安捷伦1260 6120液质联用仪操作规程
安捷伦1260 6120液质联用仪操作规程
Agilent 1260/6120液质联用-单四级杆质谱操作规程一、目的建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。
二、应用范围所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。
三、使用标准Agilent LCMS 化学工作站标准操作培训中文版四、责任人分析部负责制作规程；分析部主管审核；研发部总监批准；研发部分析人员和操作人员负责执行五、概述：A、工作原理LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。
色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
B、仪器的主要组成部分Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB共12 页，第 2 页起草人：审核人：批准人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修订号批准日期执行日期六、操作规程：6.1. 开机6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为0.56-0.69Mpa。
6.1.2 准备LC流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室的废气排到实验室外部。
6.1.3 打开计算机，并依次打开LC各模块电源及质谱电源，等待各模块自检完成(各模块右上角指示灯为黄色或者无色，质谱有“嘟”一声声音) 。
6.1.4双击桌面图标，进入化学工作站。
颜色位置无色黄色绿色红色蓝色灰色模块右上角状态灯未开电源或者模块准备就绪模块未准备就绪正在进样分析模块出错；所有模块红色，仪器有漏液——工作站图形颜色—模块未准备就绪模块准备就绪出错或者不能联机正在进样分析此模块没启用共12 页，第 3 页起草人：审核人：批准人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修订号批准日期执行日期6.2. 调谐开始抽真空之后至少要等4个小时或更长时间才能进行调谐或操作LC/MSD。
Agilent1260液相色谱仪操作规程
Agilent 1260 液相色谱仪操作规程一、准备工作a)启动计算机：打开计算机,登陆windows操作系统。
b)启动工作站：开启Agilent 1260各模块电源，待Agilent 1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击LC1260(联机)。
c)开启工作站：进入工作站，点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图：选择“视图->系统视图”，即可显示仪器控制视图。
d)配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标左键，点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵；溶剂要求：色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇，二次蒸馏水。
e)冲洗流动相管路：反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。
右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%，冲洗至管线内无气泡为止; 设置溶剂比例为初始比例，“流速”为1ml/min，关闭Purge阀。
f)开启模块：开启模块：鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框，选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”。
g)监视基线：点击“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
h)平衡色谱柱、进样分析：监视压力和信号基线等待平稳后，可以进样采集分析。
二、数据采集方法编辑a)方法编辑：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“新建方法”，调用化学工作站的默认方法DEF-LC.M ，选择“方法”菜单下的“编辑完整方法”，设置好泵参数、进样方式、柱箱温度、波长、积分参数等，即可开始编辑一个完整地方法。
b)方法存贮：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“方法另存为”选项，方法以检测项目名存贮。
三、样品信息编辑a)运行单个样品：在“方法和运行控制”状态下，单击“运行控制”菜单，选择“样品信息”进行样品信息编辑。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源，待仪器自检完成后，确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位，确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件，选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单，选择“启动系统”命令，系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后，点击“准备”菜单，选择“准备系统”命令，系统开始进行一系列的自动化准备工作，比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度，确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中，注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中，按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮，开