自身抗体检测及应用
自身抗体检测项目及临床意义
自身抗体检测项目及临床意义自身抗体检测是一种诊断方法，可以用于检测人体中是否存在自身抗体。
自身抗体是指机体产生的针对自身组织和细胞的免疫反应。
自身抗体检测项目繁多，包括抗核抗体（ANA）、抗神经元抗体（anti-neuronal antibodies）、抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibodies）、抗甲状腺抗体（anti-thyroid antibodies）等等。
这些检测项目在临床上具有重要意义。
以下将介绍几种常见自身抗体检测项目及其在临床上的意义。
首先是抗核抗体（ANA）检测。
抗核抗体是许多自身免疫疾病的标志物，包括系统性红斑狼疮（SLE）、结节性多动脉炎（Polyarteritis nodosa）等。
ANA检测的目的是通过检测抗核抗体的存在与否，帮助医生进行病因诊断和病情判定。
在临床上，对于疑似患有自身免疫疾病的患者，ANA检测是一项重要的辅助诊断手段。
其次是抗甲状腺抗体（anti-thyroid antibodies）检测。
抗甲状腺抗体包括抗甲状腺过氧化物酶抗体（anti-thyroid peroxidase antibodies）和抗甲状腺球蛋白抗体（anti-thyroglobulin antibodies）。
这两种抗体的检测可以帮助诊断甲状腺自身免疫疾病，如自身免疫性甲状腺炎（Hashimoto's thyroiditis）和Graves'病。
此外，抗甲状腺抗体的检测还可以用于评估甲状腺功能障碍的原因，以及指导甲状腺疾病的治疗。
此外，抗神经元抗体是一类特殊的自身抗体，与多种神经系统疾病有关。
例如，抗N-甲基-D-天冬酰基-L-谷氨酸受体（anti-NMDA receptor antibodies）是通过与N-甲基-D-天冬酰基-L-谷氨酸受体结合而引起的一种自身免疫性脑炎。
该抗体检测对于神经病理学诊断、病因研究和治疗方案选择非常重要。
以上仅是自身抗体检测项目的几个例子。
胰岛自身抗体检测及其临床应用
可， 同时 自身抗体 阴性 患者 的胰 岛功 能可持 续存在 ， 因此对
这类患者不需要 长期使用胰岛素治疗。 ２ ２ ２ 青少年起病的 ＭＯ Ｙ ．． Ｄ ＭＯ Ｙ是 一种 单基 因遗传 突 Ｄ
变糖 尿 病 ， 目前 已定 位 的 ＭＯ Ｙ 突 变 基 因 包 括 Ｈ Ｆ—ｌ Ｄ Ｎ ｄ、
时， ２种及 ２种 以上 自身抗体 阳性 患者约为 ７ ％ 。联 合检测 ２
ｚ １ Ａ 时 ２种 及 ２种 以上 抗 体 阳性 者 为 ８ ％ 【 。 因此 ， 合 ｎ、 ８ ２ ７ ／ 联
检 测 ｚ Ｔ Ａ和传统的胰 岛 自身抗体会 显著 增加 Ｔ Ｄ 的检 ｎ８ １Ｍ
出率。
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１２ 新近发 现的锌转运体 ８自身抗 体（ ｎ ８ Ｚ Ｔ Ａ是 ． Ｚ Ｔ Ａ） ｎ ８ ２０ ０７年 新 发 现 的 Ｔ Ｄ 胰 岛 自身抗 体 之 一。 ｃ Ｉ Ｅ Ｔ １Ｍ Ｈ ＭＩＮ Ｉ 等 研究证 实 Ｚ Ｔ ｎ ８特 异性 表 达在胰 腺 Ｂ细胞胰 岛素 分 泌
囊泡膜上 ， 富集 ｚ 于囊泡中 ， ｎ 是胰 岛素六聚 体形成 的关键 因素 ， 它的基 因主 要在 胰 腺 的胰 岛细胞 中表 达 ， ｎ８是 由 ＺＴ
１８ ９３年 Ｐ ｌｅ 等在未接 受胰 岛素 治疗的 Ｔ Ｄ 患者血 ａ ｒ ｍ １Ｍ 清 里发现 Ｉ Ａ。Ｉ Ａ针 对的胰 岛 自身抗 原— —胰 岛素 是 ｐ Ａ Ａ
细胞特异性 自身抗 原。研 究显示 ， 发病 年龄愈 小，Ａ Ｉ Ａ的 阳 性率愈 高， 小于 ５岁的 患者 ，Ａ 阳性 率 为 ９ ％ ； ＩＡ ０ 而成人 患
自身免疫性肝病(AILD)相关自身抗体的检测及临床应用
四、AILD相关自身抗体的检测
1、间接免疫荧光法（IIF）
③抗LKM-1抗体：肝组织可见肝细胞胞质细颗粒型至均质型 的强荧光染色；肾组织仅在近端肾小管上皮细胞胞质荧光染 色；胃组织缺乏特征性的荧光染色。
④抗LC-1抗体：肝组织可见肝细胞胞质颗粒型荧光染色，啮 齿类动物肝组织中央静脉周围的荧光染色明显减弱，但若同 时存在抗LKM-1抗体阳性，此荧光特征通常难以呈现。肾、 胃组织缺乏特征性的荧光染色。
三、AILD相关自身抗体检测的临床应用
在PBC患者一级亲属中，母女、姐妹间AMA的共同阳性率为 10%~20%，远高于普通人群。因此，在PBC患者的亲属中检 测AMA等自身抗体，有利于疾病的早期发现。AMA阳性但 不能明确诊断PBC者，需定期行胆汁淤积相关生化指标的随 访。
总之，检测自身抗体可用于AILD的预测，对肝脏生化指标正 常且AILD相关自身抗体（如ASMA、AMA等）阳性者，应 定期随访，以及进行相关学会指南推荐的其他评估肝脏功能 的新标志物检测，如可预测肝功能正常或轻度异常者的肝硬 化、肝纤维化程度的血清壳多糖酶3样蛋白1（CHI3L1）等， 以早期评价肝胆功能，或采取其他临床干预措施。
