免疫组化产品知识
免疫组化基本知识
免疫组织化学技术: 基本原理免疫组织化学技术是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,对组织或细胞内抗原或抗体物质定性和定位的组织化学技术。
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法,免疫铁蛋白法。
免疫金法及放射免疫自影法等。
用于病理诊断的主要有免疫荧光法和免疫酶法。
免疫荧光法是现代生物学和医学中广泛应用的方法之一,包括荧光抗体和荧光抗原技术,具有抗原抗体反应的特异性,染色技术的快速性,在细胞或组织上定位的准确性,以及荧光效应的灵敏性等优势。
但是,由于免疫荧光法必须具有荧光显微镜,荧光强度随时间的延长而逐渐消退,结果不易长期保存等缺点,在普及应用上受到一定限制,而逐渐被免疫酶法所取代。
一、免疫荧光法免疫荧光法的基本原理是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。
常用的荧光素有①异硫氰酸荧光素(fluorecein isothiocyante,FITC),为黄色、橙黄色或褐黄色结晶粉末,有两种异构体,易溶于水和酒精等溶剂。
分子量为389,最大吸收光谱为490~495,最大发射光谱为520~530urn,呈现明亮的黄绿色荧光,是最常用的标记抗体的荧光素。
②四甲基异氰酸罗达明(tetrametrylrhodarnine isothiocyante,TRITC)是一种紫红色粉末,较稳定,是罗达明(rhodamine)的衍生物。
最大吸收光谱550urn,最大发射光谱620urn呈橙红色荧光,与FITC 发射的黄绿色荧光对比鲜明,常用于双标记染色。
按照抗原抗体反应的结合步聚,免疫荧光法可分为以下三种。
1.直接法用荧光素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以检查出相应的抗原成分。
2.间接法先用特异性抗体与相应的抗原结合,洗去未结合的抗体,再用荧光素标记的抗特异性抗体(间接荧光抗体)与特异性抗体相结合,形成抗原一特异性抗体一间接荧光抗体的复合物。
HER2检测试剂盒(免疫组化法)说明书-Agilent
DAB 显色液。 5% 3, 3’-二氨联苯胺四盐酸显色剂溶液。
3×500mL
2×5
抗原修复液(包含清洗剂)(10×)。 0.1 mol/L柠檬酸盐缓冲液,1% 吐温-20,pH 5.7。
质控切片
P04605CN_01_SK00121-2CN/2017.02 2/26
P04605CN_01
10 × 试剂瓶
【检测原理】
HercepTest™检测试剂盒包含对常规处理的、石蜡包埋的样本进行两步法免疫组化染色 所需要的全部试剂。兔抗人 HER2 蛋白一抗孵育后,该试剂盒采用基于葡聚糖技术的即用型 显色试剂。该试剂包含羊抗兔二抗和偶联至葡聚糖多聚体骨架上的辣根过氧化酶分子。因此, 不需要再依次使用连接抗体,人免疫球蛋白显色试剂和胎牛血清之间的交叉反应也因为使用 固相吸附材料而消除。依次填加的色素原的酶转换,也使得显色反应发生于抗原所在部位。 标本需要复染和封片。反应结果在光学显微镜下观察。质控玻片包含 3 个福尔马林固定、石 蜡包埋的人类乳腺癌细胞系,染色强度分别在 0、1+、以及 3+,提供用于对染色结果进行 评估。这些细胞的染色强度与其所表达的受体密度一致。
该抗体着色为棕色 DAB 染色,定位于细胞膜。是一种半定量免疫组化分析方法,适用 于考虑接受曲妥单抗治疗患者的辅助评价方法。
人 HER2 基因(也称之为 ERBB2 或 NEU)编码蛋白通常称之为 HER2 或 p185HER2。 HER2 蛋白是一种膜受体酪氨酸激酶,与表皮生长因子受体(EGFR 或 HER1)具有同源性 (1-8)。HER2 蛋白通常由各种表皮细胞表达,是一种正常组织成分(8)。
外。该试剂盒所提供的材料足够用于最多 10 次免疫组化染色。
数量
HER2检测试剂盒(免疫组化法)说明书-Agilent
DAB 显色液。 5% 3, 3’-二氨联苯胺四盐酸显色剂溶液。
3×500mL
2×5
抗原修复液(包含清洗剂)(10×)。 0.1 mol/L柠檬酸盐缓冲液,1% 吐温-20,pH 5.7。
质控切片
P04605CN_01_SK00121-2CN/2017.02 2/26
P04605CN_01
10 × 试剂瓶
外。该试剂盒所提供的材料足够用于最多 10 次免疫组化染色。
数量
说明
1×22 mL
