高致病禽流感H5抗体检测存在的问题及对策
论文h5型高致病性禽流感免疫抗体检测及分析(论文)
本科生毕业设计（论文）题目h5型高致病性禽流感免疫抗体检测及分析学院动物医学院专业动物医学班级动医（061）班姓名如则·塔伊尔学号063631127指导教师加尔肯职称讲师2011年4月28日新疆农业大学教务处制目录摘要 (1)关键词 (1)前言 (1)1 材料和法 (2)1.1毒株 (2)1.2 疫苗 (2)1.3 试验动物 (2)1.4疫苗在1日龄无母源抗体商品鸡的免疫效力 (2)1.5疫苗在1日龄含母源抗体商品鸡的免疫效力 (2)1.6 血清学检测 (2)1.7保护率计算 (2)1.8统计分析 (2)2试验结果 (3)2.1 rFPV-HA和灭活疫苗诱导的HI抗体应答 (3)2.2 rFPV-HA与灭活疫苗的免疫效力 (4)3讨论 (5)3. 1 rFPV-HA与灭活疫苗诱导HI抗体应答能力 (5)3.2 rFPV-HA与油乳剂灭活疫苗免疫效力比较 (5)3.3 rFPV-HA与油乳剂灭活疫苗应用前景分析 (5)谢辞 (7)参考文献 (8)H5型高致病性禽流感免疫抗体检测及分析如则·塔依尔摘要：利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)的重组鸡痘病毒(rFPV-HA和全病毒灭活疫苗免疫商品鸡,比较两种疫苗的保护效力。
结果发现,利103PFU和106PFU的rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡和含母源抗体商品鸡,HI抗体应答水平均低于灭活疫苗免疫组.利用H5亚型禽流感病毒经肌肉注射攻毒后,rFPV-HA免疫的无母源抗体商品鸡获得了完全保护(100%),高于灭活疫苗保护率(94.7%);但rFPV-HA免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率(11.4%～15.8%)低于灭活疫苗免疫组的保护水平(68.45)。
结果表明,rFPV-HA诱导HI抗体的能力低于灭活疫苗;但rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡的保护率完全达到灭活疫苗保护水平,显示出了良好的应用前景;灭活疫苗和rFPV-HA均受到母源抗体的干扰,不适于在母源抗体处于高峰期时使用。
近三年东海县H5高致病性禽流感免疫抗体监测及分析
养禽业 最重要 的疫病之 一ｌ ＿ １ ］ ， 给养禽业 带来 了巨大 的损失 。 在 我 国采 取 以疫 苗 免 疫 为 主 的 综 合 性 防 治 措 施 来 防 控 该 病 。 每 年 东 海 县 不 定 期 对 已免 疫 家 禽 Ｈ５高 致 病 性 禽 流 感 免 疫
抗体进行检测 ， 掌握 抗 体 水 平 ， 同时 适 时 指 导 防 疫 ， 这 样 对 防 控 高 致 病 性 禽 流 感 的 发 生 和 流 行 具 有 十 分 重 要 的 作 用 。现
以完 全抑 制 ４ Ｕ 抗 原 的 最 高 血 清 稀 释 倍 数 为 该 血 清 的
血凝 抑 制 效 价 。当 阳性 对 照 血 清 的试 验 结 果 符 合 血 凝 抑 制 试 验 的要 求 ， 阴 性 血 清 效 价 不 高 于 １： ４时 候 ， 试验 才成立 。 被 检 样 品 血凝 抑 制 效 价 小 于 等 于 １： ４的 为 阴 性 ， 大 于 等 于
・
２ ・
现 代 畜 牧 科 技 ２ ０ １ ６年第 １ １期 总 第 ２ ３期
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ９ ３ ６ ９ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ２ ０ ９ ５— ９ ７ ３ ７ ． ２ ０ １ ６ ． １ １ ． ０ ０ ２
近 三年东海县 Ｈ５ 高致病性禽流感免疫抗体监测及分析
胡传 利 ， 闫颖 颖
（ 江 苏 省 连 云 港 市 东海 县 畜 牧兽 医 站 ， 江苏 连云港 ２ ２ ２ ３ ０ ０ ）
摘要 ： 为 了 全 面 了 解 和 掌握 东 海县 近 几年 禽 流 感 的 免 疫 效 果 ， 科 学评 价 基 层 免 疫 工作 质 量 ， 作 为 实 验 室检 测 人 员 的 笔 者 汇 总 了从 ２ ０ １ ３ ～２ ０ １ ５年 ３年 的试 验 结 果 ， 共 采集血样 ５ ８ ８ ８份 ， 合格数 量是 ５ １ ４ ７ ， 合格 率是 ８ ７ ． ４ １ ， 合 格 率 高
高致病性禽流感免疫抗体低下的原因及对策
福建畜牧兽医第43卷第6期2021年高致病性禽流感免疫抗体低下的原因及对策吴晓红福建省邵武市水北镇畜牧兽医站福建邵武354000摘要文中针对散养户的禽高致病性禽流感抗体水平不高的原因进行查找和分析袁提出并采取相应措施袁抗体水平提高遥关键词禽散养户高致病性禽流感抗体原因措施文献标识码院B文章编号院1003-4331渊2021冤06-0035-02高致病性禽流感渊A vi anI nf l uenza袁A I冤是一种由A型流感病毒引起家禽或野禽感染的败血性传染病袁该病具有传播速度快尧致死率高的特点[1]遥因其会对人尧动物构成特别严重的危害袁可能造成重大经济损失和社会影响袁我国根据叶中华人民共和国动物防疫法曳已将高致病性禽流感列为一类动物疫病袁为强制免疫病种遥农业部要求高致病性禽流感的免疫密度和免疫抗体水平分别达到90%和70%以上袁福建省要求禽群体免疫密度为90%以上袁春防尧秋防期间免疫抗体水平为80%以上遥邵武市虽然没有发生高致病性禽流感疫情袁但2012-2014年春防尧秋防集中送检邵武市动物疫病预防控制中心的散户禽血样共60份渊春防尧秋防各10份冤尧规模场禽血样共120份渊春防尧秋防各20份冤袁通过禽流感病毒血凝抑制试验进行检测袁散养户禽的免疫抗体水平在62%左右袁规模场的免疫抗体水平都在95%以上袁说明散户的高致病性禽流感免疫抗体效价远远不如规模养殖场遥如何提高散养户的高致病性禽流感免疫效果袁2014年秋防后袁笔者通过走访调研尧查找原因并分析袁积极采取措施袁2015年春防尧秋防期间水北镇散户的禽流感抗体水平提高到80%以上遥1免疫抗体合格率低的原因与分析1.1免疫程序不科学的影响从样品检测看袁春防的免疫抗体水平明显低于秋防袁原因在于村民受野重治不重防冶的观念影响遥水北镇根据市农业农村局统一部署安排袁春防于3月初开始尧4月15日结束袁秋防于9月初开始尧10月15日结束遥第一袁由于是年后袁一部分农户家刚养殖的禽类体重偏小袁农户的免疫意愿不强曰第二袁由于春季气温一般在15益左右袁一部分鸡处于产蛋期袁只能暂缓免疫曰第三袁农村散户禽养殖周期均达1年左右袁且到冬春季节禽类发病率较其它季节高袁普遍