酵母样真菌鉴定及应用

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162株酵母样真菌的鉴定及药敏分析

摘要：目的了解本地区酵母样真菌的感染及耐药现状。方法对２００４年１９月重医附一院门诊和住院患者的痰液、～血液、液、尿阴道分泌物、便等标本中分离出的１２株酵母样真菌进行鉴定，用真菌药敏条上的６种抗真茵药物做药敏试验，粪６并其结果结合临床综合分析。结果痰液标本酵母样真菌检出率最高，６．（０／６）其次是尿液为１．（５１２。共分离达２３１１１２，５４２／６）
在恶性胸水中ＣＰ并没有明显升高（有５１ｒｇＬＲ仅例０／＜ａＣＰ２ｍｇＬ。我们发现，核性胸腔积液的ＣＲ＜５／）结ＲＰ结果明显高于恶性胸腔积液，异有统计学意义（差Ｐ＜００）。５。所以胸水ＣＰ检测在结核性与恶性胸水的鉴别中具有明显的ｌ应Ｒ临床
ｓｉＭｅ，００，４５４２ｐｒｄ２０９（）：
［３谢思华．＿３ｃ反应蛋白在难治性肾病综合征复发时变化水
平及ｌ意义［］中华现代临床医学杂志，０５３２）临床Ｊ．２０，（３：
２４７６
维普资讯
重庆医学２００７年５月第３６卷第１Ｏ期
３讨论
９２３
或胸膜下肺部结核直接蔓延至胸膜所致，染为主要因素。感

酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法

酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法English response:Identification of yeast-like fungi and drug susceptibility testing are important steps in the diagnosis and treatment of fungal infections. The process of identifying yeast-like fungi involves several steps, including macroscopic and microscopic examination, biochemical tests, and molecular methods.First, the macroscopic examination involves observing the colony morphology on agar plates. Different species of yeast-like fungi have characteristic colony appearances, such as color, texture, and shape. This can provide initial clues to the identity of the fungus.Next, the microscopic examination involves observing the cellular morphology of the fungi using a microscope. This can reveal important features such as the presence of pseudohyphae, true hyphae, budding patterns, and theformation of spores. These characteristics can help narrow down the possible species of the fungus.Biochemical tests are then performed to further identify the yeast-like fungi. These tests may include carbohydrate assimilation tests, enzyme assays, and assimilation of nitrogen sources. The results of these tests can be compared to known patterns for different fungal species to aid in identification.In addition to traditional methods, molecular techniques such as polymerase chain reaction (PCR) and sequencing of specific genes can also be used for fungal identification. These methods can provide rapid and accurate identification of yeast-like fungi.Once the yeast-like fungi have been identified, drug susceptibility testing can be performed to determine the most effective antifungal treatment. The standard method for drug susceptibility testing of yeast-like fungi is the broth microdilution method. This method involves exposing the fungi to different concentrations of antifungal drugsin a liquid medium and observing the growth or inhibition of the fungi.In summary, the identification of yeast-like fungi involves a combination of macroscopic and microscopic examination, biochemical tests, and molecular methods. Once identified, drug susceptibility testing can help guide the selection of appropriate antifungal therapy.中文回答：酵母样真菌的鉴定涉及到几个步骤，包括宏观和微观检查、生化试验和分子方法。

酵母样真菌检验标准操作程序

酵母样真菌检验标准操作程序酵母样真菌检验标准操作程序1检验目的规范酵母样真菌鉴定的标准操作程序。

2检验程序的原理和方法通过美华MA120微生物鉴定仪及其他鉴别实验对酵母样真菌进行鉴定。

3性能特征酵母样真菌为侵犯表皮以外组织和器官的病原真菌和条件致病真菌，通过对分离的病原菌鉴定及抗真菌药物的敏感性试验等，协助临床诊断、治疗、流行病学调查研究和院内感染的检测。