1、间接免疫荧光法（IIF）
（2）标本、荧光标记二抗：IIF检测血清标本的ANA、 ASMA、抗LKM-1抗体、AMA通常采用1∶40起始的倍比稀 释系统。由于使用不同的检测试剂，可根据试剂说明书，采 用倍比稀释系统或 稀释系统。所用二抗应使用荧光素标记的 抗人IgG抗体。
四、AILD相关自身抗体的检测
四、AILD相关自身抗体的检测
2、其他免疫学方法
由于IIF检测AILD相关自身抗体的实验操作、结果判断等存 在难以标准化，阳性滴度判断依赖于不同的实验基质。因此， IIF检测AILD相关自身抗体需要经过专业培训的实验室人员 和高质量的实验基质。
自身抗体检测在自身免疫性肝病中的应用及其临床分析
自身抗体检测在自身免疫性肝病中的应用及其临床分析目的：探讨自身抗体检测在自身免疫性肝病中的应用，为临床上疾病的诊断提供一定参考意义。
方法：选取试验组32例自身免疫性肝病患者和对照组32例病毒性肝炎患者的自身抗体进行检测，比较其阳性率。
结果：试验组ANA、SMA、AMA-M2、SLA/LP、LKM-1、gp210、Sp100、LC-1抗体阳性率均显著高于对照组，两组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。
SLA/LP、LKM-1、LC-1 3种抗体为自身免疫性肝炎所特有，ANA、AMA-M2、gp210、Sp100抗体为原发性胆汁性肝硬化所特有。
结论：自身抗体谱的检测有助于临床上自身免疫性肝病的诊断，SLA/LP抗体、LKM-1抗体、LC-1抗体有助于自身免疫性肝炎的诊断，AMA-M2抗体、gp210抗体、Sp100抗体有助于原发性胆汁性肝硬化的诊断。
自身免疫性肝病是一种由自身免疫反应导致的肝胆系统损伤的慢性进展性疾病。
可以分为以肝炎为主的自身免疫性肝炎、以胆管损害和胆汁淤积为主型的原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎，以及兼具上述两组特征的重叠综合征[1-2]。
研究自身抗体谱检测在自身免疫性肝病中的应用，对于疾病的诊断、分型是十分有利的。
1 资料与方法1.1 一般资料选取本院2014年1-12月确诊的32例自身免疫性肝病患者为试验组，其中男7例，女25例；年龄19～67岁，平均（45.6±18.3）岁；自身免疫性肝炎有17例（53.1%），原发性胆汁性肝硬化有10例（31.3%），原发性硬化性胆管炎有5（15.6%）。
另外，再随机选取同时段本院收治的病毒性肝炎患者32例为对照组，其中男15例，女17例，年龄25～77岁，平均（52.1±22.7）岁。
自身免疫性肝炎诊断符合国际自身免疫性肝炎小组的诊断标准及积分系统，原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎诊断符合2003年美国肝病学会指导建议，重叠综合征的诊断参考文献标准[3-6]。
自身免疫病与自身抗体检测及应用
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（三）发病机制
隐蔽抗原释放 ✓自身抗原出现 自身抗原成分改变
共同抗原的诱导
淋巴细胞旁路活化 ✓免疫调节异常 多克隆刺激剂旁路活化
辅助刺激因子表达异常
✓遗传因素 多表现在HLA-B、DR抗原 上
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常见自身免疫病
SLE:累及多器官多系统 炎症性结缔组织病，多 发于青年女性，临床症 状复杂，可出现发热， 皮疹，蝶形红斑，盘状 红斑，光敏现象，口腔 溃疡，关节痛，肾损伤， 心血管病变，胃肠症状， 贫血等。抗ds-DNA,抗 Sm抗体是特征标志。
IgM：伴严重关节功能障碍，预后不良
IgG：与患者滑膜炎、血管炎和关节症状密切相 关
IgA：RA临床活动指标，与骨质破坏和关节炎症
20状21/1/严12 重程度有关。
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抗核抗体（ANA）
ANA是以自身真核细胞成分为靶抗原的一组自 身抗体的总称，泛指各种核成分的抗体。 ANA在不同的疾病中呈现出不同的组合，不同 疾病有自己的抗核抗体谱。 按理化特性和抗原部位分类： 1.抗DNA抗体 2.抗组蛋白抗体 3.抗非组蛋白抗体 4.抗核仁抗体
2. 一般原则 有的项目敏感性高，特异性低，有筛选意义，有 的敏感性低，特异性强，可以先做ANA筛查， 再做其他检测。
3. 质量控制 每次试验同时设置阴、阳对照，以监测结果的准 确性。
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谢谢观赏
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检测方法
1.ANA检测常用间接免疫荧光法，ELISA等方法， 常用间接免疫荧光法作总ANA的筛选试验。用 Hep2细胞和猴肝细胞做基质， Hep2细胞特点： 人源性、细胞核大、分裂期细胞多、可大批培养。
