微生物的培养方法优秀课件
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2.1-微生物的实验室培养-课件(选修1)
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。 称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动
作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。 溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯
化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。 整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致 烧杯破裂。
培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ， 培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ， 培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 。
（2）获得纯净培养物的关键是什么？ （3）避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面 （4）什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着 和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基 等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操 作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 时，就可以进行倒平板了。
2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微 生物污染培养基。
3、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃ 下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌：100kPa、 121 ℃下维持15-30min.
6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 7、如何倒平板？
三、实验操作
微生物的培养与应用ppt课件
40
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
《微生物的培养》课件
微生物培养的方法包括固体培养、液体培养、厌氧培养等。
微生物培养的步骤包括选择培养基、接种、培养和观察等。
微生物培养的分类
固体培养：将微生物接种到固体培养基上， 使其生长繁殖
液体培养：将微生物接种到液体培养基中， 使其生长繁殖
半固体培养：将微生物接种到半固体培养 基中，使其生长繁殖
厌氧培养：在无氧条件下培养微生物，如 乳酸菌、酵母菌等
接种与培养
接种步骤：将菌种接种到培 养基上，注意无菌操作
接种方法：选择合适的接种 工具，如接种环、接种针等
培养条件：控制温度、湿度、 光照等环境因素
培养时间：根据微生物种类 和实验目的确定培养时间
观察与记录
观察微生物的生长情况，记录 其形态、颜色、大小等特征
记录培养基的pH值、温度、湿 度等环境条件
固体培养基培养
固体培养基：由琼脂、淀粉、蛋白胨等成分组成 培养目的：观察微生物的生长、形态和代谢产物 培养步骤：配制培养基、接种、培养、观察 注意事项：无菌操作、温度控制、时间控制
气相培养
原理：利用微生 物在气相中的生 长特性进行培养
特点：无需液体 培养基，操作简 便
应用：适用于厌 氧菌、好氧菌等 微生物的培养
安全防护措施
实验室环境：保持清洁、通风良好 实验操作：正确使用防护设备，如手套、口罩、防护服等 实验废弃物：妥善处理，避免污染环境 实验记录：详细记录实验过程和结果，以便追溯和改进
实验器具的消毒灭菌
实验器具的消 毒：使用70% 乙醇或0.1%苯 扎溴铵溶液进
行消毒
实验器具的灭 菌：使用高压 蒸汽灭菌器进 行灭菌，温度 为121℃，时 间至少15分钟
微生物培养的基本原理
微生物生长的阶段
迟缓期：微生 物适应新环境，
微生物培养的步骤包括选择培养基、接种、培养和观察等。
微生物培养的分类
固体培养：将微生物接种到固体培养基上， 使其生长繁殖
液体培养：将微生物接种到液体培养基中， 使其生长繁殖
半固体培养：将微生物接种到半固体培养 基中，使其生长繁殖
厌氧培养：在无氧条件下培养微生物，如 乳酸菌、酵母菌等
接种与培养
接种步骤：将菌种接种到培 养基上，注意无菌操作
接种方法：选择合适的接种 工具，如接种环、接种针等
培养条件：控制温度、湿度、 光照等环境因素
培养时间：根据微生物种类 和实验目的确定培养时间
观察与记录
观察微生物的生长情况，记录 其形态、颜色、大小等特征
记录培养基的pH值、温度、湿 度等环境条件
固体培养基培养
固体培养基：由琼脂、淀粉、蛋白胨等成分组成 培养目的：观察微生物的生长、形态和代谢产物 培养步骤：配制培养基、接种、培养、观察 注意事项：无菌操作、温度控制、时间控制
气相培养
原理：利用微生 物在气相中的生 长特性进行培养
特点：无需液体 培养基，操作简 便
应用：适用于厌 氧菌、好氧菌等 微生物的培养
安全防护措施
实验室环境：保持清洁、通风良好 实验操作：正确使用防护设备，如手套、口罩、防护服等 实验废弃物：妥善处理，避免污染环境 实验记录：详细记录实验过程和结果，以便追溯和改进
实验器具的消毒灭菌
实验器具的消 毒：使用70% 乙醇或0.1%苯 扎溴铵溶液进
行消毒
实验器具的灭 菌：使用高压 蒸汽灭菌器进 行灭菌，温度 为121℃，时 间至少15分钟
