生物选修一专题二课题1

固体培养基：菌落
选择培养基
选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其 对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使 混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效 率。
不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物
人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细 胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基 （如血清）。 血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶 原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
3.微生物的恒温培养 4.菌种的保存
⑴.临时保藏： 接种到固体斜面培 养基，菌落长成后 置于4℃冰箱保存。 ⑵.长期保存： 甘油冷冻管藏法
三.结果分析与评价
㈠.培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生 长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 ㈡.接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致， 并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要 求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程 中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 ㈢.是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同， 及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一 些细微的变化。
二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)
㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基
1.计算 2.称量 3.溶化 4.灭菌: 将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅，在压力为 100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。 5.倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯 附近倒平板。2d后观察平板，无杂菌污染才可 用来接种。
本课题知识小结:
谢谢！
3.常用的消毒与灭菌的方法 ⑴.消毒的方法： ①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔 灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。
④紫外线消毒。
⑵.灭菌的方法：
①灼烧灭菌 ②干热灭菌： 160-170 ℃下加 热1-2h。
三.病毒的结构
（1）病毒的繁殖
吸附
注入
合成
释放
组装
病毒的增殖一般可分五个阶段，即：
吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放
（2）病毒的营养方式 ：寄生
四.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水
1.微生物的碳源
⑴.概念 ：凡是能为微生物提供所需碳元素的 营养物质。 ⑵.来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生 粉饼、石油等 ⑶.作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
培养基的种类
划分标准 培养基种类 液体培养基
半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 固体培养基 天然培养基 含化学成分不明确的天然物 质 培养基成分明确 在培养基中加入某种化学物 质,以抑制不需要的微生物 的生长,促进所需要的微生 物的生长 在培养基中加入某种指示剂 或化学药品,用以鉴别不同 种类的微生物
特点 不加凝固剂
用途 工业生产
观察微生物的运动、 分类鉴定 微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌 种 工业生产 分类、鉴定 培养、分离出特 定微生物 鉴别不同种类微 生物
物理性质
化学成分
Fra Baidu bibliotek
合成培养基
选择培养基 用途
鉴别培养基
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
半固体培养基：
无动力 有动力(弥散)
③高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃ 下维持15-30min.
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可 以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物 的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成 分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为 了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管 及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采 用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽， 它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物 不能通过。 而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种 器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
㈢.培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制而成 的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。 1.培养基的类型和用途 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配 方(参考教材附录内容) 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮 源、无机盐、等营养物质，另外还需要满足微 生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子 (即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物, 如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧 气、二氧化碳、渗透压等的要求。
⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量 繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有 一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 大小、形状、光泽度、颜色、硬度、 ⑵.特征： 透明度等。 ⑶.功能： 每种细菌在一定条件下所形成的菌落， 可以作为菌种鉴定的重要依据。
几 种 菌 落 及 其 形 态
几 种 菌 落 及 其 形 态
二.微生物的类群
原核类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻
微 生 物 显微藻类、原生生物 原生生物： （如：草履虫、变形 虫等） 真菌： 酵母菌、霉菌、食用菌 非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒 ◆微生物的共同特点： 个体微小、结构简单
真核类
（1）.细菌的形态
（2）.细菌的繁殖 细菌主要是以二分裂的方式 进行增殖（如右图） （3）.细菌的菌落
倒 平 板 操 作
㈡.纯化大肠杆菌
微生物的接种的常用接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法。 1.平板划线的操作方法
平板划线的操作
一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离 单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的 菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条 状的菌落。
2.稀释涂布平板的操作方法
2.微生物的氮源
⑴.概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 ⑵.来源： ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。 ②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨 基酸等 ⑶.作用： 主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产 物。
3.生长因子
⑴.概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。 ⑵.作用： 酶和核酸的组成成分。 ⑶.常见的生长因子：
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
一.微生物的概念
一.微生物基础知识
微生物（Microorganism）是广泛存在于自 然界中的一群 肉眼看不见 ，必须借助光学 显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍 甚至数万倍才能观察到的微小生物的总称。 它们具有体形微小、结构简单、繁殖迅速、 容易变异及适应环境能力强等优点。