认为只要秋防免疫1次即可遥1.2动物机体状态和应激的影响农村散养禽类因管理水平的差异而导致动物个体差异袁瘦小尧体弱的免疫功能较低袁村级动物防疫员在按照村组进行免疫时袁对动物进行驱赶尧强按等袁会对动物造成惊吓袁应激大袁应激反应也会降低免疫应答的能力遥1.3疫苗保管环节造成的影响水北镇从市疫控中心免费领取疫苗袁发放到村级遥由于村级动物防疫员没有相应的贮藏设备如专用冰箱等渊灭活苗要求在2~8益保存冤袁领取疫苗后由于受阳光照射尧环境温度以及下村免疫时长的影响而使疫苗质量下降袁容易出现免疫抗体水平下降遥1.4免疫操作不规范造成的影响2010年袁水北镇刚组建动物防疫专业队袁集中免疫时袁防疫专业队分为两个小组入村防疫遥入户免疫都是在晚上袁防疫员为了赶时间完成任务袁使用连续注射器袁因操作太快而漏苗袁导致注射剂量容易出现误差袁造成抗原接种量不足袁产生的抗体水平也就不足遥1.5没有及时补针的影响当时没有定月免疫日袁散户对于到了免疫时间及新补栏的动物没有及时通知防疫员进行免疫袁造成漏免也是一个重要原因遥2改进措施2.1加大宣传力度袁明确免疫主体通过微信尧短信尧LED及到墟场发放宣传单等方式宣传叶中华人民共和国动物防疫法曳尧叶食品安全法曳及动物疫病防控知识等提高农户对动物疫病的正确认识袁积极主动配合动物免疫工作遥2.2创新免疫形式袁提高免疫技能每年春防前开展一次培训指导及实地操作演练袁帮助村级动物防疫员了解强制免疫政策尧掌握基本免疫技能尧提升免疫技术水平袁在免疫前了解预定接种动物的健康状况袁对于由于体弱尧产蛋及健康状况不良的不接种及暂缓接种袁并进行造册登记袁以便日后补针遥在免疫操作注射时轻按轻放袁以免引起应激反应遥2.3严格操作程序袁确保免疫剂量严格按照说明书并对照养殖的畜禽日龄进行剂量选择袁不能随意加大或减少疫苗使用剂量袁剂量增幅过大容易引起应激反应袁剂量过小又达不到免疫抗体要求遥2.4完善运输环节袁确保疫苗质量发现问题后袁35. All Rights Reserved.福建畜牧兽医第43卷第6期2021年2015年水北镇畜牧兽医站抓好强制免疫疫苗供应全链条管理袁强化疫苗供应各环节有效衔接袁加大疫苗储运冷链保障力度袁给村级动物防疫员加配保温箱并加强疫苗监管袁确保疫苗质量安全遥实现疫苗从市尧镇尧村三级全程冷链储运尧冷链无缝对接袁保证疫苗质量袁确保疫苗满足强制免疫工作需要遥2.5加强监测袁及时补免2015年起袁水北镇畜牧兽医站把每月16日定为月免疫日袁并告知村民袁对于达到免疫条件的动物及时免疫袁做到应免尽免遥3取得成效通过查找原因尧采取相应措施解决问题袁水北镇的高致病性禽流感抗体明显提高袁由原来的62%左右提高到80%以上袁明显高于往年遥2015年至今袁水北镇在春防尧秋防期间根据动物疫病监测要求采集禽血样送检袁散户禽免疫抗体合格率均达到80%以上袁均符合农业农村部重大动物疫病强制免疫要求袁免疫抗体效价明显提高遥水北镇自2015年以来从未出现动物因免疫接种而应激死亡的报告袁说明采取的措施有效遥参考文献院[1]马贵达,韩荞忆,仇国明,等.河北省2017-2019年禽流感免疫抗体及病原学监测分析[J].北方牧业,2020(16):23-24.新形势下城厢区规范动物产地检疫流程的方法郑瑾莆田市城厢区动物卫生监督所福建莆田351100摘要在新形势和对非洲猪瘟疫情严格管控等影响下袁就基层如何应用野农业云131冶电子出证系统开展动物产地检疫工作进行分析袁并在遵守叶中华人民共和国动物防疫法曳叶动物检疫管理办法曳叶生猪产地检疫规程曳叶家禽产地检疫规程曳等法律法规的基础上袁制定出符合莆田市城厢区实际情况的动物产地检疫规范流程袁以供同行参考遥关键词动物产地检疫流程规范申报文献标识码院B文章编号院1003-4331渊2021冤06-0036-02动物产地检疫是把控动物食品质量安全的第一道关袁这道关是否严格尧流程是否规范尧可操作性是否比较强至关重要遥要严格禁止不合格的动物流入市场袁就得结合当地的实际情况制定可操作性比较强的动物检疫流程遥这不同于动物检疫规程袁动物检疫规程由国家农业农村部制定袁具有法律效力袁必须执行曰而动物检疫流程则是在遵守动物检疫规程基础上就操作的可行性尧方便性尧重复性进行一些规定袁使得一整套流程具有可学习性尧可复制性袁降低人为因素的影响袁但是目前因为各地畜牧业和畜牧监管部门情况不一样袁很难做到全国统一尧规范的流程遥以下结合笔者基层工作经历袁就莆田市城厢区如何规范动物产地检疫流程进行阐述遥1莆田市城厢区动物产地检疫概况莆田市城厢区是福建省南部沿海县区袁适合发展规模养殖的乡镇较少袁主要的养殖区域集中在所辖的两个镇袁目前进行规模养殖的动物种类主要有猪尧鸡尧鸭三类遥因两个镇地形多山地和丘陵袁山路蜿蜒崎岖袁且两个镇紧挨着袁所以袁采取设立一个动物检疫申报点进行动物产地检疫袁申报点位于动物交易市场袁两个镇所有的畜禽均在该申报点进行产地检疫遥2养殖动态的日常监管因为对非洲猪瘟疫情进行严格管控袁导致各地猪价疯涨袁一些养殖户和猪贩铤而走险袁违规调运生猪遥所以袁为了更好地了解各生猪规模场的养殖动态袁确保检疫工作顺利进行袁区动物卫生监督所通知要求各养殖户于每月1日上报总存栏数量尧母猪存栏数量尧大猪渊指当月可达出栏重冤存栏数量袁以便更好地与当月的检疫数量进行比较遥若当月检疫数量低于大猪存栏数量为正常渊因为猪价上涨袁很多养殖户倾向于将生猪养至较重时或等待价格更好时再出卖冤曰若当月的检疫数量高于生猪存栏数量则非正常袁会将情况上报至主管部门袁查找是否存在违规调运的可能性遥定期电话访问尧通知各畜禽养殖户将近期的养殖档案送至申报点进行查看袁时时了解各养殖场的生产尧免疫尧监测尧诊疗尧消毒尧无害化处理等情况袁免疫档案进行复印留底遥每月将养殖动态情况报送至主管部门袁并询问了解备案的养殖规模场名单是否有发生变化袁若有变化袁务必请及时告知工作人员遥由于基层工作人员长期在乡镇申报点开展工作袁无法第一时间接触到新出台的政策尧法规及文件等袁所以袁更需要积极主36. All Rights Reserved.。
高致病禽流感H5抗体检测存在的问题及对策
重， 表现为出现全身性 、 败血性症状 ， 该病传播速度快 ， 严
重时死亡率高达 １ ０ ０ ％， 而且可以直接传染人类 ， 致人死
亡， 给生 产造 成极 大 损失 和严 重 危害 公共 安 全 。 目 前， 最
第 １ 孔， 充分混匀后吸 ２ ５ １ ｘ Ｌ 于第 ２ 孑 Ｌ 依 次倍 比稀释至第 １ Ｏ 孔， 从第 ｌ ｏ ｌ ｌ 吸取 ２ ５ ￣ ｔ Ｌ 弃去 ； ｌ ～ １ １ 孔均加入含 ４ Ｈ Ａ Ｕ
ｌ 实 验安 排
养 殖 条 件 和养 殖 量 基 本 相 同 ， 试 验 场 地设 在广 德 县 张某 、 杨某 ２ 个 肉鸡 养 殖 场 ， 由 同一 防疫 队分 别 进行 高 致
的抽 样检 测 ， 按 照 相关 标 准 ， 抗 体检 测 结果 合格 率 在 ７ ０ ％ 以上 视 为免疫 合 格 ， 可 知 杨某 养殖 场 免疫 失 败 ， 张某 的免
