红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程 (2)
红细胞ABO 血型(反定型)鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO 血型在临床上同型输注,确保临床输血安全、有效,根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用试管法检测红细胞ABO 血型(反定型)。
三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体,结合正定型结果判断ABO血型。
四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。
五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:人ABO血型反定型用红细胞试剂盒;2、试剂生产厂家:上海血液生物医药有限公司;3、批准文号:国药准字S2*******;4、包装规格:A1、B、O试剂各1支,10ml/支;5、贮藏条件;2-8℃保存,不能冰冻。
6、有效期:自检定合格之日起2个月;7、试剂性能:外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。
七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支,分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞,用滴管分别加入受检者血清1滴于试管,再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。
2、,摇动试管,立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。
3.先观察是否有溶血,溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染;将试管轻轻摇晃,使沉于管底的红细胞浮起,观察细胞扣情况,并判断凝集强度(见下表)。
如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。
红细胞ABO血型(反定型)结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞仍呈分散混合凝集外观分布溶血,上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块,血清清晰透明4+红细胞凝集成数小块,血清尚清晰3+红细胞凝块分散成许多小块,周围可见到游离红细胞2+肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞1+镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细±胞镜下未见凝集,红细胞均匀分布阴性4、ABO 血型(反定型)表现型反应格局表九、质量控制 1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。
S008红细胞ABO血型正定型RhD鉴定标准化操作规程
.资料Word.红细胞ABO血型(正定型)、RhD鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型(正定型)与RhD血型在临床上同型输注,确保临床输血安全、有效,根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用微柱凝胶凝集试验检测红细胞ABO血型(正定型)与RhD血型。
三、原理将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。
微柱检测系统的上端为反应室,将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中,检测卡从左向右顺序第一支至第三支和第四支至第六支微柱凝集检测管凝胶中均分别充以抗A、抗B、抗D单克隆抗体IgM试剂。
微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。
凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间,反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙,沉积在微柱凝集检测管的底部。
四、适用范围适用于输血前患者红细胞ABO血型(正定型)确认与RhD血型复查。
出五、仪器设备普通离心机;血型血清学多用离心机;37℃免疫微柱孵育器;资料Word.六、试剂1、试剂名称:ABO、RhD血型检测卡(微柱凝胶);2、试剂生产厂家:长春博迅生物技术有限责任公司;3、批准文号:国药准字S2*******;4、包装规格:聚丙烯卡12卡×2检测人份/盒;5、贮藏条件;18-25℃避光保存。
6、有效期:自检定合格之日起12个月;7、试剂单克隆抗体效价:抗A效价≥128;抗B效价≥128;抗D效价≥64;特异性试验合格。
七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、红细胞稀释悬液的制备:采用塑料试管将采集的标本配制成0.5~0.8%红细胞生理盐水悬液(10ul压积红细胞加入1.2ml生理盐水中)。
血型测定实验操作步骤详细说明
一、实验目的1. 掌握血型测定的原理。
2. 熟悉血型测定的操作步骤。
3. 能够正确识别并鉴定血型。
二、实验原理血型是指红细胞膜上特异性抗原的类型。
根据红细胞膜表面有无A抗原和(或)B 抗原,将血型分为A、B、AB、O型4种。
血型测定主要利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定ABO血型。
正定型:用标准抗A抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或(和)B抗原。
反定型:用标准的A型、B型细胞来测定血清中有无抗A和(或)抗B。
三、实验材料1. 受检者血液标本2. A型标准红细胞悬液3. B型标准红细胞悬液4. AB型标准红细胞悬液5. O型标准红细胞悬液6. 抗A血清7. 抗B血清8. 生理盐水9. 玻片10. 吸管11. 滴管12. 移液器13. 显微镜14. 移液器吸头15. 洗耳球16. 实验记录表四、实验步骤1. 准备工作(1)将A型、B型、AB型、O型标准红细胞悬液和抗A血清、抗B血清分别置于试管中,标记清楚。