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点，选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度，确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求，设置好色谱条件，包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数，如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后，点击软件界面上的“开始”按钮，开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号，根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求，对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程，希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中，应严格按照安全操作规范进行，并及时进行维护和保养，以保证仪器的正常运行。
安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项
安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项1、配制流动相，水相置于棕色玻璃瓶中，有机相置于相应无色玻璃瓶中。
水相和有机相必须过滤，滤膜选用0.45有机系滤膜（尼龙）。
注意：过夜的流动相必须重新过滤。
2、流动相过滤后，置超声仪中超声20min。
3、将已超声的流动相轻轻换上，动作不要太剧烈，会产生气泡，注意不要把有机相和水相换反了（A是有机相，B是水相）。
4、将色谱柱接上，注意：流动相的流动方向必须和色谱柱上的箭头方向一致。
5、打开计算机电源、显示器开关，并输入密码。
6、依次从上往下打开液相色谱仪上的所有开关。
7、打开液相色谱在线工作站（online），输入密码。
8、打开的液相工作站上分为四个小部分，依次为进样器、泵、柱温箱及检测器。
在第二个部分设置流动相的体积及溶剂瓶的总体积。
9、脱气：旋开purge阀开关，右击泵部分，选择“method”，选择B相100%，流速1ml/min，选择确定；右击泵部分，选择“control”，选择pump“on”，10秒后，调节流速为3ml/min，10秒后，调节流速5ml/min，开始水相脱气3min，水相脱气结束后，将流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下调。
然后开始有机相脱气，步骤同上，注意流速不可一下子从1ml/min调到5ml/min，需慢慢调节。
流动相脱气结束后，旋紧purge阀开关。
10、建立样品的色谱方法：设置进样体积，选择洗针进样，注明洗针位置；设置流动相比例、流速及梯度洗脱条件，序列进样时设置样品运行时间和后运行时间；打开柱温箱，设置柱温；打开紫外检测灯，设置检测波长。
全部设置好后，保存方法，不要覆盖别人的方法。
11、谱图保存路径的设置：View—preferences—data path（第二个选项）—remove旧的文件夹，add自己的文件夹。
再打开Sequence—Sequence parameter—选择Data path为自己的文件夹即可。
安捷伦1260操作规程
安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。
5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。
Agilent1260液相色谱仪器操作规程(新)
Agilent1260液相色谱仪器操作规程一.生产厂家：美国Agilent二.到货日期：2011年1月三.附件：电脑、打印机四.使用范围：用于三聚氰胺，维生素A、D、E,β-胡萝卜素，牛磺酸，山梨酸、苯甲酸，乳糖、蔗糖等的检测五.工作环境：温度15℃~30℃，湿度20%~80%六.操作步骤:1.开机前准备：1.1.打开仪器室的空调。
1.2.配制流动相（按国标）,准备好蒸馏水、乙腈和甲醇。
2.开机：2.1.打开1260液相色谱仪器的进样器、泵、柱温箱和检测器的电源。
2.2.打开计算机。
2.3.打开“仪器1联机”图标，各模块完成自检。
2.4.点击“打开”图标，进入化学工作站。
3.设置运行模块和方法3.1.进样器（自动进样器）3.1.1.设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，按照国标，检测不同物质，设定不同的进样量。
反相：最大进样量为100ul，抽取速度一般设定200ul/min。
正相：最大进样量为500ul，抽取速度一般设定200~500ul/min。
3.1.2.设置进样器停止时间，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，如标样的出峰时间为7分钟，停止时间可以设置为8分钟以上。
3.2.泵（四元泵或单泵）3.2.1.泵的流速：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，按照国标要求，如设置1.00ml/min。
3.2.2.如果是四元泵，可选择溶剂瓶，输入需要使用的各溶液的比例，如B 蒸馏水90%，C乙腈10%，点击“确认”。
3.2.3.在“泵”的模块中点击鼠标右键，点击“控制”，选择“泵”（打开），确认。
3.2.4. 设置泵停止时间：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与进样器一致/无限制”。
3.2.5. 压力限值：最小值一般设0bar，最大值一般设100bar。
3.3.柱温箱3.3.1.设置柱温箱的温度：在“柱温箱”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，左边按照国标要求可设置，比如35度，一般右边设置同左边。
安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260液相操作规程一开机1 打开计算机，登录windows操作系统。
2 打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，出现进样器，泵，检测器，柱温箱四个图标。
