透射电镜样品的制备方法(精)
透射电镜生物样本制备流程及注意事项
透射电镜生物样本制备流程及注意事项透射电镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM)是一种使用电子束而不是光束进行成像的显微镜。
它可以提供高分辨率的图像,因此被广泛应用于生物样本的观察和研究。
然而,由于其特殊的工作原理和生物样本的复杂性,透射电镜生物样本的制备过程需要注意一些关键的步骤和细节。
下面将逐步介绍透射电镜生物样本制备流程及注意事项。
一、样品固定1.选择合适的固定剂:固定剂的选择应根据所研究的样本类型和要观察的细胞结构而定。
常用的固定剂包括戊二醛(glutaraldehyde)、乙酰化亚胺(acrolein)、纤维蛋白素(formaldehyde)等。
2.采取合适的固定时间和固定温度:固定时间和温度应根据固定剂的要求和样本的特性进行优化。
通常情况下,固定时间为数小时至数天,温度在4℃至25℃之间。
3.注意透射电镜样品的固定深度:样品应保持较小的厚度以便透射电子束的穿透。
二、样品剖解1.剖解细胞膜:通常采用超声波振荡或冷冻断裂等方法来剖解细胞膜。
超声波振荡可用于含有细胞膜的细胞或组织,而冷冻断裂则适用于脆弱细胞和膜脂体系。
2.剖解细胞核:利用离心裂解法可以将细胞核分离出来。
离心裂解可分为机械法和渗透法两种,机械法利用高速离心的作用将细胞核分离,而渗透法则是通过渗透剂将细胞核溶胀并破碎。
三、样品固化1.脱水:样品在固定后需要进行脱水处理,以便在后续的步骤中更好地渗透和浸透。
常用的脱水剂有乙醇、丙酮和乙醚等,脱水过程往往需要进行多次重复。
2.浸透:在脱水后,样品需要在树脂中进行浸透,使其固化为坚硬的样品。
通常采用环氧树脂或比较稳定的丙烯酸树脂来进行浸透。
这一步骤通常需要较长时间,如数小时甚至数天。
3.树脂填充:浸透后的样品需要在模具中进行树脂填充,并在适当的温度下进行固化。
树脂填充的过程需要注意排除气泡和避免过度填充。
四、样品切片1.选择合适的切割工具和方法:样品通常使用切片机和切片刀进行切割。
透射电镜制样流程
透射电镜制样流程透射电镜(Transmission Electron Microscopy,TEM)制样是指通过一系列的化学和物理方法来制取透射电镜所需的样品。
透射电镜是一种高分辨率的显微镜,可以在纳米尺度下观察材料的原子结构和微观形态。
为了获取高质量的TEM图像,制样过程非常关键。
下面将详细介绍透射电镜制样的流程。
1.样品制备:样品可以是纳米颗粒、薄膜、纤维或生物样品等。
首先,准备适宜的基底材料,如碳膜覆盖的铜网格或碳膜覆盖的铜刀片。
样品通常需要制成非常薄的切片,通常在50到100纳米的厚度范围内。
制备方法包括机械切割、电解石蠟切片、离子切割或电离蚀刻等。
2.固定和固化:对于生物样品,需要先进行固定处理,以保持样品的形态和结构。
常用的固定剂包括戊二醛、酸性醛或重金属盐。
然后,固定的样品需要进一步处理以固化,如用过氧化物、树脂或聚合物进行浸渍,以增加样品的稳定性。
3.切割和悬浮:将固化的样品切割成适当的尺寸和形状。
使用超微切割机、离子切割仪或其他切割工具进行切割。
切割后,样品通常会悬浮在水或有机溶液中,以便进一步处理。
4.脱水和对比染色:脱水是将样品从水中逐渐转移到有机溶剂中的过程。
这种处理可以控制样品的体积,以减少对比染色和观察中的伪影。
脱水通常通过渗透固定液逐渐转移,然后通过有机溶剂(如醋酸乙酯、丙酮或丙二醇)进行交换。
5.嵌入:将样品嵌入到透明的聚合物或树脂中。
嵌入过程中,通常采用逐渐增加浓度的树脂混合物,以确保样品得到完全浸透。
然后,将样品与树脂进行硬化,通常在高温下进行。
6.超薄切片:将固化的样品切割成非常薄的切片。
使用超薄切片机和钻磨刀片进行切割。
切割后的切片应尽快收集并转移到透明的铜网格或铜刀片上。
7.超薄切片处理:超薄切片通常需要进行后继处理以增强对比度和解决其他问题。
这可能包括染色、胶层增强或薄膜剥离等方法。
8.观察:将制备好的样品放入透射电镜中进行观察。
在观察前,样品需要在真空中或过氮气中去除气泡和其他杂质。
透射电镜样品制备方法
透射电镜样品制备方法
首先,样品的准备是透射电镜制备的第一步。
在进行透射电镜
样品制备之前,需要选择合适的样品。
样品可以是固体材料、生物
组织、纳米材料等,根据研究的目的和对象进行选择。
在选择样品
的过程中,需要考虑样品的形态、尺寸、结构等因素,以确保样品
能够满足透射电镜观察和分析的要求。
其次,样品的制备过程需要严格控制。
对于固体材料样品,通
常需要将样品切割成薄片或薄膜,以确保透射电镜的电子束能够穿
透样品并产生清晰的像像。
对于生物组织样品,通常需要进行化学
固定、脱水、包埋等处理,以保持样品的形态和结构。
对于纳米材
料样品,通常需要将样品分散在适当的溶剂中,并在透射电镜网格
上制备成薄膜。
在样品制备的过程中,需要注意避免样品的污染和
损坏,确保样品的原貌和结构不受影响。
最后,在透射电镜样品制备完成后,需要进行适当的检测和验证。
可以通过光学显微镜、扫描电子显微镜等手段对样品进行初步
的观察和分析,以确保样品的质量和完整性。
在透射电镜观察之前,还需要对样品进行真空干燥等处理,以避免在透射电镜中产生气泡
和水膜等影响观察效果的问题。
总之,透射电镜样品制备是透射电镜观察和分析的基础,正确的样品制备方法对于获得准确、可靠的实验结果至关重要。
在进行透射电镜样品制备时,需要选择合适的样品、严格控制制备过程,并进行适当的检测和验证,以确保样品的质量和完整性。