2.常见ANA荧光图形及意义
自身抗体的实验室检测与临床意义
第十一页，共26页。
5.抗SSA、抗SSB抗体(kàngtǐ)
50年代末首先在干燥(gānzào)综合征（Sjö gren syndrome,SS)患者血清中发现这种抗体，称为抗SSA、 SSB抗体。
多发性肌炎/皮肌炎合并(hébìng)肺间质病变时抗Jo-1 抗体阳性率可达60%。
第十四页，共26页。
8.抗PCNA抗体(kàngtǐ)
增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE患 者的血清中首次(shǒu cì)发现并命名。
第二页，共26页。
பைடு நூலகம்身抗体(kàngtǐ)的命名
以首先(shǒuxiān)被检测到该抗体的患者名字的缩写 命名：如抗Sm抗体
以相关疾病的名字的缩写命名：如抗SS-A、抗SS-B抗 体
以抗原的化学性质进行分类命名：如抗DNA、抗RNP 抗体
以抗原的部位进行命名：如抗核膜抗体。
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抗平滑肌抗体（ASMA） 抗线粒体抗体（AMA） C-ANCA
相关疾病
SLE SLE SLE SLE 混合性结缔组织病（MCTD） 干燥综合征（SS） 硬皮病
硬皮病crest征 Ⅰ型自身免疫性肝病 原发性胆汁性肝硬化（PBC） Wegener 肉芽肿
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谢谢(xiè xie)各位的聆 听
第二十页，共26页。
14.抗中性(zhōngxìng)粒细胞胞浆抗体 （ANCA）
ANCA是第一个被证实与血管炎相关的自身抗体。 胞浆型ANCA（c-ANCA） 核周型ANCA（p-ANCA） c-ANCA的靶抗原主要是丝氨酸蛋白酶3（PR3）。c-
自身抗体的检测及其临床意义
自身抗体的检测及其临床意义自身抗体检测是一种用于检测人体自身产生的抗体的方法，可以用于诊断和监测自身免疫性疾病、感染病、肿瘤和器官移植等疾病的发展和治疗效果。
自身抗体是人体免疫系统产生的一种免疫蛋白，它可以识别和攻击体内异常细胞或物质，以维持人体的正常状态。
在自身免疫性疾病中，人体的免疫系统错误地攻击自身的组织和细胞，导致炎症和组织损伤。
自身抗体检测可以帮助医生诊断和监测这些疾病的发展和治疗效果。
例如，类风湿因子（RF）和抗核抗体（ANA）是类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等疾病的典型自身抗体，它们的检测结果可以是诊断这些疾病的依据。
另外，自身抗体检测也在感染病的诊断和监测中起到重要作用。
例如，针对新型冠状病毒的抗体检测可以用于判断一个人是否感染过该病毒，或者一些疫苗是否起到了保护作用。
此外，在器官移植中，自身抗体检测可以用于评估患者的免疫状态和预测移植排斥反应的风险。
自身抗体检测的临床意义主要包括以下几个方面：1.早期诊断：自身抗体检测可以帮助医生早期发现疾病的存在，尤其是自身免疫性疾病，使得患者可以及早获得相应的治疗。
2.疾病分类：不同类型的自身抗体与不同类型的疾病相关联，通过检测特定的自身抗体，可以帮助医生明确疾病的类型和特征，从而制定更准确的治疗方案。
3.预测疾病进展：自身抗体的水平与疾病活动的程度和预后有关。
通过定期检测自身抗体的水平，可以监测疾病的进展和治疗效果，以便及时调整治疗方案。
4.指导药物治疗：一些自身抗体的检测结果可以用于指导药物治疗的选择和调整。
例如，在类风湿性关节炎患者中，抗环瓜氨酸肽抗体（ACPAs）的存在可以预测疾病的进展和对一些药物的反应，从而指导临床治疗。
总之，自身抗体检测在临床中具有重要的意义。
它可以帮助医生早期诊断、分类和预测疾病，指导药物治疗，并监测治疗效果。
随着科学技术的不断进步，自身抗体检测将会在个体化医疗中发挥越来越重要的作用，为患者提供更精准和有效的诊断和治疗方案。
自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议
自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议自身免疫性疾病是一类由机体免疫系统异常激活导致的疾病，包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬化性胆管炎等多种疾病。
这些疾病往往具有多样性的临床表现，早期诊断和治疗对患者的预后至关重要，因此准确快速地诊断自身免疫性疾病对于临床医生来说具有重要的临床意义。
自身抗体检测可以通过对患者血液或体液中的自身抗体进行定量或定性分析，从而快速准确地确定是否存在自身免疫性疾病。
一般情况下，自身抗体的检测可以通过间接免疫荧光等技术进行，这些技术已经得到了广泛应用并具有较高的准确性和特异性。
在临床实践中，自身抗体检测可以帮助医生明确诊断、评估病情和指导治疗。