(2)用生理盐水将受检者血液标本稀释至适当浓度。
2. 正定型测定(1)取清洁玻片1张,用蜡笔划成方格,标明抗A、抗B。
(2)分别滴抗A血清、抗B血清在相应的方格内。
(3)用移液器吸取受检者红细胞悬液,滴1滴在抗A血清方格内,混匀。
(4)用移液器吸取抗B血清,滴1滴在抗B血清方格内,混匀。
(5)轻轻转动玻片,使血清与细胞充分混匀,连续约1-5分钟。
(6)肉眼观察有无凝集反应,也可以用低倍显微镜观察结果。
3. 反定型测定(1)取清洁玻片1张,用蜡笔划成方格,标明A型、B型。
(2)分别滴A型标准红细胞悬液、B型标准红细胞悬液在相应的方格内。
(3)用移液器吸取受检者血清,滴1滴在A型标准红细胞悬液方格内,混匀。
(4)用移液器吸取受检者血清,滴1滴在B型标准红细胞悬液方格内,混匀。
(5)轻轻转动玻片,使血清与细胞充分混匀,连续约1-5分钟。
(6)肉眼观察有无凝集反应,也可以用低倍显微镜观察结果。
血型鉴定标准操作规程
血型鉴定标准操作规程1.目的为规范各血型系统血型鉴定的技术操作,保证鉴定结果准确及临床输血安全有效,特制定本规程。
2.适用范围适用于输血科(血库)进行各血型系统血型鉴定。
3.职责输血科(血库)技术人员负责各血型系统血型鉴定。
4.所需设备和试剂设备普通离心机,血型血清学专用离心机,普通显微镜。
试剂各血型系统单克隆血型试剂,3%-5%的A、B、O型试剂红细胞。
5.检测环境条件室温应控制在18-27℃,湿度应保持30%-70%。
6.项目及方法ABO血型鉴定ABO血型鉴定原理红细胞上具有A抗原,而血清中含有抗B抗体者为A型;红细胞上有B抗原,而血清中含有抗A抗体者为B型;红细胞上没有A和B抗原,而血清中含有抗A、B抗体者为O 型;红细胞上有A和B抗原,而血清中没有相应抗体者为AB型,见表1。
表1.试剂血清、红细胞鉴定血型(一)玻板法实验操作(1)洁静的玻板,用记号笔在正定型一侧注明抗A、抗B、抗A(B),反定型一侧孔中注明A细胞、B细胞、O细胞。
(2)在正定型一侧孔中先加入相应试剂血清1滴,再加入待检者20%红细胞悬液1滴;在反定型一侧先加入待检者血清2滴,再加入相应20%试剂红细胞(为3-5人份的混合红细胞)1滴。
(3)摇动玻板数次,5min后观察凝集现象,判断并报告检测结果。
如有怀疑者,须做试管法对照。
(4)报告方式:通过计算机信息系统发布正式血型结果。
注意事项(1)操作者必须认真细致,严格查对,准确报告血型结果。
(2)鉴定血型时,室内温度宜在18-27℃,以免产生假阳性。
遇有可疑冷凝集时 (1)先将玻板放在日光灯处加热3-5分钟后观察 (2)将待检者红细胞用37℃生理盐水洗涤2-3次后,再做血型鉴定。
(3)抗A、抗B、抗A(B)试剂血清,效价不低于256,亲和力在15s以内出现凝集,3min 时凝块不小于1mm2,冷凝集等效价在1:4以下。
(4)应另备有一套合格的试剂的血清作对照。
(5)所有待检者的血型均应做正、反定型,防止误定血型。
血型抗体效价测定标准操作规程(sop)
血型抗体效价测定标准操作规程一、目的为规范红细胞血型抗体效价测定的技术操作,保证结果的准确性从而为临床疾病的诊断和治疗做出正确的评估。
二、适用范围输血科负责红细胞血型抗体效价测定的技术人员。
三、原理:将受检血清(如检测IgG类红细胞血型抗体效价须先用巯基试剂裂解其中的IgM型抗体)经连续倍比稀释后与表达目标抗体对应的抗原红细胞试剂反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,同时根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
四、步骤和方法(1)盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价1、排试管12支,编号,以第1支试管为原倍进行生理盐水倍比稀释受检血清,第12支试管为2048倍,稀释后容积定为100微升。
2、分别往12支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升,轻摇混匀。
3、用专用离心机120g离心1min,观察有无溶血和凝集情况。
4、结果判断:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数为目标抗体的效价,再根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
(2)IgG类红细胞血型抗体效价测定1、取200微升受检血清加入0.2mol/L二巯基乙醇(2—Me)应用液200微升混匀,将试管口密封,37℃孵育30min。
2、排11支试管,编号,进行生理盐水倍比稀释2—Me处理过的血清。
由于第1支已经进行了稀释,所以第11支试管为2048倍,稀释后容积定为100微升。
3、凝聚胺法检测时,往11支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升,轻摇混匀,按照凝聚胺法操作步骤进行试验。
4、抗球蛋白法测定时,往11支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升,轻摇混匀后置37℃孵育30min后,按照抗球蛋白法操作步骤进行试验。
5、结果判断:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数为目标抗体的效价,再根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
(1)评分标准根据稀释血清各管凝集强度进行评分,凝集强度与评分标准为:4+为12分,3+为10分,2+为8分,1+为5分,+/-或W+为2分,阴性为0分,稀释各管评分之和为积分。
输血科红细胞血型抗体筛查标准操作规程
输血科红细胞血型抗体筛查标准操作规程红细胞血型抗体筛查标准操作程序红细胞血型抗体检查适用于下列情况:1.ABO血型鉴定发现受检者血清中有ABO血型以外的抗体时;2.供血者血清抗体筛检;3.输血前受血者血清抗体检查;4.输血后溶血性输血反应疑为由同种抗体引起时;5.孕妇血清的抗体检查;6.新生儿溶血病婴儿血液中抗体检查;7.直接抗人球蛋白试验阳性红细胞上抗体检查。
筛查方法一、盐水介质法:【方法原理】有些抗体能凝集盐水混悬的红细胞。
这些抗体通常是IgM类抗体,其中许多在22℃下反应最好。