希望本文提供的透射电镜样品制备方法能够对相关研究工作有所帮助。
透射电镜样品制备步骤
透射电镜样品制备步骤透射电镜是一种重要的材料表征技术,它利用电子的波动性和微粒性来观察材料的结构和性质。
为了能够使用透射电镜观察样品,首先需要对样品进行制备。
透射电镜样品制备步骤如下:1.选择合适的样品:透射电镜样品可以是固体、液体、薄膜或纳米颗粒等。
根据研究目的和样品性质选择合适的样品。
2.样品预处理:根据样品性质的不同,进行必要的预处理。
例如,对于固体样品,可以选择切割、抛光或电解抛光等方法来得到平滑的表面。
3.样品固定:将样品固定到透射电镜样品架上。
不同的样品有不同的固定方法。
例如,对于固体样品,可以使用导电胶将其固定在样品架上。
4.薄层制备:对于厚度过大的样品,需要将其制备成透明的薄层以便透射电镜观察。
常用的方法有机械研磨、电子束刻蚀或离子束刻蚀等。
5.样品清洁:将样品放入超声波清洗机中进行清洗,以去除可能附着在样品表面的杂质或污染物。
6.特殊处理:如果需要对样品进行特殊处理,例如加热、冷冻处理或受到特定环境气氛的影响等,根据需要进行相应的处理。
7.样品干燥:将样品放入真空或氮气环境中,以确保样品干燥。
避免样品受到水汽的污染。
8.获得薄片:使用切片机将固态样品切割成适当厚度的薄片。
为了获得高质量的薄片,可以选择特殊的切片工具和技术,例如离子束切片或低速钻磨切片。
9.薄片形状整理:使用不同的研磨和抛光方法,将薄片的形状和表面进行调整,以确保样品的平滑度和一致性。
10.网格制备:将薄片粘贴在透射电镜网格上。
网格可以增强样品的稳定性和保护,同时提供用于定位和标识的标记。
11.后续处理:根据研究目的和透射电镜分析的要求,可以对样品进行进一步处理。
例如,可以进行染色、脱膜、溅射或腐蚀等处理。
以上是透射电镜样品制备的一般步骤。
不同样品和研究目的可能会有所不同。
因此,根据具体的研究需求和样品特点,制备过程可以做相应的调整和优化。
透射电镜的样品制备方法详解
透射电镜的样品制备透射电镜的样品制备是一项较复杂的技术,它对能否得到好的TEM像或衍射谱是至关重要的.投射电镜是利用样品对如射电子的散射能力的差异而形成衬度的,这要求制备出对电子束"透明"的样品,并要求保持高的分辨率和不失真.电子束穿透固体样品的能力主要取决加速电压,样品的厚度以及物质的原子序数.一般来说,加速电压愈高,原子序数愈低,电子束可穿透的样品厚度就愈大.对于100~200KV的透射电镜,要求样品的厚度为50~100nm,做透射电镜高分辨率,样品厚度要求约15nm(越薄越好).透射电镜样品可分为:粉末样品,薄膜样品,金属试样的表面复型.不同的样品有不同的制备手段,下面分别介绍各种样品的制备.(1)粉末样品因为透射电镜样品的厚度一般要求在100nm以下,如果样品厚于100nm,则先要用研钵把样品的尺寸磨到100nm以下,然后将粉末样品溶解在无水乙醇中,用超声分散的方法将样品尽量分散,然后用支持网捞起即可.(2)薄膜样品绝大多数的TEM样品是薄膜样品,薄膜样品可做静态观察,如金相组织;析出相形态;分布,结构及与基体取向关系,错位类型,分布,密度等;也可以做动态原位观察,如相变,形变,位错运动及其相互作用.制备薄膜样品分四个步骤:a将样品切成薄片(厚度100~200微米),对韧性材料(如金属),用线锯将样品割成小于200微米的薄片;对脆性材料(如Si,GaAs,NaCl,MgO)可以刀将其解理或用金刚石圆盘锯将其切割,或用超薄切片法直接切割.b切割成φ3mm的圆片用超声钻或puncher将φ3mm薄圆片从材料薄片上切下来.c预减薄使用凹坑减薄仪可将薄圆片磨至10μm厚.用研磨机磨(或使用砂纸),可磨至几十μm.d终减薄对于导电的样品如金属,采用电解抛光减薄,这方法速度快,没有机械损伤,但可能改变样品表面的电子状态,使用的化学试剂可能对身体有害.对非导电的样品如陶瓷,采用离子减薄,用离子轰击样品表面,使样品材料溅射出来,以达到减薄的目的.离子减薄要调整电压,角度,选用适合的参数,选得好,减薄速度快.离子减薄会产生热,使样品温度升至100~300度,故最好用液氮冷却样品.样品冷却对不耐高温的材料是非常重要的,否则材料会发生相变,样品冷却还可以减少污染和表面损伤.离子减薄是一种普适的减薄方法,可用于陶瓷,复合物,半导体,合金,界面样品,甚至纤维和粉末样品也可以离子减薄(把他们用树脂拌合后,装入φ3mm金属管,切片后,再离子减薄).也可以聚集离子术(FIB)对指定区域做离子减薄,但FIB很贵.对于软的生物和高分子样品,可用超薄切片方法将样品切成小于100nm的薄膜.这种技术的特点是样品不会改变,缺点是会引进形变.(3)金属试样的表面复型即把准备观察的试样的表面形貌(表面显微组织浮凸)用适宜的非晶薄膜复制下来,然后对这个复制膜(叫做复型)进行透射电镜观察与分析.复型适用于金相组织,断口形貌,形变条纹,磨损表面,第二相形态及分布,萃取和结构分析等.制备复型的材料本身必须是"无结构"的,即要求复型材料在高倍成像时也不显示其本身的任何结构细节,这样就不致干扰被复制表面的形貌观察和分析.常用的复型材料有塑料,真空蒸发沉积炭膜(均为非晶态物质).常用的复型有:a塑料一级复型,分辨率为10~20nm;b炭一级复型,分辨率2nm,c塑料-炭二级复型,分辨率10~20nm;d萃取复型,可以把要分析的粒子从基体中提取出来,这种分析时不会受到基体的干扰.除萃取复型外,其余复型只不过是试样表面的一个复制品,只能提供有关表面形貌的信息,而不能提供内部组成相,晶体结构,微区化学成分等本质信息,因而用复型做电子显微分析有很大的局限性,目前,除萃取复型外,其他复型用的很少.。