首先，自身抗体检测可以帮助临床医生鉴别不同类型的自身免疫性疾病。
例如，在类风湿性关节炎的诊断中，检测类风湿因子（RF）和抗环瓜氨酸肽（anti-CCP）抗体可以明确诊断。
其次，自身抗体检测可以评估疾病的活动性和严重程度。
一些自身抗体的水平与疾病的活动性密切相关，例如系统性红斑狼疮抗核抗体（ANA），通过监测ANA抗体的变化可以评估疾病的活动性和预测疾病的复发。
最后，自身抗体检测还可以指导治疗方案的选择。
例如，在硬化性胆管炎的治疗中，抗胆管细胞抗体（anti-CA）的检测结果可以指导是否使用免疫抑制剂治疗。
然而，自身抗体检测也存在一些限制和局限性。
首先，自身抗体的检测结果并不是绝对可靠的诊断依据，需要结合临床症状、体征和其他实验室检查结果进行综合分析。
其次，自身抗体检测结果的解读需要依赖临床医生的经验和专业知识，因此需要在专科医生的指导下进行。
此外，自身抗体的检测也受到技术的限制，包括方法的准确性、灵敏度和特异性等方面。
因此，为了提高自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用价值，专家建议以下几点：首先，加强对自身抗体检测技术和方法的研发，不断提高其准确性和特异性。
其次，建立完善的自身免疫性疾病的自身抗体检测指南，帮助临床医生合理选择检测项目和解读检测结果。
自身抗体谱检测意义
自身抗体谱检测意义
自身抗体谱检测，是现代医学领域广泛应用的一种生物分子检测技术，也称为免疫定位分析，主要检测抗体反应和免疫反应。
它可以用来检测患者体内抗体在反应位点上的抗原，进而用以发现患者身体内可能存在的疾病。
自身抗体谱的检测以及可能的医疗意义一直令诸多医学界人士折服。
通过检测，早期便可发现潜伏或未出现症状的慢性疾病，以及由此而引发的病变，从而制定有效的治疗方案，避免患者遭受促使疾病恶化的危害，延缓疾病进程，降低患病风险。
此外，自身抗体的检测还可以揭示患者的遗传背景，从而预测有可能罹患某种疾病的风险，对于家族病选择合理的治疗方式，及早进行防治具有重要的意义，更多的保障病人的健康。
可以说，自身抗体组学分析作为一项实用性技术，已经在发展成熟，可以有效反映人体疾病及其机体免疫反应。
抗体检测结果不仅可以为临床诊治提供依据，也可以为靶病药物设计提供新思路，具有巨大的研究价值及潜力。
总而言之，自身抗体谱检测是一种重要的现代医学检测技术，具有广泛的临床应用价值，可以提示患者有罹患某种疾病的风险，从而及早进行防治，保障病人的健康。
自身免疫性疾病及自身抗体检测的应用
八、由Ⅲ 型超敏反应引起的 自身免疫性疾病
3、干燥综合征（SS）
SS中国的患病率为0.3%,女；男=9:1 SS发病高峰；20-30岁，50岁绝经后 分泌腺体功能异常导致皮肤和黏膜的干燥， 泪腺与唾液腺最常被侵犯，出现眼干与口干。 女性病人出现阴道黏膜干燥萎缩，有瘙痒感。 治疗：人工泪液、硼酸软膏
五、目前检测自身抗体常用的方法
间接免疫荧光法（IIF） 酶联免疫吸附实验（ELISA） 免疫印迹法（Western-blot） 酶免疫斑点法
六、常见自身免疫性疾病的标志抗体
标志抗体 dsDNA 、Sm
相关疾病
系统性红斑狼疮SLE
SSB 着丝点抗体 Scl-70 抗体 AKA、抗CCP 抗体 Jo-1 抗体 高滴度RNP 抗体 肝肾微粒体抗体（LKM-1）
ANCA荧光染色型与靶抗原
荧光染色型
胞浆型 (cANCA)
靶抗原
蛋白酶3（PR3） 阳性：韦格纳肉牙肿
核周型 (pANCA)
髓过氧化物酶（MPO 阳性：原发性பைடு நூலகம்管炎
非典型型 (aANCA) 兼有两种特性
胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体
(cANCA)
主要见于Wegener’s 肉芽肿及微小多动脉炎
7.自身免疫性肝病
病例2
• 张某：男，42岁，私企老总，2009年2月感 觉下蹲、上楼困难，手无力，低烧。单项 CK2999U/L,先怀疑心肌问题，一个月后查 抗Jo-1 抗体阳性，肌活检示肌纤维变性， 诊断：早期多发性肌炎，后碾转北京、上 海、广州半年治疗，未有好转。
病例3
• 黄某：女，39岁，16岁起经常腹泻，有脓 血，人消瘦，多次大便细菌培养，均无致 病菌生长，用抗生素治疗，症状缓解，停 药就发，数年不能诊断。后经结肠镜确认 为溃疡性结肠炎。至今未治愈。
自身抗体的检测
荧光模式： 大鼠食管，仅限于上皮角质层的较强的线性分层的均质荧光。
STEP1
STEP2
自身抗原：丝聚蛋白（filaggrin）为AKA的靶抗原。
临床意义：见于RA，阳性率36~59%，特异性95~99%。还是一个潜在的预后标志，高抗体滴度可能预示着较严重的RA类型。
抗角蛋白抗体（AKA）
抗肝肾微粒体抗体（LKM）
01
临床意义：高滴度的抗RNP抗体为 混合结缔组织病（MCTD）的特征，发生率为95~100%。也可出现于SLE，但总是与抗Sm抗体同时出现。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性，发生率为20~40%。