在室温下有活性而在37℃无活性的抗体是没有什么临床意义的。
对患者或供血者的血样不需要用这种方法。
在37℃下也有活性的样本(如抗Kell,抗D)是有临床意义的,而这些抗体通常可用抗人球蛋白试验和酶技术来检查。
【试剂】1.试剂红细胞:由血型参比实验室或血液中心提供,或由各血库从供血者或工作人员中进行普查得到。
筛查红细胞以2个或3个人抗原互补的不同的红细胞为1套,单独分开分装,因为单一的筛查红细胞较混红细胞提供较高的敏感性。
因为许多抗体同双倍量抗原(纯合子)的红细胞反应比同单倍量抗原(杂合子)的红细胞反应要强得多,而不可能得到的都是纯合子红细胞,因此,筛查红细胞的抗原组成必须是互补,经提供尽可能多的必要的抗原。
筛查红细胞大多不包括低频率抗原,所以不可能检出低频率抗体。
这种抗体只有在抗体鉴定时被测到,或在交叉配血时被发现,或在新生儿出生后出现黄疽时被发现。
每一组筛查红细胞中至少有常见的抗原,而且是互补的。
如果某种抗体只能与一种特定抗原的纯合子细胞起反应,而筛查红细胞上这种特定抗原是杂合子,则该抗体可能被漏检。
合适的纯合子表现型的供血者是很少的,为了提供有重要抗原的纯合子细胞,需要使用来自3个供血者的红细胞。
2.血清标本:虽然血清和血浆中存在相同的红细胞抗体,但一般都采用血清进行抗体检查。
因为:①如果血浆中的凝血系统发生部分激活,就可产生纤维蛋白,干扰对凝集的解释;②只有通过激活补体的作用才能证实的抗体,不能在血浆中检出;③常用的抗凝剂是结合Ca2+来防止凝固,而Ca2+对于补体的激活是必不可少的。
效价测定(精)
三、操作步骤
1、吸取受检者血清0.4ml,加2-Me应用 液0.4ml,混合,将试管口塞紧,置 37℃水浴中2h(充分破坏IgM类抗体)。 2、排列小试管(10mm×60mm)两排, 每排10支,第一排每管各加生理盐水 0.4ml。
3、第1排第1管加2-Me处理血清0.4ml, 混合,吸出0.6ml,移0.2ml至第2排第 1管内,其余0.4ml移入第1排第2管内, 混合。以此类推,作倍量稀释至第10 管, 每管内留有 1∶4, … 1:2048等 不同稀释度的血清各0.2ml。
• 也可使用二硫苏糖醇 (dithiothreitol,DTT)灭活IgM抗体, 以测定IgG抗体。DTT无恶臭味,反应快 速,但对强抗体灭活效果较差。
五、临床应用
• O型孕妇孕期内抗体水平的动态监测,预测 是否会发生ABO新生儿溶血病。
4、第1排每管各加5%A型红细胞悬液0.2ml, 第2排每管各加5%B型红细胞悬液0.2ml,置 37℃水浴温育1h。 5、结果观察:如在前几管内发现有红细胞 凝集者,是由于高效价IgG抗A(B)或IgA抗 A(B)所引起,称为“盐水效价”。
6、其余红细胞未见凝集的试管,再以生 理盐水洗涤3次,除去洗涤液,留取压实 红细胞。 7、每管各加生理盐水 2滴,混合。 8、每管各取1滴,分别移至另一排小试 管中,再各加抗人球蛋白血清1滴,混合。
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试验原理 试 剂 操作步骤 注意事项 临床应用
一、试验原理
失去与相应 红细胞凝集 的作用
IgM抗体 分子裂解 待检 血清
2-me (巯基 乙醇)
IgG抗体分 子不被灭活
保持血清学 特性(致敏相 应红细胞)
IgA抗体 分子部分 灭活
二、试剂
ABO血型测定标准操作规程
1.目的和适用范围:1.1.为保证原料血浆的质量,规范实验操作,特制定本操作规程。
1.2.适用于本公司检验科,全体工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
2.术语:无。
3.职责:3.1.实验室工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
4.工作程序4.1.操作说明4.1.1.实验原理:ABO系统中的血型是根据红细胞上有无A或B抗原及血清中有无抗A或抗B抗体来决定。
用抗A、抗B定型血清分别加入被测红细胞,以观察其抗原、抗体反应结果。
4.1.2.实验所需设备和材料:血型反应板、竹签、微量振荡器、被检测标本、抗A定型血清(效价1:128以上),抗B定型血清(效价1:64以上)亲和力应在15秒钟以内出现凝集现象,并在3分钟时凝集块的大小应不小于1mm4.2.实验操作步骤:4.2.1.方法:正定型法4.2.2.受检者全血和血型试剂在纸片上按1:1比例混合,摇匀,按照有无凝集判定结果。
4.3.结果判读:4.3.1.受检者红细胞与抗A血型试剂发生凝集反应而不和抗B血型试剂发生凝集反应为A型。
4.3.2.受检者红细胞与抗A血型试剂不发生凝集反应而和抗B血型试剂发生凝集反应为B型。
4.3.3.受检者红细胞与抗A、抗B血型试剂都不发生凝集反应0型。
注:“+”=凝集;“-”=不凝集4.4.注意事项:4.4.1.如果由于受检者的红细胞抗原弱,或抗A、抗B血清凝集力低,需要充分时间方能判定结果,则要加做反定型。
4.4.2.A型及B型定型红细胞悬液,不能互相掺杂。
4.4.3.ABO血型测定必须两人交替核对报告单,确认无误,方可发出报告。
4.4.4.要严防搞错标本、加错标本或者加错定型血清。
5.记录表式:5.1.《血型测定记录表》(记录编号:PAFC-BXJY-SOP-LM04-07-R01A)6.相关文件:无7.相关记录:无8.附件:无9.文件履历血型测定记录表记录编号:PAFC-BXJY-SOP-LM04-07-R01A本记录保存至供浆期满后10年。
红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
红细胞血型抗体效价测定标准操作规程本文介绍了红细胞血型抗体效价测定标准操作规程,以规范输血科医务科护理部的技术操作,并适用于评估母婴血型不合的新生儿溶血病的风险程度及产前检查等其他临床需要。
在材料和设备方面,需要3%~5%的A、B型反定型试剂红细胞、0.2 mol/L二巯基乙醇(2-Me)应用液、抗球蛋白试剂、待检者血标本、微柱凝胶抗球蛋白卡等。
在检测环境方面,室温应控制在18-27℃,湿度应控制在30%-70%。
在检测原理方面,对于IgM类红细胞血型抗体,将受检血清经连续倍比稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分,完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
对于IgG类红细胞血型抗体,则先用巯基试剂2-Me裂解其中的IgM型抗体,经巯基试剂2-Me处理后再测定IgG类红细胞血型抗体。