禽流感是 由于Ａ型流感病毒而导致家禽及野禽出现
病症 的一种传染病 ， 而高致病性禽流感则是由于Ａ型禽
流行性 感 冒病毒 而 引 起 的一种 传 染病 “ 。禽 类 在感 染 了 禽 流感 病毒 后 的症状 主要 表现 为 以下 ２ 种： 一 是 呼吸道 及 消化道症状不太严重 ， 死亡 率 也较 低 ； 另 一 种 则 极 为 严
表 １ 不同时间点对２组抗体的检测结果
２ 试 验方 法 抗体检测方法 采用血凝和血凝抑制实验 ， 具体步骤
如下 ： （ １ ） Ｎ定抗原效价 ： 在９ ６ 孑 Ｌ Ｖ 形 微 量反 应 板 的 ｌ ～ １ ２ 孔 均加 入 ２ ５ １ ｚ Ｌ 生理盐水 ； 吸取 ２ ５ １ ￣ Ｌ 标 准 抗 原 或 病毒 液
病禽流感抗体检测过程 中存在的问题进行探讨和分析， 提 出了有利 于改善抗体检测的措施 ， 为有效防控 高致 病禽流感提供参考。
高致病性禽流感免疫存在问题及建议
高致病性禽流感免疫存在问题及建议研究和实践表明，对饲养家禽进行禽流感疫苗的免疫，是一项切实有效防控高致病性禽流感的措施。
为做好禽流感防控，2004年起，深圳市开始实施埘家禽免费强制免疫的政策。
在这项政策支持下，龙岗一直坚持对辖区内的饲养家禽实行禽流感H5疫苗强制免疫，并对疫苗的免疫效果进行持续监测。
同时，为防止疫源从外地传人，亦持续对辖区内的三鸟批发市场的家禽进行免疫抽样检测。
这一政策为龙岗区高致病性禽流感防控打下了坚实基础，但在免疫监测中，我们也发现存在一些问题，现小结出来，以期引起大家注意。
1有些规模鸡场负责人防疫意识虽强，但不重视免疫效果监测部分规模鸡场在鸡群注射禽流感疫苗后怕麻烦不进行免疫监测的做法令人忧虑。
实际上注射了疫苗并不代表一定可以获得好的免疫效果，因为免疫效果好坏不仅与疫苗质量有关，还与鸡场环境条件、饲养管理水平及禽群免疫接种时的健康状况等多种因素有关。
因此免疫监测是必须的，不进行免疫监测可能导致防疫漏洞的出现。
建议：在规模场申领H5疫苗时，必须要求其对每一批次鸡群，在首免21d 后，二免14d后，分别抽血送区动防所检测。
这样既可使我们了解到该批次鸡群H5免疫效果情况，又可通过对同一鸡场多批次鸡群的检测，获知该场存栏鸡群H5总体免疫状况及免疫程序合理与否。
同时，通过一个时期多个鸡场H5免疫效果的监测，可了解该时期所使用的H5疫苗质量是否符合要求。
2 散养户防疫意识不强，主动性差2.1 有些散养户防疫意淡薄，缺乏主动性，进苗时未能主动到所在街道动防所申报进苗数量，并领取疫苗注射禽只。
2.2 有些散养户管理水平较差，而禽只又未能适时作第二次加强免疫，达不到预期的免疫效果。
建议：(1)加大对散养户禽流感防控宣传教育，使其意识到禽流感防控不只是政府的责任，也是自己的责任，除与其签订责任书外，还应督促其主动配合做好防控工作。
(2)加强监督巡查和免疫监测，我区散养户大多散布在偏僻的地方，如山边、林边、果园等处。
H5亚型禽流感免疫抗体检测及分析
参考文献: [1] 王士荣,陈静,马慧玲,等.山东省 2016 年 H5 亚型禽流感抗体监测与分
禽流感是禽类的一种烈性传染病袁 世界卫生组织将其列为 A 类动物疫病袁 我国将其列为一类动物疫病 [1]遥 禽流感病毒属 于正黏病毒科流感病毒属袁 根据致病性的高低分为高致病性尧 低致病性和无致病性袁 高致病性禽流感多为 H5 和 H7 亚型流感 病毒引起 [2]遥 疫苗免疫是预防和控制禽流感的有效途径之一袁 为防治高致病性禽流感的发生和流行袁 国家实行强制免疫的防 控策略遥 为了准确掌握蒙阴县 H5 亚型禽流感强制免疫效果袁 抽取全县部分禽场和散养户进行抗体水平检测遥 1 材料与方法 1.1 样品来源
规模养殖场的免疫抗体合格率明显高于散养户袁 因为规模 养殖场管理制度规范袁 有专业的免疫队伍尧 文化水平相对较 高尧 操作比较熟练尧 免疫群体集中袁 一定程度上提高了免疫水 平遥 而散养户家禽以散养为主袁 且每年春秋两季防疫时间与农 民春收秋收时间相冲突袁 农村防疫员年龄偏大尧 文化水平参差 不齐遥 有些农村散养户对强制免疫工作有抵制情绪遥 以上因素 导致散养户免疫密度低袁 从而影响免疫抗体监测合格率遥 3.3 建设专业化农村防疫员队伍
交流
H5 亚型禽流感免疫抗体检测及分析
樊信明 1,2 刘杏 1,2
渊1袁 山东省蒙阴县畜牧兽医局 276200曰 2袁 山东省蒙阴县畜牧发展促进中心 276200冤
摘要院 为了准确尧 科学的掌握蒙阴县 H5 亚型禽流感强制免疫效果袁 了解家禽免疫水平袁 及时发现强制免疫工作中存在的问 题袁 根据免疫抗体检测水平进行科学评估防疫工作遥 将 2017耀2018 年家禽 H5 亚型禽流感强制免疫抗体监测结果进行分析遥 关键词院 H5 亚型禽流感曰 强制免疫抗体曰 分析
规模鸡场高致病性禽流感疫苗免疫抗体监测和分析
健康养殖·防控452020.01 畜牧业环境摘 要：针对我国对高致病性禽流感的防控现状，开展对高致病性禽流感疫苗抗体水平的分析十分必要。
根据文献资料和现实调查，针对养鸡场高致病性禽流感疫苗免疫后一次性进行的免疫效果评估很多，但对疫苗免疫后不同时间抗体水平跟踪监测的较少。
为此，开展了跟踪检测几个鸡场高致病性禽流感疫苗免疫后不同时间的抗体水平研究。
对洛阳市4个规模化鸡场共进行了33次共990羽（份）的血清抗体检测，总合格率为99.0%。
A场、B场、C场免疫程序有缺陷，存在较长的免疫保护空白期，D场免疫程序较合理，免疫保护空白期最短。
成年鸡用H5亚型H7N9流感重组三价灭活疫苗免疫，免疫保护期可达到4个月以上。
所选两个疫苗厂疫苗的免疫效果无明显差异。
强化免疫抗体水平较上次免疫抗体水平上升快而且维持时间较长。
关键词：高致病性禽流感；疫苗；抗体；监测；分析目前，我国使用的高致病性禽流感疫苗主要是H5亚型重组H7N9流感病毒灭活疫苗。
开展对疫苗免疫抗体的监测十分必要；本研究的目的在于通过跟踪监测几个鸡场高致病性禽流感疫苗免疫后抗体消长情况，为规模化鸡场高致病性禽流感疫苗选择提供数据评估参考；指导规模化鸡场对高致病性禽流感疫苗免疫程序的优化。
1 材料与方法1.1 材料和仪器1.1.1 疫苗疫苗分别选用青岛易邦H5亚型H7N9流感三价（Re-6 Re-7 Re-8）灭活苗（疫苗批号：160740201）和乾元浩H5亚型H7N9流感三价（Re-6 Re-7 Re-8）灭活苗（疫苗批号：2016021）。
1.1.2 试剂H7N9流感病毒H5（Re-6）亚型血凝抑制试验抗原和阴阳性血清，购自哈尔滨维科生物技术开发公司，批号：2015047，冻干的抗原和血清均按瓶签上规格标注的量，用PH值7.2 0.01mol/L PBS配置、阿氏（Alsevers）液的配置以及1%鸡血红细胞悬液的配置，按参考文献[1]操作。