02
抗RNP/Sm抗体
抗SSA／SSB抗体
荧光模式 Hep-2片：细胞核呈细颗粒荧光，核仁不发光。 肝组织片：细颗粒荧光。
自身抗原：为丝氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR3）。该靶抗原为可溶性蛋白，存在于正常中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中。
01
临床意义：cANCA可见于多种系统性血管炎。主要见于Wengener’s肉芽肿，约占ANCA阳性率的80~95%。cANCA被认为是活动性Wengener’s肉芽肿和微多动脉炎的特异和敏感的标志性抗体。还见于Churg-Strauss综合征。
02
抗中性粒细胞胞浆抗体（胞浆型）
抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）pANCA 荧光模式： 乙醇固定的中性粒细胞：细胞核周围平滑的带状荧光，细胞核阴性。 猴肝：肝血窦区粒细胞强荧光，而肝细胞阴性。
自身抗原：主要抗原为髓过氧化物酶（MPO），其他抗原还有白细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G、溶菌酶及乳铁蛋白等。
分裂期细胞阳性
荧光模式：
抗着丝点抗体(ACA)
Hep-2：细胞核细的、相同大小的颗粒荧光，分裂期颗粒荧光带状位于细胞中间。 肝组织片：分布于细胞核的10~20个颗粒，荧光弱，易被忽略。
自身抗体检测的临床应用与质量控制_万本愿
自身抗体检测的临床应用与质量控制_万本愿自身免疫性疾病(autoimmune diseases，AID)是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。
自身抗体的存在与自身免疫性疾病并非两个等同的概念，自身抗体可存在于无自身免疫性疾病的正常人，特别是老年人，如抗甲状腺球蛋白、甲状腺上皮细胞、胃壁细胞、单链-DNA抗体等。
近年来，自身抗体检测在诊断自身免疫性疾病、判断疾病的活动程度、观察治疗效果、指导临床用药等具有重要的作用。
由于不同实验室可能采用不同的抗原基质，即使同样的抗原基质，其抗原固定方法也有差异或不同。
另外，由于不同的血清稀释方法以及操作者对不同荧光模式的识别能力的不同，均可影响到自身抗体的检测质量。
１常见自身抗体检测的临床应用大多数自身免疫性疾病患者的血清中可检测到高效价的自身抗体，虽然有些自身抗体在疾病中的作用尚未被证实，但其与疾病的相关性已获得认可。
特别是有些自身抗体的检测已纳入到某些自身免疫性疾病的诊断标准中，这些自身抗体的检测对自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断及愈后评估具有重要的临床意义。
随着对自身抗体的了解越来越深入，临床应用越来越广泛，免疫学技术进一步的提高，自身抗体检测已是临床免疫检测的一项重要的实验室指标。
在诊断自身免疫性疾病、判断疾病的活动程度、观察治疗效果、指导临床用药等具有重要的临床意义。
笔者简单介绍一下自身抗体的临床应用。
1.1抗核抗体(antinuclearantibody，ANA)是一组针对自身真核细胞的各种细胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称。
ANA的性质主要是IgG、也有IgM、IgA和IgD。
其无器官和种属的特异性，故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应[1,2]。
现已证实ANA对很多自身免疫性疾病有诊断价值，在不同疾病中，特别是在风湿性疾病中，其抗体谱有一定的特征性。
此外，在桥本甲状腺炎、重症肌无力、多发性动脉炎等患者中也可能检测出ANA。
第二十章自身抗体检测及应用一、选择题
一、 选择题
（一）、A1 型题（标准型） 1． SLE 患者血清中有多种自身抗体，检出率最高的是： A．抗核抗体 B．抗Ｓm 抗体 C．抗 dsDNA 抗体 D． 抗 SSA 抗体 E． 抗 SSB 抗体 2． SLE 患者血清中与疾病诊断高度相关的自身抗体是： A． 抗核抗体 B．抗 SSA 抗体 C． 抗Ｓm 抗体 D． 抗 uRNP 抗体 E．抗 dsDNA 抗体 3． 自身免疫病的特点是在患者血清中存在： A． IgE B． 低效价自身抗体 C． 补体 D．高效价自身抗体 E． B 细胞 4． SLE 患者血清中与疾病诊断高度相关的是： A． 抗 dsDNA 抗体 B． 抗Ｓm 抗体 C． 抗核抗体 D． A 和 B E． A 和 C
10. 不属于对自身抗体进行进一步区分所采取的方法是： A. ELISA B. Westen-Blot C. 对流免疫电泳 D. 免疫双向扩散法 E. RIA 二、 填空题