透射电镜样品制备方法
透射电镜样品制备方法透射电镜(Transmission Electron Microscopy,简称TEM)是一种高分辨率的显微镜,能够观察到原子尺度的物质结构。
在进行透射电镜观察前,样品的制备是至关重要的一步。
本文将介绍透射电镜样品制备的方法,希望能够帮助大家更好地进行样品制备工作。
首先,样品的制备要求样品具有一定的薄度。
因此,在进行透射电镜观察前,通常需要将样品切割成极薄的切片。
对于生物样品,可以采用超薄切片机进行切割;对于金属、陶瓷等样品,可以采用离子蚀刻或机械打磨的方法制备薄片。
在进行切割或打磨时,需要保持样品表面的平整和光洁,以确保透射电镜观察时获得清晰的图像。
其次,样品的制备还需要考虑到样品的固定和染色。
对于生物样品,固定和染色是非常重要的步骤。
固定可以保持样品的形态和结构不变,而染色则可以使样品在透射电镜下更易于观察。
常用的固定剂包括乙醛、戊二醛等,而染色剂则根据需要选择不同的染色方法。
另外,样品的制备还需要考虑到样品的支撑。
在进行透射电镜观察时,样品通常需要支撑在一种载体上,以便于放置在透射电镜的样品台上。
常用的载体包括碳膜、网格和硅片等。
在选择载体时,需要考虑到载体的透明性、机械强度和热稳定性等因素。
最后,样品的制备还需要考虑到真空条件。
透射电镜通常在高真空环境下进行观察,因此样品制备时需要保证样品的干燥和密封。
特别是对于生物样品,需要进行脱水和干燥处理,以避免在真空环境下产生气泡或水蒸汽,影响透射电镜观察效果。
总之,透射电镜样品制备是透射电镜观察工作中至关重要的一步。
在进行样品制备时,需要考虑到样品的薄度、固定和染色、支撑和真空条件等因素,以确保最终获得清晰、准确的透射电镜图像。
希望本文介绍的方法能够对大家进行透射电镜样品制备工作有所帮助。
透射电镜常规样品制备流程(精)
透射电镜样品制备流程由于透射电镜能观察的样品必须很薄(60~70nm),所以透射电镜的样品准备要求很严格,方法也很单一,仅有一下两种方法:一.负染色技术负染色技术简单快速,可以显示生物大分子、细菌、分离的细胞器以及蛋白晶体等样品的形态、结构、大小以及表面结构的特征。
尤其在病毒学中,负染色技术有着广泛的应用。
样品要求:①样品悬液的纯度不要求很纯,但是如果杂质太多,如大量的细胞碎片,培养基残渣,糖类以及各种盐类结晶的存在都会干扰染色反应和电镜的观察。
尤其是不能有过多的糖类,因为在电子束的轰击下,糖类容易碳化而有碍观察,因此样品要适当提纯。
②样品悬液的浓度要适中,太稀在电镜下很难找到样品,太浓样品堆积影响观察。
操作流程:吸取样品悬液滴到有膜的铜网上,静置数分钟,然后用滤纸吸去多余的液体,滴上负染色液,染色1~2min后滤纸吸去负染色液,待干后用于电镜观察。
二、超薄切片技术超薄切片技术是为透射电镜观察提供薄样品的专门技术,是生物学中研究细胞超微结构最常用的技术。
广泛应用于生物体的各种细胞的超微结构观察。
一般厚度在10~100nm的切片称为超薄切片,制作这种切片的技术叫做超薄切片技术。
超薄切片制作的过程包括取材、固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片和染色等几个环节,和一般光学显微镜的石蜡切片过程相似。
但是,超薄切片切片过程更为细致与复杂,要求更严格,而且所用的试剂比较昂贵、配制复杂、强致癌。
具体操作步骤、注意事项如下:1.取材和前固定:快速的切取大小为0.5~1.0mm3的样品块,一分钟内把组织(样品)块浸入2.5%戊二醛(进口品质)溶液(取样前来平台领取),每个离心管内装20个以上的样品块,作为一个样送到平台。
要求:①取材前一定要和工作人员取得电话联系!②取材选择部位要准确可靠,确保每块材料都是要观察的部位。
③所有植物样品一定要抽真空,能够沉底的样品也抽真空15mins,不能沉底的样品一定要抽真空致沉底!④细菌、散在细胞等不能成块的样品,加戊二醛固定液,离心沉淀后送到平台,由平台工作人员处理。
透射电镜制样方法
透射电镜制样方法
透射电镜制样方法主要包括以下步骤:
1. 样品制备:首先需要选择合适的样品,并进行必要的前处理。
根据需要,可以使用传统的金相方法,如切片、打磨和腐蚀等来制备样品;也可以使用更先进的方法,如离子切片、聚焦离子束等来制备样品。
2. 高真空处理:将样品置于高真空环境下进行处理,以去除气体和水分的影响。
这可以通过在真空槽中加热样品、通入惰性气体等方法来实现。
3. 制备薄片:将制备好的样品制备成足够薄的薄片,通常厚度要求在几十纳米至几百纳米之间。
这可以通过使用超薄切片机或聚焦离子束来实现。
4. 电导涂层:为了提高样品的导电性,可以在样品表面涂上金薄层或碳薄层。
这可以通过蒸镀、溅射、离子镀等方法来实现。
5. 透射电镜成像:将制备好的样品放入透射电镜中,调整仪器参数,如加速电压、透镜聚焦等,进行成像。
可以使用像差校正技术、电子衍射等方法来提高成像质量。
需要注意的是,不同样品的制备方法会有一定差异,制备薄片时要注意避免样品的破裂和变形,电导涂层要均匀且致密,成像时要注意样品与探针的相对位置等
细节问题。
此外,透射电镜制样方法还包括一些先进的技术,如原位制备、低温制备、离子减薄等,可以根据需要选择适合的方法进行制备。
透射电镜样品制备方法及优缺点
透射电镜样品制备方法及优缺点
透射电镜样品制备主要分为两步,即液体/固体样品处理和超薄切片制备。
1、液体/固体样品处理
