淋球菌培养与鉴定
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细菌培养：标本在选择性培养基上培养 ，可出现典型菌落，氧化酶试验阳性， 镜检可见到革兰阴性双球菌，
还可用检测淋球菌DNA，直接免疫荧光 试验协助确诊。
淋球菌培养
淋球菌是淋病的病原菌，为实验室确诊 淋病提供依据。（培养法为确诊淋病的 金标准） 淋球菌药敏试验，测定药物抑菌或杀菌 能力，以便准确有效利用药敏进行治疗。
T-M培养基是在GC基础培养基中，加入血 红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘 菌素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌 增菌剂，使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌 菌落长得较大，在乎皿中几乎呈纯培养， 从而大大提高了由子宫颈、尿道，尤其是 咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。
淋球菌培养条件
平板生长形态
镜检形态
从菌落上取材作涂片，革兰染色后可见 到菌的大小及染色的深度有差异，排列 也不一致，呈典型革兰阴性双球菌。
镜检形态
镜检形态
来自泌尿生殖道符合初步鉴定标准的分 离株，一般可诊断为淋球菌，准确率达 98%。 对于菌落形态不典型的分离株，来自咽 部、眼睛或其他泌尿生殖道外部位的分 离株，应作确诊试验。
葡 萄 糖
麦 芽 糖
乳 糖
蔗 糖
硝酸盐还 DNA 巧克力平皿上特
果Leabharlann Baidu
原
酶
点
糖
- 淋病奈瑟菌 - + - - - -
-
- 光滑,灰白色,透明
- 脑膜炎奈瑟 菌
- ++ - - -
-
- 光滑,灰,无色,透 明,个别淡黄
+ 粘膜奈瑟菌 + + + - + +
+
-
黄绿,光滑
d 卡他布兰汉 + - - - - -
+
+ 灰白→棕色、易 乳化
分泌物
小
直接涂片染色
结
革兰阴性细 胞内双球菌
未见革兰阴性 细胞内双球菌
男性确诊 女性（其 他标本）
分泌物培养 （巧克力色平板）
可疑菌落（菌落形态、阴性双球菌、 氧化酶阳性）
涂片染色 生化反应 DNA检测
免疫荧光
淋球菌形态
致病性
传染方式：成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染 致病物质：菌毛 外膜蛋白PI：中性粒细胞受损 外膜蛋白PII：黏附 外膜蛋白PIII：阻抑抗体活性 IgA1酶:破坏粘膜局部抗体
所致疾病
男性——急性淋菌性前尿道炎 女性——淋菌性宫颈炎、尿道炎 初生婴儿——脓漏眼 发展： 男性——后尿道炎、前列腺炎、精囊炎 、附睾炎等 女性——子宫内膜炎、输卵管炎等
淋球菌对外环境变化颇为敏感，对寒冷和干 燥抵抗力很弱。因此，为了保证培养有足够 的成功率，取材后应立即接种，标本离体时 间越短越好。 培养的最适温度为35℃~37℃，超过38.5℃ 或低于30℃便生长不良。因此，孵育的温度 要恒定。 淋球菌为需氧菌，但最初从人体分离时，为 促进生长，需用5%二氧化碳环境培养。
鉴定试验
氧化酶试验 糖分解试验（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖） 30％过氧化氢试验
鉴定依据
形态染色典型：革兰阴性球菌 培养特性：光滑、湿润、易乳化菌落 生化反应：氧化酶阳性、仅分解葡萄糖 （麦芽糖、乳糖、蔗糖、果糖均不分解 ）
奈瑟菌属鉴定
生长
产酸
菌名
巧克力 或血琼 营养
脂 琼脂 (22℃) (35℃)
淋球菌培养条件