浅谈高致病性禽流感免疫抗体检测注意事项
中图分类号 ：￥ ８ ５ ２ ． ４
文献标识码 ：Ｂ
我国重大动物疫病高致病性禽流感在部分区域呈流 行态势，存在免疫带毒和免疫临床发病现象 。新疆
地 区 自２ ０ ０ ２ 年 以来 ，共 有 ８ 个 地 区和 自治 州 的 ｌ ７ 个
种类 、是否进 行二免等 。家禽血液的采集主是翅 内侧翼下静脉采血法 ，由于家禽静脉较细 ，注射 器尽量选择小号 ，一般选择２ ～ ２ ． ５ ｍ ｌ ，抽血及拔针 时速度要缓慢 ，防止速度过快引起细胞破裂 。环 境温度过高时 ，要随身携带冰砖降温 ；温度过低
缝
２ 实验过 程注意事项
２ ห้องสมุดไป่ตู้ １ 抗原 的稀 释
血 清 样 品 的采 集 是 禽 流感 免 疫 抗 体 检测 的首
要工作 ，血清样品的好坏直接影响免疫抗体产 生 恢复正常后改用维生素ｃ 、维生素Ｂ ６ 加入５ ０ ０ ｍ ｌ 的 ５ ％葡萄糖注射液，静脉滴注即可。
Ｏ ． １ ％盐 酸 肾上 腺 素 ｌ ｍｌ ，２ ０ ｍｉ ｎ 后 根 据情 况缓 解 程
做实验前首先做的是抗 原的稀释 ，在稀释之
前 应 该 观察 抗 原 试 剂瓶 密封 状 态 、有 无 损 伤 ，瓶
内 固体颜 色 、质地有无异 常 ，查看是否在保质期 内。按照要求加人稀释液 ，震 荡直 至固体全部融 化 ，颜色呈 白色无絮状沉淀为正常 ，显示黄色且 内有杂质颗粒样物质表明抗 原质量存在 问题 。稀 释的抗原应保存在一 ２ ０ ℃冰箱 ，封 口，并标注使用
由于ＡＩ 具有临床症状复 杂，病死 率高，病原体 亚型多以及 容易发 生抗原漂移和转换等特点 ，其防治难度很大。现阶段 ，禽
分析H5N6高致病性禽流感流行病学特点及防控措施
分析 H5N6 高致病性禽流感流行病学特点及防控措施[摘要]H5N6高致病性禽流感在我国范围内表现出持续性流行的势态，该亚型禽流感有着交叉感染带毒、疫情点多面广等特点，要及时规范化有效处置疫情，采取综合防控措施加以防控，强化我国家禽业生物安全能力建设。
为了全面探讨H5N6高致病性禽流感流行病学特点及防控措施，本文对上述命题加以分析，旨意为相关人员的研究工作提供参考文献。
[关键词]H5N6；高致病性禽流感；流行病学特点；防控措施甲型流感病毒主要依照病毒表面神经氨酸酶（N）以及血细胞凝集素（H）实现命名，这种禽流感病毒 N共计9亚型、H共计16亚型。
H5N6禽流感是甲型流感病毒的一种亚型，具有高致病性、死亡率较高、可感染人等特点。
倘若家禽发生H5N6禽流感，且未能得以及时处理，极有可能导致整个鸡群死亡[1]。
这种情况对于家禽养殖业来讲，无疑是一个沉重地打击。
因此，分析H5N6高致病性禽流感流行病学特点，并制定出有效地防控举措是有必要的。
1.H5N6高致病性禽流感病原体H5N6亚型禽流感病毒和H7N9、H5N1均为甲型流感病毒，其对于家禽有着相当高的致病性。
自2008年H5N6亚型禽流感发现之后，现如今已经逐步取代H5N1亚型禽流感病毒，成为了我国活禽市场内主要流行的病毒种类。
正黏病毒科A型流感病毒（即甲型流感病毒）为当前主流禽流感病毒种类，这种禽流感病毒的基因组为单股RNA，其依照表面的神经氨酸酶（NA）、血细胞凝集素（HA）抗原种类差异性，产生诸多血清亚型。
目前已鉴定出NA亚型11类、HA亚型18类。
甲型流感为人畜共患，且病毒宿主种类非常多。
目前流行的高致病性禽流感病毒分为H5、H9和H7等亚型。
此外，H5亚型基因可与不同的NA亚型基因（N1、N2、N5、N6、N8）重组，形成新的病毒，并在世界范围内爆发。
H5N6便是其中一种重组新病毒。
1.H5N6禽流感疾病的流行病学表现2.1传染源H5N6禽流感病毒可在动物的粪便、动物饮水等环境中长期存活，传染源为带毒禽和病禽。
H5型高致病性禽流感免疫抗体监测及分析
２ ０ ￣２ ０ ０ ５ ０ ７年 上半 年 期 间 ， 为分 析 免 疫 质 量 ， 及 时掌握 流行病 学 动 态 和免 疫 效果 ， 我们 对 Ｈ５型 高致 病性禽 流感抗 体 的血 清学监 测进行 连续性 的采
样 和检测 ， 现将 近 两年 的实验室检 测结果 报告如 下 。
场 ； 个 养鹅 场免疫合 格 ； 个 养鸽场 免疫合 格 。 ２ １
源抗体具 有一定 的保护作 用 ， 过早 免疫 ， 源抗 体 中 母 和 了疫苗 抗原 ， 免疫 效 果并 不 好 。二是 首 免 日龄太 早 ， 只发育不完 全 ， 鸡 对疫 苗应 答 较差 ，０日龄前 免 １ 疫 其 他疫 苗较 多 ， 导致 免 疫无 应 答 或者 应 答 效果 较 差， 直接 影响禽 流感 疫 苗 的免 疫效 果 。 目前 多 数报 道认 为 ， 雏鸡 的最 佳首 免疫 时 间应 在 ２周左 右进行 。 ３ ２ 从结果 中可 以看 出蛋鸭 的免疫效 果很确 实 ， ． 免 疫合 格率可 以达到 １ ０／ ０ 。本文 中的 肉鸭 血样 是 在 ９ ５
表 １ 血 凝 抑 制 试 验 结 果
种类
蛋 鸡
采 样 场 数 （ ） 检 测 数 合 格 数 次
１２ ０ ２ ６ ３８ ２ ０ ２９
合 格 率 ／ ） （
９． ９ ３ ２
１ 材 料 与方 法
１ １ 材 料 ．
肉鸡
蛋 鸭
２ ５
１ ４
５６ ５
２２ ９
４９ １
２１ ６
７．６ ５ ３
８ ．８ ９ ３
肉鸭
鹅 鸽 子
８
２ １
１５ ７
３ ６ １ ３
１１ ０
禽流感免疫存在的问题及对策
台州农业2006，（2）：26～27Journal of Taizhou Agriculture禽流感免疫存在的问题及对策蒋友新戴夏友赵满正（浙江省温岭市石桥头镇兽医站317500）（温岭市农业林业局）做好免疫工作是防止高致病性禽流感发生与蔓延的重要措施之一。
但是，我们在防治禽流感免疫工作实践中及抗体检测时，发现一些不可忽视的问题，有的影响了免疫密度的提高，有的影响抗体滴度及保护时间，严重影响高致高性禽流感的防控，必须引起动物防疫工作者的重视，并通过一些技术措施加以规避。
1禽流感免疫存在的问题1.1疫苗自身存在的问题影响免疫工作的开展目前使用的禽流感灭活苗存在着一些缺陷，一是给药途径单一，除了注射给药，没有别的给药途径，而注射给药操作麻烦，有的养殖户因怕麻烦而不愿实施免疫；二是应激反应大，蛋禽注射后产蛋率下降幅度大，肉禽注射后几天生长停滞；三是药物残留严重，注射疫苗后，完全吸收需要1个月，影响肉禽品质；四是产生免疫保护需要的时间长，从注射疫苗到产生保护需要20d左右，影响紧急的免疫的效果。
疫苗本身存在的这些缺陷严重影响到免疫密度的提高。
