在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用

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酵母菌在药物研究中的应用

酵母菌在药物研究中的应用

酵母菌在药物研究中的应用最近几十年,酵母菌成为了一种倍受欢迎的模式生物。

因为其生长快,繁殖力强,是人类重要的工业酿酒、制酸、生产干酪、面包等的微生物,所以很多科学研究人员也开始关注酵母菌在医学与药物研究领域的应用。

以下我们将探讨酵母菌在药物研究中的应用,包括其在基因组学、药物筛选、毒性测试等方面的优越性。

1. 酵母菌用于基因组学研究酵母菌基因组最早于1996年被测序,正式进入基因组学时代。

它是一个单细胞真核生物,与真核生物中的其他细胞相比,它的基因组大小和蛋白编码基因数目较少。

因此,酵母菌是研究生物的基因互作网络和遗传调控的优良模型生物。

同时,多个酵母菌基因与人类疾病相关,包括神经退行性疾病、癌症、肌肉疾病和代谢性疾病等。

通过对酵母基因的功能研究,可以更好地理解人类基因功能和相关的新药研发。

2. 酵母菌在药物筛选中的应用现代药物研发的一个重点是筛选潜在的治疗药物。

在以往,药物筛选通常是通过化学合成药物分子,然而此项工作需要大量的人力、物力、时间以及费用,效率较低。

因此,有研究者发现,酵母菌作为一个单细胞真核生物,可以用于高通量筛选潜在的治疗药物。

在酵母中,部分基因和蛋白与人类的一些疾病相关。

这些基因和蛋白的研究可能会为新药的发现提供一个非常有价值的靶标。

在药物筛选时,通过对酵母菌中同类基因的筛选和比较,可以发现一些潜在的治疗靶标。

3. 酵母菌在毒理测试中的应用毒理学是研究各种物质对生命体所产生的毒性效果和作用机理的科学。

有些化学药品、重金属、农药等对人体会造成危害,为了保护人类健康,需要进行毒性测试。

这些测试可制备于细胞、动物模型或者介体模型下,其中酵母菌作为单细胞真核生物,被认为是进行毒性测试的好模型。

酵母菌在生长快,培养容易,下蛋生殖等方面的特性在毒性测试中显得特别有利。

酵母菌毒性测试在高通量下,研究了很多生物毒素的毒性机制,并可进一步为人类毒素危害的认识提供帮助。

总结:在药物研究领域中,酵母菌这个单细胞真核生物是一个非常有价值的模型生物。

322株酵母样真菌医院感染分布和耐药现状论文

322株酵母样真菌医院感染分布和耐药现状论文

322株酵母样真菌医院感染分布和耐药现状分析摘要目的:了解临床常见真菌的检出率、分布特点及耐药情况。

方法:使用改良沙氏琼脂(sda)培养基,有真菌生长用api条进行鉴定及药敏试验,药物包括制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑、两性霉素b及特比奈芬进行等。

结果:分离出322株酵母样真菌,检出率依次为白色念珠菌209株(64.9%),光滑假丝酵母菌49株(15.2%),克柔假丝酵母菌24株(7.5%),热带假丝酵母菌23株(7.1%),其他17株(5.3%);标本分布情况依次为痰61.3%、分泌物及引流物17.1%、尿液9.3%、粪便6.2%、血液1.6%、其他4.0%;白色假丝酵母菌对特比奈芬、氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、两性霉素b的耐药率依次为88.5%、21.5%、17.7%、8.6%、2.9%。

结论:在酵母样真菌感染中,以白色假丝酵母样菌检出率最高,痰液送检标本检出率最高,4种酵母样真菌对特比奈芬耐药率最高,其次为氟康唑。

关键词酵母样真菌药敏试验耐药性本文目的是了解医院真菌感染的分布特点及对抗真菌药物的敏感情况,以便为指导临床合理有效使用抗真菌药物提供依据。

资料与方法标本来源:2009年1月~2010年11月住院和门诊患者各种标本中分离得到。

培养及鉴定:改良沙氏琼脂培养基来自于oxoid公司、真菌api 鉴定条来自于梅里埃公司。

按照《全国临床检验操作规程》第3版进行手工鉴定,标本接种于改良沙氏琼脂培养基,生长真菌转种科玛嘉显色培养基中,经35℃、24~48小时培养,根据菌落不同的颜色判断菌种;并通过api条进行手工鉴定。

药敏试验:药敏参照2003nccls关于真菌纸片扩散法,m-h平皿、药敏纸片购自rosco公司。

结果真菌检出分布:2009年1月~2010年11月从医院门诊及住院患者不同标本分离出322株酵母样真菌,所有标本中痰标本最多,分泌物次之,分布情况,见表1。

科室分布以老年病科为最多,门诊最少,见表2。

rDNA测序在酵母菌和丝状真菌鉴定中的临床应用评价

rDNA测序在酵母菌和丝状真菌鉴定中的临床应用评价

文章编号:1001-8689(2021)05-0432-05rDNA 测序在酵母菌和丝状真菌鉴定中的临床应用评价卢玲玲 单洪波 许育绚* 钟钰芳 丁进龙 王慧兰(杭州艾迪康医学检验中心有限公司 杭州 310000)摘要:目的 评价核糖体RNA(rDNA)测序,在临床酵母菌和丝状真菌鉴定中的应用价值。

方法 收集61株真菌(包括5株标准菌株,9株室间质评酵母菌,24株临床酵母菌,23株临床丝状真菌),通过设计通用引物ITS 和26S D1/D2,对61株真菌进行PCR 扩增并对扩增产物进行双向测序,将获得的所有序列在Seqman 中打开,选取ITS 和26S D1/D2正反向序列无重叠峰片段,进行BLAST 核酸序列比对。

结合Mycobank 真菌分类信息以获得菌株鉴定结果。

结果 61株真菌全部扩增成功,剔除杂峰后,所有菌株联合ITS 和26S D1/D2测序鉴定,100%菌种能鉴定到属或群,97.0%(32/33)的酵母菌与73.9%(17/23)的丝状真菌准确鉴定到种。