第一种方法是基于普通电镜样品制备的双步处理法,即第一步用电子束处理样品表面,使其导电,再经过透射电子束进行处理。
在这种方法下,样品表面层只有几百到几千纳米厚,因此,只有比较薄的样品才能够得到满意的结果。
另一种方法是采用高真空下的固态电子涂覆,即将样品表面涂覆上薄层特殊金属。
例
如可以用铱、金、铂或其它金属的熔合物作为涂层,以获得特殊的涂层电导能力,从而保
证样品的电子图像分辨率和可视深度。
2、超薄切片制备
超薄切片制备分为超声切片和非超声切片两类。
超声切片通常是采用高能量超声波振
荡使容易被劈开的液体/固体样品形成自发非规则薄片,有时还可以加入一定量的碎薄片,从而使超声对样品的透射变的更容易,提高了结果的准确性。
非超声切片制备则采用比较稳定的技术来实现,如钻石刀片切割、钝型刀制备和原子
力显微镜焦点束来制备,具有薄层切片准确厚度的特点,且可以满足多层次数据获取。
优点:
1、透射电镜样品制备要求低,可以在常规实验室条件下完成,便于实验和分析;
2、采用精确远离样品表面的电子束,使放大比例高,且能够获得更高的分辨率和更
深的可视深度;
3、三维结构复杂的物质可以藉由采用不同的金属包覆来进行分析;
1、制备过程繁琐复杂,容易出现样品分析结果不精确的情况;
2、物质表面多层次结构信息分析难度大,可能会影响分析结果准确性;
3、结构深度较大时,获取信息较困难,分析效果受到影响。
透射电镜样品制备与观察实验指导书(精)
兰州理工大学学生实验指导书学院实验室课程名称实验类型实验名称指导教师材料科学与工程学院实验中心材料分析、测试方法综合性透射电镜样品制备与观察陈经民透射电镜样品制备与观察实验指导书1、实验原理及其目的1.1、透射电镜的组成与原理透射电镜是研究材料的重要仪器之一。
透射电镜通过加速高压发射电子,并使电子束透射试样后,与试样内部原子发生相互作用,从而改变其能量及运动方向。
由于不同结构具有不同的相互作用,因而,就可以根据透射电子图象所获得的信息,来了解试样内部的晶体结构。
由于试样结构和相互作用的复杂性,因此透射电镜所获得的图象也很复杂。
它不象表面形貌那样直观、易懂。
因此,如何对一张电子图象获得的信息作出正确的解释和判断,不但很重要,也很困难,必须根据相应的理论才能对透射电子象作出正确的解释。
透射电镜的组成与原理1.2、透射电镜样品的制备原理及方法1.2.1粉体材料样品的制备原理及方法将材料的粉末经研磨、过滤等方法,将粉末颗粒的粒径控制在50nm以下,然后取少量粉末放入装有无水乙醇(根据材料不同,也可选用甲苯、丙酮等)溶液的小试管中,再放入超声波振荡器中震荡10分钟左右,使粉末颗粒充分悬浮在溶液中。
最后将溶液滴到铜网或微栅上(观测倍数在20万倍以下时,用铜网;观测倍数在20万倍以上时,用微栅),即可放入透射电镜中观测。
1.2.2块体材料样品的制备原理及方法首先用金刚石圆锯或线切割机将块体材料切割成厚度为0.5mm以下、面积为2平方cm以上的薄片,再用砂纸将其厚度打磨到0.1mm以下。
然后用样品冲片器将薄片冲成直径为3mm的小圆片,再用凹坑仪在小圆片的中心位置凹一个小坑,以备用。
1.2.2.1导电材料样品的制备原理及方法导电材料可通过双喷电解的方法,对样品进行电解腐蚀,最终减薄样品。
电解抛光减薄是制备金属薄膜最常用的方法之一。
双喷射电解减薄器是其中主要的一种装置。
其特点是:(1). 采用同轴光导控制,在金属薄片抛光减薄穿孔时能接收到光信号,穿孔后立即报警。
简述透射电镜中样品制备的常用方法
透射电镜中样品制备的常用方法透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)是一种重要的高分辨率显微镜,常用于研究物质的微观结构和性质。
在使用透射电镜观察样品之前,需要对样品进行制备,以确保样品的质量和形貌。
本文将介绍透射电镜中常用的样品制备方法,包括样品的选择、切片制备、薄膜制备等。
1. 样品的选择在进行透射电镜观察之前,样品的选择非常重要。
通常,样品需要满足以下要求:•样品具有一定的透明度,能够让电子束穿透。
•样品存在较为稳定的晶体结构,以便进行晶体学分析。
•样品的尺寸合适,不过大以免超出透射电镜的观察范围。
•样品的形状和厚度需适合观察操作。
常见的样品包括金属、有机物、无机晶体、陶瓷和生物样品等。
2. 切片制备透射电镜观察样品的常用方法之一是制备薄片,即切片制备。
切片制备的目的是将样品制备成适合透射电镜观察的薄片,通常要求薄片的厚度在几百纳米到几微米之间。
切片制备的步骤如下:步骤1:固定样品对于生物样品,首先需要将样品固定。
常用的固定方法包括冷冻固定、化学固定和凝胶固定等。
这些方法可以保持样品原有的结构和形态。
步骤2:取样从固定的样品中取出小块样品,通常使用显微针或者显微刀进行操作。
步骤3:去脂处理(可选)对于脂肪含量较高的样品,需要进行去脂处理。
常见的方法包括冷冻去脂、溶液去脂等。
步骤4:嵌培将取样得到的样品嵌入切片中,嵌培有多种方法。
常用的方法包括:冷冻嵌培、树脂嵌培等。
步骤5:切割将嵌培好的样品进行切割。
切割时需要使用马来酸酐刀或者超薄刀,在适当的位置进行切割,得到适合的样品。
步骤6:收集和保护薄片将切割好的薄片收集并放置在适当的载玻片或网格中,然后进行保护。
保护可以使用丙酮或乙醇进行漂洗、涂层等方法。
3. 薄膜制备除了切片制备外,透射电镜观察样品的另一种常用方法是薄膜制备。
相对于切片制备,薄膜制备更加灵活,可以制备更薄的样品。
薄膜制备的步骤如下:步骤1:样品制备制备需要制备的样品,并确保样品的表面较为光滑。
纳米材料透射电镜样品制备方法