在操作步骤方面,盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价。
具体操作为将受检血清加入一系列稀释盐水中,分别加入A、B型反定型试剂红细胞,静置30分钟后观察凝集情况,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分,完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
7.1.1.对12支试管进行排列编号,第2至第12管每管加入0.1ml生理盐水,第1管及第2管分别加入受检者血清0.1ml,混匀后吸出0.1ml移至第3管内,以此类推,连续倍比稀释至第12管(2048倍)。
7.1.2.在12支试管中,分别加入3%检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞50μl,轻摇试管架。
7.1.3.使用血型血清学专用离心机进行离心,离心速度为120g,离心时间为1min,观察并记录有无溶血及凝集情况。
7.1.4.结果判读:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价,根据“红细胞凝集强度与评分标准”进行评分。
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程1、目的为规范输血科红细胞血型抗体效价测定的技术操作,确保检测结果准确,依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科测定IgG抗-A(B)抗体效价,用以评估胎母血型不合妊娠时发生胎儿及新生儿免疫溶血性疾病(HDN)的风险程度及其他临床需要。
3、职责:输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、原理将受检血清(如检测IgG类红细胞血型抗体,先用2-巯基乙醇处理)经连续倍稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价。
5、试剂:生理盐水,0.2mol/L的2-巯基乙醇(2-Me)应用液,博迅的微柱凝胶抗人球蛋白卡,0.8%的A和B型标准试剂红细胞。
6、仪器:XTL-4.7细胞洗涤离心机,博研微术凝胶卡专用孵育器及离心机,电热恒温水浴箱。
7、操作步骤与方法:7.1准备试剂:观察微柱凝胶卡的外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
吸取2-Me15μl,加生理盐水至1ml为0.2M 2-Me 应用液。
7.2血清/血浆标本的制备:取血清50ul和150ul的生理盐水作1:4的稀释后再加入0.2M 2-Me应用液200ul混匀,密封试管口,37℃水浴60分钟。
灭活母体血清中IgM时,必须将试管口密封,并经常摇晃试管,以保证灭活效果。
同时用单克隆抗A或抗B作为对照,用来确认2-Me是否有效灭活IgM抗体。
7.3取7只干净试管,做好标记;在第1管中加入处理后的血清200ul和200ul生理盐水,混匀(为1:16稀释);第2-7管中依次加200ul的生理盐水和前一管中的血清/血浆200ul,做倍比稀释。
7.4将抗人球蛋白卡标记好,从第7管开始到第2管依次将倍比稀释后的相应50ul血清分别加入标记孔中。
抗体筛选操作步骤
红细胞血型抗体筛选、鉴定操作规程(SOP)目的:规范红细胞血型抗体筛选、鉴定操作,保证临床用血的安全性及有效性。
职责: 输血科技术人员负责红细胞血型抗体筛选、鉴定。
适用范围: 适用于输血科抗体筛选血标本、疑难血型标本及疑难配血标本。
所需材料和设备:抗球蛋白试剂、筛选细胞、谱细胞、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、普通离心机、血型血清学专用离心机、电热恒温水浴箱、显微镜。
抗体筛选操作步骤1.取试管三支,分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ;各加入患者血清2滴,再分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选细胞2滴。
2.混匀,37ºC孵育1h。
离心15s。
4.轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集,以显微镜检查。
5.对没有凝集的试管,用盐水充分洗涤3次。
6.最后一次洗涤后,离心去上清,将试管边缘盐水用滤纸吸干。
7.按试剂说明书加最适稀释度抗球蛋白试剂1滴,充分混合。
离心15s。
轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集反应,记录结果。
抗体鉴定操作步骤1.抗体筛选阳性,应作抗体鉴定试验已确定其特异性。
2依据谱细胞数量的多少(一般由8—16个单人份的已知血型表型的0型红细胞组成)取相应数目的试管,分别标记序号,各加入患者血清2滴,再分别加入谱细胞2滴。
3.混匀,37ºC孵育1h。
离心15s。
5.轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集,以显微镜检查。
6.对没有凝集的试管,用盐水充分洗涤3次。
7.最后一次洗涤后,离心去上清,将试管边缘盐水用滤纸吸干。
8.按试剂说明书加最适稀释度球蛋白试剂1滴,充分混合。
离心15s。
轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集反应,记录结果。
血型抗体 效价测定
血型抗体效价测定目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后,加入一定量的抗原红细胞,观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个(+)凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1. 标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2.生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1.血清倍比稀释取10支小试管,每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml 被检者血清,混匀后吸取0.1ml加入第2管,依此类推,至第10管,最后弃去0.1ml。