过氧化物酶阻断剂。 3%的过氧化氢,含有15 mmol/L的叠氮钠(NaN3)。
1×12 mL
1×22 mL
兔抗人HER2多克隆抗体。 即用型亲和分离的抗体,保存在0.05 mol/L Tris/HCl, 0.1 mol/L NaCl, 1%BSA, 酒 石黄(Tartrazin), 专利蓝V(Patentblue V), 15 mmol/L NaN3, pH 7.2溶液中。 免疫原:合成的HER2蛋白的C-末端(细胞质部分)片段部分,并偶联至血蓝蛋 白上。
2×22 mL
阴性质控试剂。
与HER2抗体等价蛋白浓度下的正常兔血清免疫球蛋白成分,保存在0.05 mol/L Tris/HCl, 0.1 mol/L NaCl, 15 mmol/L NaN3, pH 7.2,并含有1%BSA稳定剂的溶液 内。
1×1mL
DAB底物缓冲液。 50 mM咪唑, 1mM N, N'-乙基双 (2-[2-羟基苯基]甘氨酸) (EDHPA), 0.1%乙基苯基 聚乙二醇(Nonidet P-40), 0.02% 过氧化氢, 0.01% 氯化苯二甲烃铵, pH 7.5。
【检测原理】
HercepTest™检测试剂盒包含对常规处理的、石蜡包埋的样本进行两步法免疫组化染色 所需要的全部试剂。兔抗人 HER2 蛋白一抗孵育后,该试剂盒采用基于葡聚糖技术的即用型 显色试剂。该试剂包含羊抗兔二抗和偶联至葡聚糖多聚体骨架上的辣根过氧化酶分子。因此, 不需要再依次使用连接抗体,人免疫球蛋白显色试剂和胎牛血清之间的交叉反应也因为使用 固相吸附材料而消除。依次填加的色素原的酶转换,也使得显色反应发生于抗原所在部位。 标本需要复染和封片。反应结果在光学显微镜下观察。质控玻片包含 3 个福尔马林固定、石 蜡包埋的人类乳腺癌细胞系,染色强度分别在 0、1+、以及 3+,提供用于对染色结果进行 评估。这些细胞的染色强度与其所表达的受体密度一致。
免疫组化知识普及、二抗免疫组化试剂盒
R i s MultiVision n Polymer s 10min e
R i s LV Blue n 10min
s e
卖点:
• 针对兔、鼠来源一抗 • 微聚合物二抗混合液,明显降低显色背景n 10min
s
e
R i s Counterstain n (Optional) s e
s
e
R i s Rabbit antin mouse enhancer s 10min e
R
i s Anti-rabbit n Polymer s 10min
e
R
i s DAB n Quanto/Plus s 5min
e
R i s Counterstain n s e
卖点:
•用于人标本检测,增强鼠来源一抗的显色强度 •用于啮齿类标本的检测,对兔来源一抗有效
免疫组化知识普及、二抗免疫组 化试剂盒
优宁维缪娓
直接法
• 直接法是将酶(如HRP)标记在特异性一抗上,然后用酶 标记抗体直接与相应抗原特异性结合,形成抗原-抗体HRP复合物,最后用酶底物显色。
• 优点:简单、步骤少、省时、特异性高。 • 缺点:敏感性差
间接法
• 我这边的讲的间接法就是酶标记在二抗上, 再与一抗反应,然后进行显色反应。
试剂盒里包含 •Mayer's Modified Hematoxylin •Bluing Reagent •Mounting Medium
MultiVision Detection Kit
货号 HRP Systems TL-012-MHRA
TL-012-HARH
品名
试剂盒包含
体积
MV Polymer Mouse Red Rabbit Blue
免疫组化试剂
免疫组化免疫组化是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。
免疫组化试剂盒:Vector Laboratories公司VECTASTAIN@ ABC免疫组化试剂盒:Vector公司于1977年率先开发出了生物素-亲和素系统,该产品系列是检测方法上的重要革命。
其后,公司发展出ABC技术(Avidin : Biotinylated Enzyme Complex Technology,亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术),并建立了著名的VECTASTAIN®ABC系统,目前,该系统被视为最灵敏、最可靠与最有效的染色系统,并被广泛应用于免疫组织化学、免疫电镜、原位杂交与凝集素化学中。
ABC技术利用生物素和卵白素具有极高亲和性的生物学特征,将卵白素和生物素化辣根酶按照一定的比例混合,形成ABC复合物。
