医学微生物实验
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cover
10min
37℃ To observe
24h
the result
2.To examine bacteria on 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 finger
before sterilization
Your sign
A
after sterilization
Press as fingerprint
资料来自百度文库供参考,不当之处，请联系改正。
3.齿 垢 涂 片
NS
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
Step of Gram stain
Smear
+ crystal violet
wash
Lugol’s wash 95% ethyl
iodine
alcohol
(fixed)
1min
2min
3 0 seconds
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
青霉素、溶菌酶
正常形态细菌形──态──结──构→ 变L异型变异
抗体或补体 (部分或完全失去胞壁)
葡萄球菌
葡萄球菌L型
3. 耐药性变异
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
四、细菌的生化反应
1、细菌的分解代谢
根据细菌含有不相同的酶系统，可分解不 同的营养物质，用生化方法来鉴定细菌, 称细菌的生化反应．
Streptococcus （Gram stain）
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
pneumococcus
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
Meningococcus
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
淋球菌（gonococcus）
2.球菌培养物观察资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 金黄色葡萄球菌菌落
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
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五、球 菌
1.球菌形态观察 2.球菌培养物观察 3.血浆凝固酶试验 4.抗O试验
1.球菌形态观察 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
Staphylococcus(Gram stain)
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2.药敏试验
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抑菌圈
抗生素滤纸片
3.化学消毒剂的杀菌试验（自做）
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三、细菌的遗传变异
细菌的变异现象 1.H→O变异 2.L型变异
3.耐药性变异
1.H→O变异
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
变形杆菌迁徙生长现象
2.L型变异
Blot dry
wash safranin wash with bibulous
1min
paper
the oilimmersion objective
Purple (G+) Red(G- )
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齿垢涂片
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二、消毒与灭菌
1.紫外线杀菌试验
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
（1）糖发酵试验(Fermentation of sugars) 细菌分解糖时，则产酸，使指示剂 变为黄色( “＋”)；有些细菌在分 解糖产酸的同时还产生气体，在管 中有气泡出现("⊕")；如细菌不分解 该糖时，指示剂不变色 ("―")。
五糖生化反应：
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
在载玻片上各滴兔血浆、盐水一滴， 取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌平 板培养物加入其中混匀，立即观察结 果。有明显小凝块出现为阳性，无此 现象者时为阴性。此法较简便，但不 如试管法锐敏、准确。
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Procedures:
Rabbit plasma
NS
S. epidermidis
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乙型溶血性链球菌菌落
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3.血浆凝固酶试验
血浆凝固酶能使含有枸橼酸钠或肝素抗 凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
凝固酶有两种：一种是分泌至菌体外的 蛋白质称为游离凝固酶；另一种结合于 菌体表面并不释放的凝固酶，称结合凝 固酶或凝聚因子。
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实验内容
一、细菌的分布 二、消毒与灭菌 三、细菌的遗传变异 四、细菌的生化反应 五、球菌
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一、细菌的分布
1.空气 2.手指（自做） 3. 齿垢涂片（自做） 4. 泥土（示教）
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1.To examine bacteria in air of laboratory
S.aureus
After mixing
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4.抗 O 试 验
原理：乙型溶血性链球菌产生溶血毒素“O” （SLO ），具有很强的抗原性，可刺激机体产生抗 体，于感染后2～3周至病愈后数月到一年可检出 SLO抗体，风湿热病人血清中SLO抗体显著升高， 一般其效价在1：400以上。因此，测定SLO抗体含 量，可了解近期内有无链球菌感染的病史，作为风 湿病辅助诊断的指标。
成均匀的混悬液；另一试管用表皮葡萄球
菌做为对照。将两试管放在37℃水浴箱或 温箱中2～4h 观察结果。观察结果时使试 管倾斜，凡血浆呈现胶胨样凝集者即为阳
性，仍呈液状者为阴性。
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→ 沾菌的接种环在此处
管内壁上轻轻研磨
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（2）玻片法
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游 离 凝
协同因 子
凝 血 酶
样
固
物
凝酶
质
固
酶
结 合
（ 纤 维
血 浆
凝蛋
纤
固
白 原
+
酶受
体
）
维 蛋 白 原
纤维蛋白原(液态） 纤维蛋白（固态）
血浆凝固
（试管法）
细菌凝聚
（玻片法）
（1）试管法
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取两支灭菌小试管，每管加入1：4稀释 的兔血浆0.5ml，用灭菌接种环沾取金黄色 葡萄球菌培养物，在一小试管内壁研磨使
葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖
（指示剂-溴甲酚紫）
（对应发酵管颜色：红、黄、蓝、白、黑）
大肠杆菌：⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ―
伤寒杆菌：＋ ― ＋ ＋ ―
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伤寒杆菌
大肠杆菌
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（2）吲哚试验 有些细菌如大肠杆菌等能分解蛋白胨
水中的色氨酸生成吲哚（靛基质），与 试剂中的对二甲基氨基苯甲醛相互作用， 形成玫瑰红色化合物，为吲哚试验阳性。