2.加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml,混匀。
3.温育置15~20°C室温中温育15min。
4.离心和观察结果以1000r/min离心1min,以出现1个(+)凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
注意事项1.倍比稀释要准确,避免稀释不匀出现跳管现象。
2.离心后试管内上清液出现溶血,表明不仅有抗原抗体反应,而且有补体激活,具有重要临床意义。
血型抗体效价测定目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后,加入一定量的抗原红细胞,观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个(+)凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1. 标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2.生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1.血清倍比稀释取10支小试管,每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml 被检者血清,混匀后吸取0.1ml加入第2管,依此类推,至第10管,最后弃去0.1ml。
2.加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml,混匀。
3.温育置15~20°C室温中温育15min。
4.离心和观察结果以1000r/min离心1min,以出现1个(+)凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
抗体效价滴定操作规程
抗体效价滴定操作规程抗体效价是衡量抗体活性和浓度的重要指标,在医药研究和临床应用中有着广泛的应用。
抗体效价滴定操作规程是对进行抗体效价测定的步骤和方法进行规范和描述的文件,下面是一个关于抗体效价滴定操作规程的示例,包括前期准备、试验步骤和结果判定等内容。
一、前期准备1.阅读相关文献和实验说明书,了解抗体效价滴定的原理和方法。
2.了解实验所需物品清单,准备好所需的试剂、试管、移液器等实验器材。
3.检查实验设备,确认设备处于正常工作状态。
4.准备好质控抗体和待测抗体溶液,并按实验要求进行稀释。
二、试验步骤1.根据实验要求,将待测抗体和质控抗体分别加入试管中。
2.通过稀释系列将质控抗体稀释为一系列不同浓度的溶液。
3.充分混匀待测抗体和质控抗体溶液,保证溶液均匀。
4.将待测抗体和质控抗体溶液放置于室温,使其达到相同的温度。
5.取一组试管,依次加入相同体积的质控抗体溶液和待测抗体溶液,混匀后,在每个试管中加入适量的相同抗原。
6.将试管放置于恒温箱或洗涤器中,进行适当的培养时间,使抗原和抗体充分反应。
7.取出试管,加入适量的二抗或底物,并根据实验要求,进行适当的显色反应。
8.根据显色反应的颜色深浅和强度,判断抗体效价的高低。
9.计算抗体效价的对数,确定抗体效价。
三、结果判定1.根据检测结果,得出相应的抗体效价,记录在实验记录表中。
2.将实验结果进行统计和分析,确定最终的抗体效价。
3.根据实验结果,进行抗体效价滴定的质控和质量保证。
四、实验安全1.在操作过程中,注意安全操作,避免溶液的直接接触和飞溅。
2.使用刀片或针头等锐利物品时,要特别注意安全,防止划伤和刺伤。
3.遵守实验室的安全规定,佩戴实验室服装和防护设备,保证实验操作的安全性。
五、实验记录和数据处理1.记录实验过程中的各个步骤和操作细节,包括使用的抗体和试剂名称、溶液浓度和体积等。
2.记录显色反应的颜色深浅和强度,以及操作过程中的问题和异常情况。
3.对实验结果进行统计和分析,计算抗体效价的平均值和标准偏差,并进行结果的合理解释和讨论。
S005红细胞ABO血型(正定型)鉴定标准化操作规程
红细胞ABO血型(正定型)鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注,确保临床输血安全、有效,根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型(正定型)。
三、原理用已知抗A、抗B标准血清(单克隆抗体)测定被检者红细胞上有无相应的A或B抗原,结合反定型结果判断ABO血型。
四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(正定型)确认。
五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体);2、试剂生产厂家:上海血液生物医药有限责任公司;3、批准文号:国药准字S1*******;4、包装规格:抗A、抗B试剂各1支, 10ml /支;5、贮藏条件;2-8℃避光保存。
6、有效期:自检定合格之日起2年;7、试剂性能:试剂单克隆抗体效价:抗A效价≥128;抗B效价≥128;特异性试验合格。
七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管2支,分别标明抗A、抗B,用滴管分别加入受检者5%红细胞悬液1滴于试管,再分别在对应管中加入抗A、抗B标准血清1滴。
2、摇动试管,立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s或室温静臵1小时。
3.先观察是否有溶血,溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染;将试管轻轻摇晃,使沉于管底的红细胞浮起,观察细胞扣情况,并判断凝集强度(见下表)。
如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。
