淋球菌检查ppt课件
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(3)对无性交史女性可采集阴道处分泌物。 (4)直肠取材时,应将棉拭子插入肛门 2~3cm。 (5)检查淋球菌咽炎时,应从扁桃体及扁桃体 窝取材
2)标本取出后立即接种于培养基中,目前常 用加入多粘菌素的血液琼脂或巧克力培养基 3)初次分离培养应使用5%~10%CO2浊缸, 培养温度36℃为宜,24~48小时后观察
4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。 5)用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色 30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革 兰氏阴性菌被褪色而呈无色。 6)用蕃红染液复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈 紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳 性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
2.淋球菌培养 1)取材 (1)男性患者从尿道取材,用细小棉拭子伸入尿道 2~4cm,轻轻转动并停留10~20s后取出。 (2)女性患者在妇检床上取材,先用扩阴器暴露宫 颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另 取一拭子插入宫颈口内1~2 cm,转动并停留 10~20s后取出。
附:革兰氏染色法
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四 个步骤,具体操作方法是: (口诀1 1 半 半 ) 1)载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取 少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加 热以杀死菌种并使其粘附固定。 2)草酸铵结晶紫染1分钟。 3)自来水冲洗,去掉浮色。
5)女性宫颈分泌物、咽和直肠标本在涂片中由 于杂菌较多,故推荐用培养法 6)分离培养应采用加抗生素的选择性培养基 7)氧化酶试剂应为新鲜配制(现用现配),在 棕色瓶中避光保存 8)氧化酶遇铁也会变成红色,接种环应为非铁 丝所制
考试模拟题:女性淋病取材培养
项目 项目分 内容及评分标准 于妇检床上取材,充分暴露外阴 用灭菌生理盐水清洗外阴 操作流程 70 用扩阴器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物, 另取一拭子插入宫颈口内1~2 cm,转动并停留10~20s后取 出。 标本取出后立即接种于培养基中,放入36℃培养箱培养。 24~48小时后观察。 1.涂片时不要用力涂擦,厚薄要合适。 注意事项 30 2.培养取材时拭子伸入宫颈的深度要足够,并停留一段时间。 3.取材后应立即接种。 总分 100 满分 10 15 20 15 10 10 10 10 得分
4)淋球菌在多粘菌素的血液琼脂上经24~48h 培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、 半透明或灰白色的菌wk.baidu.com,边缘呈花瓣状,直 径0.5~1.0cm,用接种环触之有粘性,如继续 培养,菌落体积增大,表面粗糙,边缘皱缩。
3.淋球菌的鉴定 1)配制氧化酶试剂:0.5%~1%盐酸二甲基对苯 二铵水溶液; 2)将溶液滴加在可疑菌落上,观察颜色变化, 也可将试剂滴在一小张滤纸片上,然后挑取 可疑菌落与之接触,观察颜色变化。
淋球菌检查
【适应证】
淋病 【禁忌证】 无 【并发症】 无
【用物准备】 无菌生理盐水、细小棉拭子、扩阴器、载 玻片 ,培养皿,氧化酶试剂等
【操作流程】 1. 分泌物的涂片检查(男性) 1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。 2)戴无菌手套,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤 出脓液,用棉签拭子蘸取脓液,涂于载玻片上,自 然干燥后加热固定。 3)革兰氏染色 4)显微镜下观察,在多形核白细胞内发现革兰氏阴 性双球菌可明确诊断。
谢 谢!
3)菌落在接触氧化酶试剂15~20S出现红色, 保持30s以上,然后逐渐变成紫色,最后是黑 色,为氧化酶试验阳性,证实为淋球菌
【注意事项】 1)涂片时不要用力涂擦,厚薄要合适。 2)培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度要足 够,并停留一段时间。 3)取材后应立即接种。 4)对症状不典型的男性患者取材,最好是晨起 排尿前或排尿4h后。