1．临床上检测 RF 常采用的方法是：_____、_____、_____、_____。 ２． 主要的 ANCA 有_____、_____两型 3． 自身免疫性疾病的重要标志是_____。 4． 对 SLE 诊断价值最大的 ANA 类型是_____。 5． 进行性系统性硬皮病（PSS）的特征性抗体是_____ 6． ANCA 主要可分为__________和_____
１．A 2．E 3．D 4．Ｄ 5．B 6．Ａ 7．Ｃ 8．Ｃ 9．Ｂ １0．Ｂ １1．Ｃ １2．Ｂ １3．E １4．Ｃ １5．B １6．A 17．Ａ18．E 19．Ｃ ２0．Ｂ ２1．Ａ ２2．D （二）、A2 型题（否定型） 1．C ２．B 3．Ｂ 4．Ｅ 5．D 6．Ｅ 7．E 8．Ｃ 9．D 10．Ｅ
自身抗体的实验室检测及临床意义
自身抗体的实验室检测及临床意义自身抗体是指人体免疫系统错误地将自身组织识别为外来入侵物质，从而产生针对自身抗原的抗体。
这些自身抗体可以通过实验室检测来鉴定和定量化，并且具有重要的临床意义。
一、实验室检测实验室检测自身抗体可以通过以下几种常见的方法进行：1.免疫荧光法：该方法通过将被检测物质与标记有荧光的抗体结合，然后观察荧光反应的强度和模式来确定是否存在自身抗体。
例如，典型的抗核抗体（ANA）检测就是采用免疫荧光法。
2.酶联免疫吸附测定法（ELISA）：该方法利用酶反应来检测自身抗体的存在。
将被检测物质与特异性抗体结合，然后加入酶标记的抗人免疫球蛋白，再加入底物使酶反应产生颜色变化，通过测定颜色的强度来确定是否存在自身抗体。
3.凝集试验：该方法利用自身抗体对存在抗原的物质进行凝集，观察凝集的程度来确定是否存在自身抗体。
例如，类风湿因子（RF）的检测就是采用凝集试验。
这些实验室检测方法能够对特定的自身抗体进行检测和定量化，从而帮助医生做出医学诊断并制定相应的治疗方案。
二、临床意义检测自身抗体的临床意义非常重要，主要体现在以下几个方面：1.诊断自身免疫性疾病：自身抗体的产生与自身免疫性疾病密切相关，例如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、甲状腺自身免疫性疾病等。
通过检测自身抗体，可以帮助医生诊断这些疾病，并确定疾病的类型和严重程度。
2.监测疾病活动和预测预后：一些自身抗体的水平在疾病发作期间会增高，在缓解期间会降低。
因此，定期监测自身抗体的变化可以帮助医生判断疾病的活动程度，并预测预后。
3.指导治疗：一些自身抗体与特定的治疗方法和药物敏感性相关。
通过检测自身抗体，可以帮助医生选择最合适的治疗方案，并预测治疗的有效性。
4.预防疾病发展：有些自身抗体出现在疾病发展的早期阶段，通过早期检测这些抗体，可以帮助医生及时干预和预防疾病的进展。
总之，实验室检测自身抗体具有重要的临床意义，可以帮助医生精确诊断自身免疫性疾病，监测疾病的活动程度和预测预后，指导治疗和预防疾病发展。
自身抗体检测及临床应用价值
自身抗体检测及临床应用价值
首先，自身抗体检测在疾病诊断中具有重要作用。
许多疾病的发生与自身免疫反应异常有关，例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
通过检测患者体内是否存在特定的自身抗体，可以帮助医生确定疾病的类型和程度，以便进行进一步的治疗和管理。
例如，类风湿因子阳性是类风湿性关节炎的重要诊断指标，抗核抗体阳性是系统性红斑狼疮的典型表现。
通过这些自身抗体的检测，可以提高疾病的准确诊断率，从而更好地指导治疗。
其次，自身抗体检测能够预测疾病的风险和进展。
一些自身抗体在疾病的发生和进展中起着重要作用。
例如，抗磷脂抗体可以预测系统性红斑狼疮患者心血管疾病的风险。
通过定期检测这些抗体的水平的变化，可以提前预测出疾病的恶化趋势，有助于及时调整治疗方案，减轻疾病对患者的损害。
第三，自身抗体检测在选择个体化治疗方案上起着重要作用。
同一种疾病在不同患者身上表现出不同的临床特征和治疗反应。
通过检测患者体内的自身抗体水平，可以更加准确地预测患者对不同药物的敏感性和耐药性。
例如，检测乳酸抗体可以帮助选择对乳酸激酶类药物敏感的乳腺癌患者，从而优化治疗效果。
此外，自身抗体检测还可以评估患者在治疗过程中可能出现的不良反应和药物代谢情况，帮助医生调整治疗方案。
总之，自身抗体检测在临床应用中具有重要的价值。
它可以帮助医生进行疾病诊断和预测，指导治疗方案的选择，并且可以提高疾病管理的个体化水平。
随着技术的不断进步，自身抗体检测的精确性和灵敏性也会不断提高，有望在未来发挥更为重要的作用。
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U1-nRNP
单链DNA
阳性率（%)
95~100
20~50
类风湿性关节炎（RA）
抗原类型
IgM-RF
阳性率（%）
65~90
抗角蛋白抗体（AKA）
单链DNA 组蛋白
36~59
8 少见
原发性干燥综合征（SS）
抗原类型
SSA SSB ssDNA 唾液腺流出道 RF
阳性率（%）
40~95 40~95 30~60 40~60 60~80
