【临床血液学-实验课课件】_11实验十一 TT,3P,DD

3P试验
• 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固实验 • 操作:取血浆和(阳性对照血浆)各0.5 ml ,分别加入
0.05ml 1%的硫酸鱼精蛋白溶液,放37oC 30min ,观察 有无絮状沉淀物. • 阳性:絮状沉淀物或细蛋白网 • 意义:纤溶的筛选,但假阳性和假阴性较多,已被D-D 取代.
血浆D-二聚体检测
均值报告
参考值
• （16-18）S • 超过正常对照3S为延长
临床意义
• 延长：见于DIC时Fg消耗，异常Fg血症或先天性低 （无）Fg血症; 原发性纤溶，FDP增高; 肝素和类肝 素物质增多。
• 缩短：少见 • 可作为链激酶、尿激酶溶栓治疗时的监测指标，正
常的3-5倍
注意事项
⑴抗凝比例要准确，±不得超过0.2ml ⑵离心速度及时间必须到位，以除去血小板的干扰 ⑶采血后2小时内完成 ⑷标本不得有溶血、凝血 ⑸标本结果异常应密切联系临床 ⑹凝血酶试剂易失活，4℃可保存3天
开启秒表 ，轻轻摇动。 4. 在较强的光线下，3分钟内观察凝集现象 5. 做阳性和阴性对照
临床意义
D-D为交联纤维蛋白的特异性ຫໍສະໝຸດ Baidu解产物， 是纤维蛋白形成并发生降解的特异性分子标 志物。D-D增高表明体内有纤维蛋白形成并 发生溶解。
临床意义
1. 诊断DIC的重要依据 2. 鉴别原发性纤溶与继发性纤溶 3. 血栓性疾病升高，如深静脉血栓形成、肺梗塞、
主要检测方法：
1. 胶乳凝集法 2. ELISA法 3. 免疫比浊法
胶乳凝集法 原理： D-二聚体+ D-二聚体单抗（胶乳颗粒） 结果： 正常：阴性 血浆D-二聚体>0.5mg/L时阳性
操作
1. 枸橼酸钠1：9抗凝血2ml 2. 3000rpm离心15min 3. 取20ul D-D胶乳试剂+20ul血浆混匀，同时
原理
标准凝血酶 血浆
内源
Ⅻ Ⅻa Ⅺ Ⅺa Ⅸ Ⅸa
Ⅸa, Ca2+,Ⅷa PF3
Ⅹa Ⅹa,Ca2+,Ⅴa
PF3 Ⅱ
Ⅰ
凝血机制
外源
Ⅲ
Ⅶa,Ca2+,Ⅲ PF3 Ⅹ
Ⅱa Ⅰa (纤维蛋白)
操作
1.枸橼酸钠1：9抗凝血2ml 2.3000rpm离心15min 3.将血浆150ul加入试管内37℃温浴1min 4.加入150ulTT试剂，同时启动秒表 5.不断轻轻倾斜试管，记录凝固时间，重复2次取
内源凝血系统、外源凝血系统、国际标准化比值(INR)、 DIC、出血时间、APTT、PT、TT
1.止血与凝血基本机制 2.常见出血性疾病的实验室检查指标 3.检查内源、外源凝血途径筛选试验是哪一项试验? 其参考值
与临床意义？
心梗、重症肝炎等 4. 对抗凝和溶栓治疗的检测
A.在DIC抗凝治疗中，高水平的D-D持续下降，间接说明凝血过程在减 缓或中止，治疗有效。
B.开始因血栓迅速溶解而使血中的D-D明显升高之后D-D则从高水平 很快下降。如不下降，呈持续高水平状态，多提示药物用量不足。
作业
• 书写ＴＴ实验报告
复习思考题
血浆鱼精蛋白副凝固试验（3P）
• 原理：继发性纤溶时，形成可溶性FM-FDP复合物。 鱼精蛋白可使FM-FDP解离，FM-FM自行聚合沉淀， 出现副凝固。
• 临床意义：
– 阳性：DIC早、中期 – 阴性：DIC晚期，原发性纤溶亢进 – 原发性与继发性纤溶鉴别
• 手工操作，检测时间长，灵敏度低，干扰因素多， 现已少用。
TT 3P D-Dimer
凝血酶
因子ⅩⅢa
非交联
交联
纤维蛋白原
纤维蛋白
纤维蛋白
纤溶酶
FPA,FPB
纤溶酶
纤溶酶
X、Y、D、E， Bβ1～42， A、B、C、H
X’、Y’、D、E’， B β15～42，
A、B、C、H
X’、Y’、D、E’， D-二聚体
凝血酶时间测定 Thrombin Time TT