蛋白纯化中去除色素方法合集

多数色素中性条件下带负电荷，根据你色素的性质，可以采用合适的pH值，上阴离子柱，寻找一个合适条件，这个条件你的蛋白不挂，而色素可以挂住，缓冲液充分洗掉蛋白后高盐去除填料上的色素杂质。可以试试。另外，如果所含色素和蛋白分子量相差很大，可以采用透析的方法，找一个截留半径合适的袋子试试。超滤也是个好办法，但色素如果分子量比较大的话，最好不要用millipore的那种超滤装置，我用30000截留半径的膜竟然能留下10000多的物质。供参考！

不大同意作者的意见，其实色素挂柱后是非常难以洗下来的，用高盐洗不下，用NAOH后更是发生共价结合，绝对洗不下来，对柱子的损害是比较大的。

建议还是在上柱前处理，有时可以采用温和的萃取方法出色素，个人意见。

You can use reverse-phase HPLC to remove the pigments if your protein is not denature after it.

色素一般使用阳离子交换色谱和疏水色谱,不吸附色素,另外,如果你的蛋白分子量大的话,可以考虑使用超滤,色素都是一些分子量小的分子.

通过IEC、HIC等去除色素效果不理想，而且色素的存在会影响树脂的寿命，我建议采用超滤，效果相对较好。

色素应该用什么从阴离子柱上洗脱啊，我用了2M氯化钠，0.1M盐酸，1M氢氧化钠洗，但洗得不是很彻底，柱载量下降了

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∙3楼

色素难去,你可以用少量的样品稀释上柱,看流穿的液体颜色有没有变化,如果没有,那恭喜你, 色素不挂,那不就可以了,如果挂住了,你洗脱你的蛋白看有没有色素混合,如果没有也可以, 挂在柱子上的色素再用酸碱洗以及乙醇等,都可以把大多色素洗下来.你可以加点活性炭试试.

色素的种类特别多，大分子的，小分子的，带正、负电荷等。你现在肯定不知道你的溶液中

含有的色素的性质。

我的发酵液也是含有大量的色素但是我过阳离子柱的时候色素没有挂在柱子上全被冲下来

了。

如果你的色素比较浓且几乎成油状，你觉得过疏水柱如何？我的理解是：你的目的蛋白的分

子量一般不会和色素的分子量大小一样，故有可能能起到分离的效果。

不至于那么严重吧，我们这段时间的研究发现，色素和阴离子结合特别牢固，你可以按照正

常上样，上样后用梯度为10-20%的高盐溶液冲洗，蛋白质和阴离子结合不太牢固所以会被

洗脱下来，然后在用50-100%的高盐溶液冲洗，色素就会被洗脱下来；但要注意如果是用

预装柱的话，在样品上柱之前先要把样品用0.22um的滤膜过滤。

除色素的办法可以采用：硫酸铵沉淀、活性炭吸附（对蛋白也有一定的吸附）、离子交换或

疏水层析柱，具体哪个方法好，你可以尝试一下，我觉得离子交换或活性炭比较好。