4、ABO血型(正定型)表现型反应格局表受检者血型受检者红细胞+试剂标准血清抗A 抗BA + -B - +O - -AB + +5、红细胞ABO血型(正定型)结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度混合凝集外观镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞仍呈分散分布溶血,上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块,血清清晰透明4+红细胞凝集成数小块,血清尚清晰3+红细胞凝块分散成许多小块,周围可见到游离红细胞2+肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞1+镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞±镜下未见凝集,红细胞均匀分布阴性九、质量控制1、对新进批号的试剂应作抗体效价验定。
ABO血型鉴定标准操作规程
ABO血型鉴定标准操作规程1.检验原理:根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B 型、AB型及0型4种。
可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。
所谓正定型,是用已知抗一A和抗一B分型血清来测定红细胞上有无相应的A 抗原或/和B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗一A或/和抗一B2.试剂和材料:1、抗一A(B型血)、抗一B(A型血)及抗一A十B(0型血)分型血清,2、5%A、B及。
型试剂红细胞盐水悬液。
3、受检者血清;4、受检者5%红细胞盐水悬液。
3.方法3.1.试管法(1)取洁净小试管(内径IommX60mm)3支,分别标明抗一A、抗一B和抗-分型血清各1滴于试管底部,再A十B,用滴管分别加抗一A、抗一B和抗一A十B以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混合。
(2)另取洁净小试管(内径IOmlnX60mm)3支,分别标明A、B和0细胞。
用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B和0型5%试剂红细胞悬液1滴,混合。
(3)立即以100Or/min离心Inlino(4)将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象。
如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。
(5)观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型、类B或CiSAB的发现。
(6)凝集强度判断标准4十红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。
3十红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。
2十红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。
1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞±镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞MF混合凝集外观(mixedfield)是指镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞仍呈分散分布。
一表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
3.2.玻片法(1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块),用蜡笔画成方格,标明抗X、抗-B 和抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗f和抗-A十B分型血清1滴于标明的方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1滴,混合。
输血科试验操作规程
输血科试验操作规程一、血型血清学检查的操作规程(一)ABO+RH血型鉴定常规方法1..试剂:单克隆或多克隆抗A、抗B试剂,RhD(IgM)血型单克隆抗体定型试剂,2-5%的反定红细胞悬液2..操作步骤:(1)将病人标本离心(2)反定型:取两只试管分别标明A、B,加入相应的反定细胞各1滴,加入病人的血浆1滴,离心(3)将玻片用红蜡笔划分为3个区域,各加一滴待测标本红细胞,分别滴加抗A、抗B、RhD试剂,轻轻晃动观察结果(4)结果:有凝集为阳性。
无凝集无溶血为阴性。
正反定型对照得出结果(二)ABO+RH血型鉴定(卡氏法)操作1.试剂:Ortho Biovue ABO-Rh正反定型血型试剂卡友6个微柱组成,每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白、大分子增强剂以及0.1%叠氮钠和0.01M 的EDTA。
2.操作步骤:(1)配置0.8%的反定细胞(一般配成约1.5%)(2)将试剂卡编号,并打开试剂卡(3)将病人血标本离心(4)将50ul的反定细胞A、B加入到相应反应腔中(5号6号柱),加入50ul 的病人血清。
(5)取50ul的病人压积红细胞加入1ml的盐水中配成5%的红细胞悬液,分别加入前四柱10ul的5%红细胞悬液。
(6)离心,读取结果. 按照下表并结正反定型对照。
得出结果(二)改良凝聚胺技术交叉配血试验一.主要组成成份:R1:低离子介质、R2:凝聚胺、R3:假凝集清除液。
二.步骤:1.复检供血者、受血者血型2.主侧管加入供血者3%-4%的红细胞悬液1滴,加入受血者血清1滴或2滴3.次侧管加入受血者3%-4%的红细胞悬液1滴,加入供血者血清1滴或2滴4.加低离子介质3滴,混匀,静置30秒,各管加凝聚胺1滴,混匀,3500r/min离心15秒,倒出上清液(残留约0.1ml),扣摇,肉眼可见明显的凝集状(如无凝集须重做),加假凝集清除液1滴于管底,轻摇,凝集1min内消失呈均匀混悬液,为阴性,凝集1min内不能被消除,即为阳性。
抗体效价滴定操作规程
抗体效价滴定操作规程 SXYJ-GZ-02171目的规范抗体效价滴定操作,确保红细胞血型抗体效价滴定的准确性。
2适用范围适用于全部血清(包括患者血清及试剂血清)效价的滴定。
3职责检测者负责依据此程序进行抗体效价滴定操作。
4材料与设备抗体筛选红细胞或谱细胞、IgG抗-D血清、3%RhD阳性红细胞盐水悬液、1%木瓜酶试剂、抗人球蛋白试剂、0.9%无菌生理盐水;一次性使用滴管、试管;KUBOTA KA-2200型离心机、S648型电热恒温水温箱(37℃)等。