结论 经优化后的核糖体RNA(rDNA)测序,能准确快速的鉴定临床常见真菌与疑难菌。

关键词:核糖体;真菌;基因测序中图分类号:R446.5 文献标志码:AApplication and clinical evaluation for DNA sequencing analysis in identification ofyeasts and filamentous fungiLu Ling-ling, Shan Hong-bo, Xu Yu-xuan, Zhong Yu-fang, Ding Jin-long, and Wang Hui-lan(Hangzhou Adicon Clinical laboratory, Inc., Hangzhou 310000)Abstract Objective To evaluate the value of ribosomal RNA (rDNA) sequencing in the identification of clinical yeasts and filamentous fungi. Methods 61 fungi were collected (including five standard strains of yeasts, nine strains of yeasts of external quality assessment, 24 strains of clinically isolated yeasts, and 23 strains of filamentous fungi), PCR amplification and two direction gene sequencing were performed by the universal primer 1TS and 26S D1/D2 of fungal rDNA gene. All sequences obtained were opened in Seqman, the fragments without overlapping peaks were selected for blast nucleic acid sequence comparison and were combined with Mycobank to obtain the information of species identification. Results All the 61 strains were amplified successfully. After removing the heteropeaks, all the strains were identified by combining with ITS and 26S D1/D2 sequencing. 100% of the strains could be identified to genera or groups, and 97.0% (32/ 33) yeast and 73.9%(17/23) filamentous fungi could be identified to species accurately. Conclusion The optimized ribosomal RNA (rDNA) sequencing could accurately and rapidly identify clinical common and difficult fungi.Key words Ribosomal; Fungus; DNA sequencing收稿日期:2020-05-08作者简介:卢玲玲,女,生于1984年,硕士,研究方向为临床微生物检验,Email:****************。

酵母样真菌158株样本分布与耐药情况分析

酵母样真菌158株样本分布与耐药情况分析

标 准 判 断 结 果 , 性 霉 素 B 的 最 低 抑 菌 浓 度 ( C)≥ 两 MI
2m / 判 断 为 耐 药 。 质 控 菌 株 为 白 色 念 珠 菌 gL
ATCC9 02 0 8。
3 讨论
酵母样 真菌 是 重 要 的 机会 致 病 菌 , 由于 患 者 免 疫 常
2 结 果
验和科 玛嘉 显色培 养 基及 真 菌鉴 定 系 统进 一 步 确定 其 种
类 。痰 液标本 的 酵母 样 真 菌 至少 成 优势 生 长 时才 做 药 敏 试验 , 其他 标本 均为纯 培养 。药 敏试验 采用 念珠 菌药敏 试 剂条 ( T .u gs , 说 明 书操 作 并 按 N C 19 M2 一 A BF nu) 按 C L 9 7 7A
念珠 菌 中各 有 1株对 所 列 5种 抗真 菌 药 物全 部 耐 药 。见
表 2 。
表 2 酵 母样 真 菌 1 8株 耐 药试 验 结 果 ( ) 5 %
要求 , 液标本 接种 于 配套 培 养瓶 中 , 细菌 自动 培养 仪 血 在
中培养 , 待仪 器报警 后 转种 于 血平 板 , 液 标 本 经 预处 理 痰 后接 种 于血 平板 , 他标本 直接 接种 在血平 板或 沙保 弱培 其 养基 上 ,5C培 养 2 4 3 ̄ 4~ 8 h后 观 察 菌 落 生 长 情 况 , 圆 将 形、 光滑 、 湿润 、 油样 、 奶 白色 、 白色 或黄 色 、 黄 色 的 菌 灰 淡 落进行 初步 鉴定 , 确认 的酵 母样 真 菌 经染 色 观 察 、 管 试 芽
果 按 白色念珠 菌 和非 白色念珠 菌分别 统计 , 果没 有发现 结 对 氟胞 嘧啶 和两 性 霉 素 B耐 药 的 白色念 珠 菌 , 对伏 立 康