1.2快大型禽类免疫存在技术难题快大型肉鸡或肉鸭一般30~40日龄就可以出栏，而根据我们检测，目前使用的禽流感灭活疫苗首免时间在25日龄或更大才能产生较好免疫应答，注射后一般经过20d多才能产生保护，这些肉鸡、肉鸭注射禽流感灭活苗后，要么未产生免疫力就可以出栏，或者刚有保护力就出栏；且说明书要求使用该疫苗后28d内不能上市，28d之内上市影响商品品质。
因此，饲养户一般不愿注射疫苗。
1.3产蛋禽使用禽流感疫苗难度大目前使用的禽流感灭活苗保护期只有3个月，而产蛋禽一个产蛋周期一般为1年，必须在产蛋期内多次加强免疫才能在整个产蛋期都得到保护。
蛋禽在产蛋期内注射疫苗，由于一个一个抓捉和注射疫苗时疼痛与疫苗的副作用，应激反应很大，注射疫苗后产蛋率大幅度下降。
特别是产蛋鸭恢复产蛋需要很长时间。
高致病性禽流感防控存在的问题及防治措施
分 养 殖户 存在 一 经免 疫 ，不在 染 毒 的认识 误 区 ，从 而 忽 略 了诸 如
消毒 、检 疫监 测 等综 合 防控措 施 ，为 病毒 传播 、疫 情 暴发 留下 隐
患。
禽 流 感是 由正 黏病 毒 科 ，流 感病 毒 属 ，Ａ 型 流感 病 毒 引起 的 ４ 防控对 策建议 以感 染鸡 、火 鸡 、水 禽等 禽类 为 主 的一种 急 性 、高度 接触 性 传染 ４ ． １ 加大 监 测力度 ，强化 疫苗质 量监 管
国 自１ ９ ９ ６ 年 首次 从广 东 省发病 鹅 中分离 ￣ ］ Ｈ ５ Ｎ Ｉ 高 致病 性禽 流感病 早发 现变 异和 可能形 成 的毒株 。
北 京 市 部 分 强 制免 疫 病 实行 “ 先 打 后 补 ” 政 策 ，该 项政 策 实 施对 市 场疫 苗监 管提 出了更 高要 求 。主 管部 门应 加大 科 研 、生 １ 流行特 点 患病 及 隐性 带毒 动物 足 主要 传 染源 ． ． 野 生水 禽及鸟 类 存病 毒 产 、市 场 全面 监管 力度 ，建立 责任 可追 溯 制度 ，同时针 对 不 同厂
症 状 为 发 病 鸡 精 神 沉郁 ，饮 食 废 绝 ，体 温 升 高 ，产 蛋 停 止 ，有 大食 药卫 生 、环 境保 护 的执 法力 度 。针对 农村 散 养户 、农 家 乐 、 轻 微 呼 吸 道 症 状 ，头 、脸 、颈 部 浮 肿 ，无 羽 毛 部位 发 绀 、腿 部 城 镇 小 区 内的养 殖户 ，积 极做 好 宣传 ，力 争 自主 清除 一批 ；同时
毒 。２ ０ ０ ４ 年 先后有 １ ６ 个 省 、市 ，超 过４ ０ 个县暴 发 了禽流感 疫情 。
传播 中起 一 定作 ；病 原在 禽 群之 问传 播 主要 是水 平传 播 。传 播 家 、不同批次疫苗做好抗体效价评估 。 途径 主要 是 呼 吸道 、消 化道 传播 。此外 ，被 含 毒分 泌物 或 者粪 便 ４ ． ２ 推 动养 禽产 业模式 转变 ，提高 生物 安全 管理水 平 污染 的物体 ，如空 气 、水 、饲 料等 都可 机 械传 播病 毒 ；易 感动 物 政 府 部 门应 加 强 宣 传 ，加 大 对 规模 化 养 殖 企 业 扶 持 补 贴 力 包括 火鸡 、珍 珠鸡 、各种 禽类 ，其 中 以火 鸡最 为易感 。 ２ 发病 症状 度 ，倡 导 无 害化处 理政 策 的落 实 ，提 升规 模化 饲养 管 理水 平 ，推 动 产业 转 型升 级 。此外 ，要加 强养 殖企 业 准人 管理 ，强化 监督 执
H5型高致病性禽流感免疫抗体监测及免疫效果分析
安徽农业科学, Journal of Anhui Agri. Sci. 2007, 35( 30) : 9537, 9540
禽流感是一种由 A 型流感病毒引起的多种家禽及野鸟 的高度接触性传染病, 又名欧洲鸡瘟、真性鸡瘟, 被 OIE 列为 A 类传染病, 我国也将其列为一类传染病。2005~ 2007 年上 半年期间, 为分析免疫质量, 及时掌握流行病学动态和免疫 效果, 笔者对H5 型高致病性禽流感抗体的血清学监测进行 连续性的采样和检测, 现将近 2 年的实验室检测结果报道 如下。 1 材料与方法 1. 1 材料 阿氏( Alsevers) 液配制, 1% 鸡红细 胞悬液制 备[ 1- 2] ;H5 型禽流感抗原, 由中国农业科学院哈尔滨兽医研 究所提供, 批号: 2005040503, 20051113。 1. 2 采样 1. 2. 1 采样选择。共对 127 个养鸡场、22 个养鸭场、2 个养 鹅场、1 个鸽子场采样。 1. 2. 2 采样要求。每个养殖场的家禽均采用翅静脉采取血 液, 并记录地址、日龄、养殖规模、免疫次数、最近免疫时间、 品种及使用疫苗的相关资料。 1. 2. 3 采集内容。共采集鸡血 2 924 份、鸭血467 份、鹅血 36 份、鸽血 13 份, 每个样品采血量 1. 5~ 2. 0 ml。 1. 3 检测方法 血凝抑制试验: 采集血液后, 及时分离出血 清, 并参照5高致病性禽流感诊断技术6( GB/T 18936-2003) 和 禽流感微量红细胞凝集抑制试验( SN/ T 1182. 2-2004) [ 2] 的规 定, 采用血凝抑制试验, 集中对血清样品进行实验室检测, 并 作系统分析。 1. 4 结果判定 血凝试验结果判定按标准判断, 血清的血 凝抑制滴度 \24( 1B16) , 判断为免疫合格。 2 结果与分析
我国H5、H7亚型禽流感流行现状与防控策略
我国Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感流行现状与防控策略马守敏（四川省盐亭县龙泉乡畜牧兽医站，四川盐亭６２１６００）摘 要：在新形势下，我国Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感不断盛行，毒株复杂化，呈现出多样化特征。
随之，我国养禽业疾病防控以及可持续发展面临巨大挑战，急需要采取行之有效的防控策略，有效开展禽流感防控工作，高效防控Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感，最大化降低发生率的基础上推动新时期养禽业“健康、协调、稳定”发展。
从不同角度客观分析了我国Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感流行现状与防控策略。
关键词：Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感；流行现状；防控策略中图分类号：Ｓ８５８．３ 文献标识码：Ｂ ＤＯＩ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０１８．０７．１０５收稿日期：２０１８－０５－１１ 引言在养禽业动态发展中，如何有效防控Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感已成为党和国家关注的焦点。