该法亦被称作三步法,第一步为biotin化二抗和一抗结合,第二步为avidin(亲和素,A液)和二抗上的biotin结合,第三步为HRP偶联的biotin(B液)和avidin结合,而HRP再催化底物显色完成染色。
试剂盒组份:2ml试剂A(Avidin DH溶液)2ml试剂B(生物素化的酶)1ml生物素化的二抗(1.5mg anti-IgG/0.5mg anti-IgM抗体/2.1mg通用抗体)3ml阻断血清其中standard试剂盒只含有试剂A和试剂BVECTASTAIN®ABC系列产品VECTASTAIN®ABC-HRP Kits(辣根过氧化物酶)最通用的系统,使用范围广VECTASTAIN®ABC-AP Kits(碱性磷酸酶)灵敏度较高,染色密度较低,适于形态学染色非常重要的组织VECTASTAIN®ABC-GO Kits(葡萄糖氧化酶)灵敏度较低,适用于组织内源性HRP或AP 含量比较高的组织,常与HRP或AP系统配合进行双染。
SMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书
SMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书【产品名称】通用名称:SMA抗体试剂(免疫组织化学)英文名称:FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Smooth Muscle Actin, Clone 1A4, Ready-to-Use (Dako Omnis)【包装规格】12mL【预期用途】体外诊断用途。
在常规染色(如:HE染色)基础上进行免疫组织化学染色,为医师提供诊断的辅助信息。
SMA抗体试剂/检测试剂盒(免疫组织化学),预期与Dako Omnis全自动免疫组化染色设备配合使用,进行免疫组化(IHC)分析。
该抗体可标记福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织中的平滑肌细胞、肌成纤维细胞和肌上皮细胞。
其结果有助于区分平滑肌瘤、平滑肌肉瘤(1)和多形性腺瘤(2)。
该抗体与其他相关抗体联合使用有助于疾病的鉴别诊断。
临床上解释任何染色或其缺失都需辅以使用恰当对照的形态学研究,并应由有资质的病理医师结合患者临床病史和其他诊断检测进行评价。
该抗体预期在使用非免疫组化法的常规病理学染色对肿瘤进行初步诊断的基础上使用。
【检验原理】胞质肌动蛋白属于细胞骨架蛋白微丝系统中的一员,是哺乳动物和鸟类中表达最保守的一类蛋白。
肌动蛋白包含六种亚型,其氨基酸序列不同,但分子量均为42 kDa。
这些亚型显示了超过90%的总体序列同源性,但在肽链N端的18个残基中仅有50-60%的同源性。
因此N端区域是区分不同亚型的主要抗原区域(3)。
在不同的肌肉组织中又有不同特异性的α亚型,如骨骼肌α-、心肌α-和平滑肌α-肌动蛋白(4)。
β-和γ-肌动蛋白可能存在于肌肉细胞以及身体其他大多数细胞类型中,包括非肌肉细胞(5)。
参考Dako“免疫组化染色一般说明”或“IHC程序检测系统说明”,以获取以下信息:程序原理、所需未提供材料、储存、标本制备、染色程序、质量控制、故障排除、染色判读和一般局限性。
【主要组成成份】1.提供的试剂即用型单克隆小鼠抗体以液体形式提供,缓冲液中含有稳定蛋白和0.015 mol/L的叠氮钠。
(整理)免疫组化知识
免疫组织化免疫组织化学免疫组织化学(Immunohistochemistry)又称免疫细胞化学。
它是组织化学的分支,它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术。
1.发展简史——1941年Coons首先用荧光素标记抗体一检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。
60年代Nakane建立酶标抗体技术铁蛋白标记Ab技术。
——70年代Stemberger改良上述技术,建立辣根过氧化物酶——抗体过氧化物酶(PAP)技术,使免疫细胞化学得到广泛应用。
——80年代Hsu等建立了抗生物素一生素(ABC)法之后,免疫金一银染色法、半抗原标记法、免疫电镜技术相继问世。
——90年代分子杂交技术、原位杂交技术、免疫细胞化学分类方法迅速发展。
——2000年各种免疫组化技术更加成熟,使免疫组化技术成为当今生物医学中形态、功能代谢综合研究的一项有力工具。
其应用范围深达医学各个学科,是目前生命科学工作者应该掌握的基本技术之一。