酵母样真菌56株的分离鉴定及药物敏感性分析

酵母样真菌56株的分离鉴定及药物敏感性分析

养基培养阳性率高于沙氏培养基 , 并且区分混合感染 的 月 110份 临 床标 本 中分 离 出 的 5 0 6株 酵母 样 真 菌进 行 能力更 强 。2 ℃ 培养 2 , 为绿色 或翠 绿色 则 进一 步 7 4h 如 鉴定 和药敏 分析 , 而指 导 临 床 合 理 使 用抗 真 菌 药 物 , 做 芽 管试 验 , 芽 管 试 验 阳性 则 为 白色 假 丝 酵 母 菌 , 从 若 若
对 1 0 例 标本 中分 离出的 5 株酵母样真 菌进行 菌种 鉴定及常用抗真茵 药物的敏 感性分析 , 0 1 6 以指
用常规培养方法从 临床标本 中分离 出的5 6株 酵母样 真菌用柯 玛嘉显 色培养基纯培养 , 根据 菌
导临床合理 用药。方法
分析 。结果
落颜 色进行分类 , 可疑 者在 法 国 b m r u i ei x的 VT K一 2全 自动细 菌分析仪上鉴 定, A BF N U N o e IE 3 用 T U G S2I T试条做 药敏 5 酵母样 真菌 中, 色假 丝酵母茵检 出率最 高( 5 0 , 次为热带假 丝酵母 菌( 4 3 ) 光 滑假 丝 6株 白 7 . %) 其 1.% , 酵母 茵( . %) 检 出葡萄牙假 丝酵母 茵、 71 , 郎比可假丝 酵母 菌各 1 。酵母样 真菌对 5一氟胞 嘧啶 ( 株 5一F 、 c) 两性 菌素 B
的环境 下再 培养 2 。通 过 肉眼判读 观察 生 长情 况 , 4h 与 司生产 的 5 2 0 加样器 。3 ℃培养箱 、7 培养 0~ 5 l 7 2℃ 生 长对 照相 比较 , 照说 明书判 读 并记 录药敏 结 果 。用 依 箱。 克柔念 珠 菌 A C 65 株作 质控 菌株 。 T C 28菌 13 方 法 我院各 科送 检 的各类 标 本 接种 于血 培 养 基 . 2 结 果 上 ,7 培养 2 3% 4h后 , 现 有 酵 母 样 菌 落 时 , 取 菌 落 发 挑 110份 临 床 标 本 中分 离 出 的 5 0 6株 酵 母 样 真 菌 。 采用直接镜检的一般方法 , J检查时应遮去强光 , 先在 其 中痰标本 3 7例, 中段尿 4例 , 血液标本 4例 , 导管尖 低倍 镜下 检查 有无 菌丝 和孢 子 , 后 用 高倍 镜 观察 孢 子 然 端 物 2例 , 耳分 泌物 6例 , 口腔分 泌 物 2例 , 口脓 液 1 伤 和菌丝 的形 态 、 征 、 特 位置 、 大小 和 排列 等 , 可 涂 在 载 也 例 。5 6株酵母样真菌 中, 白色假丝酵母菌检 出率最高 玻 片上 , 气 干 燥 后 , 革 兰 染 色 等 方 法 染 色 后 观 察 。 空 经 (50 )其次为热带假丝酵母菌(4 3 , 7 .% , 1. %) 光滑假丝 革 兰染色 中真 菌 为 阳性 , 被染 成 蓝 黑 色 , 此方 法适 用 于 酵母 菌 ( .% ) 检 出葡萄牙 假 丝酵母 菌 、 比可假丝 酵 71 , 郎 酵母 菌 、 孢子 丝 菌 、 组织 胞 浆 菌 检 测 j 。肺 孢 子 菌感 染 。酵母 样 真菌 对 5一 胞 嘧 啶 ( 氟 5一 的痰 或支 气管肺 泡灌 洗 液涂 片检查 可 用 此染 色 方法 , 可 母 菌各 1株 。见 表 1 C、 A B、 F A) 依 以见到染成黑色的包囊体和滋养体 , 证实为真菌则分 F ) 两 性 菌 素 B( M ) 氟 康 唑 ( C 、 曲康 唑

尿沉渣染色镜检联合显色培养法快速鉴定尿路感染酵母样真菌的应用价值的探讨

尿沉渣染色镜检联合显色培养法快速鉴定尿路感染酵母样真菌的应用价值的探讨

.48.World Notes on Antibiotics,2021,Vol.42,No1尿沉渣染色镜检联合显色培养法快速鉴定尿路感染酵母样真菌的应用价值的探讨杜金龙,罗万鹏,杜海燕,唐春燕,刘淑梅,张岩,谭延国*(首都医科大学附属复兴医院检验科,北京100038)摘要:目的探讨尿沉渣染色镜检联合显色培养法对尿液标本中酵母样真菌的快速诊断价值。

方法取尿培养标本共376例,以常规尿培养法的结果为金标准,评估尿沉渣染色镜检法联合显色培养法对真菌(以下简称联合法)的检出效果。

结果(1)常规尿培养中酵母样真菌阳性率为9.0%(34/376);联合法酵母样真菌的阳性率为6.9%(26/376)。

(2)经配对卡方检验,联合法与常规尿培养法在检出酵母样真菌方面的差异有统计学意义,在鉴定酵母样真菌上一致性较高(Kappa=0.830,P<0.05);在常规尿培养法检出的34例酵母样真菌标本中,镜检联合显色培养法检出26例,符合率为76.4%(26/34),联合法比常规培养法至少提前一天鉴定出酵母样真菌。

结论尿沉渣染色镜检联合显色培养法与常规尿培养法对酵母样真菌的检出符合率较高,且能显著缩短检测时限,可作为常规尿培养法的补充实验。

关键词:尿沉渣;革兰染色;酵母样真菌显色培养基;酵母样真菌中图分类号:R978.1文献标志码:A文章编号:1001-8751(2021)01-0048-03Performance Evaluation of Microscopy of Stained Urinary Sediment in Combination with a Chromogenic Culture Cethod for the Detection of Yeast-likeFungi in Urine SpecimensDu Jin-long,Luo Wan-peng,Du Hai-yan,Tang Chun-yan,Liu Shu-mei,Zhang Yan,Tan^n-guo(Beijing Fuxing Hospital,Capital Medical University,BeiJing100038)Abstract:Objective To evaluate the perfonnance of microscopy of stained urinary sediment in combination with a chromogenic culture method(combined method)for the detection of yeast-like fungi in urine specimens. Methods Routine culture test was used as golden standard,for the performance evaluation of the combined method. Results(l)Yeast-like fungi were observed in34,among the376specimens,by routine culture method(34/376,9%); whereas26specimen were observed fungus-positive by combined mthod(26/376,6.9%).(2)As for the performance, significant difference was observed between the combined method and the routine culture method(p=0.000),but the two methods were consistent with each other at a high degree(Kappa=0.83,P<0.05);of all the34yeast-like fungus positive specimen by routine culture method,26were observe positive by combined method(76.4%,26/34),which could give a fungal species information1or2days earlier than the routine culture method.Conclusion Due to its higher consistency,obviously shorted test period and availability,relative to routine culture method,the combined method can be a complementary way for the earlier detection of yeast-like fungi.Keywords:urinary sediment;gram stain;CHROMagar Candida;yeast fungi尿路感染是泌尿系统的常见疾病之一,我国尿素、免疫抑制剂、糖皮质激素等药物的广泛使用,路感染占医院感染的20%~32%[心。