4样品类型痰、尿、脓、各种体液、尿道及阴道分泌物、咽拭、脑脊液、血等标本。

5所需的仪器和试剂5.1仪器：美华MA120鉴定仪、比浊仪。

5.2试剂：念珠菌显色平板、革兰染液、白念珠菌ATCC 90028、生理盐水。

5.3其他：洁净玻片、无菌试管。

6环境和安全控制满足二级实验室的生物安全柜内进行操作试验。

7程序性步骤7.1镜检及染色方法7.1.1直接镜检直接镜检阳性说明送检标本中有真菌存在，排除污染的可能性后结合临床症状可做出初步诊断。

7.1.2革兰染色后镜检此法适用于大多数临床标本，将临床标本或培养物固定于洁净载玻片上，进行革兰染色，酵母样真菌被染成蓝紫色。

7.2培养特征：在科玛嘉念珠菌显色平板上生长18～24小时可见菌落，菌落呈奶油色、光滑的菌落。

7.3鉴定：从科玛嘉念珠菌显色平板上挑取可疑菌落，用比浊仪配置菌液浓度相当于1麦氏单位，用美华MA120微生物鉴定仪进行细菌鉴定。

7.4药敏：参见《MA120微生物鉴定药敏仪标准操作程序》及CLSI M100-S26最新版本文件。

8质量控制程序参见《微生物组室内质量控制管理程序》。

9警示或危急值当无菌部位培养出该菌属时，需联系临床。

10实验室临床解释10.1目前临床上分离出的酵母70%～80%为白色假丝酵母菌及热带假丝酵母菌，其他在念珠菌显色培养基不能鉴定的酵母，可用微生物鉴定仪鉴定到种。

无菌部位采集的标本中分离的任何酵母都必须鉴定到种，均有诊断意义。

同一部位反复分离出同一菌种也具有重要意义。

10.2从非无菌部位（痰、咽拭、粪等）分离到的条件致病菌（如白色假丝酵母菌），如直接镜检阳性，须认定具致病性。

酵母样真菌56株的分离鉴定及药物敏感性分析

养基培养阳性率高于沙氏培养基，并且区分混合感染的月１１０份临床标本中分离出的５０６株酵母样真菌进行能力更强。２ ℃ 培养２，为绿色或翠绿色则进一步７４ｈ如鉴定和药敏分析，而指导临床合理使用抗真菌药物，做芽管试验，芽管试验阳性则为白色假丝酵母菌，从若若
对１０例标本中分离出的５株酵母样真菌进行菌种鉴定及常用抗真茵药物的敏感性分析，０１６以指
用常规培养方法从临床标本中分离出的５６株酵母样真菌用柯玛嘉显色培养基纯培养，根据菌
导临床合理用药。方法
分析。结果
落颜色进行分类，可疑者在法国ｂｍｒｕｉｅｉｘ的ＶＴＫ一２全自动细菌分析仪上鉴定，ＡＢＦＮＵＮｏｅＩＥ３用ＴＵＧＳ２ＩＴ试条做药敏５酵母样真菌中，色假丝酵母茵检出率最高（５０，次为热带假丝酵母菌（４３）光滑假丝６株白７．％）其１．％，酵母茵（．％）检出葡萄牙假丝酵母茵、７１，郎比可假丝酵母菌各１。酵母样真菌对５一氟胞嘧啶（株５一Ｆ、ｃ）两性菌素Ｂ
的环境下再培养２。通过肉眼判读观察生长情况，４ｈ与司生产的５２０加样器。３ ℃培养箱、７培养０～５ｌ７２℃ 生长对照相比较，照说明书判读并记录药敏结果。用依箱。克柔念珠菌ＡＣ６５株作质控菌株。ＴＣ２８菌１３方法我院各科送检的各类标本接种于血培养基．２结果上，７培养２３％４ｈ后，现有酵母样菌落时，取菌落发挑１１０份临床标本中分离出的５０６株酵母样真菌。采用直接镜检的一般方法，Ｊ检查时应遮去强光，先在其中痰标本３７例，中段尿４例，血液标本４例，导管尖低倍镜下检查有无菌丝和孢子，后用高倍镜观察孢子然端物２例，耳分泌物６例，口腔分泌物２例，口脓液１伤和菌丝的形态、征、特位置、大小和排列等，可涂在载也例。５６株酵母样真菌中，白色假丝酵母菌检出率最高玻片上，气干燥后，革兰染色等方法染色后观察。空经（５０）其次为热带假丝酵母菌（４３，７．％，１．％）光滑假丝革兰染色中真菌为阳性，被染成蓝黑色，此方法适用于酵母菌（．％）检出葡萄牙假丝酵母菌、比可假丝酵７１，郎酵母菌、孢子丝菌、组织胞浆菌检测ｊ。肺孢子菌感染。酵母样真菌对５一胞嘧啶（氟５一的痰或支气管肺泡灌洗液涂片检查可用此染色方法，可母菌各１株。见表１Ｃ、ＡＢ、ＦＡ）依以见到染成黑色的包囊体和滋养体，证实为真菌则分Ｆ）两性菌素Ｂ（Ｍ）氟康唑（Ｃ、曲康唑

在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用

中意外ＤＮＡ污染，采用无菌双蒸水作为阴性对照。

选择克柔假丝酵母菌（ＡＴｃＣ６２５８）和白色假丝酵母菌（ＡＴｃｃ９００２９）为ＰＣＲ灵敏度参考菌株，以ｌ：１０倍比稀释以浓度为１０１～１０８／ｍｌ作为模板，ＰＣＲ反应最终灵敏度为１０２／ｍｌ。

（５）测序及序列分析ｊＰＣＲ产物回收采用琼脂糖凝胶回收试剂盒，连接反应采用Ｂｅｃｋｍａｎ测序试剂盒，ｃＥＱ８０００双向测序。

获得序列提交美国国家生物技术信息中心（ＮａｔｉｏｎａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｉｏｔｅｃｈｎ０１０９ｙＩｎｆｏｎｎａｔｉｏｎ，ＮＣＢＩ）ＧｅｎＢａｎｋ数据库（ｈｔｔｐ：／／ｍ州．ｎｃｂｉ．Ｉｌｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）进行序列比对，分析待检真菌与参考序列相似度。

根据ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ的软件的ＦＡｓＴＡ计算法则，找出与最佳参照序列无法匹配的差异碱基，通过检查电泳峰图进行必要的修改，未知碱基Ｎ视为匹配碱基。

ＢＬＡｓＴ序列比对：由于目前真菌序列比对无明确判断标准，本研究采用细菌１６ＳｒＲＮＡ序列比对标准：①与某种系的代表参照序列相比，未知菌株序列的相似性≥９９％，未知菌株鉴定为该种；②与某种系的代表参照序列相比，未知菌株序列的相似性≥９７％，但＜９９％，未知菌株鉴定为该属；③如未知菌株序列相似性≤９７％，未知菌株不能鉴定为该种或属；④如存在两个或两个种系以上参照菌株与未知菌株序列相似性≥９９％，且两者相似性相差≤０．５％，则暂将未知菌株归为其中相似性较高种系，但不排除未知菌株为另一种的可能性¨０｜。