纳米材料透射电镜样品制备方法
制备纳米材料透射电镜样品是一项复杂的过程,需要精密的操
作和合适的设备。
以下是一种常见的制备方法:
1. 样品准备,首先,需要选择合适的纳米材料,例如金属纳米
颗粒或纳米结构的半导体材料。
然后,将样品分散在适当的溶剂中,如乙醇或丙酮,以获得均匀的分散液。
2. 标本制备,将分散的纳米材料溶液滴在碳膜覆盖的透射电镜
网格上。
通过自然干燥或者较低温度的热处理,使样品均匀地分布
在网格上,并且避免聚集和团聚。
3. 真空干燥,将样品置于真空中进行干燥,以去除溶剂和任何
可能的残留物,确保样品的纯净度和稳定性。
4. 透射电镜观察,将制备好的样品放入透射电镜中进行观察。
在观察之前,通常需要使用离子束或者溅射技术制备悬臂梁样品,
以确保样品的薄度和透明度。
此外,还有一些其他的制备方法,如冷冻切片法、离子磨薄法
等,可以根据具体的样品特性和研究需求选择合适的方法。
在制备过程中,需要注意样品的稳定性和纯净度,避免杂质的引入和样品的变形。
同时,也需要根据透射电镜的要求,调整样品的厚度和形貌,以获得清晰的观察结果。
总的来说,纳米材料透射电镜样品的制备是一个细致而关键的步骤,对于后续的观察和分析具有重要意义。
透射电镜的制样方法
形貌的细节特征。 • 常用的复型材料是对电子束透明的薄膜——非晶碳膜、各种塑料薄膜和氧化物薄
膜)。
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三、间接样品(复型)的制备
• 在电镜中易起变化的样品和难以制成薄膜的试样采用此方法. • 表面显微组织浮雕的复型膜,只能进行形貌观察和研究,不能研究试样的成分
分布和内部结构。
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复型的种类
• 按复型的制备方法,复型主要分为:
•
一级复型
•
二级复型
•
萃取复型(半直接样品)
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电解双喷 1 。 电 解 双 喷 时 , 一 般 要 进 行 冷 却 , 常 用 液 氮 加 酒 精 的 方 法 来 冷 却 , 尤 其 是 钢 铁 材 料 , 必 须 冷 却 , 而 且
最好用液氮。 2。电解双喷时,要调好电流和电压的值,只有电流和电压的值处于电解抛光的平台时,才能制造出好
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粉末(纤维)样品的断面
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2. 晶体薄膜样品
• 块状材料多采用此方法。 • 通过减薄制成对电子束透明的薄膜样品。 • 薄膜样品制备方法要求: ①薄膜样品的组织结构必须和大块样品相同,且制备过程中不引起材料组织的变
化。 ② 薄,相对电子束而言必须有足够的“透明度”,且避免薄膜内不同层次图像的
重叠,干扰分析。 ③ 具有一定的强度。
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晶体薄膜法
• 薄膜样品制备步骤: ① 切取:切取薄块(厚度<0.5mm) ② 预减薄:用机械研磨、 Dimpling、化学抛光等减薄成“薄片”(0.1mm) ③ 终减薄:用电解抛光、离子轰击减薄成“薄膜”(<500nm)(视材料而
金属透射电镜样品制备方法详解(精)
机械切割→手工磨光→冲样→预减薄→最终减薄1.机械切割:将样品切成厚度为100~200微米的薄片;确定取样部位和试样的大小。
为了防止组织的改变,切割时必须注意以下两点:(1).防止切割时金属发生变形。
(2).防止金属材料因受热引起组织的变化。
切割试样的工具有很多,比如手锯、锯床、砂轮切割机、显微切片机等。
切割前应该根据试样的大小和材料的软硬,选择合适的方法切割。
金属切样后的形状一般选择方柱形和圆柱形,其尺寸不宜过大或过小,尺寸太小,拿起来不太方便,且容易造成边缘缺陷和磨面不平坦;试样过大,研磨时耗费时间多,同样试样的磨面也易残留磨痕和其他缺陷。
对于金属样品,一般采用线切割的方法。
2. 手工磨光:金属试样机械切割后,表面都很粗糙且具有严重的变形层,故需要不同粒度的金相砂纸逐步磨光。
砂纸主要有两类:1)干砂纸,是在干的条件下磨光,这类砂纸是刚玉砂纸,多半是混合刚玉磨料制成的砂纸,一般呈灰棕色。
因为这类砂纸含有较软的相(Fe2O3),磨光时易碎化脱落,因此需要清理脱落的磨粒或更换砂纸;2)水砂纸,在水冲刷的条件下使用最好。
金属样品好像用的较少。
手工磨光时,将砂纸铺在玻璃或平板上,将试样磨面轻压在砂纸上,并且向前推行,进行磨光,知道试样磨面仅留有一个方向的均匀磨痕为止。
在磨光的回程中最好将试样提起拉回,步与砂纸接触。
磨光选用什么粒度的砂纸主要与磨平的试样表面的粗糙程度以及材料的软硬有关。
磨光操作每更换细一号砂纸时,为了便于观察前一道砂纸留下的较粗磨痕的消除情况,磨面磨削的方向应该与前一号砂纸磨痕方向成90或45度。
3.冲样:金属材料韧性比较好,可在冲样机上冲出直径为3mm的小圆片,也可用机械切片机(mechanical punch)将直径3mm薄圆片从材料上切下来。
一个设计得很好的机械切片机只会在切下的小圆片的圆周上引起很小的损伤,但对某些材料机械切片时产生的冲击可造成剪切变形。
4.预减薄:如果冲样前的试样磨得不是很好,此时可以在砂纸上再次手工研磨。
透射电镜样品制备