医院常见酵母样真菌的耐药特点分析

医院常见酵母样真菌的耐药特点分析

Lb i qu.De a t n f Cln c lLa o a oy,Lu eHopi lo n z o src ,Bej n 0 1 9 h n p rme t iia b r tr o h s t f To g h uDitit a iig 1 1 4 ,C ia
[ b t c] O jci Toiv siaet ec r n r g rs tn esau f o ptl c urd y a t ief n i o A s a t b et e r v et t u r t u e i a c tt s s i - q i e s l u g n g h e d s o h aa e -k t
张 芳, 李玉敏 , 惠景 , 立秋 ( 京 市通 州区潞 河 医院检验 科 崔 王 北 11 4) 0 1 9
【 要】 目 的 了解 酵 母 样 真 菌 对 常用 抗 真 菌 药 物 的耐 药情 况 , 于 指 导 临 床 合 理 用 药 。 方 法 真 菌 培 养 采 摘 便
用 常规 方 法 , 采用 念珠 菌 显 色 培 养 基 进 行 鉴 定 , 敏 使 用 微 量 液 体 培 养 基 稀 释 法 。 结 果 1 5株 酵 母 样 真 菌 中 , 药 1 白 色 假 丝 酵 母 菌 4 株 , 4 . ; 滑假 丝 酵母 菌 1 9 占 26 光 6株 , 1. ; 平 滑 假 丝 酵 母 菌 1 占 39 近 6株 , 1 . ; 带 假 丝 酵 占 39 热 母 菌 1 株 , 1 . ; 柔 假 丝 酵母 菌 1 株 , 9 6 ; 也 蒙 假 丝 酵 母 菌 8株 , 6 9 。酵 母 样 真 菌 对 两 性 霉 素 2 占 O4 克 1 占 . 季 占 . B、一 5氟胞 嘧 啶 、 霉 菌 素 、 康 唑 、 曲 康 唑 、 康 唑 和 酮 康 唑 的 耐 药 率 分 别 为 3 5 、 . 、 3 0 、 5 2 、 制 咪 伊 氟 . 1 7 1. 2 . 2 . 、6 1 和 2 . 。结 论 3 5 2 . 26 院 内酵 母 样 真 菌 感 染 以 白 色假 丝 酵 母 菌 最 为 多 见 , 康 唑 耐 药 性 较 其 他 药 物 高 。 氟

酵母菌在医学研究中的应用

酵母菌在医学研究中的应用

酵母菌在医学研究中的应用酵母菌是一种单细胞真核生物,广泛存在于自然界中。

由于其结构简单,在实验室中易于培养和操作,因此成为了生物学家研究基因功能,细胞生理和生物学等方面的重要模式生物。

同时,随着对酵母菌生物学和遗传学的深入研究,酵母菌在医学研究中的应用也逐渐得到了发展。

本文将从几个方面介绍酵母菌在医学研究中的应用。

1. 酵母菌在癌症研究中的应用癌症是一种常见的疾病,以其剧烈的进展和高度恶性而闻名。

如何找到治愈癌症的方法一直是科学家们关注的焦点。

酵母菌作为模式生物,在癌症研究中得到了广泛的应用。

首先,酵母菌的基因组与人类有许多相似之处,比如同源基因,显性突变和隐性突变等等。

这些相似之处让科学家们可以将酵母菌用作研究癌症相关基因的平台,以便更好的了解基因与癌症发展之间的关系。

另外,酵母菌的生命过程简单,没有困难的操作,因此可以很容易地进行各种基因操作,比如过表达,突变等。

这些解剖学优点使得酵母菌成为了筛选癌症小分子药物的重要平台,为治疗癌症提供了新的机会。

2. 酵母菌在药物筛选中的应用酵母菌在医药研究领域中的应用不仅仅是在癌症方面。

由于其基因组较小,细胞结构相对较为简单,因此可以很容易地进行高通量筛选,从而在药物研究中得到广泛应用。

例如,科学家们可以将某些细胞毒性化合物或抑制剂添加到酵母菌中,以此来筛选新药物的效果。

而这些化合物所作用于的靶点通常是人体细胞中的蛋白质,这些蛋白质与酵母菌蛋白质具有高度的同源性,因此科学家们可以通过这种方式筛选出一些潜在的药物,当然还需要更加深入的研究和实验来验证这些药物的效果和安全性。

3. 酵母菌在疾病诊断中的应用除了上述两个方面,酵母菌还可以在疾病的诊断中得到广泛应用。

人体中会产生多种绝缘性的蛋白和免疫因子以应对细菌和病毒的感染,而这些因子的产生需要消耗能量,因此可以影响细胞的代谢。

有研究表明,酵母菌的代谢方式与人类的一些代谢方式存在相似之处。

因此,通过研究酵母菌的代谢过程,科学家们可以根据代谢产物来诊断某些疾病的发生和发展。

酵母型真菌的分类和临床意义

酵母型真菌的分类和临床意义

酵母型真菌的分类和临床意义
(一)分类
1.念珠菌属念珠菌属假丝酵母菌)有150多个种,常见致病的有11种:白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、星形念珠菌、克菲念珠菌、季也蒙念珠菌,维斯念珠茵、葡萄牙念珠菌、都柏林念珠菌等,其中以白念珠菌为最常见的致病菌。

2.隐球菌属隐球菌包括17个种和8个变种,其中对人致病的最主要是新生隐球菌及其变种(新生隐球菌新型变种、新生隐球菌格特变种和新生隐球菌格鲁比变种)。

(二)临床意义
1.念珠菌属白念珠菌广泛分布于自然界,通常存在于人的体表、口腔、上呼吸道、肠道和阴道黏膜上,当机体发生正常菌群失调或抵抗力降低时,白念珠菌可侵犯人体多个部位,引起各种念珠菌病:女性的念珠菌性阴道炎、外阴炎;男性念珠菌龟头炎、包皮炎;体质虚弱婴儿的鹅口疮;念珠菌性肠炎、肺炎、膀胱炎、肾孟肾炎和心内膜炎等:中枢神经系统白色念珠菌病,如脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿等。