我国需要根据Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感流行具体情况，明确防控重点与难点，在解决问题的基础上巧用合理化防控手段，提高Ｈ５、Ｈ７亚型禽流感防控工作效率与效益。
流行现状禽流感就是禽流感病毒作用下的禽类传染病。
由于外膜血凝素等不相同，禽流感可以分为多种类型血清亚型。
就禽流感病毒而言，某些Ｈ５和Ｈ７亚型毒株引发高致病性禽流感几率较大，具备发病突然、较强传染性、死亡率高等特点，导致家禽全身感染，严重影响养禽业长远发展，对公共健康也会造成较严重的威胁。
２０１７年２月，我国疾病预防控制中心发布了关于发现Ｈ７Ｎ９病毒变异株的信息，到２０１７年８月，我国公布的Ｈ７Ｎ９亚型禽流感疫情已有８起，都发生于蛋鸡。
在此过程中，我国Ｈ５亚型禽流感流行现状体现在多个方面，活禽交易市场在Ｈ７Ｎ９亚型禽流感发生方面扮演重要角色，临床上发病的家禽主要是鸡只，即蛋鸡、种鸡、黄羽肉鸡，高低致病性Ｈ７Ｎ９亚型禽流感同时流行，前者鸡只死亡率为２０％～１００％，各类型毒株传播速度并不相同，借助消化道、呼吸道进行传播；后者大都出现在蛋鸡场、肉鸡场，会迅速降低鸡只产蛋率，超过２０％，传播途径相同。
高致病性禽流感H5防控策略
高致病性禽流感H5防控策略高致病性禽流感（Highly pathogenic Avian Influenza HPAI）,是由正粘病毒科流感病毒属A型禽流感病毒引起的禽类类型传染病。
世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。
为预防、控制和消灭高致病性禽流感，依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关法律法规，国家专门制定了《高致病性禽流感防治技术规范》。
当前，正值雏鸡高致病性禽流感等重大动物疫病易发、高发季节。
从国际疫情情况来看，2010年以来，全球有19个国家和地区报告发生高致病性禽流感疫情或在野禽中发现高致病性禽流感病毒。
从国内情况看，尽管去年全年高致病禽流感疫情形势平稳，但禽流感等多种亚型病毒并存，原流行毒株容易发生新的变异。
特别是目前，进入后年迁徙的时期，病毒随后年迁徙传播的风险显著增大，春节后家禽开始大批补栏，育雏市场活跃，贩运频繁，疫病防治的漏洞增多，去年秋防免疫的家禽逐步超过免疫有效保护期，非常容易感染。
因此，各级动物防疫部门和广大养殖户应高度重视高致病性禽流感的防控，严格执行《高致病性禽流感防治技术规范》，抓免疫促效果，提升家禽免疫保护水平；抓检测促预警，提升家禽疫病风险控制水平；抓监督促检疫，提升禽产品质量安全水平；抓管理促防疫，提升养殖人员防疫灭病能力；抓应急促防控，提升突发疫情应急处置水平。
广大养殖场户要严格科学执行国家《高致病性禽流感防治技术规范》，全面掌握高致病性禽流感的有关知识，积极科学防控，杜绝疫病发生。
1.流行病学高致病性禽流感可引起各种日龄的鸡发病，主要发生在冬春和季节交替时期，气温多变时更易发病，近期是高风险期。
病死禽和其粪便、被污染的饮水、饲料、衣物、蛋托（箱）、运输工具等都是很危险的传染源和传播媒介。
经呼吸道、消化道感染，也可通过气源性媒介传播。
拉淘汰鸡的车辆，如果不严格消毒，到处乱窜，会给鸡场招致致命的打击。
本病易与大肠杆菌、支原体、新城疫等疾病混合感染，导致更大的死亡损失。
高致病性禽流感实验室检测风险的分析及预防
高致病性禽流 感实验室检测风 险的分析及预 防
章春燕 （ 辽宁省朝阳市动物疫病预防控制中心 １ ２ ２ ０ ０ ０ ）
高致 病性 禽 流感 （ Ｈ ｉ ｇ ｈ ｌ ｙ Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇ ｅ ｎ ｉ ｃ Ａｖ ｉ ａ ｎ Ｉ ｎ —
ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｚ ａ ， Ｈ Ｐ Ａ Ｉ ） 是 由正 粘 病 毒 科 Ａ型 流 感 病 毒 属 流
感病毒引起 的以禽类为主的急性传染病 。高致病性 禽流感 因其在禽类中传播快 、 危害大 、 病死 率高 ， 世 界动物卫生 组织 （ Ｏ Ｉ Ｅ） 将其列为 Ａ类动物传染病 ， 我国将其列为一类动物疫病。近年在家禽身上分离 出了 Ｈ ７ Ｎ９亚型 高致 病性禽 流感 病毒 ， 各 地 兽 医实 验
体飞溅或形成气溶胶 ，因此检验人员检测时应穿专 用 的工 作 服 或 防 护 服 ， 戴 防 护 较好 的手 套 、 口罩 、 帽 子及 眼镜 ， 条件好 的实验室可佩戴防化学飞溅面罩 。 实验结束后 ， 手套 、 鞋套 、 帽子 、 口罩等一次性 防护用
品要 摘 掉放 人 垃圾 袋 中待 集 中高压 灭 菌 处 理 ，工 作 服 可在 紫外 灯 下进 行 消 毒 。实 验 室 内长期 备 有 ７ ５ ％
样本确保 容器盖拧 紧放人零下 ２ ０ ￣ （ ２ 以下 的 冰箱 保
１安全级 别及检验活动的要求
实 验 室 的 生物 安全 防 护水 平 的 分级 是 根 据 所 操
作 的生物 因子 的危 害程度 和采取 的防护措施 而划 分。对于生物安全 Ⅱ 级兽 医实验 ， 我们要按照 《 病原 微生物实验室生物安全管理条例 》 、 《 实验室生物安 全认可准则 》 等相关要求 ， 从事高致病性禽流感血清
高致病性禽流感H5亚型免疫抗体监测与分析
养户 每户不少 于 ５ ； 份 采集 ３ 个集 贸市场活 禽血清 ， 每场不
少于 ２ ０份 。
１１ 主要试剂 ．． ２
液（ 自配 ） 。
Ｈ ５亚型禽流感标 准抗 原 ， 准阴性 、 标 阳性
血清 ，由中国农 业科学 院哈尔滨 兽医研究所 生产 ，Ｂ Ｐ Ｓ缓 冲
１ 方 法及 步骤 ． ２
１ ． 采血送 检 ．１ ２
采送样 由各镇畜牧 兽医站负责 ， 收到血样
２２ ２ ０ ．． ０ ７年的监测户 数以及样 品数较往 年少 ，但我们 都 ３
后， 待血液 自然凝 固后 （ Ａ） ．２ ２ Ｈ 和血 凝 抑 制 （ ） 验 ＨＩ试
禽专业户 以及 散养户 ８ ６户 ， 品总数 ５ ４ 份 ， 中合格数 ２ 样 ０８ 其 ４４ ， ０ ４份 不合格数 １０ 。 ０ ４份 合计 合格 率为 ８ ． 详见表 １ ０１ ％。 。 ２１ ２ ０ ．． ０ ６年检 测结果 ２ 全 年共检 测各规 模化 养殖场 、 养 禽专业户 以及散 养户 ８ ２户 ， 品总数 ４ １ ， 中合格数 ２ 样 ４ ９份 其 ３５ 份 ， ７ ９ 不合格数 ６ ０份。合计合格率为 ８ ． ６ ５１ ％。详见表 ２ 。 ２１ ２０ ．． ０ ７年 检测结 果 ３ 垒 年共检 测各 规模化 养殖场 、 养 禽专业户 以及散养户 ６ ７户 ， 品总数 ３ ４ ， ２ 样 ５ ６份 其中合格数 ３０ ， １５份 不合格数 ４ １ 份。合计合格率为 ８ ．％。详 见表 ３ ７ ６ 。