结果一、质量控制克柔假丝酵母菌（ＡＴＣｃ６２５８）、新型隐球菌（ＡＴＣＣ３２６０９）、季也蒙假丝酵母菌（ＡＴｃＣＡｓ２１５００）、葡萄牙假丝酵母菌（ＡＴＣＣ６６０３５）、近平滑假丝酵母菌（ＡＴＣＣ２２０１９）、光滑球拟假丝酵母菌（ＡＴＣＣ“５５０）、热带假丝酵母菌（ＡＴＣＣｌ４６３）及白色假丝酵母菌（ＡＴｃｃ９００２９）的１８ｓｒＲＮＡ基因序列比对相似性均为１００％：Ｖｉｔｅｋ３２ＹＢｃ和显色培养基鉴定符合率均为１００％。

纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑药敏试验及临床应用

ｕｓｄｉｃｉｉａｔｃｉｎｔａＣＣＬＳｂｒｔｉｒｌｉｅｈｏｅｎｌｎｃｌｄｅｅｔｏｎｉｓｅｄｏｆＮｏｈｍｃｏｄｉｏｎｍｔｄ．ｕｔ
Ｋｅｒｓ：Ｄｉｃｄｆｕｉｎｍｅｈｄ；Ｙｅｓ—ｉｅｆｎｉｌｃｎｚｌ；Ｓｓｅｔｉｔｔｄｅｙｗｏｄｓｉｓｏｔｏｆａｔｌｕｇ；Ｆｕｏａｏｅｕｃｐｉｌｙｓｕｉｓｋｂｉ
２２重复性实验用白色假丝酵母菌ＡＴＣ．Ｃ９０８和近平滑假丝酵母菌ＡＴＣ２１，氟康０２Ｃ２０９对
唑纸片扩散法进行重复性实验，测试４各８次，抑其菌圈直径９结果落在质控范围内，菌圈直径之８抑
（ＣＬ７Ａ２ｃ笔者应用此方案检测了临床ＮＣｓＭ２一），
标本中分离的１３假丝酵母菌属对氟康唑的敏感１株
损害人群防止细菌感染方法之前，们必须面对真人菌感染这一现实；由于真菌感染病例的增加，抗真菌药物的耐药也出现了上升趋势；已有资料报道，内国临床分离的白色假丝酵母菌对伊曲康唑、康唑和氟酮康唑的耐药率分别达５、３、５［，０３２２因此有］必要普及和推广真菌药敏试验。体外抗真菌药物敏
间相差 ≤ ４ｍｍ。结果见表１。纸片扩散法与肉汤
１０１甲蓝储存液（．０亚Ｏ１ｇ亚甲蓝溶于２无菌Ｏｍ１

酵母菌的分类与鉴定

酵母菌的分类与鉴定
酵母菌是一类单细胞真菌，常用于面包、啤酒、发酵食品、生物技术等领域。

酵母菌的分类和鉴定主要依据其形态、生理特性和分子生物学特征。

1. 形态分类：根据菌体形态、大小、颜色等特征，将酵母菌分为不同属。

常见的属有酵母属（Saccharomyces）、球孢酵母属（Candida）、香霉酵母属（Schizosaccharomyces）等。

2. 生理分类：通过酵母菌的代谢特征、培养条件等进行分类。

例如，氧气需求、酵母菌对不同碳源（如葡萄糖、果糖等）利用的能力等。

3. 分子生物学分类：通过对酵母菌基因序列进行分析，以及对不同遗传标记（如基因型、DNA指纹等）的测定，可以确定不同酵母属、种、亚种。

酵母菌的鉴定可以通过比较分析其形态、生理和分子生物学特征，使用不同的鉴定方法和技术。

其中，常用的技术包括传统的形态学方法、生理生化测试、酵母菌基因检测、热循环放大（PCR）技术等。

酵母样真菌的临床分布及耐药分析

酵母样真菌的临床分布及耐药分析俞碧霞;胡燕琴【摘要】目的探讨酵母样真菌感染情况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法采用法国生物梅理埃公司生产的ATB微生物鉴定仪、ID32C真菌鉴定板、ATBFUNGUS3药敏板对临床标本进行真菌鉴定和药敏试验.结果共分离酵母样真菌530株,主要来源痰液、尿液、分泌物及粪便.酵母样真菌中白假丝酵母检出率最高为57.17％,其次为热带假丝酵母、光滑假丝酵母、近平滑假丝酵母及克柔假丝酵母等.酵母样真菌对各类抗菌药的耐药率最高氟康唑、伊曲康唑,两性霉素B 最敏感.结论临床酵母样真菌感染以白假丝酵菌为主,临床应根据药敏试验结果合理选用抗真菌药物.【期刊名称】《现代实用医学》【年(卷),期】2016(028)003【总页数】2页(P386-387)【关键词】酵母样真菌;临床分布;微生物敏感性试验【作者】俞碧霞;胡燕琴【作者单位】315200宁波,宁波市镇海龙赛医院;315200宁波,宁波市镇海龙赛医院【正文语种】中文【中图分类】R446.5近年来由于激素、免疫抑制、广谱抗生素的广泛使用，深部真菌感所致的疾病日渐增多，抗真菌药物的广泛应用导致真菌的耐药。