若没有出现，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”选项。
二排气1 把各流动相放入溶剂瓶中2 旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流速设到5ml/min，溶剂瓶A设到100％，开泵，排出管线的气体3分钟，柱压＜10bar。
3 依次切换到B,C,D溶剂瓶排气，待排气结束，关泵。
4 将泵的流速设到1.0ml/min，将多元泵设置成做样时的溶剂配比，关闭排气阀（顺时针）。
5 开泵，待柱压稳定后，基线平衡后方可进样。
三设置方法和调用方法1 设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，设定进样量。
在进样模式中输入进样量。
“标准进针”——只能输入进样体积。
“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置。
2 在“检测器”模块中，点击鼠标右键，点击“控制”，打开检测器的灯，点击“确认”。
3 在“检测器”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与泵，进样器一致”。
4 紫外检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长。
5 以上模块设置好后，从“方法”菜单中，选中“方法另存为”，输入方法名，点击“确认”。
6 从“方法”菜单中，选择“调用方法”，单击确认。
四设置序列和调用序列1 从“序列”菜单中，选中“序列参数”，选择数据文件路径和输入子目录名称，这样数据会自动保存在指定的文件夹中，方便查找。
2 从“序列”菜单中，选中“序列表”，在样品盘中依次放置好样品，命名样品的名称和批号，选择“方法”，点击“确认”。
3 从“序列”菜单中，选中“调用序列表”，把序列表改好后，点击保存当前序列模板。
点击“文件”，另存为序列模板。
4 点击“进样器”图标上的“序列”或者点击序列表中的“运行”，仪器进样。
1260操作规范及注意事项
安捷伦液相操作规程及注意事项一、开机1.接通电源，打开计算机，进入windows操作系统；2.检查色谱柱（型号是否正确及进出口有无接反）；3.检查流动相（是否正确，溶剂是否够用）；4.打开主机各模块，待其完成自检后，双击桌面联机系统(online)，单击view，选择方法和运行控制画面；5.排气：逆时针旋转排气阀60-90°，右击“四元泵”图标出现快捷键，点击method选项进入泵编辑画面。
将泵流量设到5 mL/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2-3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10 bar，则应更换排气阀内过滤白头）。
依次切换到B、C、D管道分别排气；6.将泵流量设为0.5 mL/min，设定溶剂配比，关闭排气阀。
随后将泵流量设为0.8 mL/min，2 min后设为1 mL/min，冲洗柱子20-30 min；7.待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况，待基线稳定后即可进样。
二、采集方法编辑1.编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名及存储路径等；2.编辑方法信息：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。
选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。
最后保存方法；3.设置泵参数：在“流速”处输入流量，在“溶剂”处选中输入相应比例，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“stop time”和“post time”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250 bar，在“时间表”添加编辑梯度；4.设定进样器参数：在进样模式中输入进样量。
标准进针：只能输入进样体积不能洗针。
针清洗后进样：可以输入进样体积和洗瓶位置，针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。
注意：洗针瓶不盖盖子，以免污染针外表面。
安捷伦HPLC1260操作流程
安捷伦HPLC1260操作流程HPLC（高效液相色谱）是一种常用的分离和纯化化学物质的技术。
安捷伦HPLC1260系列是一款先进的高效液相色谱仪器，具有高精度、高灵敏度和高分辨率等优点。
下面是安捷伦HPLC1260的操作流程：1.准备工作a.打开色谱仪电源，并确认电源线已连接到稳定的电源插座。
b.打开色谱仪的仪器主机，等待一段时间，让仪器预热至工作温度。
c.确保溶剂瓶中的溶剂已经充足，且瓶盖已经拧紧。
d. 打开安捷伦 ChemStation 软件，点击“仪器控制”界面上的“打开仪器”按钮，连接仪器。
2.设置方法b.在“新建方法”界面上，填写方法名称、采样装置、检测器类型等信息。
c.在“进样”选项中设置进样体积、进样方式和进样流量。
d.在“柱温控制”选项中设置柱温度。
e.在“梯度程序”选项中设置梯度程序，包括流速、时间和浓度等参数。
f.在“检测器”选项中设置检测器的波长或其他相关参数。
g.设置完成后保存方法。
3.准备样品a.准备样品溶液，并使用过滤器过滤掉杂质。
b.将样品溶液定量注入样品瓶中。
4.进样a. 在 ChemStation 软件界面上点击“方法控制”按钮，选择之前设置好的方法。
b.将样品瓶与自动进样器连接，通过软件控制自动进样器进行进样。
c.等待自动进样器完成进样过程。
5.开始分析a. 在 ChemStation 软件界面上点击“仪器控制”按钮，然后点击“开始”按钮，开始分析。
b.软件会自动控制进样和梯度程序，进行样品分离。
6.结果分析a.在分析过程中，软件会实时显示色谱图和数据。
b.分析结束后，可以导出数据或生成报告。
7.清洗和保养a.在分析完成后，关闭仪器主机。
b.清洗色谱柱和进样器，使用对应的溶剂进行清洗。
c.定期检查仪器的运行状况，如进样量、流速等，进行维护和保养。