本 、 挝 、 国 、 南 、 国 等 亚洲 ９ 国 家 相继 暴 发 由 Ｈ 老 韩 越 泰 个 ５亚
高致病性禽流感防控工作存在的问题及对策
２ ０ １ ５ 年
３ １ 卷
第７ 期
疫 病 防 控
高致病 性禽流感 防控工 作存在 的问题 及对 策
张忠惠
（ 清 镇市动物疫病预 防控制 中心，贵州清 镇
禽 流 感是 禽 流 行 性 感 冒的 简称 ，是 由Ａ 型 流感 病 毒 引 起 的发 ２ ． ４ 毒 株 变 异 生在 各 种 家禽 和野 鸟 的传 染 性疾 病 。此 病 毒 有 多种 血 清 亚型 ，在 近年 来疫 病 频 发 ，连 续性 的 高密 度 强化 免疫 ，诱发 了禽 流感 临床 上 有 不 同 的表 现形 式 ，其 中高 致病 性 禽 流感 最 为 严重 ，死亡 病 毒抗 原 发生变 异 ，给禽 流感 疫苗 免疫 防控 造成 了很 大 的困难 。 率可 达 ９ ０ ％ ～１ ０ ０ ％，而且 还 可 以感染 人 类 ，引 起死 亡 ，严 重 危 害 ２ ． ５ 应 急 处 理 不 到 位 公共 卫 生 安全 。为 有效 防控 高致 病 性禽 流 感 的 发生 和 传播 ，笔 者 性 的防控 措 施 。 我 国的扑 疫 补偿 机 制还 不 健 全 ，补偿 资 金 少 ，有 的养 殖场 出 病 禽 、同群 禽乃 至 死 禽卖 给不 法 商贩 ，有 的在走 投 无路 时 ，才上 报 给 政府 部 门 ，从 而贻 误 了最 佳控 制 时机 ，造成 了疫情 的扩散 ，
迅 速灭 活 ，一 般常 用浓 度 的常 规 消毒剂 均 可将 其迅 速杀 死 。
１ 个 月 以上 ，确认 无病 后才 能进 入饲 养 区 。养 殖场 要定 期或 不定 期 地进 行 检 验 ，对 检 出 的阳性 病 禽要 进 行 隔离 ，根 据疫 情 种类 ，及
２ 防控工作 中存在 的问题
高致病性禽流感抗体的检测与控制
１ 动物 免疫 抗体监 测的重要性
Ｈ Ｎ 来 源 于猪 ； （ ３） Ｈ Ｎ ，Ｈ Ｎ 来 源 于患 病海 豹 ； （ ４） Ｈ． 。 Ｎ 来
５ ）Ｈ Ｎ ， 、Ｈ Ｎ 、Ｈ ， Ｎ 、Ｈ Ｎ 。 、Ｈ Ｎ 引起 人类 呼 吸道 动 物 免疫 抗 体监 测 是通 过 免 疫血 清 学 的方 法 对免 疫后 动 物 抗 源于 病貂 ； （ 体 水平 的测 定 ，根 据 免疫 监 测 的结果 来 检 验免 疫 成效 的一种 技 术 疾 病 ； （ ６ ）几 乎所 有 的神 经氨 酸酶 Ｎ Ａ 和 血凝 素 （ Ｈ Ａ）的组合 都 Ｎ 、Ｈ Ｎ ２ 、Ｈ ７ Ｎ ｌ ， 以及 Ｈ ９ Ｎ ２ 引起 “ 禽 流 方 法 。检 测 免疫 动 物抗 体 水 平 ，是检 验 免 疫效 果 ，掌 握 疫情 动 态 在禽 类 中发 现 ，尤 其 是 Ｈ 大 动物 疫病 提供 科 学 的依 据 。 Ｎ 高 致病 性禽 流感 。 的最 直接 、最有 效 的方 法 ，动物 的免 疫 抗 体水 平 ，可 以为 防控 重 感 ”。 以及伊 犁地 区 的Ｈ 家禽 自然感 染 禽流感 各 种亚 型病 毒一 段 时间 或者康 复后 ． 会 在
助。
Hale Waihona Puke ４ 工 作 体 会 ４ ． １ 保 证高 致病性禽 流感抗体 监测的准确性
抗 原效 价测 定 ：必须 使 用无 禽流 感 抗体 的公 鸡 红 细胞 ，不 同 种属 动物 红 细胞对 抗原 效价 测定 有影 响 。
禽 流感 抗原 首 次 使用 时 应分 装 多瓶 后冻 藏 ，每 次使 用 时需 要
定 时 间段 带 有该 病 原较 高 效价 的抗 体 。检 测 到禽 流感 某 亚 型病
毒特 异性 抗 体后 ． 可 以初 步确 定该 地 区有 家禽 已感 染或 者是 感染 过
H5+H7免疫中存在的技术问题及克服方法
由于对散户习惯了用禽-新二联苗饮水、拌食免疫，个别防 疫员将H5+H7二价灭活疫苗也发与农户饮水、拌食免疫。既做无 用功，又起不到免疫效果。 1.2 免疫时间混乱
由于国家所说的免疫程序比较笼统，特别是大场首免时间怎 么安排，蛋鸡、蛋鸭、蛋鹅和种用禽类二免后什么时间加免就不 知怎么安排了，所以从2017年下年测抗水平来看普遍较低。 1.3 免疫范围不清
学进展，2007，28（3）：85-88.
疫苗 名称
H5+H7二价 灭活疫苗
动物类别 种鸡、蛋鸡
商品代肉鸡 种鸭、蛋鸭、种
鹅、蛋鹅 商品肉鸭、肉鹅
H5+H7二价灭活疫苗建议免疫程序
大场 免疫时间
方法剂量
散户
7～14日龄用H5+H7首免，间隔3～4周二免，以后4
个月或根据抗体监测情况加免。
蛋鸡、种鸡2～5周龄，每只 散户鸡鸭鹅等禽类春、
H5+H7属二价灭活苗，免疫途径只能是注射，饮水和滴鼻 点眼均不能使机体产生较明显的免疫应答。注射部位最好选在 颈后部1/3处，呈45°进针皮下注射，小鸡用7号针头、大鸡用9 号针头为宜。采用腿部或胸部肌肉注射要针头适当、进针角度 45°～50°为宜，避免刺穿胸部伤及内脏和肌键、神经等组织。 无论颈部皮下注射还是腿部胸部肌肉注射，均要进针适度用力和 缓慢取针，防止肌体损伤和疫苗回流。 2.4 不用失效苗
的肉禽进行一次免疫。对人工饲养的鹌鹑、鸽子、珍禽等，参考 鸡的相应免疫程序进行免疫。接种方法及剂量按相关产品说明书 规定操作。对鸭鹅，疫苗免疫接种剂量为，2～5周龄鸭和鹅，每 只 0.5ml；5周龄以上鸭，每只1ml；5周龄以上鹅，每只1.5ml。但 以上说的较为笼统，具体详见以下H5+H7二价灭活疫苗建议免疫 程序。 2.3 免疫途径和部位
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
高致病禽流感H5抗体检测存在的问题及对策
作者：王世月
来源：《安徽农学通报》2015年第04期
摘要：禽流感是指由于禽流感病毒导致人与动物共患的一种急性传染病，主要发生在鸡、鸭等禽类中，严重时临床症状表现为全身败血症等。
根据禽流感病原体的不同，可分为非致病性、低致病性和高致病性3种类型，其中高致病禽流感发病急、传播速度快、死亡率高，被世界卫生组织列为A类动物疫病。
该文通过对高致病禽流感抗体检测过程中存在的问题进行探讨和分析，提出了有利于改善抗体检测的措施，为有效防控高致病禽流感提供参考。
关键词：高致病禽流感；抗体检测；问题；措施
中图分类号 S858.3 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2015）03-04-120-02
禽流感是由于A型流感病毒而导致家禽及野禽出现病症的一种传染病，而高致病性禽流感则是由于A型禽流行性感冒病毒而引起的一种传染病[1]。