因此，开展真菌的培养鉴定及体外药敏试验，指导临床合理用药，已受到越来越多的关注［1］。

为了解临床分离酵母样真菌感染分布及对常用抗真菌药物的体外耐药特点，为临床合理应用抗真菌药物提供依据，本文对来自临床的530株酵母样真菌进行药敏分析，报道如下。

1.1 标本来源选取2014年1月至2015年12月宁波市镇海龙赛医院临床送检的痰液、血液、尿液、引流液、分泌物及粪便等明确感染的合格标本，同一患者相同标本多次分离不累计。

1.2 仪器与试剂BACT/ALERT 3D240血培养仪，ATB半自动微生物鉴定仪，酵母菌鉴定试剂条ID32C，微量稀释法药敏试剂盒ATBFUNGUS3（均为法国生物梅里埃biomerieux公司产品）。

酵母样真菌的培养鉴定及药敏结果分析

６．，１．％，．％，．％，２０ａｃｔｓｅａｈｔｒｉＢ６２５２９７３４．％ｎ．ｒｓｅｔｅｖｙｈｅｓｉｔａｅｏｕｏｙｏｉ，ｍｐｏｅｉｎ，ｔｉｆｏｎｃ
【要】目的了解呼伦贝尔地区真菌感染的类型、布及对常用药物的敏感程度，临床提供及时合理的用药指摘分为
导。方法选取２１００年４月￣２１年４月住院的１５例病人的送检培养物，０１４参照《全国临床检验操作规程》自制普通，
ｔｆＣａｄｄａｂｃｎ，Ｃｎｉａｇａｒｔ，ＣａｄｄｒｐｃｌｓＣａｄｄａａｓｌｓｓａｄｏｈｒｙａｔｌｅｕｇｗｅｅｉｏｎｉａｌｉａｓｏａｄｄｌｂａａｎｉａｔｏｉａｉ，ｎｉａｐｒｐｉｉｎｔｅｅｓ－ｉｆｎｉｏｋｒ
Ｉｅｉｉａｉｎａｒｇｓｓｅｔｂｌｔｆｙａｔｌｋｕｇｄｎｔｆｃｔｏｎｄｄｕｕｃｐｉｉｉｙｏｅｓ－ｉｅｆｎｉ
ＨＡＮ－ｉｇ，ＨＡＯ。ｎｇＦｕｑａｎＳＬｉｐｉ
（ｐｒｍｅｔｆＣｉｉｌａｏａｏｙ，ＴｅｅｐｅＨｏｐｔｌｆＨｕｕｂｉｒＤｅａｔｎｏｌｃＬｂｒｔｒｎａｈＰｏｌ’ ｓｉａｏｌｎｅｅ，Ｈｕｕｂｉ２０８ｌｎｅｅ０１０，Ｎｅｍｅｇｕ，ｈｎ）ｒｉｎｇＣｉａ

酵母样真菌感染的菌群临床分布与药敏分析

酵母样真菌感染的菌群临床分布与药敏分析内容摘要：目的了解临床酵母样真菌的感染类型、分布及其对常用抗真菌药物的敏感性，为临床诊断治疗提供正确的用药依据。

方法采用常规方法分离培养真菌，用法国生物梅里埃公司生产的ATBExpression微生物自动鉴定/药敏分析仪进行真菌鉴定和药敏分析。

结果396株酵母样真菌中，白色假丝酵母菌检出率最高(72．3%)，其次为热带假丝酵母菌(15．91%)，光滑假丝酵母菌(6．82%)。

酵母样真菌对5氟胞嘧啶、两性菌素B、氟康唑、依曲康唑的敏感性分别为98．02%，98．43%，77．38%，77．76%。

结论临床酵母样真菌感染以白色假丝酵母菌为主，对5氟胞嘧啶、两性菌素B敏感性较高，对氟康唑、依曲康唑有不同程度的耐药，因此，药敏监测是非常必要的，临床医生应根据药敏结果合理使用抗真菌药物。

酵母样真菌：感染；抗真菌药物；敏感性近年来，随着广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛应用，导管插管、器官移植和其他介入性治疗的普遍开展，以及艾滋病患者的不断增加，由真菌引起的条件致病菌感染日益增多[1]。

患者多数为自身感染，尤以酵母样真菌引起的深部真菌感染最为常见，并且常常成为终期感染。

同时抗真菌药物的使用又使真菌出现了耐药现象，给临床治疗带来了困难。

由于抗真菌药物品种有限，研究真菌的耐药性并控制其耐药性发生，显得尤为重要。

为了解酵母样真菌感染的菌群分布及药敏状况，现对我院1月—12月临床标本中分离出的396株酵母样真菌进行鉴定和药敏分析，从而指导临床合理使用抗真菌药物，有效预防真菌感染和耐药性发生。

1材料与方法1．1标本来源396株酵母样真菌均分离自我院临床送检的痰液、尿液、粪便、咽拭子、分泌物等。

1．2培养鉴定标本接种于沙保罗培养基30℃24h培养，涂片染色确认为酵母菌后，严格按操作说明书接种法国生物梅里埃公司生产的ATBID32C鉴定条，并用ATBExpression鉴定仪进行鉴定。

酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法

酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法英文回答：Identification of yeast-like fungi and the methods for antifungal susceptibility testing are essential in clinical laboratories for the diagnosis and treatment of fungal infections. In this response, I will explain the general process of yeast-like fungi identification and the methods used for antifungal susceptibility testing.Yeast-like fungi identification process:1. Specimen collection: The first step is to collect a clinical specimen from the patient, such as blood, urine, or respiratory secretions. The specimen should be collected using aseptic techniques to avoid contamination.2. Microscopic examination: The collected specimen is then examined under a microscope to identify the presence of yeast-like fungi. The characteristic morphology of yeastcells, such as budding or pseudohyphae formation, can help in the initial identification.3. Culture: If yeast-like fungi are observed in the microscopic examination, the specimen is cultured on appropriate agar media, such as Sabouraud dextrose agar or chromogenic media. The culture is incubated at an optimal temperature for yeast growth, typically around 30°C.4. Colony morphology: After incubation, the colonies that grow on the agar media are examined for their macroscopic characteristics, such as color, texture, and size. These characteristics can provide additional clues for identification.5. Biochemical tests: Various biochemical tests are performed to differentiate different species of yeast-like fungi. These tests may include carbohydrate assimilation tests, enzyme production tests, and other metabolic reactions. The results of these tests help in narrowing down the identification to a specific species.6. Molecular methods: In some cases, molecular methods such as polymerase chain reaction (PCR) or DNA sequencing are used for more accurate and rapid identification of yeast-like fungi. These methods can detect specific genetic markers or sequences that are unique to different species.Antifungal susceptibility testing methods:Once the yeast-like fungi are identified to the species level, it is important to determine their susceptibility to antifungal drugs. This helps in selecting the mosteffective treatment for the patient. The two commonly used methods for antifungal susceptibility testing are:1. Disk diffusion method: In this method, paper disks containing different antifungal drugs are placed on an agar plate that has been inoculated with the yeast-like fungi. The plate is incubated, and the zone of inhibition around each disk is measured. A larger zone of inhibitionindicates greater susceptibility to the drug.2. Broth microdilution method: This method involvespreparing a series of dilutions of antifungal drugs in a liquid growth medium. The yeast-like fungi are then added to each well of a microtiter plate containing the drug dilutions. The plate is incubated, and the minimum inhibitory concentration (MIC) of the drug, which is the lowest concentration that inhibits fungal growth, is determined.中文回答：酵母样真菌的鉴定和药敏试验方法对于临床实验室诊断和治疗真菌感染至关重要。

174株酵母样真菌的鉴定及药敏分析

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４３ｌ・
第２卷第４期８２１００年８月
实验与检验医学
ＥＸＰＥＲＩＥＮＴＡＬＡＮＤＬＡＢ０ＲＡＴ０ＲＹＭＥＤＩＮＥＭＣＩ
Ｖｏ．８Ｎｏ．１２４Ａｕ．２０ｇ０１
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经验交流・
１４酵母样真菌的鉴定及药敏分析株７
关键词：母菌；敏试验：药性酵药耐
近年来由于广谱抗生素、疫抑制剂的广泛应用．免疫功能下降．酵母样真菌以使
Ｍ — ＡＲ念珠菌筛选显色培养基上，７Ｃ养１～４ＡＧ）３ｑ培６２ｈ后，根
１１１４株酵母样真菌分别来源于临床送检的痰、拭子、．７咽
康唑、康唑、康唑７种抗真菌药物的药敏状况益氟
２结果
尿液、血培养、１分泌物等标本。伤：３
１试剂来源郑州博赛生物技术股份有限公司生产的科．２玛嘉（ＨＲＭＧ１珠菌筛选显色培养基ｆ号：６）温州ＣＯＡＡＲ念批４６、市康泰生物科技有限公司生产的酵母样真菌快速药敏试验试剂盒（色ＭＩ显Ｃ法，产批号：Ｌ８３。生Ｇ０８）１分离培养采用标准常规方法培养分离挑取沙保罗－３培养基中单个的菌落经革兰染色确认为酵母样真菌后接种到郑州博赛生物技术股份有限公司生产的科玛嘉ｆＨＲ一Ｃ０

酵母样真菌的培养鉴定及其耐药性分析

酵母样真菌的培养鉴定及其耐药性分析摘要】目的对引起感染的酵母样真菌类型及其耐药特性进行研究，以指导临床合理用药。

方法从2005年1月～2007年12月我院临床送检的血液、中段尿、粪便、痰、胸腹水、伤口分泌物、穿刺液等标本中，采用常规方法培养和分离酵母样真菌，用法国生物梅里埃A TB EXPRESS系统对酵母样真菌进行鉴定，用ATB FUNGUS药敏试条进行药敏试验。

结果共分离到484株酵母样真菌，其中白色假丝酵母菌占42.4％，热带假丝酵母菌占27. 9%,光滑假丝酵母菌占10.5%,清酒假丝酵母菌占7.0%,近平滑假丝酵母菌占2.3%,克柔假丝酵母菌占2.7%,中间假丝酵母菌占4.1%,其他酵母菌占3.1%。

酵母样真菌对两性霉素B敏感,对5氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑存在不同程度的耐药。