可超过95%， 活动期几乎100%阳性。 髓过氧化物酶（MPO）与显微镜下多血管炎、坏死性新 月体型肾小球肾炎、过敏性肉芽肿性血管炎相关、 杀菌/通透性增高蛋白（BPI）主要见于肺部炎症性疾病 并与长 期慢性绿脓杆菌感染有一定关系
组织蛋白酶G (Cath-G) • 白细胞弹性蛋白酶(HLE) 乳铁蛋白(LF)
体，主要包括抗心磷脂抗体、抗磷脂酸抗体和抗 磷脂酰丝氨酸抗体。 类型：IgG、A、M型，IgG型最常见，其次是 IgM型，IgA型与自身免疫性疾病的关系较小。
检测方法： 临床应用：
常用ELISA
• 在SLE中总阳性检出率达70%~80%，与病情活动 显著相关；ACA阳性者发生血管炎、溶血性贫血 、心脏及中枢神经精神系统损伤的几率明显。 • 在RA患者阳性率为33%~49%。 • ACA阳性是脑出血及脑梗塞的危险因素。 • 与反复自然流产和胎儿发育迟缓有一定的相关性
自身抗体的检测及意义
几个概念
自身免疫(autoimmunity) 免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应 出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象 自身抗体(autoantibody) 针对自身组织、器官、细胞及其成分的抗体。 自身免疫性疾病(autoimmune disease，AID) 自身免疫反应 导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。 免疫系统紊乱
自身抗体
自身免疫性疾病的重要标志 高滴度存在于自身免疫性疾病患者
与疾病的活动性相关性
参与免疫病理性改变损伤
常用的检测方法
间接免疫荧光法（IIF）
ELISA
免疫印迹法（Western-blot）
酶免疫斑点法
常检测的自身抗体
• 类风湿因子（RF）
• 抗核抗体（ANA）
• 抗可提取性核抗原抗体（ENA）
均质型 斑点型 核仁型 着丝点型 周边型
细胞浆
核糖体型 线粒体型 高尔基体型 溶酶体型 颗粒型
细胞骨架
肌蛋白型 波形纤维蛋白型 细胞角蛋白型 原肌球蛋白型 纽带蛋白型 结蛋白(桥粒)型
细胞周期
中心体型 纺缍体型 纺缍丝型 中间体型 PCNA型
核点型(dots)
斑点型（nRNP/Sm）
斑点型（SSA/SSB）
•可见于SLE、IBD、 PBC、PSC等
抗角蛋白抗体（AKA）
AKA主要见于RA， 阳性率36%~59%，特 异性95%~99%，其出 现可以先于临床表现； 高滴度可预示较严重的 RA类型。
抗磷脂抗体
（anti-phospholipid antibody, APLA）
一组针对含有磷脂结构抗原物质的自身抗
是一组以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗 原，与临床多种小血管炎性疾病密切相关的 自身抗体，对系统性血管炎、炎症性肠病等 疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。
ANCA荧光染色型与靶抗原
荧光染色型
胞浆型(cANCA)
靶抗原
蛋白酶3（PR3） 杀菌/通透性增高蛋白（BPI）
核周型(pANCA)
髓过氧化物酶（MPO） 组织蛋白酶G（Cath-G） 乳铁蛋白（LF） 白细胞弹性蛋白酶（HLE） 兼有两种特性
高滴度的抗U1-nRNP为MCTD 的特征。抗Sm抗体对SLE具有高度特 异性。
抗SSA最常出现于SS及新生儿红 斑狼疮 （100%）。抗SSB抗体几乎仅 见于女性，可出现于SS和SLE。
均质型
抗dsDNA抗体 抗ssDNA抗体
抗组蛋白抗体(histone) 抗核小体抗体(nucleosome)
抗dsDNA抗体
• 某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更 丰富
ANA
均质体
+
中性粒细胞
DNP(DNA-Histone) + 抗DNP + 补体
LE细胞
LE细胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等结缔组织病，药物 过敏，慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测
间接免疫荧光法
+
待检抗体（血清） 抗原—抗体
部分自身免疫性疾病中
自身抗体的检出率
ANA在自身免疫性疾病中的检出率
自身免疫性疾病
SLE MCTD RA PSS PM/DM SS 溃疡性结肠炎 慢性活动性肝炎 其它风湿病
ANA阳性率（%）
80~100 95~100 20~40 85~95 30~50 70~80 26 30~40 20~50
系统性红斑狼疮 (SLE)
10
原发性胆汁性肝硬化(PBC)
抗原类型
线粒体2型（M2） 线粒体4型（M4） 线粒体8型（M8） 线粒体9型（M9） 核点 板层素
阳性率（%）
95 55 55 35~85 30 2
问题
怀疑SLE，怎么办？
常规检测程序
免疫球蛋白、 补体等检测
