FL-SOP-CL-5001 微生物样本采集、运送标准操作规程

Shanghai Fenglin Clinical Laboratory Co.,Ltd.

上海枫林医药医学检验有限公司

SOP File Code

文件编号：

FL-SOP-CL-5001

TITLE：Standard operating procedure for microbiological sample

collection, preservation, transportation

文件名称：

微生物样本采集、保存、运送程序标准操作规程

WRITTEN BY/ DATE 编写者：丁星

日期：2013.08.26 REVIEW BY/ DATE

审阅者：黄永富

日期：2013.08.26

QA REVIEW / DATE

QA审阅者：葛晓明

日期：2013.08.28

APPROVED BY/ DATE

批准者：胡胜南

日期：2013.08.29

REVISION DATE

修订日期：2013.08.19 New Format/Revision Number

新版/修号： 2/2

REPLACE NUMBER

被替代版号: 2/1

EFFECTIVE DATE:

生效日期：2013.09.02

1.Intended Use目的

规范样本采集、保存、运送程序，保证实验室检测前样本质量。

2.Sphere of Application适用范围

微生物实验室受理的样本。

3.Responsibility职责

3.1.医护人员和检验人员指导病人如何正确留取样本。

3.2.护理人员负责临床样本的采集，特殊样本由临床医生采集。

3.3.用户端样本保存的责任人由用户自行规定，本实验室临床样本的保存由检验人员负责。

3.4.临床样本的运送由本中心实验室物流人员负责。

4.Procedure程序

4.1.血液骨髓样本

4.1.1.采集指征：对可疑血流感染患者未进行抗菌药物治疗前，应及时进行血液培养。可疑血

流感染的患者出现以下一项或几项体征时应及时采集血培养：

●发热（≥38℃）或低温（≤36℃）

●寒战

●白细胞增多（计数大于10000×109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞）

●粒细胞减少（成熟的多核白细胞小于1000×109/L）

●血小板减少

●皮肤粘膜出血

●昏迷

●多器官衰竭

●血压降低

●呼吸加快

●降钙素原升高

●C反应蛋白升高

●在评估可疑新生儿败血症时，除发热和低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊

液培养。

●肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症患儿（特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，

常伴有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多（总数≥20000×109/L）。

●老年菌血症患者，可能不发热或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心

内膜炎的重要信号。

骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。 4.1.2.血培养次数和采血时间

采血应该尽量在使用抗菌药之前进行，推荐同时采集2-3套（不同部位）血培养，以助于提高阳性检出率，区别病原菌与污染菌。一套血培养一般为一瓶需氧培养加一瓶厌氧培养。一次静脉采血只能注入一套培养瓶中。尽可能选用可中和或吸附抗菌药物的培养基。临床对可疑菌血症患者应立即采集血培养样本，对间歇性寒战或发热可在寒战时或体温高峰来到之前0.5-1h进行采血。

特殊情况除外（如怀疑细菌性心内膜炎），采集血培养后的2至5天内，无需重复采集血培养。

4.1.3.特殊的全身性和局部性感染患者采集血培养的建议：

●急性心内膜炎：对于可能的心内膜炎患者，必须在经验使用抗菌药物前30min之内抽取

血培养，起始采集3套血培养，如果在24h内仍报告为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共5套。

●亚急性心内膜炎：需要24h之内连续从不同部位抽取3套血培养，间隔30-60min。如24h

内为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共5套。

●对于亚急性心内膜炎的评估，皮肤消毒尤为重要，因为其主要的病原菌为皮肤定植菌如

凝固酶阴性的葡萄球菌。因此，血培养必须取自外周静脉血而非留置的静脉导管。取自导管的血培养会伴有很高的污染风险从而导致错误的心内膜炎的结论。建议采用正确的皮肤消毒，从不同外周静脉部位分别采集血培养，不能从留置的导管采血。

●急性脓毒症：10min内从不同部位采集2-3套血培养。

●可疑菌血症但血培养持续阴性，应改变血培养方法，如延长培养时间或增加特殊培养基，

以获得罕见的或苛氧的微生物（真菌、结核菌等）。

●不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，从不同体位采集2-3套血样本，24-36h

后估计体温升高前（通常下午）在采集2套以上。

4.1.4.皮肤消毒程序：

严格按以下三步法进行：

●70%酒精消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上），作用60秒。

●用碘伏消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上），作用1.5-2min；

或用碘酊消毒皮肤作用30秒。

●再用70%酒精脱碘（以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上）

●对碘过敏的病人只能用70%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。

4.1.

5.培养瓶消毒程序

●用70％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。

●酒精作用60s。

●在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入

血液。

4.1.6.培养瓶接种程序

●抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。如果

同时作需氧和厌氧培养，若用注射器采血，应将标本先接种厌氧瓶，再接种需氧瓶；若用蝶形针采血，则先接种需氧瓶、后接种厌氧瓶。严禁将空气注入厌氧瓶中。

4.1.7.骨髓样本：用骨髓穿刺针从髂骨采集。

4.1.8.采集容器：需氧和/或厌氧培养瓶。

4.1.9.采集量：

●成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为10ml，血液和肉汤比为1：5～10（体积：体积）。

●儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～5ml 用于血培养。