抗酸染色概要(1)

夹层杯抗酸染色制片法概要

一：标本的预处理：消化和离心

1.将标本至于夹层杯中加消化液消化至液体清亮（2~5分钟可灭活细菌）（若是其它

容器取痰的，可小心的在痰上加些许消化液，待痰不再粘附其上后转入夹层杯）（夹

层杯可装液体不超过杯身三分之二）（非痰类标本亦须加适量消化液消化）。

2.将本杯置于离心机内对称平衡放稳，以4500转/分钟转速离心5分钟，弃去液体（轻

快的倒掉），放在干片机内烘烤（干片机提前开启至60度）。

二：染色：初染和洗脱和复染

1.加A液在60度温度下染色5分钟。

2.B液脱色（尽量将红色脱净）。

3.C液复染一分钟。

（每次弃去染色液后需以缓慢小水流沿杯壁将杯中剩余液体洗清沥干）。（加染液液量以可覆盖膜片为适量）

三：制片：取片和阅片

1.将染色后的片子烘干。

2.用取片针顶起杯底纳米膜片，用镊子夹出，轻轻印干水分，用中性胶倒封于玻片上，

弃去保护膜。（水分将会影响胶水对膜片的粘附）

3.阅片。（可利用“红十字”找寻视野）

四：注意事项

1.膜片上的细菌的保护：本制片法的原理为通过离心沉降并烘烤将目标菌粘附在膜片

上后进行染色，在操作过程中必须避免直接冲刷、液体剧烈振荡、大力印擦等而将

膜上已粘附的细菌冲走，这些失误会严重影响阳性率。

2.各标本间的交叉污染：标记混淆、杯中液体互溅、液体转移等将会使结果严重不可

靠。

3.脱色的程度：脱色不完全将导致膜上非抗酸菌或其它物质也呈现红色，脱色过久过

重会影响抗酸杆菌所着色，二者都将影响后续镜检。

4.B液：其重要成分为酒精盐酸，易挥发，用完务必盖好盖子。

5.操作时间段的把握：请有效利用机器与时间间隔，避免标本堆积。