2.免疫组织化学的技术分类(1)根据染色方式分成:①贴片染色;②漂浮染色。
(2)根据Ag—Ab结合方式分成:①直接法;②间接法;③多层法。
(3)按标记物的性质分成:①免疫荧光技术(免疫荧光法);②免疫酶技术(酶标抗体法、桥法、PAD法、ABC法);③免疫金属技术(免疫铁蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法)。
3.标记物(1)必要性:组织细胞内Ag—Ab结合反应一般是不可见的,若在镜下检测,则必须具有可视性标记物。
(2)常用标记物①荧光素:最常用的是异硫一氰酸荧光素(Fluoresceinisothiocyanate,FITC)荧光显微镜下呈绿色荧光四乙基罗达明(rho—damineRB200)——荧光显微镜下发橙红色荧光;②酶:辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶。
③生物素:(Biotin)④铁蛋白金等:主要应用于免疫电镜。
其他:如同位素(因涉及污染和防护难一般不用)4.应用凡是组织细胞内具有抗原性的物质,如肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等等均可用免疫组织化学方法显示,因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。
地高辛染色液说明书 一类
地高辛染色液说明书一类地高辛染色液是一种常用的染色试剂,常用于组织学研究中的免疫组化染色实验。
下面我将从多个角度全面介绍地高辛染色液的说明书内容。
1. 产品简介:地高辛染色液是一种含有地高辛标记的二抗试剂,用于检测目标蛋白在组织切片中的表达情况。
它可以与免疫组织切片中的靶蛋白发生特异性结合,并通过染色反应显示出目标蛋白的位置和分布。
2. 试剂成分:地高辛染色液主要由以下成分组成:地高辛标记的二抗,这是地高辛染色液的核心成分,通过特异性结合目标蛋白进行染色。
缓冲液,提供适宜的酸碱度和离子强度,维持染色反应的稳定性。
阻断剂,用于阻断非特异性结合,减少背景信号。
保存剂,保护试剂的稳定性和活性。
3. 使用方法:地高辛染色液的使用方法如下:准备组织切片,将待染色的组织切片固定在载玻片上,并进行适当的抗原修复和膜通透处理。
涂抹试剂,将地高辛染色液均匀涂抹在组织切片上,确保完全覆盖。
孵育反应,根据实验要求,在适当的温度和时间条件下孵育反应,使地高辛与目标蛋白发生特异性结合。
洗涤步骤,使用缓冲液或洗涤液进行适当的洗涤步骤,去除非特异性结合的试剂。
显色和显微观察,根据实验需要,使用适当的显色试剂进行染色反应,并在显微镜下观察和记录结果。
4. 注意事项:在使用地高辛染色液时,需要注意以下事项:试剂存储,请按照说明书中的建议存储试剂,避免温度过高或过低,避免阳光直射。
使用前检查,使用前请检查试剂的外观和标记,确保没有异常。
防止污染,使用过程中,请使用干净的工具和试剂盒,避免交叉污染。
实验条件优化,根据不同的样本和实验要求,可能需要优化反应条件,包括孵育温度、时间和洗涤步骤等。
总结:地高辛染色液是一种常用的免疫组织化学染色试剂,通过特异性结合目标蛋白进行染色反应。
在使用时,需要按照说明书中的方法和注意事项进行操作,以获得准确可靠的实验结果。
希望以上内容能够对你有所帮助。
Mayer'苏木素染液(免疫组化)使用说明及注意事项
Mayer'苏木素染液(免疫组化)使用说明及注意事项
货号:G1080
规格:10mL/100mL
保存:室温避光保存,有效期至少一年。
产品简介:
Mayer'苏木素染液(免疫组化)适合免疫组化中组织切片的复染,染色后细胞核呈蓝色。
本产品为工作液,可直接使用。
染色液可重复使用多次,但染色效果会逐渐降低。
使用方法:
1、免疫组化显色后,将组织切片浸入苏木素染色液,也可以直接滴加到样本上染色
5-10分钟(深染),或0.5-2分钟(浅染)。
2、浸自来水中冲洗去除多余的染色液。
3、颜色过深可以在分化液(1%盐酸)中分化几秒钟,再用氨水(0.25%)或PBS(pH7.4)
冲洗返蓝,镜下观察结果。
4、染色、分化、返蓝时间都需要预实验优化至最佳,分化和返蓝步骤可选。
5、根据显色液的种类,用水性封片剂直接封片或梯度酒精脱水,二甲苯透明后用中性
树胶封片。
注意事项:
1、第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
2、室温避光保存,2-8℃保存最佳,至少一年有效。
