医学微生物实验二(新)
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shake up 5～8 minute
Patient Serum
Negative control Positive control
.
-
+
Uniformity turbidity
White granule agglutination
ASO test: ASO titer > 1: 400 units, help
SLO胶乳试剂测定抗O试验（反应板法）
血清中ASLO的测定可用于链球菌感染的 诊断，ASLO高滴度的病人血清被适量的 SLO中和后还有多余的ASLO，这些多余的 抗体即与SLO胶乳试剂反应，出现清晰、均 匀的凝集颗粒。SLO胶乳试剂是根据免疫学 原理将羟化聚苯乙烯胶乳与SLO共价交联作 为抗原，用于测定受链球菌感染病人血清中 的ASLO。
乙型溶血性链球菌菌落
3.血浆凝固酶试验
血浆凝固酶能使含有枸橼酸钠或肝素抗 凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
凝固酶有两种：一种是分泌至菌体外的 蛋白质称为游离凝固酶；另一种结合于 菌体表面并不释放的凝固酶，称结合凝 固酶或凝聚因子。
游 离 凝
协同因 子
凝 血 酶
样
固
物
凝酶
质
固
酶
结 合
（ 纤 维
1. Patient Serum Negative control Positive control
2. Soluble streptolysin O，shake up 1～3 minute; 3. Soluble streptolysin O combine with latex beads ，
齿垢涂片
二、消毒与灭菌
1.紫外线杀菌试验
2.药敏试验
抑菌圈
抗生素滤纸片
3.化学消毒剂的杀菌试验（自做）
三、细菌的遗传变异
细菌的变异现象 1.H→O变异 2.L型变异
3.耐药性变异
1.H→O变异
变形杆菌迁徙生长现象
2.L型变异
青霉素、溶菌酶
正常形态细菌形──态──结──构→ 变L异型变异
五糖生化反应： 葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖 （指示剂-溴甲酚紫） （对应发酵管颜色：红、黄、蓝、白、黑） 大肠杆菌：⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ― 伤寒杆菌：＋ ― ＋ ＋ ―
伤寒杆菌
大肠杆菌
（2）吲哚试验 有些细菌如大肠杆菌等能分解蛋白胨
水中的色氨酸生成吲哚（靛基质），与 试剂中的对二甲基氨基苯甲醛相互作用， 形成玫瑰红色化合物，为吲哚试验阳性。
→ 沾菌的接种环在此处
管内壁上轻轻研磨
（2）玻片法 在载玻片上各滴兔血浆、盐水一滴，
取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌平 板培养物加入其中混匀，立即观察结 果。有明显小凝块出现为阳性，无此 现象者时为阴性。此法较简便，但不 如试管法锐敏、准确。
Procedures:
Rabbit plasma
NS
S. epidermidis
五、球 菌
1.球菌形态观察 2.球菌培养物观察 3.血浆凝固酶试验 4.抗O试验
1.球菌形态观察
Staphylococcus(Gram stain)
Streptococcus （Gram stain）
pneumococcus
Meningococcus
淋球菌（gonococcus）
2.球菌培养物观察 金黄色葡萄球菌菌落
抗体或补体 (部分或完全失去胞壁)
葡萄球菌
葡萄球菌L型
3. 耐药性变异
四、细菌的生化反应
1、细菌的分解代谢
根据细菌含有不相同的酶系统，可分解不 同的营养物质，用生化方法来鉴定细菌, 称细菌的生化反应．
（1）糖发酵试验(Fermentation of sugars)
细菌分解糖时，则产酸，使指示剂 变为黄色( “＋”)；有些细菌在分 解糖产酸的同时还产生气体，在管 中有气泡出现("⊕")；如细菌不分解 该糖时，指示剂不变色 ("―")。
血 浆
凝蛋
纤
固
白 原
+
酶受
体
）
维 蛋 白 原
纤维蛋白原(液态） 纤维蛋白（固态）
血浆凝固
（试管法）
细菌凝聚
（玻片法）
（1）试管法
取两支灭菌小试管，每管加入1：4稀释 的兔血浆0.5ml，用灭菌接种环沾取金黄色 葡萄球菌培养物，在一小试管内壁研磨使 成均匀的混悬液；另一试管用表皮葡萄球 菌做为对照。将两试管放在37℃水浴箱或 温箱中2～4h 观察结果。观察结果时使试 管倾斜，凡血浆呈现胶胨样凝集者即为阳 性，仍呈液状者为阴性。
to diagnose rheumatic fever.
THANKS!!
S.aureus
After mixing
Baidu Nhomakorabea.抗 O 试 验
原理：乙型溶血性链球菌产生溶血毒素“O” （SLO ），具有很强的抗原性，可刺激机体产生抗 体，于感染后2～3周至病愈后数月到一年可检出 SLO抗体，风湿热病人血清中SLO抗体显著升高， 一般其效价在1：400以上。因此，测定SLO抗体含 量，可了解近期内有无链球菌感染的病史，作为风 湿病辅助诊断的指标。
Patient Serum
Negative control Positive control
.