5操作方法5.1待检标本的准备及要求5.1.1待检标本准备两管血样,一管用EDTA抗凝,另一管不抗凝血清:待检的不抗凝标本应退缩充分,用离心机离心并分离出血清;5.1.2细胞:从待检的抗凝标本中吸出一滴红细胞,用0.9%生理盐水充分洗涤三遍,配制成2%红细胞盐水悬液。
5.2血清连续倍量稀释法取10支小试管,标明序号,在每一管中加入0.1ml的生理盐水溶液,然后在第1管中加入待检血清(产前检查加入中和后血清)0.1ml,混匀后取出0.1ml依次向后稀释至第10管,从第10管中吸出0.1ml弃去,或暂时保留在另一试管中,以备必要时作进一步稀释;5.3加红细胞悬液每管加2%红细胞悬液0.1ml,混匀;5.4根据抗体性质的不同选用以下试验方法:5.4.1盐水法立即离心后观察,或置室温1小时观察结果;5.4.2间接抗人球蛋白法:方法参见SXYJ-GZ-0211;5.4.3木瓜酶法:方法参见SXYJ-GZ-0215。
6结果判定根据凝集强度(方法参见SXYJ-GZ-0202:5.2.1.6)对结果进行判断,通常以肉眼观察到的最后一个“1+”的凝集管作为判断的终点,终点血清稀释度的倒数为效价,或称滴度。
7注意事项7.1稀释液的容量越小,可能产生的误差越大,如果可能,可以增大稀释常量。
如果一种血清要分别和几种红细胞作用,要将血清做总稀释,然后分别移同样的实验容量到所需的几个试管中,这样会缩小误差。
抗体效价测定操作规程
抗体效价测定操作规程 Hessen was revised in January 2021抗体效价测定操作规程操作步骤:一.IgG类1.IgG类抗体效价滴定,须取适量血清200μL加等体积2—Me溶液混合,封口,置37℃水浴箱作用60分钟,先稀释血清:200L病人血清600L生理盐水备用,排列6支试管按顺序编号。
第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,在第一管和第二管中各加入稀释血清200L,第二管混匀后移出200L转至第三管,以同样操作第六管,从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中(可做为第七管),以备必要时作进一步稀释。
这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
2.加红细胞悬液(自配红细胞悬液同反定型试剂)每管各加2%相应红细胞悬液200L,混匀。
(如待检血清抗体为抗A,则加入A型标准红细胞悬液;如待检血清抗体为抗B,则加入B型标准红细胞悬液;如待检血清中既有抗A又有抗B,则倍量稀释两份血清,一份加入A型标准红细胞悬液,另一份加入B型标准红细胞悬液;)3.先直接观察离心结果,之后在每管分别加入凝聚胺试剂盒中的R1液3d,混合30S均匀后,在各加R2液2滴,操作方法同凝聚胺交叉配血法,然后判读结果。
通常以肉眼观察到的第一个“±”的凝集管作为判断的终点,终点血清稀释度的倒数为效价(Titer),或称滴度。
二.IgM1.血清连续倍量稀释法先稀释血清:100L病人血清+700L生理盐水备用,排列6支试管按顺序编号。
第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,第一管和第二管中各加入稀释血清200L,第二管混匀后移出200L转至第三管,以同样操作第六管,从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中(可做为第七管),以备必要时作进一步稀释。
这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
医院Rh(D)血型定型标准操作程序
Rh(D)血型定型标准操作程序【项目名称】Rh(D)血型【实验用途】Rh(D)血型常规检测【实验原理】根据抗D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分Rh(D)阳性和Rh(D)阴性【样本种类】红细胞抗凝或不抗凝样本,被检者无需特殊准备【仪器和材料】仪器:无特殊专用仪器材料:Rh(D)(IgM)血型定型试剂试剂主要组成成份:抗D(IgM)单克隆细胞株培养上清液,NaCl,磷酸盐缓冲液等试剂稳定性:原装试剂在2~8℃避光保存,有效期24个月。
如果长时间储存在高温或反复冻融会使试剂失去活性试剂性能指标:抗D(IgM)效价≥1:64(ccDee O型)注意事项:①、本试剂含有0.1%W/V叠氮钠,如果摄入会中毒;②、本品如出现浑浊则不能使用,若开瓶使用时间较长后,最好用已知Rh(D)阴性、Rh(D)阳性红细胞检查结果是否符合,以防制品污染、变质失效,而造成鉴定错误。
【试验方法】1 平板法(玻片法)①、加1滴抗D试剂于玻片上;②、再加1滴35-45%的被检红细胞悬液。
该红细胞悬液可以是盐水悬液,也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞;③、在圆形地玻片区域中混匀,(直径均为20mm大小),前后缓慢摇晃玻片。
2分钟左右肉眼判断结果。
不要将试剂的干燥与凝集相混淆;④、如果呈阴性,需用试管法重做一遍试验。
2 试管法①、加1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中(75×12mm或75×10mm);②、再加一滴约3-5%的被检红细胞悬液于试管中。
混匀;③、离心,速度和时间可选择以下二种之一:a)转速1000rpm,时间1分钟;b)转速3400rpm,时间15秒;④、检查是否有溶血(溶血可能是阳性结果或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞再悬浮起来;⑤、观察凝集状况,并立即记录结果。
必要时可借助显微镜;⑥、若是阴性结果,需在37℃孵有15-30分钟,然后再离心观察结果。
结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。
3 微量板法(U型板)①、加一滴抗D试剂U型底的微孔中;②、再在微孔中加一滴约3-5%的被检红细胞悬液,细胞悬液需事先制备于生理盐水中;③、用机械的方法将U型板混匀;④、用板式离心机离心:2000rpm,时间为30秒。
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红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
