过与已知阳性和阴性样本进行对照,确保实验结果的正确性。
5. 应用广泛:血清学实验在临床医学、流行病学调查和基础研究等领域都有广泛的应用。
在临床医学中,血清学实验可以用于疾病的诊断和鉴定,如病毒感染、细菌感染、寄生虫感染等;在流行病学调查中,血清学实验可以用于疫情监测和疫苗评价;在基础研究中,血清学实验可以用于研究机体的免疫应答机制、抗体的产生和功能等。
总结起来,血清学实验具有高度特异性、高灵敏度、多样性、可靠性和广泛应用等特点。
它是研究免疫应答的重要实验方法,可以提供重要的免疫学信息,为疾病的诊断、预防和治疗提供依据。
通过不断改进和创新,血清学实验将在免疫学领域发挥越来越重要的作用。
血清学诊断的方法是
血清学诊断的方法是
血清学诊断的方法主要是通过检测血清中特定抗体的存在和水平来确定某种疾病的诊断。
常用的血清学诊断方法有以下几种:
1. ELISA(酶联免疫吸附实验):通过将被测抗原与特异性抗体结合后,添加酶标记的二抗来检测特定抗体的存在与水平。
2. 免疫荧光染色:将被测抗原与特异性抗体结合后,使用荧光染料标记二抗,通过荧光显微镜观察是否呈现荧光信号。
3. 网格凝集试验:将被测抗原与特异性抗体混合后,观察是否出现凝集现象。
4. 中和试验:通过将被测病毒与特定抗体混合后,观察病毒的感染性能否受到抑制。
5. 补体结合试验:将被测抗原与特定抗体混合后,添加补体,观察抗原和抗体是否结合并激活补体,从而测定抗体的存在与水平。
6. 微量凝集试验:将被测抗原与特异性抗体混合后,通过观察悬液中的凝聚物的形态和程度来判断特定抗体的存在与水平。
这些方法可以检测多种病原体感染、自身免疫性疾病、过敏反应等相关疾病的诊
断。
具体的方法选择取决于被测疾病的特性和检测的目的。
血清学分型法
血清学分型法
方法:补体依赖的微量细胞毒试验(CDC)。
分型抗原:SD抗原,包括HLA-A、B、C、DR、DQ。
(一)原理
标准血清+淋巴细胞,形成抗原抗体复合物,加入补体,在补体的
作用下,细胞被溶解。
溶解的细胞可被加入的染料(台盼蓝、伊红)
着染,即为阳性反应,计数死细胞数,作出结果判断。
(二)技术要点
1.CDC试验的关键在于获得标准抗血清,与AB0血型抗体不同,主
要获自经产妇。
2.抗血清种类应覆盖本民族、本地区80%以上的抗原。
3.Ⅱ类抗原,仅分布于B细胞或巨噬细胞表面,故检测Ⅱ类抗原应
分纯B细胞。
4.注意下列假象:①粒细胞和单核细胞能够非特异性地,吞噬染
料而造成着染假象,应注意细胞形态的区别。
②血小板与淋巴细胞竞争,结合HLA抗体而导致假阴性结果,可用玻璃珠脱纤维抗凝。
③红细
胞沾染易致假阳性。
④单克隆抗体复合物不能激活补体,不能用于CDC,可改用ELISA、FCM.