3、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
免疫组织化学染色 知识点
免疫组织化学染色知识点
免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,简称IHC)是在组织切片或细胞制片的基础上,通过利用特异性抗体与细胞或组织中特定分子间的特异性结合反应,以染色或标记方式来检测目标抗原的一种检测技术。
以下是免疫组织化学染色的一些基本知识点:
1. 抗体选择:根据实验目的选择合适的抗体,一般选择单克隆或多克隆抗体。
抗体可以是来自同种或异种动物,也可以是人源化的。
2. 组织或细胞预处理:包括固定、脱脂、脱水和切片等步骤,目的是保持组织或细胞的形态和结构完整,同时提高抗体的进入性。
3. 抗原解表:染色前需进行抗原解表处理,去除组织或细胞中的内源性酶等物质,以提高抗体的结合效率。
4. 特异性抗体结合:将经过解表处理的组织或细胞与选择的特异性抗体反应,抗体与目标抗原结合形成免疫复合物。
5. 二抗结合:特异性抗体结合后,使用与该抗体结合的二抗(常为抗种属免疫球蛋白)进行结合,放大信号。
6. 染色反应:根据具体实验的需要,可以选择不同的染色反应方法。
常用的染色方法有酶标法(如辣根过氧化物酶染色法,碱性磷酸酶染色法等)和免疫荧光染色法。
7. 结果观察和分析:观察染色结果,可以通过显微镜观察染色位置和程度,分析目标抗原在组织或细胞中的分布情况。
8. 数据分析和结果解读:根据染色结果,进行数据统计和分析,并结合实验设计和背景知识进行结果解读和推断。
总结:免疫组织化学染色是一种用于检测组织或细胞中特定抗原的技术,通过选择合适的抗体、预处理样品、特异性抗体结合、染色反应等步骤,可以获得目标抗原的位置和分布情况,并通过数据分析和结果解读来获取有效的实验结果。
immunoway cd141 免疫组化检测试剂盒 说明书
CD141免疫组化检测试剂盒【产品货号】 IHCM6830【产品名称】1、通用名称:CD141 mouse mAb ABT145免疫组化检测试剂盒2、英文名称:CD141 High Sensitive and Rapid Immunohistochemical Kit【主要组成成份】 编号名称规格 保存试剂 9A 脱蜡修复二合一溶液20X 60 mL 2~8°C 试剂 B 过氧化物酶封闭缓冲液 3 mL 2~8°C 试剂 C HRP 多聚合抗兔/鼠二抗 3 mL 2~8°C 试剂 D 超敏DAB 浓缩液20X 150μL 2~8°C 试剂 E 超敏DAB 缓冲液 3 mL 2~8°C 试剂 F 苏木精染色缓冲液 3 mL 2~8°C 试剂 G即用型抗体溶液3 mL2~8°C【预期用途】免疫组织化学染色。
【作用原理】超敏快速免疫组化检测试剂盒,摆脱传统免疫组化实验条件对实验的限制和束缚,无需通风厨和传统的脱蜡修复缸,将传统的三次二甲苯脱蜡、三到五次梯度乙醇水化和抗原修复整合成一个溶液,有效的缩短了操作时间,简化了繁琐的操作步骤,同时,减少了操作中的变量,提高了染色的稳定性。
脱蜡抗原修复二合一试剂应用新的环保技术,不仅把对身体的危害降到了最低,而且对环境不会造成任何污染。
免疫组化实验用到的试剂一站式配齐,具有高灵敏度的 HRP 多聚合物二抗(Anti-Rabbit/Mouse)和 D AB 显色液配套使用,使得该试剂盒具有操作方便、快速、灵敏度高等特点。
【包装规格】3mL 装。
标准可染色30张切片。
【储存条件及有效期】1、储存要求:2℃~8℃密封保存。
2、有效期:一年。
【适用仪器】 手工操作【自备材料】 1、 合适的加热装置,染缸,移液器,盖玻片等常用耗材2、 无水酒精3、 中性树胶4、 PBS 、纯水等常用试剂 【样本要求】新鲜活检或外科样本组织,甲醛固定,固定时间8-24小时要求取材、脱水、石蜡包埋并制成蜡块。
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则免疫组化类诊断试剂产品是一种重要的医疗诊断工具,广泛应用于临床诊断、疾病预防和治疗等领域。
为了规范免疫组化类诊断试剂产品的分类和管理,制定了一系列的指导原则。
一、免疫组化类诊断试剂产品的定义免疫组化类诊断试剂产品是指通过免疫学原理,利用抗体与抗原的特异性结合作用,对生物样本中的特定分子进行检测和定量的试剂产品。
二、免疫组化类诊断试剂产品的分类根据免疫组化类诊断试剂产品的不同特点和用途,可以将其分为以下几类:1. 抗体试剂:包括单克隆和多克隆抗体试剂,用于检测特定抗原或蛋白质。