微生物培养的基本原理
微生物生长的阶段
迟缓期：微生 物适应新环境，
微生物的培养ppt课件
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接 种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划 线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后， 接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种 环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而 通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数 目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧 接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避 免细菌污染环境和感染操作者。
（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无 菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新 制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基 本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作 是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明 接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因， 再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明 显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察 到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生 良好的科学态度与习惯。
2/12/31
微生物的恒温培养
2023/12/31
微生物的恒温培养
菌种的保存
1、临时保藏： 接种到固体斜面培 养基，菌落长成后 置于4℃冰箱保存。
2、长期保存： 甘油冷冻管藏法
2023/12/31
本课题知识小结:
2023/12/31
四、课题成果评价
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
2023/12/31
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的
2023/12/31
（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无 菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新 制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基 本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作 是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明 接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因， 再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明 显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察 到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生 良好的科学态度与习惯。
2/12/31
微生物的恒温培养
2023/12/31
微生物的恒温培养
菌种的保存
1、临时保藏： 接种到固体斜面培 养基，菌落长成后 置于4℃冰箱保存。
2、长期保存： 甘油冷冻管藏法
2023/12/31
本课题知识小结:
2023/12/31
四、课题成果评价
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
2023/12/31
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的
2023/12/31
微生物的实验室培养(课件)
详细描述
分批培养是将微生物接种到一定量的培养基中，在一 定时间内完成生长繁殖的过程。该方法可以控制微生 物的生长环境，便于观察和控制。连续培养则是让微 生物在恒定条件下持续生长繁殖的方法，通过不断地 补充新鲜的培养基和排除老的培养基，使微生物在恒 定的条件下快速生长繁殖。该方法适用于大规模工业 生产，可以提高生产效率和产品质量。
微生物培养
在适宜的温度、湿度、 pH等条件下，将纯化 的微生物菌株接种到培 养基中，让其生长繁殖 。根据需要，可以选择 不同的培养方式和培养
基类型。
微生物观察与检测
在培养过程中，定期观 察微生物的生长情况， 记录生长曲线、菌落形 态等数据，并进行相关 的检测和鉴定，如生化 反应、抗原抗体反应等
。
微生物保藏与利用
微生物的生长需求。
培养基的pH值
培养基的pH值对微生物的生长具 有重要影响，不同微生物对pH值 的要求不同，因此需根据实际情况 调整。
培养基的灭菌
灭菌是培养基制备的重要环节，通 过高温或高压灭菌，消除培养基中 的杂菌，保证微生物纯种培养。
实验室设备与器材
显微镜
观察微生物形态和生长情况，是微生物实验 室的基本设备。
实验室安全防护措施
实验室应配备必要的安全设施， 如灭火器、急救箱、洗眼器等，