总结：。
标准安捷伦1260液相色谱仪操作规程
标准安捷伦1260液相色谱仪操作规程安捷伦1260液相色谱仪操作规程一、仪器开机1、更换流动相（水需要超纯水，有机试剂需要色谱纯），其中水需要每次使用时更换，有机试剂长时间不用也需要更换2、开机：打开电脑、打开液相所有模块电源、点击电脑桌面上的工作站联机图标3、打开工作站上的所有电源，待其就绪（所有灯变绿）4、拧开排空阀，四元泵里设置流速5 ml/min，A 100%；3分钟后，设置B 100%；3分钟后设置流速至合适流速，关闭排空阀二、运行样品1、新建方法或调用已有方法2、设置方法参数四元泵：设置流速、流动相比例、采集时间，若需梯度则设置梯度，确定自动进样器（ALS）：设置进样量，确定柱温箱（TCC）：设置柱子温度，确定紫外检测器(VWD)：设置紫外波长，确定设置好后保存方法3、在线信号中点击“改变”，可添加泵的压力，以及VWD的信号4、等待系统平衡，所有灯变绿，泵的压力稳、VWD的信号稳定（约20分钟）5、进样：（1）单针进样：运行控制—样品信息，设置进样位置，保存路径等后运行方法（2）序列进样：序列—序列参数，编辑保存路径；序列—序列表，编辑序列表，然后运行序列6、待仪器自动停止分析（四元泵中已设置采集时间）或手动点击“停止”图标（四元泵中未设置采集时间）三、关机1、冲柱流动相中含缓冲盐：先用10%甲醇、90%水冲30分钟，再用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机流动相中不含缓冲盐：用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机2、关机关闭各模块，关闭仪器电源，关闭工作站，关闭电脑四、数据处理1、调用需要处理的信号2、自动积分，或者手动积分，删除不要的峰3、打印面积百分比结果，记录每个峰的峰面积、保留时间，在excel中用已知浓度（标准样品）的峰面积作工作曲线，得到工作曲线方程4、未知样品的峰面积来算得其浓度。
安捷伦1260高效液相操作规程
安捷伦液相 1260 高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。
如果还不清晰样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。
流动相选择注意事项：① 避免使用高粘度的溶剂作为流动相；② 所选用的流动相一定要与样品相溶；③ 各流动相之间可以很好的相溶；固定相选择注意事项：a. 正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或者其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对照固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
b. 反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
2.准备工作① 用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm 过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态；② 流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用0.4µm 过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min；③ 在连接柱子和色谱仪之前，阀件或者管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗）3.仪器操作（一）将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A 泵，该瓶中只能加双蒸水或者娃哈哈纯净水；B、C、D 泵根据需要添加。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程开机1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows XP画面。
1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。
待各模块自检完成后，双击“仪器2联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。
（注意：在“仪器2脱机”关闭的情况下，“仪器2联机”方能打开。
）1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。
1.4 确保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。
单击“确定”。
（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。
1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。
右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量6ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。
右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。
2. 数据采集方法、系列编辑：2.1 编辑完整方法：2.1.1. 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。
2.1.2. 方法信息：在“方法注释”中写入方法的相关信息。
此项可忽略不写，单击“确定”，进入下一界面“选择进样源/位置”。
2.1.3. 自动进样器参数设定:选择“Als”的进样方式，单击“确定”，进入下一界面“设置方法”。
2.1.4. 方法参数设定：在“设置方法”界面选择“四元泵”选项，在“流量”处输入所需流量，如：1ml/min，在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D)，也可在右侧“时间表”项下选择“添加”，编辑梯度。
液相色谱1260操作流程