(三)临床应用
1.HLA配型可用于器官移植与相关疾病的诊断研究。
2.HLA交叉配型即用CDC法检测受体血清有无针对供者HLA的抗体,以监测排斥反应的发生或估价受体的敏感性。
3.群体反应性抗体的检测(PRA)PRA用于判断器官移植时受体的敏感程度。
12 经典血清学试验
十二章经典血清学实验一、名词解释凝结性实验:按照是否产生凝结现象,用已知抗体或抗本来判定相应(未知)抗原或抗体的免疫反应。
凝集反应:细菌,红细胞等颗粒性抗原,或吸附在颗粒性载体表面的可溶性抗原,与相应抗体发生特异性反应,在适当电解质存在下,经过一段时光形成肉眼可见的凝集现象。
反应中的抗原称为凝集原,反应中的抗体称为凝集素。
直接凝集反应:颗粒性抗原与相应抗体直接发生特异性结合并浮上肉眼可见的凝集现象称为直接凝集反应。
间接凝集反应:将可溶性抗原(或抗体)吸附在一种与免疫无关的惰性载体颗粒表面,使其成为致敏载体,然后与相应抗体(或抗原)结合,在电解质存在的条件下发生凝集的现象。
葡萄球菌A蛋白(SPA):是金黄色葡萄球菌的特异性表面抗原,能与IgG分子的Fc片段结合,当SPA-Ab与相应抗原结合时,就可产生协同凝集反应。
HA:有些病毒具有能凝集某种哺乳动物和禽类红细胞的特性,依此特性建立的检测主意称为病毒血凝实验。
HI:按照病毒的特异性抗体可以抑制血凝现象建立的检测主意称为血凝抑制实验。
沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体结合,在适量电解质存在的条件下,形成肉眼可见的白色沉淀。
参加沉淀反应的可溶性抗原称为沉淀原,抗体称为沉淀素。
琼脂免疫蔓延:抗原,抗体在琼脂凝胶中蔓延,当二者在比例适当处相遇,即发生沉淀反应。
反应的沉淀物因颗粒较大,故在凝胶中不再蔓延,而形成沉淀带。
电泳:带电质点在电场中向着带异向电荷的电场移动。
免疫电泳:由琼脂双蔓延与琼脂电泳技术结合的实验。
凝集价/滴度/抗体效价:浮上50%以上凝集的血清最大稀释度为该血清的凝集价。
沉淀价:环状沉淀实验时,以浮上白色沉淀环的最高抗原稀释倍数作为沉淀素的效价,即沉淀价。
中和指数:在尽头法中和实验中,使病毒感染力减少至50%的血清中和效价称为中和指数。
中和效价:中和实验中,被检血清中抗体中和病毒的能力。
病毒的毒价:引起半数感染动物死亡的病毒最小量。
第1页/共5页二、简答题1.凝集反应和沉淀反应的基本类型有哪些?有何用途?2.凝集反应和沉淀反应的区别?(凝集反应和沉淀反应各有什么特点?)3.琼脂凝胶免疫蔓延实验有哪些不同的主意?举例说明它们的用途?抗原,抗体在琼脂凝胶中蔓延,当二者在比例适当处相遇,即发生沉淀反应。
血清学试验
微生物以及其他一些抗原性物质进入机体后,能在机体的血清中产生特异性抗体,。这种抗体与相应的抗原在体外相遇,可以表现出凝聚、沉淀、溶解、补体结合等多种反应,这些反应的试验都是采用免疫血清来进行的,所以称为血清学试验。现将其原理及其应用作简要介绍。
( 2)试管法 在一系列的小试管中,加入等量的、不同稀释度的被检血清,最后一管以生理盐水代替血清,作为对照。在各试管中,再滴加等量细菌悬液,使均匀混合,置于水浴( 52~ 55℃)保温约 4h后,观察结果,而后再置于 4℃冰箱中过夜,再观察结果。以最高稀释度血清管发生凝集者,为免疫血清的凝集效价。凝集效价越高,则说明抗体含量越多。
一、 抗原与抗体
(一)抗 原
凡能刺激机体产生特异性抗体,并能与所产生的抗体进行结合发生反应的物质,称为抗原。
1. 抗原的性质
( 1)抗原一般为大分子胶体,相应分子质量在 10万以上。相对分子质量越大,抗原性越高。由于大分子胶体物质在机体内停留时间较长,因此能刺激机体产生抗体。
将微生物细胞或动物红血球的悬浊液与含有相应特异抗体的血清混合,可以在电解质( 0.85%NaCL)溶液中发生反应,并出现肉眼可见的凝聚块,这种现象,就叫凝聚反应。参与反应的微生物细胞或血球等,称为凝集原,免疫血清中的特异抗体,称为凝集素。
1. 试验方法
( 1)玻片法 吸取一滴经生理盐水( 0.85%NaCL)稀释的免疫血清置于玻片上,另加一小滴细菌悬液(用生理盐水制成的菌液)。使之充分混合,在几分钟内,即可出现凝集现象。同时以生理盐水代替免疫血清作对照。
有关免疫电泳的应用,由于具体操作上的不同,还有其他多种方法,例如“火
箭”免疫电泳、交叉免疫电泳等等。
2. 沉淀反应与凝聚反应的区分
血清学试验
凝集滴度,即一个凝集单位。如表18-1-1的病毒血凝滴度为27, 即将病毒原液作27倍稀释,其中含一个血凝单位的病毒。 ❖ 由于病毒血凝抑制试验中需要的病毒液应含4个血凝单位,因此, 需要对原病毒液进行25倍稀释。
补体结合试验
试验系统、原理和结果判定
反应系统
指示系统
反应结果的判定
已知抗原 (抗体)
补体
绵羊红 细胞
如溶血则 为阴性
待检血清 (抗原)
溶血素