-
+
Uniformity turbidity
White granule agglutination
ASO test: ASO titer > 1: 400 units, help
SLO胶乳试剂测定抗O试验（反应板法）
血清中ASLO的测定可用于链球菌感染的 诊断，ASLO高滴度的病人血清被适量的 SLO中和后还有多余的ASLO，这些多余的 抗体即与SLO胶乳试剂反应，出现清晰、均 匀的凝集颗粒。SLO胶乳试剂是根据免疫学 原理将羟化聚苯乙烯胶乳与SLO共价交联作 为抗原，用于测定受链球菌感染病人血清中 的ASLO。
乙型溶血性链球菌菌落
3.血浆凝固酶试验
血浆凝固酶能使含有枸橼酸钠或肝素抗 凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
凝固酶有两种：一种是分泌至菌体外的 蛋白质称为游离凝固酶；另一种结合于 菌体表面并不释放的凝固酶，称结合凝 固酶或凝聚因子。
游 离 凝
协同因 子
凝 血 酶
样
固
物
凝酶
质
固
酶
结 合
（ 纤 维
1. Patient Serum Negative control Positive control
2. Soluble streptolysin O，shake up 1～3 minute; 3. Soluble streptolysin O combine with latex beads ，
齿垢涂片
二、消毒与灭菌
1.紫外线杀菌试验
2.药敏试验
抑菌圈
抗生素滤纸片
3.化学消毒剂的杀菌试验（自做）
三、细菌的遗传变异
细菌的变异现象 1.H→O变异 2.L型变异
3.耐药性变异
1.H→O变异
变形杆菌迁徙生长现象
2.L型变异
青霉素、溶菌酶
正常形态细菌形──态──结──构→ 变L异型变异
五糖生化反应： 葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖 （指示剂-溴甲酚紫） （对应发酵管颜色：红、黄、蓝、白、黑） 大肠杆菌：⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ― 伤寒杆菌：＋ ― ＋ ＋ ―
伤寒杆菌
大肠杆菌
（2）吲哚试验 有些细菌如大肠杆菌等能分解蛋白胨
水中的色氨酸生成吲哚（靛基质），与 试剂中的对二甲基氨基苯甲醛相互作用， 形成玫瑰红色化合物，为吲哚试验阳性。
→ 沾菌的接种环在此处
管内壁上轻轻研磨
（2）玻片法 在载玻片上各滴兔血浆、盐水一滴，
取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌平 板培养物加入其中混匀，立即观察结 果。有明显小凝块出现为阳性，无此 现象者时为阴性。此法较简便，但不 如试管法锐敏、准确。
Procedures:
Rabbit plasma
NS
S. epidermidis
五、球 菌
1.球菌形态观察 2.球菌培养物观察 3.血浆凝固酶试验 4.抗O试验
1.球菌形态观察
Staphylococcus(Gram stain)
Streptococcus （Gram stain）
pneumococcus
Meningococcus
淋球菌（gonococcus）
2.球菌培养物观察 金黄色葡萄球菌菌落
抗体或补体 (部分或完全失去胞壁)
葡萄球菌
葡萄球菌L型
3. 耐药性变异
四、细菌的生化反应
1、细菌的分解代谢
根据细菌含有不相同的酶系统，可分解不 同的营养物质，用生化方法来鉴定细菌, 称细菌的生化反应．
（1）糖发酵试验(Fermentation of sugars)
细菌分解糖时，则产酸，使指示剂 变为黄色( “＋”)；有些细菌在分 解糖产酸的同时还产生气体，在管 中有气泡出现("⊕")；如细菌不分解 该糖时，指示剂不变色 ("―")。
血 浆
凝蛋
纤
固
白 原
+
酶受
体
）
维 蛋 白 原
纤维蛋白原(液态） 纤维蛋白（固态）
血浆凝固
（试管法）
细菌凝聚
（玻片法）
（1）试管法
取两支灭菌小试管，每管加入1：4稀释 的兔血浆0.5ml，用灭菌接种环沾取金黄色 葡萄球菌培养物，在一小试管内壁研磨使 成均匀的混悬液；另一试管用表皮葡萄球 菌做为对照。将两试管放在37℃水浴箱或 温箱中2～4h 观察结果。观察结果时使试 管倾斜，凡血浆呈现胶胨样凝集者即为阳 性，仍呈液状者为阴性。
to diagnose rheumatic fever.
THANKS!!
S.aureus
After mixing
Baidu Nhomakorabea.抗 O 试 验
原理：乙型溶血性链球菌产生溶血毒素“O” （SLO ），具有很强的抗原性，可刺激机体产生抗 体，于感染后2～3周至病愈后数月到一年可检出 SLO抗体，风湿热病人血清中SLO抗体显著升高， 一般其效价在1：400以上。因此，测定SLO抗体含 量，可了解近期内有无链球菌感染的病史，作为风 湿病辅助诊断的指标。