热带念珠菌广泛分布于自然界,在人体表和外界相通的腔道中也存在,是先天性免疫缺陷患者的条件致病菌。

热带念珠菌可引起皮肤、黏膜和内脏念珠菌病。

克柔念珠菌可引起系统性念珠菌病,特别是先天性免疫缺陷患者和大量接受抗菌药物治疗的患者。

光滑念珠菌为人体的一种腐生菌,可导致泌尿生殖道感染,也是新生儿的条件致病菌。

2.隐球菌属隐球菌属一般为外源性感染。

经呼吸道侵入人体,由肺经血行播散时可侵犯所有脏器组织,主要侵犯肺脏、脑及脑膜,也可侵犯皮肤、骨和关节。

新生隐球菌病好发于细胞免疫功能低下者,如AIDS、恶性肿瘤、糖尿病、器官移植及大剂量使用糖皮质激素者。

新生隐球菌的致病物质是荚膜。

酵母样真菌的临床分布及耐药分析

酵母样真菌的临床分布及耐药分析

酵母样真菌的临床分布及耐药分析俞碧霞;胡燕琴【摘要】目的探讨酵母样真菌感染情况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法采用法国生物梅理埃公司生产的ATB微生物鉴定仪、ID32C真菌鉴定板、ATBFUNGUS3药敏板对临床标本进行真菌鉴定和药敏试验.结果共分离酵母样真菌530株,主要来源痰液、尿液、分泌物及粪便.酵母样真菌中白假丝酵母检出率最高为57.17%,其次为热带假丝酵母、光滑假丝酵母、近平滑假丝酵母及克柔假丝酵母等.酵母样真菌对各类抗菌药的耐药率最高氟康唑、伊曲康唑,两性霉素B 最敏感.结论临床酵母样真菌感染以白假丝酵菌为主,临床应根据药敏试验结果合理选用抗真菌药物.【期刊名称】《现代实用医学》【年(卷),期】2016(028)003【总页数】2页(P386-387)【关键词】酵母样真菌;临床分布;微生物敏感性试验【作者】俞碧霞;胡燕琴【作者单位】315200宁波,宁波市镇海龙赛医院;315200宁波,宁波市镇海龙赛医院【正文语种】中文【中图分类】R446.5近年来由于激素、免疫抑制、广谱抗生素的广泛使用,深部真菌感所致的疾病日渐增多,抗真菌药物的广泛应用导致真菌的耐药。

因此,开展真菌的培养鉴定及体外药敏试验,指导临床合理用药,已受到越来越多的关注[1]。

为了解临床分离酵母样真菌感染分布及对常用抗真菌药物的体外耐药特点,为临床合理应用抗真菌药物提供依据,本文对来自临床的530株酵母样真菌进行药敏分析,报道如下。

1.1 标本来源选取2014年1月至2015年12月宁波市镇海龙赛医院临床送检的痰液、血液、尿液、引流液、分泌物及粪便等明确感染的合格标本,同一患者相同标本多次分离不累计。

1.2 仪器与试剂BACT/ALERT 3D240血培养仪,ATB半自动微生物鉴定仪,酵母菌鉴定试剂条ID32C,微量稀释法药敏试剂盒ATBFUNGUS3(均为法国生物梅里埃biomerieux公司产品)。

酵母菌多样性评估及其在生命科学中的应用

酵母菌多样性评估及其在生命科学中的应用

酵母菌多样性评估及其在生命科学中的应用酵母菌是一类广泛存在于自然界中的单细胞真菌,常见于泥土、水体和植物表面。

它们在酿酒、面包、酸奶等食品加工中发挥着重要的作用,同时也成为生命科学研究的重要模式生物。

酵母菌的种类繁多,但其贡献和价值却常常被人们忽视。

对酵母菌多样性进行评估,可以更好地发挥其在生命科学中的应用,并更好地认识和利用这些微小生物的巨大潜力。

一、酵母菌的多样性评估酵母菌的多样性评估是指对酵母菌种类、数量、分布等方面进行的系统分析与研究。

酵母菌的多样性评估可以通过采集自然环境中的酵母菌样品,通过传统菌落计数法、分子生物学技术等多种手段对酵母菌的种类和数量进行分析,从而更好地了解酵母菌生态与分布特征。

在评估酵母菌多样性方面,传统菌落计数法是最基础的手段,它是通过将样品分离在富含营养物质的培养基上,并定期观察酵母菌的生长繁殖情况,通过数目上的统计,确定酵母菌的种类及其数量。