如不溶血 则为阳性
中和试验
概念:根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫
学试验。
原理:病毒与抗血清中抗体特异结合后失去感染易感
动物、鸡胚或细胞活性。
举例
一种抗原成分出现一条沉淀
带。如两个相邻孔之间抗原
相同,则沉淀带融合,如1、
2;抗原不同,则互相交叉,
如3;部分相同则部分融合,
另外不同部分则交叉,如4。
免疫电泳
免疫电泳技术是把凝胶扩散 试验与电泳技术相结合的免 疫检测技术。即将琼脂扩散 置于直流电场中进行,让电 流来加速抗原与抗体的扩散 并规定其扩散方向,在比例 合适处形成可见的沉淀带。
抗 补 体 抗 体
抗补体法
酶标抗体技术
原理:将酶分子标记在抗体或抗原分子上, 利用抗原抗体反应的特异性及酶的高催化活 性进行检测。
用于标记的酶:辣根过氧化物酶 (HRP)、碱 性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等。
酶标抗体技术分类
免疫酶组织化学染色技术 酶联免疫吸附试验 斑点-酶联免疫吸附试验
酶联免疫吸附试验
用已知测未知
实验室血清学常用检测方法
常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前,该项技术已在兽医学上得到广泛的应用,大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。
1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型:①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。
在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA,就是根据这种原理设计的。
②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。
用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。
与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。
乙肝HBs的检测常采用本法。
本法关键在于酶标抗原的制备,需要根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。
此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于于间接法。
此外,该方法不受被检动物种属差异的限制。
③.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。
其原理为利用酶标记的抗体(抗免疫球蛋白抗体),检测与固相抗原结合的受检抗体(见图1)。
实验室血清学常用检测方法
实验室血清学常用检测方法本页仅作为文档封面,使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前,该项技术已在兽医学上得到广泛的应用,大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。
1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型:①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。
在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA,就是根据这种原理设计的。
②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。
用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。
与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。
乙肝HBs的检测常采用本法。
本法关键在于酶标抗原的制备,需要根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。
血清学试验名词解释
血清学试验名词解释血清学试验是一种客观检测病人血清中化学成分的实验过程,它可以帮助医生们更准确地诊断病人的疾病,同时也能够排查出可能的疾病危险因素。
血清学试验也被称为血液化学分析,它可以快速准确地测量患者的血清成分,临床血清学试验的主要内容包括血清生化分析、肝功能检查、肾功能检查、脂质代谢紊乱和骨骼质量检查等。