淋球菌的营养要求较复杂，所用的培养 基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的 各种因子。目前国内常用的是血液琼脂 或巧克力琼脂。 国外常用的培养基有Thayer-Martin(TM)培养基、NewYork City(NYC)培养基 和Martin-Lewis(ML)培养基等。
T-M培养基
后遗症：不育、不孕、异位妊娠
淋球菌感染
淋病是由奈瑟淋球菌所致的泌尿生殖系 统感染。 不仅可引起男性尿道炎、女性宫颈或尿 道炎，还可经血行播散引起菌血症。 临床表现因感染的人群不同，部位不同 而有差别
实验室鉴别淋球菌
直接涂片：取尿道或宫颈脓性分泌物涂 片，作革兰染色，镜下可见大量多形核 白细胞，细胞内可见数量不等的革兰阴 性双球菌。涂片对女性检出率低，有假 阴性，必要时应作培养。
淋球菌培养及鉴定
2014-10-31
什么是淋球菌？
淋球菌即淋病奈瑟菌，属于奈瑟菌属。
共同点：革兰阴性球菌、单个或成双排 列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛 触酶试验（+） 氧化酶试验（+） 不同点：对糖分解能力、硝酸盐还原能 力和DNA合成酶
淋球菌形态
淋球菌，是一种革兰阴性双球菌，呈卵 圆形或肾形，成对排列，直径约0．6—0 ．8~m，常位于多形核白细胞的胞浆内 ，慢性期则在细胞外。 生长适宜温度为37℃—38℃，淋菌不耐 热，干燥环境存活1—2小时，55℃5分钟 立即死亡，附着在衣裤和卧具上的淋菌 最多只能生存24小时，一般消毒剂易将 其杀死。
淋球菌培养关键
取材部位准确 女性病人标本：取宫颈内膜分泌物 男性病人标本：取尿道口脓性分泌物
培养基预温 立即接种 最好床边接种 合适的培养基 CO2培养
淋球菌鉴定
分泌物 直接涂片染色
初步报告
分离培养 可疑菌落
生长特性
涂片染色
生化反应
平板生长特性
经24h~48h的培养后，可形成圆形、凸起 、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落，似 露水珠，易乳化，直径为0.5mm ~1.0mm 。
还可用检测淋球菌DNA，直接免疫荧光 试验协助确诊。
淋球菌培养
淋球菌是淋病的病原菌，为实验室确诊 淋病提供依据。（培养法为确诊淋病的 金标准） 淋球菌药敏试验，测定药物抑菌或杀菌 能力，以便准确有效利用药敏进行治疗。
T-M培养基是在GC基础培养基中，加入血 红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘 菌素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌 增菌剂，使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌 菌落长得较大，在乎皿中几乎呈纯培养， 从而大大提高了由子宫颈、尿道，尤其是 咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。
淋球菌培养条件
平板生长形态
镜检形态
从菌落上取材作涂片，革兰染色后可见 到菌的大小及染色的深度有差异，排列 也不一致，呈典型革兰阴性双球菌。
镜检形态
镜检形态
来自泌尿生殖道符合初步鉴定标准的分 离株，一般可诊断为淋球菌，准确率达 98%。 对于菌落形态不典型的分离株，来自咽 部、眼睛或其他泌尿生殖道外部位的分 离株，应作确诊试验。
葡 萄 糖
麦 芽 糖
乳 糖
蔗 糖
硝酸盐还 DNA 巧克力平皿上特
果Leabharlann Baidu
原
酶
点
糖
- 淋病奈瑟菌 - + - - - -
-
- 光滑,灰白色,透明
- 脑膜炎奈瑟 菌
- ++ - - -
-
- 光滑,灰,无色,透 明,个别淡黄
+ 粘膜奈瑟菌 + + + - + +
+
-
黄绿,光滑
d 卡他布兰汉 + - - - - -
+