结论临床需要加强真菌送检培养，合理使用抗真菌药物，尽量避免单纯经验用药，以减少耐药菌株的出现。

【关键词】真菌；微生物敏感性试验；药物耐受性ISOLATION AND IDENTIFICATION OF YEAST LIKE FUNGI AND ANALYSIS OF THEIR DRUG RESISTANCEZHAO QI, WANG XUE BO, LI JIN HAI, et al(The Affiliated Yantai Yuhuangding Hospital of Qingdao University Medical Co lle ge, Yantai 264000, China);［ABSTRACT］Objective To investigate the species of pathogenic yeast like fungi and their drug resistance in order to guide rational clincal administration. M ethods Samples including blood, urine, feces, sputum, pleural effusion,ascites, woun d secretion and puncture fluid sent for fungus detection in this hospital, from Jan. 2005 to Dec. 2007, were cultured by routine methods, and identified with France Bi omerieux TB express system. A drug sensitivity test was done by ATB fungus st rip. Results A total of 484 strains were isolated, in which, candida albicans (42. 4%), C.tropicalis (27.9%), C.glabrata (10.5%), C.sake (7.0%), C.parapsilosis (2.3%), C.krudei (2.7%), C. intermedia (4.1%) and others (3.1%) were noted. All these wer e sensitive to amphotericin B, and expressed resistance to 5fluorocytosine, flucon azole and itraconazole in different extent. ConclusionYeast like fungi are requiredto be sent for classification and drug resistance study so as to rationally use anti fungal agent to reduce the development of drug resistant strains.［KEY WORDS］Fungi; Microbial sensitivity test; Drug tolerance随着高效广谱抗生素、免疫抑制剂的大量使用及器官移植和外科介入性治疗手段的广泛开展，由酵母样真菌引起的感染日益增多。

酵母样真菌体外抗菌活性检测报告

酵母样真菌体外抗菌活性检测报告摘要】本文旨在了解临床常见真菌对常用抗真菌药物的敏感性，为临床使用抗真菌药提供依据；对试剂盒的质量与适用性进行评价。

【关键词】酵母样真菌药物敏感性试验随着抗生素和细胞毒药物的广泛使用，导致真菌尤其是酵母菌的感染日益增多，在免疫功能缺损者和AIDS患者中，真菌感染是最常见的并发症之一。

本文以法国生物梅里埃公司生产的ATB Fungus体外抗酵母菌药物敏感性试剂盒对临床分离的深部真菌予以试验研究，结果如下：1 材料和方法1.1实验菌株为近年来从临床送检的痰咽拭子（45株）、生殖道分泌物（31株）、血（2株）等样本中分离的菌株，其中白色念珠菌55株，热带念珠菌15株，光滑球拟酵母10株，克柔氏念珠菌2株，近平滑念珠菌1株，高里氏念珠菌5株，未定型3株。

1.2 ATB Fungus试剂盒成分该试剂盒具有32个孔的塑料条，含6种抗真菌剂，即5—氟胞嘧啶（5—FC）、两性霉素B（AmB）、制霉菌素（NYS）、咪康唑（MIZ）、益康唑（ECO）和酮康唑（KET）。

药物共占22孔，塑料条的前、中、后共有10孔为不含药的生长对照孔。

1.3标准参照株白色念珠菌ATCC90028为中科院皮肤病研究所馈赠。

1.4培养基 ATB Fungus试剂盒带有ATBF半液体培养基，实际上就是酵母氮源基础加天冬酰胺和葡萄糖培养基。

1.5缓冲液称取含3个结晶水的磷酸氢二钾157.5g，加水至100ml溶解pH9.8～10.0的缓冲液。

1.6方法按ATB Fungus操作指南进行菌液制备及接种。

将纯菌落混悬于无菌蒸馏水中使其浓度为麦氏比浊管第２管，取100ul加入ATB培养基中混匀,再以微量加样器，取此菌液于5—FC的10孔及其前后各4个生长对照孔中,每孔135ul。