一、血清生化分析血清生化分析是一种常见的血清学试验,它可以检测出血清中的各种化学成分,如蛋白质、糖类、磷、钾、钠、氯离子等,它们能够帮助医生们更精确地检测病人的状况,以及每种疾病的发病机制。
二、肝功能检查肝功能检查也是血清学试验的一种,它可以测量血清中的一组特殊的物质,如胆红素、胆汁酸、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白等,这些物质可以反映出患者肝脏正常运作能力的程度,从而帮助医生们进行诊断。
三、肾功能检查肾功能检查也是血清学试验的一种,它通过测量血清中的一组特定的代谢产物,如尿素氮、血清肌酐、血钾、血磷等,来反映患者肾脏正常运作能力的程度,提供肾病的早期诊断和分类。
四、脂质代谢紊乱检查脂质代谢紊乱检查也是血清学试验的一种,它可以测量血清中的胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等脂质代谢相关物质,以及一些炎症分子,如C反应蛋白、白介素-6、载脂蛋白A1等,这些物质的水平可以用来反映患者的脂质代谢状况,为预防和治疗脂质代谢紊乱提供重要的参考。
五、骨骼质量检查骨骼质量检查也是血清学试验的一种,它可以检测血清中的钙质、磷质、胱抑素C、尿酸等特殊物质,以及一些炎症分子,如载脂蛋白A1、白介素-6等,这些物质可以用来评估患者的骨骼健康情况,帮助医生们进行准确的诊断与治疗。
血清学试验是用来帮助医生们更准确诊断病人疾病的一种实验过程,它可以快速准确地测量患者的血清成分,帮助医生们排查出可能的疾病危险因素。
目前,血清学试验主要包括血清生化分析、肝功能检查、肾功能检查、脂质代谢紊乱检查和骨骼质量检查五个部分,它们能够帮助医生们进行准确的诊断,同时可以为患者的预防及早期诊断提供重要的参考。
血清学试验概述
血清学试验概述
血清学试验特点
• 特异性与交叉性 • 反应的可逆性 • 最适比与带现象 • 反应的二阶段性 • 影响反应的因素
第一节 凝集试验
• 一、凝集试验的概念 • 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后, 在电解质存在下互相凝集成絮片状团块的现象。 • 二、分类及方法 • 1、直接凝集试验 • ⑴玻片法 • ⑵试管法 • 2、间接凝集试验 • ⑴正向间接凝集试验 • ⑵反向间接凝集试验
实验八 沉淀反应
• 一、 目的
• 掌握环状沉淀和琼脂扩散试验的一般操 作及结果判定。
二、实验内容
• • 环状沉淀试验(以炭疽杆菌为例)
琼脂扩散试验
三、注意事项
四、实验报告内容
• 写明实验判定结果(即阴性或阳性), 并描述整个实验过程及注意事项。
第二节 沉淀试验
• 一、沉淀试验的概念 • 可溶性抗原与相应抗体结合后,在适量电解质
存在下,能形成肉眼可见的白色絮状或颗粒状沉淀的 反应。
• • • • •
二、分类及方法 1、环状沉淀试验 2、絮状沉淀试验 3、琼脂扩散 4、免疫电泳
第三节补体结合试验
• • • • 一、原理: 二、应用 1 1、传染病的诊断 2、抗原免疫
第四节 中和试验
• 一、概念:病毒或毒素与相应抗体结合 后,抗体中和了病毒或毒素,使其失去 了对易感动物的致病力或毒力的试验。 • 二、毒素和抗毒素中和试验 • 三、病毒中和试验
第五节 免疫标记技术
• • • • • • 一、荧光抗体 1、直接法 2 2、间接法 二、酶标记抗体 1、组化法 2、测定法
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
血清学试验种类
血清学试验主要分为微量凝集试验、酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验和补体结合试验等。
这些试验在医学诊断和治疗中有着广泛的应用,可以帮助医生了解患者的免疫系统状态,从而制定更有效的治疗方案。
微量凝集试验是一种通过测定血清中特定抗体与细菌或病毒抗原之间的反应来检测感染的试验。
这种试验通常用于诊断细菌感染和病毒感染。
酶联免疫吸附试验是一种常用的血清学试验,通过酶标记的抗体与抗原的结合反应,检测样本中是否存在目标抗原。
这种试验具有较高的灵敏度和特异性,可用于检测各种感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤标志物等。
免疫印迹试验是一种将被测样本中的蛋白分离出来,然后通过特定抗体与蛋白进行相互作用,从而确认特定抗体或蛋白的方法。
这种试验常用于检测自身免疫性疾病、传染病和肿瘤等。
补体结合试验是一种通过测定补体结合率来检测免疫反应
的试验。
这种试验通常用于诊断自身免疫性疾病和某些感染性疾病。
除了以上几种血清学试验,还有间接血凝试验、亲和素-生物素-酶复合物酶联免疫吸附试验、斑点酶联免疫吸附试验等其他血清学方法。
这些试验在临床诊断和治疗中都有着广泛的应用,为医生提供了重要的参考信息。