1260简易操作流程开机：1．打开电脑2．打开液相色谱各个模块的电源3．双击桌面“仪器1联机”，进入联机界面。
4．排气：4．1 手动旋开冲洗阀。
逆时针旋转约1圈4．2 点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面，设流速：3ml/min（一般为3－5ml/min），点击“确定”。
4．3 点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
4．4 点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。
4．5 点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。
5．同理点击“柱温箱”，“DAD”和“FLD”图标，点击“设置…”选项，按照方法的要求设置温度，波长，激发波长和发射波长，点击“控制”选项，打开VWD和FLD的监测器。
编辑方法：1．点击“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法2．选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。
3．方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。
点击“确定”，进入下一画面。
4．泵参数设定：在“流速”处输入流量, 如1.0ml/min，停止时间：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75％即可。
点击“确定”，进入下一画面。
5．自动进样器参数设定: 选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，点击进“确定”，进入下一画面。
6、柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。
点击“确定”，进入下一画面。
7．DAD检测器参数设定: 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 参比波长550nm。
安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。
2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。
3.有关责任：化验室精密仪器室4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容：5.1开机前准备5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。
5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。
5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。
5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。
5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。
5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A 到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。
(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。
)5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的：建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程，保证正确使用。
二、适用范围：适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。
三、职责：研发部对本标准的实施负责。
四、正文：1 仪器组成及电源：1.1 仪器组成：本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。
1.2 电源：泵为110V稳压电源，检测器为220V稳压电源，工作站为220V稳压电源。
1.3开机运行前，更换溶剂瓶中的流动相，若管道为第一次使用，先用针管排空各管道中的气泡。
2 仪器硬件开启：自上而下或自下而上顺序开启各模块（真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器），打开电源指示灯，指示灯亮，显“绿色”；状态指示灯指示当前的状态，各模块进行自检（自动进样器的门板必须关上）。
3安捷伦化学工作站的操作：3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面，各模块的软件图标均为绿色。
3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”，来调用所需界面（或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。
3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。
3.1.4打开“Purge”阀，点击泵图标，点击“设置泵”，进入泵编辑画面，设置流速为3-5ml/min，点击“确定”，则系统开始排空管道内的气泡，切换通道继续排空，直至所有要用的通道无气泡为止。
3.1.5点击泵图标，选“控制”选项，选中“关闭”关泵，关闭“Purge”阀。
3.1.6点击泵图标，设置流速冲洗柱子。
3.1.7点击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。
3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项，选中除“数据分析”外三项，点击“确定”，进入下一画面。
安捷伦LC1260液相色谱操作规程及使用注意事项
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程㈠开机1．把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。