透射电镜样品制备引言透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope, 简称TEM)是一种非常强大的高分辨率成像技术,可以用于观察材料的结构和组织,以及研究纳米级别的材料特性。
在使用TEM进行实验之前,必须制备一种称为透射电镜样品的特殊样品。
透射电镜样品制备的关键是制备出足够薄的样品,以便电子可以通过样品而不会被散射或吸收。
本文将介绍透射电镜样品制备的常用方法和步骤。
方法1. 切割样品透射电镜样品通常需要从大块的材料或器件中切割出来。
首先,选择合适的切割工具,如金刚石刀片或钨丝刀,以确保能够切割出薄片。
然后,将待切割的材料固定在切割台上,并将其固定好。
使用切割工具沿着所需的方向切割材料,控制切割角度和速度,制备出较薄的样品。
2. 技术腐蚀技术腐蚀是一种常用的透射电镜样品制备方法,可以在保持样品形状和结构的情况下,去除样品表面的杂质。
首先,将样品放置在腐蚀液中,如酸性或碱性溶液中。
然后,根据所需的腐蚀速率和选择的溶液,控制腐蚀时间,使材料的表面逐渐溶解。
腐蚀完成后,取出样品并用纯水冲洗,最后用热空气干燥。
3. 离心旋涂法离心旋涂法是一种常用的制备透射电镜样品的方法,适用于制备薄膜和纤维样品。
首先,将待制备的样品溶液或悬浮液滴在旋涂机的旋盘中心。
然后,启动旋涂机,使旋盘高速旋转。
在旋涂过程中,液体会在旋盘边缘形成薄膜或纤维,而溶剂则会挥发掉。
当样品完全干燥后,取出样品即可。
4. 离子磨蚀离子磨蚀是一种制备透射电镜样品的高级方法。
它可以控制样品的厚度和形状,并在其表面形成平坦的区域。
首先,将样品放置在磨蚀仪中,并选择合适的离子束参数。
然后,启动磨蚀仪,使离子束磨蚀样品表面。
通过控制磨蚀时间和离子束能量,可以获得所需的样品厚度和表面平整度。
结论透射电镜样品制备是进行TEM实验的关键步骤之一。
通过选择合适的方法和技术,可以制备出足够薄的样品,以便电子能够透射而不被散射或吸收。
透射电镜常规样品制备流程
透射电镜常规样品制备流程
透射电镜是电子显微镜技术中最重要的一种技术,普通晶体样品的常
规样品制备流程如下:
1、样品的准备:将样品、水、石蜡、助融剂(如NaCl)、磷酸盐、石墨、甲醛和电子源材料(碳粉)准备好备用,并配合温度控制装置使用。
2、样品处理:将样品用接近样品发热点的温度处理,一般为200?C,把样品放入室温保温的石蜡,再将该石蜡分别放入不同的温度槽,如助融
剂的温度可以高于样品放置温度。
3、镀膜:将样品放置在硝酸银或碳材料的固体膜下,镀膜时,将碳
气体经过电子枪加热,形成形状与原子相同的表面。
4、结晶:首先需要将样品放置在一定温度和压力下,进行结晶,再
将研磨剂如磷酸盐、石墨和水添加到样品中,使样品迅速结晶,并在腔内
升温至合适温度,加快结晶过程。
5、夹具的清洗:在滴定液中加入抗蚀剂,夹具进行清洗,确保样品
无几何不良影响。
6、取晶体:用软金属夹具取出晶体,放在清洗过的滴定液中浸泡,
以使样品重新渗透,然后将样品放入滴定液腔中,进行滴定,使样品表面
无污染物。
7、安装样品:用金刚石夹具将样品安装在金刚石台子上,并将其固定,以保证样品的准确安装。
tem透射电镜的样品制备方法
tem透射电镜的样品制备方法TEM(透射电子显微镜)是一种高分辨率的显微镜,可以观察到物质的微观结构和原子级的细节。
TEM样品的制备是获取高质量TEM图像的关键步骤之一、下面将介绍一些常用的TEM样品制备方法。
1.机械切片法:通过将所研究物质切片成非常薄的片,以便电子束能够透过样品。
这种方法适用于硬材料或质地坚硬的样品。
首先,使用机械工具(如剪刀)或精密切割仪来制备尺寸较小的薄片。
随后,使用刮刀等工具,将薄片轻轻地转移到透明的TEM样品网格上。
最后,用气吹干净样品,并使用显微镜检查成果。
2.离心沉淀法:使用这种方法,可以制备到具有较大颗粒的样品。
首先,将所研究的材料分散在适当的溶剂中,并用超声波处理来消除聚集物。
然后,使用离心机将样品离心,使颗粒沉淀在薄网格上。
最后,将样品干燥,并用透明胶带密封以保持样品稳定。
3.冻脱水法:这种方法适用于液态或可溶性样品。
首先,将样品溶解在适当的溶剂中,然后将溶液滴到一片透明的TEM样品网格上。
接下来,将样品迅速冷冻,使其形成冻结状态,并使用真空甚至液氮将水从样品中去除。
最后,将样品干燥,并用透明胶带密封以保持样品稳定。
4.薄膜制备法:对于一些材料,可以通过溅射、蒸镀、离子束制备等方法制备薄膜样品。
这种方法适用于需要研究材料的表面结构和形貌的情况。
通过这些技术,可以在TEM样品网格上制备出具有亚纳米尺寸的薄膜。
无论使用哪种方法,请确保样品制备过程中防止氧化或其他污染物的入侵,以保持样品的原始状态。
此外,制备过程中的轻柔操作以及对透明度的注意,也是获得高质量TEM样品的关键。
最后,使用TEM显微镜观察样品前,确保样品在真空或干燥的环境中,以避免图像的模糊或扭曲。
透射电镜常规样品制备流程(精)
透射电镜样品制备流程由于透射电镜能观察的样品必须很薄(60~70nm),所以透射电镜的样品准备要求很严格,方法也很单一,仅有一下两种方法:一.负染色技术负染色技术简单快速,可以显示生物大分子、细菌、分离的细胞器以及蛋白晶体等样品的形态、结构、大小以及表面结构的特征。
尤其在病毒学中,负染色技术有着广泛的应用。
样品要求:①样品悬液的纯度不要求很纯,但是如果杂质太多,如大量的细胞碎片,培养基残渣,糖类以及各种盐类结晶的存在都会干扰染色反应和电镜的观察。
尤其是不能有过多的糖类,因为在电子束的轰击下,糖类容易碳化而有碍观察,因此样品要适当提纯。