然而,传统菌落计数法存在很多弊端,如只能分离某些常规菜肴用酵母菌,不能完全反映酵母菌的多样性和数量等。

针对传统菌落计数法的不足,分子生物学技术被用来替代传统方法。

这些技术主要包括PCR、扩增子测序、DNA条形码等。

这些方法通过对酵母菌DNA的特异性扩增及测序,可以获得更为直观和准确的酵母菌种类、数量和分布信息。

这些技术具有极高的灵敏度和精确度,能够为酵母菌基础研究以及农业、医药、食品等领域的应用提供有力支持。

二、酵母菌在生命科学中的应用酵母菌是一种广泛应用的模式生物,常被用于基础和应用研究。

作为单细胞真菌,酵母菌的生长和繁殖比较快速,而且分生子数量一致,便于运用于基因转移和基因表达实验等。

同样,酵母菌是真核生物,其DNA序列较为复杂,而且较为贴近哺乳动物。

从这两个方面考虑,酵母菌成为生命科学中研究重要性乃至于人类生命的模式生物。

1. 生物学研究酵母菌在生物学研究领域中有着重大的应用价值,因为它们能够对生命系统中的基本生理过程进行研究。

338株酵母样真菌临床分析

338株酵母样真菌临床分析

株 (5 3 % )其 他 科 室 1 1 .8 , 8株 ( .3 ) 53 % 。
23 药敏结果分析 . 在 5种 抗 真 菌 药 中 5一氟 胞 嘧 啶 、 性 两
霉 素 B的 敏 感性 较 高 , 伏 立 康 唑 、 康 唑 、 曲 康 唑 的 耐 药 而 氟 伊 率 较 高 。见 表 1 。
11 标本来源 .
收 集 我 院上 述 时 期 住 院及 门诊 送 检 的血 液 、
内科 7 4株 ( 18 % ) 内分 泌 肾 内科 6 2 .9 , 6株 (9 5 % )I U 5 1 .3 , 2 C
痰液 、 液 、 泌物等共 2 7 分标本 。 尿 分 1 8 12 试 剂 及仪 器 血 平 板 ( 州 安 图 绿 科 生 物 工 程 有 限 公 . 郑 司 )沙 保 罗 培 养 基 ( 州 安 图 绿 科 生 物 工 程 有 限 公 司 )鉴 定 , 郑 , 为法 国生 物 梅 里 埃 公 司 I 2 D 3 C酵 母 菌 鉴 定 板 条 , 敏 为 法 国 药
3 8株 酵 母样 真 菌 临床 分 析 3
姚 丹 燕
( 江省 平湖 市 中医 院, 浙 浙江 平 湖 3 4 0 ) 12 0
[ 要 】 目的 了解 临床 常见 酵母 样 真 菌 感 染 的 种 类 、 布 及 耐 药情 况 , 于 指 导 临床 合 理 用 药 。方 法 收 集 我 摘 分 便
培养 2 4h后 , 取 可 疑 菌 落 涂 片 , 兰 染 色 镜 检 见 酵 母 样 真 挑 革 菌 , 接 种 沙保 罗 培 养 基 放 3 ℃ 培 养 2 得 到纯 菌 落 。 挑 取 转 5 4h 几 个 菌 落 在 A IS ses nMeim 安 瓿 内 制 成 2个 麦 氏 单 P upni d o u

临床常见酵母样真菌的分布及耐药性分析

临床常见酵母样真菌的分布及耐药性分析

C RP与 E R、 C T 的 阳性 率差 异 有 统 计 学 意 义 ( 1 . 1 S WB 、 Y 一 2 7

P 0 0 ) 其 中 C P高 于 E R、 B T, 果 与 部 分 文 献 相 < .1 , R S W C、 结
n tl ess acicl e i [] e i rIfc DsJ aa spi: r i ve J .P da net i , ta r w t
落经 革 兰 染 色 确 认 为 酵 母 样 菌 后 , 康 泰 生 物 公 司 的 B ( 用 II ) K T 1 C系 统 对 酵 母 样 真 菌 进 行 鉴 定 确 证 。 ON 6 3 药 敏 试 验 . 将 分 离 株 严 格 按 照 标 准 操 作 程 序 接 种 康
泰生 物 公 司 的 F UNGU 7 菌 药 敏 试 验 条 进 行 药 敏 试 验 , S 真 其
为 了 解 酵 母 样 真 菌 感 染 的菌 群 分 布及 药 敏 状 况 , 对 临 床 现
标 本 中分 离 出 的酵 母 样 真 菌进 行 分 析 , 而 为 临 床 合 理 使 用抗 从
真菌药物提供参考 。
资 料 和 方 法
1 标 本 来 源 .
本 院 20 0 7年 8月 至 2 0 0 8年 1 月 就 诊 患 1

10 ・ 7
国际检验 医学杂 志 2 1 00年 2月第 3 1卷第 2期
It a d F bu r 00 V 1 1 N . n L bMe , er a 21 , l. , o 2 J y o3
认 为 C P是 一 种 诊 断 新 生 儿 败 血 症 的手 段 。本 研 究 发 现 新 生 R 儿 败 血 症 发 生 早 期 ( 院 当 天 ) 检 测 血 清 C P浓 度 , 现 疾 人 即 R 发 病组 C P阳性 率 8 . , 著 高 于健 康 对 照 组 ( 7 0 , R 65 显 Y 一4 . 8 P

科玛嘉显色培养基鉴别酵母样真菌的临床价值

科玛嘉显色培养基鉴别酵母样真菌的临床价值
1 材 料 与 方法
9 5 . 3 % 。而在 自制培 养基上 , 白色念珠 菌仍 然为 白色乳 酪样 , 因此
1 . 1 材料 : 国内成品科碉幕硷 粜 菌显 色培 养基 , 本室 自制沙保氏培养基 。 科 玛嘉 显色培养 基上菌 落不 同的颜色 可筛选 不同 的念 珠菌 ,它能
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
简便 准确 的鉴定 临床上 常见 的念 珠菌 , 提 高对念 珠菌混 合感 1 . 2标 本 来 源 :贵 医三 附 院 2 0 1 2年 6 月一 1 2月 门 诊及 住 院患 者 快 速 , 染 的识别 , 因此在分离 , 诊 断致病性 酵母菌方 面优于沙 氏培养基 。 呼 吸 道标 本 泌尿 道 等 2 6 9 例, 同一 病人 多 次标 本 不 重复 计 算 。 l - 3方 法 : 取 患者 痰 、 咽拭 子 、 尿液 等标 本 同 时接 种于 沙 氏培养 基
2 0 1 3 年 1 月2 0日收 稿
版社 。 2 0 0 6 : 1 1 2 .
治疗麻风病 的药物及其抗菌活性和毒副作用
谢 小敏 ’
摘 要 : 麻 风病在《 中华人 民共 和国传染病 防治 法》 中属 于丙类传 染病是 由麻风 分枝 杆茵引起 的主要侵犯皮肤和 周围神 经的一种慢性 传染 病. 会引起皮肤、 骨头及 内 脏的溃疡, 出现坏疮、 感官丧失、 身体变形, 甚至瘫痪, 如不及时发现与治疗, 可能出现畸残并呈丑陋外观。 关键词 : 麻 风病 ; 抗菌; 毒 副作 用
和 科玛 嘉念 珠 菌显 色培养 基上 , 置2 5  ̄ C 培养 , 分别 于 2 4 h 、 4 8 h 、 7 2 h
表1 酵 母样 真菌在两种培养基上 的分离情 况
各记录一次 , 观察生长情况, 沙氏培养基上的酵母菌经 H x 一 2 1 细