取无菌缓冲液50ul加入剩余的含菌培养基中混匀。

然后接种于余下各孔中，每孔亦为135ul。

盖上塑料盖，置30℃孵育24～48小时后，以生长对照各孔生长良好而含药最高稀释孔不生长者为最小抑菌浓度的终点。

酵母菌的鉴定实验方法

酵母菌的鉴定实验方法酵母菌啊，这小小的微生物，在我们的生活里可藏得挺深。

要把它们找出来，还得好好做个鉴定实验呢。

咱先说从哪能找到酵母菌。

酵母菌这小家伙啊，喜欢在有糖分的地方晃悠。

像那放久了有点发馊的水果表面，或者是正在发酵的面团里，都可能有它们的身影。

要是想做鉴定实验，就得先从这些地方取点样本。

比如说那有点烂的苹果，用个干净的小牙签，轻轻在烂的地方刮一刮，就把可能存在的酵母菌给取到了。

取到样本之后呢，咱得把酵母菌给培养出来。

这就像种菜得有块地一样。

咱得准备好培养基。

培养基就像是酵母菌的食物和房子，得包含它们生长需要的营养物质。

一般会用到麦芽汁琼脂培养基。

把取来的样本放到培养基上，就像把种子种到地里。

然后把培养基放到合适的温度下，酵母菌最喜欢的温度大概是28℃到30℃左右，就像人待在舒适的温度里一样，这个温度下它们能快快生长。

过了一段时间，培养基上就会出现一些小菌落。

这时候就可以开始观察酵母菌的模样了。

酵母菌的菌落和其他微生物的菌落可不一样。

酵母菌的菌落通常是乳白色的，表面光滑湿润，看起来有点像奶油。

这就好比在一群人中，酵母菌穿着独特的白色衣服，让你能一眼就把它们认出来个大概。

再进一步看单个的酵母菌细胞。

得用显微镜这个神奇的工具。

把带有酵母菌的培养基制成玻片标本，放到显微镜下。

酵母菌细胞是椭圆形的，就像一颗颗小椭圆豆子。

而且在细胞里面还能看到一些特殊的结构，比如液泡。

这就好比在小椭圆豆子里面还有个小水袋一样。

还有个很有趣的鉴定方法是看酵母菌的发酵能力。

咱可以把疑似有酵母菌的样本放到一个装有糖水的小瓶子里，然后在瓶口套上一个小气球。

如果这里面真的有酵母菌，它们就会把糖分解，产生二氧化碳气体。

这二氧化碳气体就会把小气球吹起来。

这就像是酵母菌在小瓶子里开了个小派对，不断产生气体让气球膨胀起来。

另外，酵母菌对某些染料的反应也能帮助我们鉴定。

像用美蓝染色法。

正常的活酵母菌细胞被染上美蓝之后，是浅蓝色的，而那些老的或者死了的酵母菌细胞就会被染成深蓝色。

尿沉渣染色镜检联合显色培养法快速鉴定尿路感染酵母样真菌的应用价值的探讨

.48.World Notes on Antibiotics,2021,Vol.42,No1尿沉渣染色镜检联合显色培养法快速鉴定尿路感染酵母样真菌的应用价值的探讨杜金龙，罗万鹏，杜海燕，唐春燕，刘淑梅，张岩,谭延国*(首都医科大学附属复兴医院检验科，北京100038)摘要：目的探讨尿沉渣染色镜检联合显色培养法对尿液标本中酵母样真菌的快速诊断价值。

方法取尿培养标本共376例，以常规尿培养法的结果为金标准，评估尿沉渣染色镜检法联合显色培养法对真菌(以下简称联合法)的检出效果。

结果(1)常规尿培养中酵母样真菌阳性率为9.0%(34/376)；联合法酵母样真菌的阳性率为6.9%(26/376)。

(2)经配对卡方检验，联合法与常规尿培养法在检出酵母样真菌方面的差异有统计学意义，在鉴定酵母样真菌上一致性较高(Kappa=0.830,P<0.05)；在常规尿培养法检出的34例酵母样真菌标本中，镜检联合显色培养法检出26例，符合率为76.4%(26/34),联合法比常规培养法至少提前一天鉴定出酵母样真菌。

结论尿沉渣染色镜检联合显色培养法与常规尿培养法对酵母样真菌的检出符合率较高，且能显著缩短检测时限，可作为常规尿培养法的补充实验。

关键词：尿沉渣；革兰染色；酵母样真菌显色培养基；酵母样真菌中图分类号：R978.1文献标志码：A文章编号：1001-8751(2021)01-0048-03Performance Evaluation of Microscopy of Stained Urinary Sediment in Combination with a Chromogenic Culture Cethod for the Detection of Yeast-likeFungi in Urine SpecimensDu Jin-long,Luo Wan-peng,Du Hai-yan,Tang Chun-yan,Liu Shu-mei,Zhang Yan,Tan^n-guo(Beijing Fuxing Hospital,Capital Medical University,BeiJing100038)Abstract:Objective To evaluate the perfonnance of microscopy of stained urinary sediment in combination with a chromogenic culture method(combined method)for the detection of yeast-like fungi in urine specimens. Methods Routine culture test was used as golden standard,for the performance evaluation of the combined method. Results(l)Yeast-like fungi were observed in34,among the376specimens,by routine culture method(34/376,9%); whereas26specimen were observed fungus-positive by combined mthod(26/376,6.9%).(2)As for the performance, significant difference was observed between the combined method and the routine culture method(p=0.000),but the two methods were consistent with each other at a high degree(Kappa=0.83,P<0.05);of all the34yeast-like fungus positive specimen by routine culture method,26were observe positive by combined method(76.4%,26/34),which could give a fungal species information1or2days earlier than the routine culture method.Conclusion Due to its higher consistency,obviously shorted test period and availability,relative to routine culture method,the combined method can be a complementary way for the earlier detection of yeast-like fungi.Keywords:urinary sediment;gram stain;CHROMagar Candida;yeast fungi尿路感染是泌尿系统的常见疾病之一，我国尿素、免疫抑制剂、糖皮质激素等药物的广泛使用，路感染占医院感染的20%~32%［心。

酵母样真菌应用两种培养基分离鉴定的比较分析

酵母样真菌应用两种培养基分离鉴定的比较分析发表时间：2015-11-06T13:55:00.050Z 来源：《中国医学人文》2015年第9期供稿作者：山长地[导读] 嘉祥县人民医院医院感染管理科由真菌引起的条件致病菌感染近年来日益增多[1]，其中以酵母样真菌引起的深部真菌感染最为常见。

山长地（嘉祥县人民医院医院感染管理科，山东272400）【摘要】目的：探讨应用两种培养基分离鉴定酵母样真菌的不同鉴定效果比较。

方法：近年来本研究收集我院患者640份临床送检标本，分别划线接种于沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基上，分离鉴定酵母样真菌效果。

结果：沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基对白色念珠菌和热带念珠菌分离鉴定效果差异有显著性（P< 0.05），而沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基对其它酵母样真菌生长阳性率鉴定差异无显著性（P<0.05）。