禽类在感染了禽流感病毒后的症状主要表现为以下2种：一是呼吸道及消化道症状不太严重，死亡率也较低；另一种则极为严重，表现为出现全身性、败血性症状，该病传播速度快，严重时死亡率高达100%，而且可以直接传染人类，致人死亡，给生产造成极大损失和严重危害公共安全。
目前，最为有效的防治措施是注射禽流感疫苗，使易感动物体内产生保护性抗体。
近年来，通过对高致病性禽流感H5疫苗注射后进行抽样检测发现，多数养殖场免疫后抗体检测合格率普遍偏低。
在此背景
下，通过对高致病禽流感抗体检测存在的问题进行分析并制定预防措施，对于防控高致病禽流感有着重要意义。
1 实验安排
养殖条件和养殖量基本相同，试验场地设在广德县张某、杨某2个肉鸡养殖场，由同一防疫队分别进行高致病禽流感H5N1灭活苗免疫，其中对张某养殖场的免疫注射现场安排一个村级防疫员进行现场指导。
免疫时间为2012年3月26日，于免疫后21d、25d、30d分别对2个养殖场肉鸡群的抗体水平进行抽样检测。
2 试验方法
抗体检测方法采用血凝和血凝抑制实验，具体步骤如下：⑴测定抗原效价：在96孔V形微量反应板的1～12孔均加入25μL生理盐水；吸取25μL标准抗原或病毒液加入第1孔，混匀；从第1孔吸取25μL液体加入第2孔，混匀后吸取25μL加入第3孔，如此进行对倍稀释至第12孔，从第12孔吸取25μL弃之，换滴头；每孔再加入25μL生理盐水；将体积1%的鸡红细胞悬液充分摇匀后，每孔均加入25μL鸡红细胞悬液；微量振荡器上振荡混匀，室温（20～25℃）静置30min后观察结果。
对照孔细胞将成明显的钮扣状沉到孔底；将板倾斜，观察红细胞有无呈泪滴状流淌。
判定抗原效价，配制四单位病毒抗原液。
（2）测定血清抗体效价：在微量反应板的1～11孔加入25μL生理盐水，第12孔加入50μL生理盐水；吸取25μL血清加入第1孔，充分混匀后吸25μL于第2孔依次倍比稀释至第10孔，从第10孔吸取25μL弃去；1～11孔均加入含4HAU混匀的病毒抗原液25μL，微量振荡，室温静置至少30min每孔加入25μL1%的鸡红细胞悬液混匀，微量振荡30s，室温静置约30min观察结果，红细胞对照孔成明显的纽扣状沉到孔底时即可判定结果。
3 试验结果
由表1可以看出：在免疫后21d时2个养殖场的抗体检测合格率分别为0和50%，25d时抗体检测合格率分别为30%、70%；30d时抗体检测合格率分别为50%、80%，张某养殖场的合格率一直高于杨某的养殖场。
通过20/1000的抽样检测，按照相关标准，抗体检测结果合格率在70%以上视为免疫合格，可知杨某养殖场免疫失败，张某的免疫基本符合要求。
表1 不同时间点对2组抗体的检测结果
[抗体检测时间（d）＼&组别＼&抗体检测合格率（%）＼&21＼&杨某＼&0＼&张某＼
&50＼&25＼&杨某＼&30＼&张某＼&70＼&30＼&杨某＼&50＼&张某＼&80＼&]
4 分析与讨论
通过上述实例结果可以反映出在肉鸡免疫的过程中存在着多方面的问题[2]，从而造成检测结果不好，免疫失败。
笔者现结合日常工作出现的问题作如下分析：
4.1 高致病禽流感的流行特点及防控现状禽流感病毒的宿主多样，不仅对家禽、野禽等禽类具有感染力，而且对猪、马、人也有感染的可能，尤其是高致病性禽流感可以感染人类并造成死亡。
目前对该病的主要防控措施是人为的给易感动物进行免疫接种使机体产生抗体，而群体的抗体水平直接影响到免疫接种的效果，与疾病防治的效果有着密不可分的关系。
国内外对禽流感抗体进行监测的技术多种多样，主要包括血凝和血凝抑制试验、琼脂凝胶免疫扩散试验、酶联免疫吸附技术以及RT-PCR等等，其中最为常用的为血凝和血凝抑制试验。
然而，近来的报道表明，该病主要易感动物禽类的免疫接种疗效并未取得较好的效果。
根据农业部2007年制定的《高致病性禽流感防治技术规范》中规定的禽血凝抑制（Hl）试验方法，对免疫后21～120d的禽群进行禽流感免疫抗体检测，抗体效价≥4log2为免疫合格，存栏禽群免疫抗体合格率在70%以上为群体免疫合格。
然而在日常的抗体监测中发现，有部分禽群在免疫21d后，抗体水平仍达不到合格水平；不同种类、不同日龄的禽群免疫抗体水平也参差不齐。
4.2 抗体检测合格率低的原因
4.2.1 防疫员和技术因素从以上2组抗体检测结果可以看出，张某养殖场的抗体检测合格率明显高于杨某，其主要原因可能是由于张某养殖场免疫时有防疫员在现场监督。
这也反应了目前抗体检测合格率低的主要原因可能是在进行防疫的过程中技术不够规范，出现漏防、少防。
在对这些家禽进行高致病禽流感的防疫过程中，可能会由于防疫人员工作的不仔细而导致一些免疫动物疏漏和注射剂量不足，从而导致在对家禽进行抽样检测时得到的检测结果不令人满意。
4.2.2 时间因素本次实验在21d、25d和30d时的抽样检测结果显示，随着时间的增加，抗体检测合格率也在逐渐上升，这就说明了抗体检测合格率低的另外一个主要原因可能是目前多数抗体检测都是在免疫后21d的进行有关。
在实际工作中，大量事实证明肉鸡首次免疫
H5N121d采样抗体结果极少能达到70%的合格率。
4.2.3 疫苗质量疫苗质量是影响免疫效果的主要原因之一。
如果防疫队的防疫人员在使用前没有对疫苗进行严格的质量检查，忽略了疫苗中存在的质量问题，从而可能导致家禽的检测结果不合格。
4.3 提高抗体检测水平的措施根据检测结果对高致病禽流感抗体检测过程中存在的问题进行分析，为了有效的提高抗体检测的水平以及降低高致病禽流感的发病率，笔者有针对性地制定了如下措施[3]：一是加强对各个动物防疫队的监督管理，严格控制因防疫队员操作造成的漏免、注射剂量不足等造成的免疫失败；二是把好所需的疫苗质量关。
在进行防疫前，防疫人员一定要对疫苗的质量进行严格的检查，避免使用出现破损、颜色改变、有无沉淀、有效期等，同时在进行使用前要对疫苗进行预温，以利于减少在防疫过程中动物的应激反应，从而有
效的保证抗体检测的水平；三是规范疫苗操作技术。
在进行疫苗的注射前，检测人员一定要对注射器、针头等器具进行消毒，同时要保证疫苗的注射剂量符合规定以及注射的部位准确，避免因疫苗的技术操作不规范而对抗体检测的水平造成影响；四是检测人员要认真做好抗体检测和疫病监测工作。
检测人员对来样要及时检测，做到认真细致，检测报告准时送达到养殖户手中，对于免疫不合格的家禽要及时通知做好的补防工作，从而提高抗体水平，有效控制疫病的发生。
参考文献
[1]肖康，周碧君，王开功，等.贵州省禽流感免疫抗体监测结果分析[J].畜牧与兽医，2011，43（1）：51-53.
[2]成进，彭晓玲，夏俊，等.2009-2010年新疆地区家禽禽流感免疫抗体监测与分析[J].中国动物检疫，2011，28（7）：51-53.
[3]刘红英.浦江县防控禽流感的主要技术措施[J].浙江畜牧兽医，2009，34（4）：39. （责编：张宏民）。