真菌操作常规20070307

真菌操作常规20070307

真菌操作常规20070307真菌鉴定操作常规一.标本的采集和处理1. 皮肤、指甲、毛发和组织在收集标本前用75%酒精消毒病变部位。

如果损害处已用了软膏、冷霜或粉剂应事先清洁。

取材应用钝手术刀刮取表皮皮屑,或用透明胶带粘取皮屑直接移至载玻片上,水疱取疱壁组织,脓疱则取脓液。

皮肤粘膜交界处或菲薄的皮肤部位如龟头、大阴唇、口周、肛周等处以浸有生理盐水的湿棉拭子,檫拭局部后送检。

指甲标本应取变色、萎缩或变脆的部位,以钝手术刀刮除表层,采集病甲边缘下病甲置载玻片上,滴封固液,微加热,使甲溶解。

毛发标本应取无光泽、脆而松动,根部折断的毛发。

毛发置载玻片滴加10%KOH溶液,微加热使角质溶解。

组织取病变部位,置无菌生理盐水中送检。

以无菌镊子和剪刀剪碎后进行培养或镜检,避免使用组织研磨器对真菌菌丝的折断及机械性损害皮肤、指甲、毛发和组织标本一般采用直接镜检。

2.眼、耳部标本怀疑真菌性角膜炎时,应在手术显微镜下以眼科小匙刮取溃疡的基底和边缘部位。

怀疑真菌性内眼炎时,应尽可能收集玻璃体液。

结膜标本可用消毒生理盐水浸湿的棉拭子拭取。

耳部标本应从耳道中刮屑取材,也可采用拭子取材。

3.脑脊液标本取3-5ml经腰穿获取的脑脊液标本至无菌管内立即送检。

将标本2500rpm离心15分钟,上清液可用于血清学实验,沉淀部分用于培养和涂片镜检。

4.血液、骨髓标本抽取5-10 毫升血液或骨髓注入需氧菌血培养瓶中,尽快送检。

如血培养仪器报告阳性,及时取样接种于沙氏培养基并涂片革兰染色镜检,如发现真菌孢子电话报告病房并登记。

5.体液(包括胸腔、腹腔及关节腔积液):将无菌抽取胸水、腹水和关节腔液及时送检。

标本放无菌离心管中,2500rpm离心10分钟,取沉渣培养或涂片镜检。

6.尿液将清洗外阴后留取的中段尿,或经导尿管导出的中段尿,或经皮膀胱穿刺尿立即送检。

尿标本应先2500rpm 离心10分钟,取沉淀部分进行培养及涂片镜检。

7.阴道分泌物或男性尿道标本女性由妇科医师用窥器取阴道或宫颈的伪膜或豆渣样凝块。

酵母菌模型生物学的研究方法及应用

酵母菌模型生物学的研究方法及应用

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酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法

酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法

酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法英文回答:Identification of yeast-like fungi and the methods for antifungal susceptibility testing are essential in clinical laboratories for the diagnosis and treatment of fungal infections. In this response, I will explain the general process of yeast-like fungi identification and the methods used for antifungal susceptibility testing.Yeast-like fungi identification process:1. Specimen collection: The first step is to collect a clinical specimen from the patient, such as blood, urine, or respiratory secretions. The specimen should be collected using aseptic techniques to avoid contamination.2. Microscopic examination: The collected specimen is then examined under a microscope to identify the presence of yeast-like fungi. The characteristic morphology of yeastcells, such as budding or pseudohyphae formation, can help in the initial identification.3. Culture: If yeast-like fungi are observed in the microscopic examination, the specimen is cultured on appropriate agar media, such as Sabouraud dextrose agar or chromogenic media. The culture is incubated at an optimal temperature for yeast growth, typically around 30°C.4. Colony morphology: After incubation, the colonies that grow on the agar media are examined for their macroscopic characteristics, such as color, texture, and size. These characteristics can provide additional clues for identification.5. Biochemical tests: Various biochemical tests are performed to differentiate different species of yeast-like fungi. These tests may include carbohydrate assimilation tests, enzyme production tests, and other metabolic reactions. The results of these tests help in narrowing down the identification to a specific species.6. Molecular methods: In some cases, molecular methods such as polymerase chain reaction (PCR) or DNA sequencing are used for more accurate and rapid identification of yeast-like fungi. These methods can detect specific genetic markers or sequences that are unique to different species.Antifungal susceptibility testing methods:Once the yeast-like fungi are identified to the species level, it is important to determine their susceptibility to antifungal drugs. This helps in selecting the mosteffective treatment for the patient. The two commonly used methods for antifungal susceptibility testing are:1. Disk diffusion method: In this method, paper disks containing different antifungal drugs are placed on an agar plate that has been inoculated with the yeast-like fungi. The plate is incubated, and the zone of inhibition around each disk is measured. A larger zone of inhibitionindicates greater susceptibility to the drug.2. Broth microdilution method: This method involvespreparing a series of dilutions of antifungal drugs in a liquid growth medium. The yeast-like fungi are then added to each well of a microtiter plate containing the drug dilutions. The plate is incubated, and the minimum inhibitory concentration (MIC) of the drug, which is the lowest concentration that inhibits fungal growth, is determined.中文回答:酵母样真菌的鉴定和药敏试验方法对于临床实验室诊断和治疗真菌感染至关重要。

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中意外DNA污染,采用无菌双蒸水作为阴性对照。

选择克柔假丝酵母菌(ATcC6258)和白色假丝酵母菌(ATcc90029)为PCR灵敏度参考菌株,以l:10倍比稀释以浓度为101~108/ml作为模板,PCR反应最终灵敏度为102/ml。

(5)测序及序列分析jPCR产物回收采用琼脂糖凝胶回收试剂盒,连接反
应采用Beckman测序试剂盒,cEQ8000双向测序。

获得序列提交美国国家生物技术信息中心(NationalCenterforBiotechn0109yInfonnation,NCBI)GenBank数据库(http://m州.ncbi.Illm.nih.gov)进行序列比对,分析待检真菌与参考序列相似度。