并定期进行检查和维护。
实验室应保持通风良好，确保空 气流通，以降低感染和污染的风
险。
实验室应定期进行消毒和清洁， 确保实验环境的卫生和安全。
实验废弃物的处理与环保要求
实验废弃物应按照规定进行分类和处 理，避免对环境和人类健康造成危害 。
培养获得的微生物可以 用于后续的研究和应用 ，如生产生物制品、进 行疾病诊断和治疗等。 同时，对于有价值的菌 种可以进行长期保藏，
微生物的培养PPT教学课件
1000ml
放线菌（高氏1号）
淀粉 20g K2HPO4 0.5g
NaCl 0.5g MgSO4.7H2O
0.5g KNO3 1g FeSO4 0.01g
H2O 1000ml
酵母菌(麦芽汁培养基) 干麦芽粉加四倍水，在50℃--60℃保温糖化3-4小时，用碘液 试验检查至糖化完全为止，调整糖液浓度为10。巴林，煮沸 后，沙布过滤，调PH为6.0。
四、Nutrient
营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可 以将它们区分成六大类。
1. Source of carbon （碳源） 2. Source of Nitrogen （氮源) 3.Inorganic salt（无机盐） 4. Growth factor（生长因子) 5.Water（水分） 6. Energy source（能源)
葡萄糖通过基团移位 运输过程的化学反应
1）PEP+HPr 酶I 磷酸~HPr + 丙酮酸
2）磷酸~HPr + 葡萄糖 酶II 6-磷酸葡萄糖 +HPr
基团转位运输葡萄糖示意图
基团移位示意图
5、膜泡运输
主要存在于原生动物特别是变形虫中。 如果膜泡中包含的是固体营养物质，称胞 吞作用；是液体营养物质称胞饮作用。
光合细菌分为紫色细菌和绿色细菌两大类群。
2、光能有机异养型微生物
光能异养型：能利用光能、以简单有机物(有机酸、 醇等)为供氢体同化CO2的微生物类群称为光能有 机营养型
碳源——CO2 能源——光
例：Rhodospirillum
CO2 + 2CH3CHOHCH3 (CH2O) +2CH3COCH3 + H2O
培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物 的生长繁殖和代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C/N）的 影响较大。
最新微生物的培养和应用课件PPT课件
选择培养基和鉴别培养基的比较
从众多微生物 中分离所需的 微生物
加入青霉素分离得 到酵母菌和霉菌
鉴别不同种 类的微生物
伊红—美篮培养基 使大肠杆菌的菌落 呈深紫色，可以鉴 别大肠杆菌
几种选择培养基：
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A.C A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌
2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是
A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐
A.C
C 蛋白质
D 无机氮化物
下表关于四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢的类 型，描述正确的是
1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方
（2）特殊营养：—生长因子
细菌生长必需，而往往自身不能合成的 化合物，如维生素、某些氨基酸、碱基等
（3）pH、氧气等要求
四：营养基配制的原则
1：目的要明确 配制培养基要根据 培养的微生物、培养
的目的、培养基的用途来确定培养基的化 学成分、物理状态。 2：营养要协调 3：PH要适宜
五、培养基的配制过程
霉菌 5.0～6.0 细菌6.5～7.5 放线菌 7.5～8.5
以上反应了微生物生长受到哪些条件影响？
三、培养基的营养物质 1、水 2、碳源（提供碳元素的物质） 3、氮源（提供氮元素的物质） 4、无机物（无机盐） 5、生长因子（微生物生长不可缺少的微 量有机物。如维生素、含氮碱基）
碳源
▪ 可作为碳源的物质有: ▪ 含碳无机物: 碳酸盐 碳酸氢盐 二氧化碳 ▪ 含碳有机物： 糖类（主要）
微生物的实验室培养说课稿PPT公开课一等奖课件省赛课获奖课件
培养基的类型及应用
含用化学成分还不清晰或化 学成分不恒定的天然有机物
天然培养基
牛肉膏蛋白胨培养基、麦 芽汁培养基
按成分不同划分
合成培养基
化学成分完全理解的物质配 制而成的培养基
高氏1号培养基、查氏培养 基
天然培养基：
天然培养基有血清、血浆、和组 织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。
优点：蛋白胨培养基）：
牛肉膏 蛋白胨 3g 10g
NaCl 5g
H2O 1000ml
放线菌（高氏1号）
淀粉 K2HPO4 NaCl MgSO4.7H2O KNO3 FeSO4 H2O
20g 0.5g 0.5g 0.5g
1g
0.01g 1000ml
霉菌（查氏合成培养基）
NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4.7H2O
3g
1g
0.5g 0.5g
FeSO4 蔗糖 H2O 0.01g 30g 1000ml
酵母菌(麦芽汁培养基) 干麦芽粉加四倍水，在50℃--60℃保温糖化3-4小时，用碘液实验 检查至糖化完全为止，调节糖液浓度为10。煮沸后，纱布过滤， 调PH为6.0。
培养基配制的基本原则： 目的明确 营养协调 理化条件适宜 经济节省
普通指那些微生物生长所必需并且需要量很小，但 微生物本身不能合成或合成量局限性以满足机体生 长需要的有机化合物。
例如： 维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)
功效：酶和核酸的构成成分，微生物生长不可缺 少的微量有机物.