2. 标记试剂:包括酶标记试剂、荧光标记试剂、放射性标记试剂等,用于标记抗体或抗原,以便于检测和定量。
3. 控制试剂:包括阳性对照、阴性对照、内标和外标等,用于检测试剂的准确性和可靠性。
4. 辅助试剂:包括缓冲液、洗涤液、稀释液等,用于制备和处理样本。
三、免疫组化类诊断试剂产品的管理为了确保免疫组化类诊断试剂产品的质量和安全性,需要进行严格的管理和监管。
具体措施包括:1. 产品注册:免疫组化类诊断试剂产品需要进行注册,获得批准后才能上市销售。
2. 质量控制:生产企业需要建立质量管理体系,确保产品的质量和稳定性。
3. 标签标识:产品标签需要标注产品名称、批号、生产日期、有效期等信息,以便于追溯和管理。
4. 储存运输:产品需要储存在干燥、阴凉、避光的环境中,运输过程中需要避免震动和高温。
5. 应用范围:产品应用范围需要明确,不能用于未经批准的用途。
综上所述,免疫组化类诊断试剂产品是一种重要的医疗诊断工具,需要进行严格的分类和管理。
只有确保产品的质量和安全性,才能更好地服务于临床诊断和治疗。
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则免疫组化类诊断试剂是临床诊断的重要工具之一,广泛应用于疾病的诊断、分型和预后评估等方面。
为了规范和统一免疫组化类诊断试剂的分类,制定了一系列的指导原则。
本文将介绍关于免疫组化类诊断试剂产品分类界定的指导原则,并分享对这一主题的观点和理解。
一、免疫组化类诊断试剂的定义和作用免疫组化类诊断试剂是指利用免疫反应原理和技术,对疾病相关分子或细胞进行检测和诊断的试剂。
它能够通过标记免疫试剂与待检测目标结合,从而发现、定量或定位特定分子或细胞,为临床诊断提供重要依据。
二、免疫组化类诊断试剂产品分类的基本原则1. 根据试剂检测的靶点分子或细胞进行分类。
免疫组化类诊断试剂可以针对不同的靶点分子或细胞进行检测,如蛋白质、酶、细胞膜分子等。
根据不同的靶点,可以将试剂分为抗体试剂、标记物试剂、底物试剂等不同类型。
2. 根据试剂的用途和应用进行分类。
免疫组化类诊断试剂可以用于不同的临床检测目的,如肿瘤诊断、感染性疾病诊断等。
根据应用领域的不同,可以将试剂分为免疫组化肿瘤标志物试剂、免疫组化感染性疾病诊断试剂等。
3. 根据试剂的技术原理进行分类。
免疫组化类诊断试剂可以采用不同的技术原理进行检测,如免疫组化反应、免疫组化染色等。
根据技术原理的不同,可以将试剂分为免疫组化免疫反应试剂、免疫组化染色试剂等。
三、免疫组化类诊断试剂产品分类的回顾性总结通过对免疫组化类诊断试剂产品分类的研究和实践,总结以下几点:1. 免疫组化类诊断试剂的分类应该考虑到临床实际需求和应用的目的,以便为医生提供准确、可靠的诊断结果。
2. 针对不同的靶点分子或细胞,选择适当的试剂类型和技术原理进行分类,有利于提高诊断的敏感度和特异性。
3. 在分类过程中,应该充分考虑以从简到繁、由浅入深的方式进行,以帮助医生和研究人员更好地理解和应用免疫组化类诊断试剂。
4. 免疫组化类诊断试剂的分类应该与其他临床检测方法相衔接,形成有机的整体,为综合诊断和治疗提供更全面、准确的信息。
EMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书
EMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书【产品名称】通用名称:EMA抗体试剂(免疫组织化学)英文名称:FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Epithelial Membrane Antigen, Clone E29, Ready-to-Use (Link)【包装规格】40-60测试/盒【预期用途】体外诊断用途。
在常规染色(如:HE染色)基础上进行免疫组织化学染色,为医师提供诊断的辅助信息。
EMA抗体试剂(免疫组织化学),预期与Autostainer Link免疫组化染色设备配合使用,进行免疫组化(IHC)分析。
该抗体有助于鉴别多种组织中的上皮细胞,可辅助肿瘤上皮细胞分类(1)。
该抗体与其他相关抗体联合使用有助于疾病的鉴别诊断。
临床上解释任何染色或其缺失都需辅以使用恰当对照的形态学研究,并应由有资质的病理医师结合患者临床病史和其他诊断检测进行评价。
该抗体预期在使用非免疫组化法的常规病理学染色对肿瘤进行初步诊断的基础上使用。
【检验原理】EMA属于人乳脂肪球(HMFG)蛋白家族成员。
HMFG是一种复杂的乳腺上皮细胞分泌产物,EMA可以从氯仿和甲醇萃取后的脱脂牛奶水相中回收富集。