根据wisconsin的软件的FAsTA计算法则,找出与最佳参照序列无法匹配的差异碱基,通过检查电泳峰图进行必要的修改,未知碱基N视为匹配碱基。

BLAsT序列比对:由于目前真菌序列比对无明确判断标准,本研究采用细菌16SrRNA序列比对标准:①与某种系的代表参照序列相比,未知菌株序列的相似性≥99%,未知菌株鉴定为该种;②与某种系的代表参照序列相比,未知菌株序列的相似性≥97%,但<99%,未知菌株鉴定为该属;③如未知菌株序列相似性≤97%,未知菌株不能鉴定为该种或属;④如存在两个或两个种系以上参照菌株与未知菌株序列相似性≥99%,且两者相似性相差≤0.5%,则暂将未知菌株归为其中相似性较高种系,但不排除未知菌株为另一种的可能性¨0|。

结果
一、质量控制
克柔假丝酵母菌(ATCc6258)、新型隐球菌(ATCC32609)、季也蒙假丝酵母菌(ATcCAs21500)、葡萄牙假丝酵母菌(ATCC66035)、近平滑假丝酵母菌(ATCC22019)、光滑球拟假丝酵母菌(ATCC“550)、热带假丝酵母菌(ATCCl463)及白色假丝酵母菌(ATcc90029)的18srRNA基因序列比对相似性均为100%:Vitek32YBc和显色培养基鉴定符合率均为100%。

不同种属真菌的PCR产物均检测出目的片段(图1)。

二、不同方法鉴定结果比较
在115株酵母样真菌中,显色培养基、Vitek32YBC、18srRNA基因序列分析鉴定到种的比例分别为88.7%(表1)、100%和100%,接近国内文献报道∽12|。

1.显色培养基与18srRNA基因序列分析鉴定结果比较(表2、3,图2):显色培养基仅能鉴定出白
注:1.标准带;2.白色假丝酵母菌(醌以池以6妇w);
3.热带假丝酵母菌(铂蒯池t阳p妇池);4.光滑球拟假
丝酵母菌(如,ld渤g缸6r咖);5.克柔假丝酵母菌
(c口蒯池瓤西);6.近平滑假丝酵母菌(c口,娥如脚妣厶);7.葡萄牙假丝酵母菌(仇rld池Zw妇n沁);
8.季也蒙假丝酵母菌(血,‘d彘kg越髓诂嗍n击£);9.挪威
假丝酵母菌(血,‘d赴k,lDn孵ni厶);lO.阿萨希丝孢酵母
(‰h唧拼∞∞砒茹);11.类星形丝孢酵母(舭融妒M}
∞姗,涵);12.ATcc90029白色假丝酵母菌(血,l出如
口珈∞似);13.ATcc6258克柔假丝酵母菌(&,‘也如
幻硼ei);14.无菌双蒸水
图l不同种酵母样真菌提取DNA的18srRNA基因
PCR扩增结果
表l18SrRNA基因序列分析法与表型鉴定法
鉴定率比较[株(%)]
色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑球拟假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌,有13株无法鉴定,且鉴定结果有11株与基因序列分析结果不同;基因序列分析法鉴定范围广,可鉴定出不同种属真菌,如挪威假丝酵母菌、葡萄牙假丝酵母菌。

2.Vitek32YBc鉴定与18SrRNA基因序列分析鉴定结果比较(表2、3,图2):Vitek32YBC鉴定表2115株真菌18SrRNA基因序列分析法与
表型鉴定法鉴定率比较(株)
史堡捡验匡堂苤盍兰Q塑生垒旦筮丝鲞筮垒翅£塾垫』L坐丛盟:』!些!Q堕:!些丝:塑垒垒
表318SrRNA基因序列分析法与表型鉴定结果不同菌株比较
注:1、4、5为白色假丝酵母菌;2、3、6为热带假丝酵母
菌;7、11、12、13为光滑球拟假丝酵母菌;8为克柔假丝
酵母菌;9、10为其他假丝酵母菌
图2显色培养基鉴定结果
能将多种酵母样真菌鉴定到种,鉴定结果有10株与基因序列分析结果不同,白色假丝酵母菌、葡萄牙假丝酵母菌、季也蒙假丝酵母菌鉴定结果无差异,热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌等其他假丝酵母菌鉴定则存在差异。

讨论
真菌的分类鉴定方法主要有两大类,一类是表型鉴定,另一类是分子生物学鉴定¨3l。

显色培养基、Vitek32YBC鉴定卡属于表型鉴定,18SrRNA基因序列分析法属于分子生物学鉴定。

显色培养基可以快速鉴定4种常见酵母菌(24~48h),可同时发现2种以上酵母菌感染¨引,本研究显色培养基鉴定与序列分析鉴定的符合率为89.2%(91/102)。

这可能是因为:(1)菌株在显色培养基上显色不典型,如2株丝孢酵母属菌和1株热带假丝酵母菌在显色培养基上显绿色,而葡萄牙假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌应显白色却显出其他颜色。

(2)个人在辨色上的差异,蓝色、灰色、紫色色差不清晰。

Vitek32YBc鉴定可根据真菌生化反应鉴定多种临床常见酵母样真菌,鉴定结果与序列分析鉴定的符合率为91.3%(105/115),低于国外文献报道(98.2%)¨5|,文献中采用Vitek2鉴定系统,比本研究采用的Vitek32YBC鉴定的生化反应多,分类更精细。

热带假丝酵母菌等其他酵母菌鉴定存在差异的原因可能有以下几点:(1)真菌的生长阶段不同,生理生化反应能力不同;(2)某些长期使用免疫抑制剂的患者,培养鉴定之前应用抗真菌药的患者,如血液病患者,重症监护室的患者,其病原菌有可能失去了典型的生理生化特性,甚至变得难于培养¨副;(3)Vitek32YBc数据库有限;(4)环境因素导致表型与基因型不符。

18srRNA基因序列分析法从基因水平明确种
属分类,基因序列分析以核酸为基础,受到外界环境。

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