几个微生物所需的生长因子
微生物种类 肠膜乳状杆菌 白喉棒杆菌 破伤风梭状芽孢杆菌 阿拉伯聚糖乳杆菌 粪链球菌 干酪乳杆菌
（从红藻中提取的多糖， 98度以上熔化，44度下列 凝固）
高中生物微生物的培养PPT课件
严格控制无菌操作，在培 养过程中要更换培养基， 调节细胞分裂素和生长素 的比例和添加顺序。
严格控制无菌操 作，整个培养过 程无需更换培养 基
第8页/共52页
适宜的环境条件，基质 垫底并固定幼苗，不需 要保证无菌条件，注意 溶氧和矿质元素的浓度。
3.下列关于植物组织培养、微生物培养和无土栽培技术的比较的
第12页/共52页
拓展深化
某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽 孢。每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐 射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人，可保持几年到几 十年的生活力。 孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞，个体微小， 通常是适应于从不利环境条件中存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能 直接发育成新个体。
用途
_工__业___生__产
物理 性质
化学 成分
用 途
半固体培养基 加凝固剂，如
__固__体__培养基
琼脂
观察微生物的运动、分类、鉴定
微保生藏物菌分_种__离_、鉴___定_、活菌计数、
_天___然__培养基
含化学成分不明确的 天然物质
工业生产
_合___成__培养基
培养基成分明确(用化学成分 已知的化学物质配成)
牛肉膏 天然培养基，主要提供C源、磷酸盐和维生素、N源。
玉米粉
主要提供C源与能量
②．大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌等微生物营养类型。
大肠杆菌：异养兼性厌氧型 乳酸菌：异养厌氧型
硝化细菌：自养需氧型
③由①②可以得到什么结论？
根据不同的微生物营养类型不同，选择配制不同的培养基。 ④．微生物培养与植物组织培养的营养成分区别？
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2、液体培养法
（1）试管液体培养 （2）浅层液体培养 （3）摇瓶培养 （4）台式发酵罐
（二）厌氧培养 法
1 固体培养法：（加入还原剂）
（1）高层琼脂柱 （早期） （2）厌氧培养皿 （早期） （3） 亨盖特厌氧试管技术 （现在） （4）厌氧罐技术 （现在） （5）厌氧手套箱（现在）
2 液体培养
在实验室中，用液体培养基培养厌氧 菌时，一般采用加有还原剂的深层液体 培养基，或同时在液面上封一层石蜡油 或凡士林-石蜡油，则可保证专性厌氧菌 的生长。
二、生产实践中的微生物培养法
（一）好养培养法
1、固体培养法 好氧菌的固体培养方法都是将接过种的固体
基质薄薄地摊铺在容器表面，这样，既使微生物 获得充分的氧气，又使微生物在生长过程中产生 的热量及时释放。
2、液体培养法 （1）浅盘培养 （2）利用发酵罐作深层液体培养
机械搅拌通风发酵罐Fra bibliotek微生物的培养方法优秀课 件
好氧菌 微好氧菌 兼性厌氧菌 厌氧菌 耐氧 菌
微生物培养法
固体培养
实验室
好氧 厌氧
液体培养 固体培养 液体培养
好氧 生产实践
厌氧
固体培养
液体培养 固体培养 液体培养
一、实验室培养法
（一）好氧培养法
1、固体培养 主要有试管斜面、培养皿平板及较大型的 克氏扁平、茄子瓶等的平板培养方法。