+ 灰白→棕色、易 乳化
分泌物
小
直接涂片染色
结
革兰阴性细 胞内双球菌
未见革兰阴性 细胞内双球菌
男性确诊 女性（其 他标本）
分泌物培养 （巧克力色平板）
可疑菌落（菌落形态、阴性双球菌、 氧化酶阳性）
涂片染色 生化反应 DNA检测
免疫荧光
淋球菌形态
致病性
传染方式：成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染 致病物质：菌毛 外膜蛋白PI：中性粒细胞受损 外膜蛋白PII：黏附 外膜蛋白PIII：阻抑抗体活性 IgA1酶:破坏粘膜局部抗体
所致疾病
男性——急性淋菌性前尿道炎 女性——淋菌性宫颈炎、尿道炎 初生婴儿——脓漏眼 发展： 男性——后尿道炎、前列腺炎、精囊炎 、附睾炎等 女性——子宫内膜炎、输卵管炎等
淋球菌对外环境变化颇为敏感，对寒冷和干 燥抵抗力很弱。因此，为了保证培养有足够 的成功率，取材后应立即接种，标本离体时 间越短越好。 培养的最适温度为35℃~37℃，超过38.5℃ 或低于30℃便生长不良。因此，孵育的温度 要恒定。 淋球菌为需氧菌，但最初从人体分离时，为 促进生长，需用5%二氧化碳环境培养。
鉴定试验
氧化酶试验 糖分解试验（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖） 30％过氧化氢试验
鉴定依据
形态染色典型：革兰阴性球菌 培养特性：光滑、湿润、易乳化菌落 生化反应：氧化酶阳性、仅分解葡萄糖 （麦芽糖、乳糖、蔗糖、果糖均不分解 ）
奈瑟菌属鉴定
生长
产酸
菌名
巧克力 或血琼 营养
脂 琼脂 (22℃) (35℃)
淋球菌培养条件
淋球菌的营养要求较复杂，所用的培养 基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的 各种因子。目前国内常用的是血液琼脂 或巧克力琼脂。 国外常用的培养基有Thayer-Martin(TM)培养基、NewYork City(NYC)培养基 和Martin-Lewis(ML)培养基等。
T-M培养基
后遗症：不育、不孕、异位妊娠
淋球菌感染
淋病是由奈瑟淋球菌所致的泌尿生殖系 统感染。 不仅可引起男性尿道炎、女性宫颈或尿 道炎，还可经血行播散引起菌血症。 临床表现因感染的人群不同，部位不同 而有差别
实验室鉴别淋球菌
直接涂片：取尿道或宫颈脓性分泌物涂 片，作革兰染色，镜下可见大量多形核 白细胞，细胞内可见数量不等的革兰阴 性双球菌。涂片对女性检出率低，有假 阴性，必要时应作培养。
淋球菌培养及鉴定
2014-10-31
什么是淋球菌？
淋球菌即淋病奈瑟菌，属于奈瑟菌属。
共同点：革兰阴性球菌、单个或成双排 列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛 触酶试验（+） 氧化酶试验（+） 不同点：对糖分解能力、硝酸盐还原能 力和DNA合成酶
淋球菌形态
淋球菌，是一种革兰阴性双球菌，呈卵 圆形或肾形，成对排列，直径约0．6—0 ．8~m，常位于多形核白细胞的胞浆内 ，慢性期则在细胞外。 生长适宜温度为37℃—38℃，淋菌不耐 热，干燥环境存活1—2小时，55℃5分钟 立即死亡，附着在衣裤和卧具上的淋菌 最多只能生存24小时，一般消毒剂易将 其杀死。
淋球菌培养关键
取材部位准确 女性病人标本：取宫颈内膜分泌物 男性病人标本：取尿道口脓性分泌物
培养基预温 立即接种 最好床边接种 合适的培养基 CO2培养
淋球菌鉴定
分泌物 直接涂片染色
初步报告
分离培养 可疑菌落
生长特性
涂片染色
生化反应
平板生长特性
经24h~48h的培养后，可形成圆形、凸起 、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落，似 露水珠，易乳化，直径为0.5mm ~1.0mm 。