2．打开计算机，打开主机各模块电源（从上至下），再双击桌面“LC1260(联机)”图标，进入化学工作站。
3．旋开排气阀（逆时针），右键单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量设为“5mL/min”，溶剂A设为“100%”，打开泵，排出管路中的气体，直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止，此过程约需要5min。
4．依次切换到溶剂B、C、D，分别排气。
㈡数据采集1. 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据，文件名等。
2. 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，单击“确定”进入“方法注释”，编辑好单击“确定”。
在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”，在“设置方法”中进行参数设定。
3. 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1mL/min，在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数，在右侧注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子，在“时间表”添加编辑梯度。
4. TCC（柱箱）参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”，使柱箱的温度左右一致。
5. VWD检测器参数设定：在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，再设置“停止时间”和“后运行时间”。
6. 仪器曲线设置：默认即可。
7. 关闭排气阀（顺时针），冲洗色谱柱20~30min，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。
8. 将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置，在环路全量进样时（定量环体积为20uL），用50~100 uL的液相进样针将2~5倍定量环体积的样品缓慢注入进样器中，再将进样器转动手柄顺时针方向迅速转到INJECT位置，将定量环中样品引入系统中。
安捷伦HPLC1260操作流程
色谱峰实例
mAU 80 70 60 50 40 30 20 10
* D A D 1 A , S ig = 2 4 8 ,4 R e f= o ff (V P A -T D M -2 \V P A -S C J 2 0 1 5 -0 3 -2 4 1 1 -3 1 -1 6 \V P A -2 0 1 5 0 3 2 4 0 0 1 .D )
安捷伦HPLC1260操作流程
仪器的组成 操作前准备 开机及关机 工作站使用 数据分析 注意事项
安捷伦HPLC1260操作流程
主体 安捷伦1260HPLC 流动相瓶、四元泵、自动进样器、柱温箱、 二极管阵列检测器
附件 电脑、显示器、打印机等
安捷伦HPLC1260操作流程
安捷伦1260HPLC 流动相瓶 四元泵 自动进样器 柱温箱 二极管阵列检测器
流速突然变大或突然变小会导致柱压的突然改 变，时间久了柱子填料会坍陷或松动，最终柱 压下降，所以泵开始和结束前要注意缓慢改变 流速。
安捷伦HPLC1260操作流程
仪器使用后，应用90%水冲洗柱子和系统0.5-1h， 流量1.0mL/min，再用100甲醇冲洗0.5h；
安捷伦HPLC1260操作流程
开机时，打开排气阀，设置流动相为100%水， 泵流量5.0mL/min，若此时显示压力＞10bar， 则应更换排气阀里的过滤白头。
安捷伦HPLC1260操作流程
安捷伦HPLC1260操作流程
流动 相瓶
排气阀
关电 源 开
四元泵 自动进样器
灯指 示
色谱柱
安捷伦HPLC1260操作流程
二极管阵列 检测器
柱温箱
流动相选择 流动相过滤 流动相超声与脱气 流动相冷却
安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260高效液相操作规程及注意事项一开机1)打开主机各模块电源(从下至上),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器2联机”图标,进入化学工作站,2)把过滤白头放入流动相溶剂瓶中。
3)旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量从1mL/min梯度上升至5mL/min,排出管路中的气体2—3分钟,直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力(若大于10bar,则应更换排气阀内过滤白头),关闭排气阀。
4)重复上述步骤,依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
5)将泵的流量设到实验用流速,按照色谱柱使用说明用相应溶液冲洗色谱柱20—30分钟。
6)点击四元泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,点击“确定”。
7)把缓冲液换成流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况,进入平衡系统。
二数据采集方法编辑若已创建方法,可在“方法”菜单选择“调用方法”,选择相应的方法。
若无,需按下面步骤建立:(1)从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”,钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行时选项表”三项,点击确定;(2)出现“方法信息”对话框,如有需要可将方法的描述信息输入,也可选择不输入任何信息,点击确定;(3)泵参数设定:在“流量”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如300bar,以保护柱子。
点击“确定”进入下一参数设定。
(4)柱温箱参数设定:手动输入规定的温度即可。