+
ANA筛选
抗胞浆型抗体鉴定
ENA抗体谱
其它自身抗体
• 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） • 抗环瓜氨酸抗体（CCP） • 抗心磷脂抗体（ACA）
类风湿因子
（RHEUMATOID FACTOR, RF）
抗变性IgG Fc的自身抗体，主要类型是IgM型
检测方法：
1. 胶乳颗粒凝集实验
定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定IgM-RF
2. 速率散射比浊法（ARRAY、IMAGE）
SLE特异性抗体，与病情活动度相关。
周边型
可见于胶原病、PBC、CAH等患者
核点型（DOTS）
抗着丝点型
见于SLE、SS、PBC、风湿病。
PSS局限型标志抗体。
抗PM-Scl（PM-1）抗体
见于重叠综合征（多发性肌炎PM /皮肌炎 DM / 弥漫性PSS ）
抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体
抗线粒体抗体（AMA）
效价>80IU/ml并伴有严重关节功能障碍时通常提示 患者预后不良。
抗核抗体
（ANTINUCLEAR ANTIBODY，ANA）
真核细胞（如HEp-2细胞、肝细胞）的各种 细胞核成分为靶抗原 检测的自身抗体的总称。
ANA概念
• 指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶） 的抗体。 • 广义：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白 （Nucleoprotein）抗体的总称
非典型型(aANCA)
周边型抗中性粒细胞胞浆抗体
（pANCA）
主要见于炎症性肠病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）
胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体
(cANCA)
主要见于Wegener’s肉芽肿及微小多动脉炎
ANCA临床应用
蛋白酶3（PR3）与Wegener’s肉芽肿（WG）密切相关。
仅cANCA诊断WG的特异性大于90%，联合PR3
+
第二抗体
Ep-2细胞肝组织切片
间接免疫荧光法
荧光标记抗体
病人血清（待检抗体）
HEp-2细胞 肝组织切片
分类和命名
1. 以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗Sm、 抗Sa 抗体等； 2. 以相关疾病命名，如抗 Scl-70、抗 SS-A、抗 SS-B 抗体等； 3. 以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线粒 体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；
进行性系统性硬化症（PSS）
PSS类型 相对应的抗原
原纤维蛋白 弥漫型 PM-Scl（PM-1） Scl-70 RNA多聚酶Ⅰ
阳性率（%）
5~10 3 25~75 4
局限型
着丝点
80~95
多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)
抗原类型
PM-Scl（PM-1） Jo-1 Mi-1 Mi-2 Ku（重叠综合征） 单链DNA PL-7 PL-12
定量、准确、快速，测定IgM-RF
3. ELISA
定量、准确，可测定不同类型的RF
临床应用：
（1）RF在多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。
疾病
阳性率%
RA 79 SLE 30 SS 95 Sclerosis 80 PM 80 MCTD 25 （2）RF滴度与 RA患者临床表现呈正相关， IgM-RF
SLE标志抗体
原发性胆汁性肝硬化标志抗体
抗Jo-1抗体
抗高尔基体抗体
多发性肌炎（PM）标志抗体
偶见于SLE和SS
抗肌动蛋白抗体
见于自身免疫性慢性活动型肝炎
抗ENA抗体谱
ENA (extractable nuclear antigen)： 可提取核抗原的总称 临床常检测的抗ENA抗体谱主要包括： 抗Sm 抗SSA 抗Jo-1 抗rib-P蛋白 抗U1-RNP 抗SSB 抗Scl-70
4. 以抗原的化学性质进行分类命名，如抗DNA、 抗RNP、抗组蛋白抗体等。
抗核抗体检测方法
间接免疫荧光法 （indirect immunofluorescence, IIF）
酶免疫斑点法 ELISA
blot）
免疫印迹法
（Western-
ANA谱条法
ENA斑点法
IIF检测ANA荧光染色模型
细胞核
（－）
95%~99%可排除SLE SLE治疗缓解
ANA初筛
病情特重（大量IC沉积消耗抗体） （＋）低滴度 常见于RA等其它自身免疫性疾病
高滴度 可作为诊断SLE的依据