除了乳汁,这些蛋白质还存在于各种正常和肿瘤类型的上皮细胞中。
EMA在分泌性上皮细胞膜上也有表达(2)。
针对EMA已有多种单克隆和多克隆抗血清,抗EMA抗体与其他抗体联合使用也在大量肿瘤病变中有广泛研究(2,3)。
参考Dako“免疫组化染色通用说明”或“IHC程序检测系统说明”,以获取以下信息:程序原理;自备材料;储存;标本制备;染色程序;质量控制;故障排除;染色判读;一般局限性。
【主要组成成份】1.提供的试剂即用型单克隆小鼠抗体以液体形式提供,缓冲液中含有稳定蛋白和0.015 mol/L的叠氮钠。
克隆:E29 同型:Ig2a,kappa。
2.免疫原人乳脂肪球膜(1,4)。
3.特异性在免疫原的蛋白免疫印迹分析中,该抗体标记条带的分子量为265-400 kDa(1)。
徕卡全自动免疫组化染色机和试剂介绍
Leica Bond-Max System
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主要参数
• • • • • 尺寸:775*760*703mm 批次大小:30片 3排玻片架,每排10片,完全独立运行 4排试剂架,每排9个 剂量:100ul, 150ul
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3
基本构成
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4
全流程全自动 特性一:
IHC ISH
烤 片 脱 蜡 抗原修复 染 色 复染
烤 片 脱 蜡 免 疫 杂 交 染 色 复 染
对比
DAKO:半自动,抗原修复和染色步骤分别在 两台机器完成,需要有人操作。
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技术
ROCHE:油膜技术,需额外 清洗,影响染色
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特性四:环保设计
分离收集有害废液和无害废液,减少 处理成本,提高安全性
对比
ROCHE:有害和无害废液集合收集,安全性 大大降低
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(OCR)光学字符识别功能
• 标签易被人工及机器读取 • 故障保护 • 甚至可辨认手写标签
优越性 NCL-CK7-RN7染色效果高于Dako OV-TL 12/30 稀释度(1:160)优于Dako OV-TL 12/30 (1:50-1:100)
浸润性乳腺小叶癌
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20
细胞角蛋白------CK20
优越性 实验表明ER(6F11)敏感性比Dako(1D5)高5%. ER(6F11)来源于功能性ER蛋白的N-末端, Labvision(SP1)来源于ER蛋白的C-末端,SP1可能造 成ER检测的水平过高,假阳性率高,因此6F11克 隆的抗体敏感性更高。
免疫组化
常用荧光素
异硫氰酸荧光素 FITC
吸收光谱:490-495 发射光谱:520-530
明亮的黄绿色光
四甲基异氰酸罗达明 TRITC
最大吸收光谱:550 最大发射光谱:620 橙红色光
免疫荧光显微技术
Substrate-chromogen solution
Fluorochrome-conjugated Secondary Antibody (anti species X) Primary Antibody (species X) Antigen expressing Cell
是用荧光素(常用的有异硫氰酸荧光素, FITC) 与抗体连接成荧光抗体,再与待测标本 的抗原反应,,置荧光显微镜下观察,抗原抗 体复合物散发出荧光,借此对标本中的抗原作 鉴定和定位。 包括直接荧光法、间接荧光法和补体法。
直接荧光法:将荧光素直接标记抗体作标本染
色。该法的优点是特异性强,但其缺点是每检 测一种抗原必须制备相应的荧光抗体。 间接荧光法:用一抗与标本中的抗原结合,再 用荧光素标记的二抗染色。该法的优点是敏感 性比直接法高,制备一种荧光素标记的二抗可 用于多种抗原的检测,但非特异性荧光亦会增 加。 补体结合免疫荧光法:此法是在间接法的第一 步抗原—抗体反应时加入补体,使之与抗原— —抗体复合物结合;再用荧光素标记的抗C3抗 体进行示踪。
临床应用
1.感染性疾病