10min
37℃ To observe
24h
the result
2.To examine bacteria on 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 finger
before sterilization
Your sign
A
after sterilization
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3.齿 垢 涂 片
NS
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Step of Gram stain
Smear
+ crystal violet
wash
Lugol’s wash 95% ethyl
iodine
alcohol
(fixed)
1min
2min
3 0 seconds
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
青霉素、溶菌酶
正常形态细菌形──态──结──构→ 变L异型变异
抗体或补体 (部分或完全失去胞壁)
葡萄球菌
葡萄球菌L型
3. 耐药性变异
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资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
四、细菌的生化反应
1、细菌的分解代谢
根据细菌含有不相同的酶系统，可分解不 同的营养物质，用生化方法来鉴定细菌, 称细菌的生化反应．
Streptococcus （Gram stain）
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
pneumococcus
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
Meningococcus
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
淋球菌（gonococcus）
2.球菌培养物观察资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 金黄色葡萄球菌菌落
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
五、球 菌
1.球菌形态观察 2.球菌培养物观察 3.血浆凝固酶试验 4.抗O试验
1.球菌形态观察 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
Staphylococcus(Gram stain)
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
2.药敏试验
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
抑菌圈
抗生素滤纸片
3.化学消毒剂的杀菌试验（自做）
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
三、细菌的遗传变异
细菌的变异现象 1.H→O变异 2.L型变异
3.耐药性变异
1.H→O变异
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
变形杆菌迁徙生长现象
2.L型变异
Blot dry
wash safranin wash with bibulous
1min
paper
the oilimmersion objective
Purple (G+) Red(G- )
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
齿垢涂片
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
二、消毒与灭菌
1.紫外线杀菌试验
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
（1）糖发酵试验(Fermentation of sugars) 细菌分解糖时，则产酸，使指示剂 变为黄色( “＋”)；有些细菌在分 解糖产酸的同时还产生气体，在管 中有气泡出现("⊕")；如细菌不分解 该糖时，指示剂不变色 ("―")。
五糖生化反应：
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
在载玻片上各滴兔血浆、盐水一滴， 取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌平 板培养物加入其中混匀，立即观察结 果。有明显小凝块出现为阳性，无此 现象者时为阴性。此法较简便，但不 如试管法锐敏、准确。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
Procedures:
Rabbit plasma
NS
S. epidermidis
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
乙型溶血性链球菌菌落
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
3.血浆凝固酶试验
血浆凝固酶能使含有枸橼酸钠或肝素抗 凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
凝固酶有两种：一种是分泌至菌体外的 蛋白质称为游离凝固酶；另一种结合于 菌体表面并不释放的凝固酶，称结合凝 固酶或凝聚因子。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
实验内容
一、细菌的分布 二、消毒与灭菌 三、细菌的遗传变异 四、细菌的生化反应 五、球菌
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
一、细菌的分布
1.空气 2.手指（自做） 3. 齿垢涂片（自做） 4. 泥土（示教）
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
1.To examine bacteria in air of laboratory
S.aureus
After mixing
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
4.抗 O 试 验
原理：乙型溶血性链球菌产生溶血毒素“O” （SLO ），具有很强的抗原性，可刺激机体产生抗 体，于感染后2～3周至病愈后数月到一年可检出 SLO抗体，风湿热病人血清中SLO抗体显著升高， 一般其效价在1：400以上。因此，测定SLO抗体含 量，可了解近期内有无链球菌感染的病史，作为风 湿病辅助诊断的指标。
成均匀的混悬液；另一试管用表皮葡萄球
菌做为对照。将两试管放在37℃水浴箱或 温箱中2～4h 观察结果。观察结果时使试 管倾斜，凡血浆呈现胶胨样凝集者即为阳
性，仍呈液状者为阴性。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
→ 沾菌的接种环在此处
管内壁上轻轻研磨
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
（2）玻片法
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
游 离 凝
协同因 子
凝 血 酶
样
固
物
凝酶
质
固
酶
结 合
（ 纤 维
血 浆
凝蛋
纤
固
白 原
+
酶受
体
）
维 蛋 白 原
纤维蛋白原(液态） 纤维蛋白（固态）
血浆凝固
（试管法）
细菌凝聚
（玻片法）
（1）试管法
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
取两支灭菌小试管，每管加入1：4稀释 的兔血浆0.5ml，用灭菌接种环沾取金黄色 葡萄球菌培养物，在一小试管内壁研磨使
葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖
（指示剂-溴甲酚紫）
（对应发酵管颜色：红、黄、蓝、白、黑）
大肠杆菌：⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ―
伤寒杆菌：＋ ― ＋ ＋ ―
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伤寒杆菌
大肠杆菌
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
（2）吲哚试验 有些细菌如大肠杆菌等能分解蛋白胨
水中的色氨酸生成吲哚（靛基质），与 试剂中的对二甲基氨基苯甲醛相互作用， 形成玫瑰红色化合物，为吲哚试验阳性。