结论：沙保弱培养基和CHROMagar显色培养基都有较好的分离酵母样真菌的鉴别效果，显色培养基在分离鉴定酵母样菌中操作简便、抑杂菌强，又优于沙保弱培养基。

【关键词】沙保弱培养基；显色培养基；酵母样真菌；分离鉴定由真菌引起的条件致病菌感染近年来日益增多[1]，其中以酵母样真菌引起的深部真菌感染最为常见，常常导致患者的终期感染，这给临床治疗带来了困难。

由于抗真菌药物品种有限，研究真菌的耐药性并控制其耐药性发生，显得尤为重要。

为了提高其诊断率和治愈率，临床急需新技术代替传统的常规鉴定方法[2]。

科玛嘉念珠菌显色培养基是一种新的分离和鉴定的培养基（法国生产），本研究采用此培养基与传统的沙保弱培养基对酵母样菌的分离鉴定进行比较，取得了预期的临床效果，现将有关结果分析报告如下：1 资料与方法1.1 一般实验资料2010年1月——2014年12月期间，我们收集在我院住院及门诊患者临床送检的尿液、痰液、粪便、咽拭子、分泌物等标本共640例。

CHROMagar显色培养基我们购自山东济南博赛生物研究所，沙保弱培养基我们按照《全国临床检验操作规程》中的规定进行自配。

酵母样真菌鉴定及应用

酵母样真菌鉴定及应用发表时间：2010-12-08T15:24:38.397Z 来源：《中外健康文摘》2010年第32期供稿作者：赵立春[导读] 近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂广泛应用和机会致病菌的医院感染包括临床深部真菌感染增多赵立春（黑龙江省哈尔滨市香坊区结核病防治所化验室150036）【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）32-0440-01近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂广泛应用和机会致病菌的医院感染包括临床深部真菌感染增多，特别是肺结核病人或肺部疾病患者，因药物治疗时间长，在杀死致病菌的同时，也杀死正常菌群，造成人体内微生态障碍，菌群失调，在肺结核等肺部疾患基础上继发支气管肺部酵母样菌感染，所以从肺部疾患病人中分离酵母样真菌，快速鉴定并及时治疗非常有意义。

我国现在快速、准确鉴定酵母样真菌的方法很少，近年国外开发的手工和自动化微量鉴定系统已大大简化了传统鉴定程序，但难已在中小医疗机构推广应用，我们研制的微量鉴定系统，通过与传统鉴定方法及生物梅里埃Api20c鉴定系统对比性评价，并经数家医疗单位临床应用，证明本系统具有可靠、快速、简便和价廉等优点，可推广为临床常规方法，报道如下：1 材料与方法1.1 菌株来源：主要来自香坊区结核病防治所，治疗一个月以上肺结核、脑膜炎、慢性支气管炎等患者，从痰中分离出2-3次同一种菌株。

标准菌株为中国科学院微生物研究所“真菌国家开放专业实验室质控菌株。

1.2 试剂：葡萄糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、蔗糖、木糖、密二糖、纤维二糖、肌醇、棉子糖、海藻糖、卫矛醇、草糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖醇、赤藓醇、山梨醇、尿素、KNO3、KH2P4、NaHPO4和MgSo4、7H2O系分析纯。

优质琼脂粉、玉米粉、酵母浸膏和吐温80。

1.3 90mm培养皿或U形塑料凹孔盒、新华Ⅲ号滤纸、打孔器等。

1.4 生物梅里埃公司生产的API——20C鉴定卡。

酵母菌检测

酵母菌检测原理及适用范围霉菌和酵母菌普遍存在于空气、水和土壤中，绝大部份对人体无害，但有些霉菌对人体有害，比如说黄曲霉，它分泌的黄曲霉毒素是一种强致癌物。

霉菌还可引发食物霉变，会刺激人体消化道、胃部等，严峻的还可损伤肝脏，造成食物中毒。

与传统方式相较，省去了配制培育基、消毒和培育器皿的清洗处置等大量辅助性工作，随时能够开始进行抽样检测，而且操作简便，通过酶显色剂的放大作用，使菌落提早清楚地显现出来，培育时刻由一周缩短为48h。

试剂预备：（BM207）操作方式：样品处置：取样品 10（g）放入含有110 mL无菌水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL无菌水的试管内，反复吸吹50次成为1:100的稀释液。

接种：一样选用10 、100两个稀释度进行检测，将霉菌酵母菌测试片（BM207）置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5min使培育基凝固，最后用手轻轻地压一下。

每一个稀释度接种两片。

培育：将测试片叠在一路放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培育箱内，堆叠片数不超过12片。

培育温度为29℃±1℃，培育48～72h。

结果判读：霉菌和酵母菌在测试片上生长后会显示蓝色斑点，霉菌菌落显示的斑点略大呈放射状，酵母菌落那么较小而圆滑，许多霉菌在培育后期会呈现其本身特有的颜色。

选择菌落数适中（10～100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每毫升（克）样品中霉菌和酵母菌的数量。

具体计数原那么和报告方式请参照菌落总数测试片利用说明。

附加说明：由于霉菌常以孢子的形式于空气中处处传播，而多种样品是要求霉菌酵母菌不得检出，因此检测霉菌时需专门警惕操作，取样用品、稀释用水和吸管吸头等都需认真消毒，接种时尽可能幸免空气流动，动作要干净利落，每次最好用无菌水接一片空白对照，以避免显现假阳性结果。