(5)紫外检测器(VWD)参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
在“时间表”中可以“插入”一行,输入随时间切换的波长,如1min,波长=300nm。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
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Agilent 1260/6120液质联用-单四级杆质谱操作规程
一、目的
建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。
二、应用范围
所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。
三、使用标准
Agilent LCMS 化学工作站标准操作培训中文版
四、责任人
分析部负责制作规程；
分析部主管审核；
研发部总监批准；
研发部分析人员和操作人员负责执行
五、概述：
A、工作原理
LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。
色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
B、仪器的主要组成部分
Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB
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六、操作规程：
6.1. 开机
6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为0.56-0.69Mpa。
6.1.2 准备LC流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室
的废气排到实验室外部。
6.1.3 打开计算机，并依次打开LC各模块电源及质谱电源，等待各模块自检完成(各模
块右上角指示灯为黄色或者无色，质谱有“嘟”一声声音) 。
6.1.4双击桌面图标，进入化学工作站。
颜色
位置
无色黄色绿色红色蓝色灰色
模块右上角状态灯未开电源
或者模块
准备就绪
模块未准
备就绪
正在进样
分析
模块出错；
所有模块
红色，仪器
有漏液
——
工作站图形颜色—
模块未准
备就绪模块准备
就绪
出错或者
不能联机
正在进样
分析
此模块没
启用
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6.2. 调谐
开始抽真空之后至少要等4个小时或更长时间才能进行调谐或操作LC/MSD。
建议每周进行一次检验调谐，当检验调谐失败时，应该进行一次自动调谐。
调谐应该不需要超过每月一次或最多每星期一次。
一般情况下调谐一次可以稳定三个月。
6.2.1 单击MSD调谐,进入仪器调谐。
6.2.2 选择调谐文件，一般选择ATUNES.TUN
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6.2.3 自动调谐
双极性调谐会先做正模式调谐，再做负模式调谐，第一次调谐必须是双极性调谐。
自动调谐一般在检验调谐失败后做，也可以每个月或在做完仪器维护后执行。
6.2.4 检验调谐
检验调谐可以每天进行（不关机情况下，每周1次就可以），检查峰宽，质量轴和调谐离子丰度是否达标。
如果失败工作站会提示对失败的项目重新校正。
如果校正仍然失败则需要做自动调谐。
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6.2.5 保存调谐文件，指定文件名和路径，将调谐文件保存到atunes.tun中。
6.2.6 最后点击方法和运行控制，返回到仪器控制界面。
6.3. 样品测定
6.3.1 方法建立
从编辑整个方法开始，如图所示。
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从方法菜单中选择“编辑完整方法”项，选择要编辑的项目，点击“确定”。
编辑关于该方法的注释，然后点击“确定”。
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系统默认选择自动进样。
6.3.2 编辑LC采集参数
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6.3.3 编辑MSD采集参数
其中Fragmentor的值是碰撞解离诱导的电压值。
对于大分子需要更大的fragmentor值才能使离子进入skimmer。
这个参数对于检测到的离子丰度影响很大，需要优化。
选择scan模式需要设定扫描的分子量范围，选择sim摸式则需要设定被检测的离子的质核比（小数点后一位的分子量）。
6.3.4 报告的设定
简短报告包含了信号详细信息对话框中设置的所有积分信号的定量文本结果。
LCMS定性报告中，显示各个积分的色谱峰的质谱图，可以自动扣背景，并对色谱峰中主要离子自动提取EIC。
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6.3.5 方法的保存
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6.4. 数据分析
6.4.1. 点击图标，打开分析软件，使用导航栏可以查看数据所在的位置。
6.4.2. 使用下拉菜单可以选择想查看的通道。
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6.4.3. 光谱工具栏介绍
6.4.4.显示质谱图
打开色谱图，选择光谱工具，从光谱工具栏里先提取离子色谱，然后平均一组选定的光谱，就可以看到质谱图。
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6.5. 关机
6.5.1 进入诊断界面。
6.5.2 点击菜单Maintenance>>MSD Vent，直到vent对话框蓝色进度条走完，选择close。
建议从软件的诊断界面放质谱的真空，系统会自动按顺序先关分子涡轮泵，再关机械泵。
不建议直接关闭质谱的开关，且要等四极杆温度降至60度以下再关闭电源，大概30分钟后可以关闭软件，并依次关闭质谱、LC电源，最后关掉载气。