人血清中抗-A、抗-B主要为IgM型,小部分为IgG型。
IgM型分子由5个辐射状排列的单体组成,单体间通过μ链倒数第二位的二硫键与J链互相连接,单体间的二硫键比单体内的链间及链内二硫键容易被巯基试剂破坏。
IgM型分子经巯基试剂处理后,裂解为6~7s亚单位,仍保持与抗原结合的能力,但已失去其与红细胞凝集的作用。
IgG抗体分子则不被巯基试剂灭活,保持与相应红细胞致敏的血清学特性。
1.目的为规范红细胞血型抗体效价测定的技术操作,依据《输血实验室管理程序》的要
求制定本章程。
2.适用范围适用于医疗机构输血科(血库)测定IgG抗-A、IgG抗-B及IgG或IgM类红细胞
不规则抗体效价,用以评估母婴血型不合的新生儿溶血病的风险程度及产前检查等其他临床需要。
3.职责医疗机构输血科(血库)技术人员负责红细胞血型抗体效价测定。
4.原理检测IgM类红细胞血型抗体,将受检血清经连续倍比稀释后与表达检测目标抗体
对应抗原的试剂红细胞反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分,完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
若检测IgG类红细胞血型抗体,则先用巯基试剂2-Me 裂解其中的IgM型抗体,经巯基试剂2-Me处理后再测定IgG类红细胞血型抗体。
5.所需材料和设备
5.1.材料3%~5%的A、B型反定型试剂红细胞、0.2 mol/L二巯基乙醇(2-Me)应用液、抗球
蛋白试剂、待检者血标本、微柱凝胶抗球蛋白卡。
5.2.设备普通离心机、普通显微镜、电热恒温水浴箱、血型血清学专用离心机、微柱凝
胶卡专用孵育器及离心机。
6.检测环境室温应控制在18-27℃,湿度应控制在30%-70%。
7.步骤与方法
7.1.盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价:
7.1.1.排试管12支,编号,第2至第12管每管加生理盐水0.1ml,在第1管及第2管加受检者
血清各0.1ml,将第2管混匀后吸出0.1ml,移至第3管内,以此类推,连续倍比稀释至第12管(2048倍)。
7.1.2.在12支试管中,分别加入3%检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞50μl,轻摇试管架。
7.1.3.用血型血清学专用离心机120g离心1min后,观察并记录有无溶血及凝集情况。
7.1.4.结果判读:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价,根
据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
7.2.2-Me裂解IgM抗体:吸取受检者血清0.2ml,加2-Me应用液0.2ml,混匀,将试管口塞
封,置37℃水浴中孵育30min。
7.3.倍比稀释已裂解IgM抗体的受检血清:排列小试管11支,编号,第2至第11管每管加生
理盐水0.1ml,在第1管及第2管加2-Me处理血清各0.1ml,将第2管混合后吸出0.1ml,移至第3管内,以此类推,作连续倍比稀释至第11管(2-Me处理血清已2倍稀释,第11管为2048倍稀释)。
7.4.抗球蛋白法测定IgG类红细胞血型抗体效价
7.4.1.每管各加入3%检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞50μl,轻摇试管架,置37℃孵育
1h。
7.4.2.结果观察,如在前几管内发现有红细胞凝集者,是由于高效价IgG抗-A(B)所引起,
称为盐水效价。
7.4.3.其余未见凝集的试管,再以生理盐水充分洗涤3次,倾去洗涤液,留取压积红细胞。
7.4.4.每管加最适稀释度抗人球蛋白血清25μl,混合。
7.4.5.1300g离心15s。
7.4.6.轻轻摇动试管,观察并记录各管的凝集情况。
7.4.7.结果判定:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价,根
据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
7.5.凝聚胺法测定IgG类红细胞血型抗体效价
7.5.1.按7.2.2倍比稀释受检者血清后,在11支试管中各加入3%检测目标抗体对应抗原的试
剂红细胞50μl,轻摇试管架。
7.5.2.执行《凝聚胺试验标准操作规程》做凝聚胺实验。
7.5.3.结果判读:完成凝聚胺试验后,观察并记录各管凝集情况,镜检呈“1+”凝集的最
高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价,根据“红细胞凝集强度与评分标准”
评分。
7.6.微柱凝胶抗球蛋白法测定IgG类红细胞血型抗体效价
7.6.1.按7.2.2倍比稀释受检者血清后,在11支试管中各加入1%已知目标抗体对应抗原表型
的试剂红细胞100μl,轻摇试管架。
7.6.2.执行《微柱凝胶试验标准操作规程》红细胞血型抗体效价测定。
7.6.3.结果判读:根据红细胞在微柱凝胶中的滞留情况,以“1+”凝集的最高稀释倍数的
倒数即为检测目标抗体的效价,根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
8.效价判定及评分标准
红细胞血型抗体效价测定以“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数作为检测目标抗体的效价,并根据稀释血清各管凝集强度进行评分,红细胞凝集强度与评分标准为:4+=12分,3+=10分,2+=8分,1+=5分,±或W+=2分,阴性=0分。
以稀释各管评分之和作为积分。
9.注意事项
9.1.连续稀释血清操作时,应先混匀再稀释下一管,以免稀释不均匀。
9.2.盐水介质法测定血型抗体效价离心后,试管上清出现溶血,表明不仅有抗原抗体反应,
而且有补体激活,有重要临床意义。
9.3.稀释液容量越小,可能产生的误差越大,故应适当采用较大容量血清进行倍比稀释。
9.4.报告时应以效价和积分评价血清抗体。
9.5.不同的检测方法对IgG抗体检测敏感性差异较大,通常抗球蛋白法比凝聚胺法高1~2
个稀释倍数,报告时应注明试验方法。
10.相关文件
10.1.《中国输血技术操作规程》(血站部分)天津:天津科学技术出版社,1997
10.2.《输血技术学》(第二版)北京:人民卫生出版社,2002
11.相关记录
11.1.《血型血清学试验报告单》
11.2.《血型血清学试验原始记录表(本)》。