各种病原体感染后,体内能检出特异抗体或抗原,因此抗 原抗体反应广泛用于感染的确定传染病的诊断、传染后免疫力 的确定等。
2.免疫缺陷病
免疫细胞的鉴定、计数以及功能试验,可帮助免疫细胞缺 陷的诊断。
3.免疫学监测
感染性疾病的免疫学监测有助于疾病的转归与预后判定, 如监测乙型肝炎病毒抗原与抗体的消长有助于乙型肝炎的预后 判定,HIV感染者的CD4+细胞计数有助于艾滋病的诊断、病情 分析、疗效判定。
MUM1抗体试剂免疫组织化学说明书
MUM1抗体试剂(免疫组织化学)说明书【产品名称】通用名称MUM1抗体试剂(免疫组织化学)英文名称:FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human MUM1 Protein, Clone MUM1p, Ready-to-Use (Dako Omnis)【包装规格】12mL【预期用途】体外诊断用途。
在常规染色(如:HE染色)基础上进行免疫组织化学染色,为医师提供诊断的辅助信息。
MUM1抗体试剂(免疫组织化学),预期与Dako Omnis全自动免疫组化染色系统配合用于免疫组化(IHC)分析。
该抗体可标记MUM1蛋白,MUM1蛋白表达于生发中心明区的B细胞亚群(代表B细胞分化晚期)、浆细胞和活化T细胞。
其结果可辅助血液淋巴肿瘤的分类以及淋巴系统恶性肿瘤的亚型分类(1, 2)。
临床上解释任何染色或其缺失都应辅以使用适当对照的形态学研究,并应由有资质的病理学家结合患者临床病史和其他诊断检测进行评价。
该抗体预期在使用非免疫组化法的常规病理学染色对肿瘤进行初步诊断的基础上使用。
【检验原理】抗原别名:IRF4(干扰素调节因子4)、ICSAT(活化T细胞干扰素保守序列结合蛋白)和PIP(PU.1相关元件)(3)MUM1蛋白(多发性骨髓瘤癌基因-1)是一种由MUM1基因编码的50 kDa蛋白质,在多发性骨髓瘤(MM)中观察到由于一种罕见的t(6;14)(p25;q32)染色体易位,导致MUM1基因与Ig重链基因座并置(4, 5)。
Mum1-蛋白缺陷小鼠无法形成生发中心、脾和固有层缺乏浆细胞,因而血清免疫球蛋白水平显著降低,难以产生可检测的抗体应答、T淋巴细胞毒性反应或抗肿瘤反应(1)。
MUM1蛋白的表达并不依赖于t(6;14)(p25;q32)易位,可在多发性骨髓瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和活化T细胞中检测到。
MUM1蛋白表达对浆细胞分化无特异性(1-3, 6)。
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显微镜及数字病理扫描系统产品知识要点:
1、新型Leica DM显微镜是针对:生物、医学和临床实验室而设计的,所有型号都可装备荧光,DM显微镜系列可以为专门的实验室应用而单独定制。
2、Leica DM显微镜特点及优势:
(1)高度可调的聚焦旋钮;(2)真正的对称操作;(3)可调式镜筒;(4)快速从右手换到左手操作;(5)独一无二的超硬台面;(6)新型样夹;(7)人性化调焦旋钮;(8)舒适的Ergo提升装置;(9)灯泡更换简单易行;(10)智能化、创新性、等等。
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3、Leica Aperio Versa全能数字切片扫描仪分为全玻片成像(WSI)和单视野成像(FOV)两种扫描模式。
4、eica Aperio Versa全能数字切片扫描仪的双CCD系统可提供高精度荧光扫描和高性能明场扫描。
5、FISH 、免疫荧光、TMA 是Leica Aperio Versa全能数字切片扫描仪用户使用最多的应用。
ASP300s脱水机特点优势:
1,脱水质量有保证:独特的压力/真空、加温、2种搅拌方式促进试剂渗透;2,试剂成本控制:试剂管理系统可优化试剂使用;
3,安全性保护:独立的排放功能,活性炭滤网保护操作者。
4,互相独立的液体和气体通路,避免管道堵塞。
5,试剂缸盖独特设计可取下清洗,减少试剂交叉污染。
6,有效的石蜡清洁程序。
7,废气液化由专用收集瓶收集。
FISH的概念:
即荧光原位杂交,通常指探针的荧光标记的DNA序列,用于检测和定位染色体或核上的特定DNA序列。
FISH在临床上的应用有那些?
1,可用于白血病淋巴瘤的诊断鉴别;
2,常规染色体的检测;
3,染色体遗传性疾病的诊断
4,膀胱癌的早期辅助诊断和后期的肿瘤复发监测
5,检测与肿瘤侵袭性相关的肿瘤抑制基因缺失或重排。