②样品悬液的浓度要适中,太稀在电镜下很难找到样品,太浓样品堆积影响观察。
操作流程:吸取样品悬液滴到有膜的铜网上,静置数分钟,然后用滤纸吸去多余的液体,滴上负染色液,染色1~2min后滤纸吸去负染色液,待干后用于电镜观察。
二、超薄切片技术超薄切片技术是为透射电镜观察提供薄样品的专门技术,是生物学中研究细胞超微结构最常用的技术。
广泛应用于生物体的各种细胞的超微结构观察。
一般厚度在10~100nm的切片称为超薄切片,制作这种切片的技术叫做超薄切片技术。
超薄切片制作的过程包括取材、固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片和染色等几个环节,和一般光学显微镜的石蜡切片过程相似。
但是,超薄切片切片过程更为细致与复杂,要求更严格,而且所用的试剂比较昂贵、配制复杂、强致癌。
具体操作步骤、注意事项如下:1.取材和前固定:快速的切取大小为0.5~1.0mm3的样品块,一分钟内把组织(样品)块浸入2.5%戊二醛(进口品质)溶液(取样前来平台领取),每个离心管内装20个以上的样品块,作为一个样送到平台。
要求:①取材前一定要和工作人员取得电话联系!②取材选择部位要准确可靠,确保每块材料都是要观察的部位。
③所有植物样品一定要抽真空,能够沉底的样品也抽真空15mins,不能沉底的样品一定要抽真空致沉底!④细菌、散在细胞等不能成块的样品,加戊二醛固定液,离心沉淀后送到平台,由平台工作人员处理。
透射电镜样品制备方法
透射电镜样品制备方法透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM)是一种利用电子束穿透样品而观察样品结构的高分辨率显微镜。
为了获得高质量的透射电子显微镜图像,样品制备是非常重要的一步。
下面将介绍几种常见的透射电镜样品制备方法。
1.薄片制备法:薄片制备法是最常用的透射电镜样品制备方法之一、首先,将待观察的材料切割成薄片,通常使用切片机或者离心切片机进行切割。
然后,将薄片放置在网格上,并用显微镊夹持住。
接下来,使用离心机将网格和薄片一起离心,以去除多余的液体。
最后,将网格放入透射电镜中进行观察。
2.离解法:离解法适用于那些不易制备成薄片的样品。
首先,将待观察的样品制备成溶液或者悬浮液。
然后,将溶液滴在碳膜覆盖的网格上。
接下来,使用离心机将网格和溶液一起离心,使溶液在网格上均匀分布。
最后,将网格放入透射电镜中进行观察。
3.冻结法:冻结法适用于那些需要观察生物样品或者水溶液的样品。
首先,将待观察的样品制备成溶液或者悬浮液。
然后,在液氮中冷冻样品,使其迅速冻结成冰。
接下来,使用离心机将冰冻样品离心,以去除多余的液体。
最后,将网格放入透射电镜中进行观察。
4.脂溶法:脂溶法适用于那些不溶于水的样品。
首先,将待观察的样品制备成脂溶液。
然后,将脂溶液滴在碳膜覆盖的网格上。
接下来,使用离心机将网格和脂溶液一起离心,使脂溶液在网格上均匀分布。
最后,将网格放入透射电镜中进行观察。
除了以上几种常见的透射电镜样品制备方法,还有一些特殊的方法,如原位制备法、离子切割法等。
这些方法可以根据实际需求选择使用。
总结起来,透射电镜样品制备是透射电子显微镜观察样品结构的关键步骤。
合适的样品制备方法可以保证获得高质量的透射电镜图像。
不同的样品制备方法适用于不同类型的样品,研究人员可以根据实际情况选择合适的方法进行样品制备。
透射电镜样品制备方法
透射电镜样品制备方法透射电镜(Transmission Electron Microscope,TEM)是一种能够观察物质内部微观结构的高分辨率显微镜,广泛应用于材料科学、生物学、纳米技术等领域。
而透射电镜样品的制备质量直接影响到后续的观察结果。
因此,制备高质量的透射电镜样品至关重要。
下面将介绍一些常用的透射电镜样品制备方法。
首先,对于生物样品的制备,常用的方法是冷冻切片技术。
这种方法能够保持生物样品的原始结构,避免了传统化学固定和脱水过程中可能引起的伪形态。
在冷冻切片过程中,样品被快速冷冻,并在低温下切割成极薄的切片,然后通过透射电镜观察。
这种方法适用于观察生物细胞、组织等样品。
其次,对于材料样品的制备,常用的方法是机械切割和离子蚀刻。
机械切割是指利用超薄切片机或离心切片机将材料切割成极薄的切片,然后通过透射电镜观察。
而离子蚀刻则是利用离子束对材料进行加工,形成极薄的样品。
这两种方法适用于观察金属、陶瓷、半导体等材料样品。
另外,对于纳米材料的制备,常用的方法是原位制备技术。
这种方法通过在透射电镜下直接在样品表面进行原位制备,如原位成膜、原位合成等,可以观察到纳米材料的生长过程和结构特征。
这种方法适用于观察纳米颗粒、纳米线、纳米片等样品。
总的来说,透射电镜样品的制备方法多种多样,选择合适的制备方法需要根据具体样品的性质和要求来确定。
在制备过程中,需要注意样品的预处理、切割、薄化等步骤,确保样品的质量和结构完整。
通过精心制备的透射电镜样品,可以获得清晰、准确的观察结果,为后续的科研工作提供可靠的数据支持。
在透射电镜样品制备过程中,还需要注意操作规范、安全防护等问题,确保实验过程安全可靠。
同时,不同样品的制备方法可能存在差异,需要根据具体情况进行调整和改进。
希望本文介绍的透射电镜样品制备方法能够为相关科研工作者提供一些参考和帮助,促进透射电镜技术的应用和发展。
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试验材料为经过热处理后的钢材!
一、样品要求
1.粉末样品基本要求
(1)单颗粉末尺寸最好小于1μm;
(2)无磁性;
(3)以无机成分为主,否则会造成电镜严重的污染,高压跳掉,甚至击坏高压枪;
2.块状样品基本要求
(1)需要电解减薄或离子减薄,获得几十纳米的薄区才能观察;
(2)如晶粒尺寸小于1μm,也可用破碎等机械方法制成粉末来观察;
(3)无磁性;
(4)块状样品制备复杂、耗时长、工序多、需要由经验的老师指导或制备;样品的制备好坏直接影响到后面电镜的观察和分析。
所以块状样品制备之前,最好与TEM的老师进行沟通和请教,或交由老师制备。
二、送样品前的准备工作
1.目的要明确:(1)做什么内容(如确定纳米棒的生长方向,特定观察分析某个晶面的缺陷,相结构分析,主相与第二相的取向关系,界面晶格匹配等等);(2)希望能解决什么问题;
2.样品通过X-Ray粉末衍射(XRD)测试、并确定结构后,再决定是否做HRTEM;这样即可节省时间,又能在XRD的基础上获得更多的微观结构信息。
3.做HRTEM前,请带上XRD数据及其他实验结果,与HRTEM老师进行必要的沟通,以判断能否达到目的;同时HRTEM老师还会根据您的其他实验数据,向您提供好的建议,这样不但能满足您的要求,甚至使测试内容做得更深,提高论文的档次。
三、粉末样品的制备
1.选择高质量的微栅网(直径3mm),这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步;(注:高质量的微栅网目前本实验室还不能制备,是外购的,价格20元/只;普通碳膜铜网免费提供使用。
)
2.用镊子小心取出微栅网,将膜面朝上(在灯光下观察显示有光泽的面,即膜面),轻轻平放在白色滤纸上;
3.取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯,进行超声振荡10~30min,过3~5 min 后,用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液,然后滴2~3滴该混合液体到微栅网上(如粉末是黑色,则当微栅网周围的白色滤纸表面变得微黑,此时便适中。
滴得太多,则粉末分散不开,不利于观察,同时粉末掉入电镜的几率大增,严重影响电镜的使用寿命;滴得太少,则对电镜观察不利,难以找到实验所要求粉末颗粒。
建议由老师制备或在老师指导下制备。
)
4.等15 min以上,以便乙醇尽量挥发完毕;否则将样品装上样品台插入电镜,将影响电镜的真空。
四、块状样品制备
1.电解减薄方法
用于金属和合金试样的制备。
(1)块状样切成约0.3mm厚的均匀薄片;(2)用金刚砂纸机械研磨到约120~150μm厚;(3)抛光研磨到约100μm厚;(4)冲成Ф3mm 的圆片;(5)选择合适的电解液和双喷电解仪的工作条件,将Ф3mm 的圆片中心减薄出小孔;(6)迅速取出减薄试样放入无水乙醇中漂洗干净。
注意事项:
(1)电解减薄所用的电解液有很强的腐蚀性,需要注意人员安全,及对设备的清洗;
(2)电解减薄完的试样需要轻取、轻拿、轻放和轻装,否则容易破碎,导致前功尽弃;
2. 离子减薄方法
用于陶瓷、半导体、以及多层膜截面等材料试样的制备。
块状样制备(1)块状样切成约0.3mm厚的均匀薄片;(2)均匀薄片用石蜡粘贴于超声波切割机样品座上的载
玻片上;(3)用超声波切割机冲成Ф3mm 的圆片;(4)用金刚砂纸机械研磨到约100μm 厚;(5)用磨坑仪在圆片中央部位磨成一个凹坑,凹坑深度约50~70μm,凹坑目的
主要是为了减少后序离子减薄过程时间,以提高最终减薄效率;(6)将洁净的、已
凹坑的Ф3mm 圆片小心放入离子减薄仪中,根据试样材料的特性,选择合适的离子减薄参数进行减薄;通常,一般陶瓷样品离子减薄时间需2~3天;整个过程约5天。
注意事项:
(1)凹坑过程试样需要精确的对中,先粗磨后细磨抛光,磨轮负载要适中,否则试样易破碎;
(2)凹坑完毕后,对凹坑仪的磨轮和转轴要清洗干净;
(3)凹坑完毕的试样需放在丙酮中浸泡、清洗和凉干;
(4)进行离子减薄的试样在装上样品台和从样品台取下这二过程,需要非常的小心和细致的动作,因为此时Ф3mm薄片试样的中心已非常薄,用力不均或过大,很容易导致试样破碎。
(5)需要很好的耐心,欲速则不达。