革兰氏阳性产芽孢杆菌课件PPT

普通琼脂上的菌落 低倍镜观察菌落
串珠反应试3验
三、抵抗力
繁殖体的抵抗力不强
60℃30-60min即可杀死 常用消毒剂均能将其杀死 青霉素等多种抗生素高度敏感
芽胞的抵抗力特别强
在干燥状态下可长期存活 121 ℃灭菌5-10min 芽胞对碘特别敏感 0.04％-10 min
Fra Baidu bibliotek
4
四、抗原结构
荚膜抗原： 荚膜—半抗原，与毒力有关，无保护作用 不稳定，反应性特异—可用于血清学鉴定
2
二、培养特性
需氧菌，适温37℃，营养要求不高 普通肉汤：37℃，24h培养，上层液透明，形成白色絮状沉淀
普通琼脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、 边缘不整齐 火焰状菌落。低倍镜观察菌落边缘呈卷发状，不溶血。
明胶高层：呈倒置松树状
串珠反应：0.5单位/ml青霉素的培养基中，细胞壁合成受抑制， 菌体膨胀相互粘连形成“串珠状”
感染途径：消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播
食草动物炭疽常表现为急性败血症 猪炭疽多表现为慢性的咽部局限感染
感染表现 犬、猫和食肉兽则多表现为肠炭疽
人类肠炭疽、肺炭疽或皮肤炭疽
实验动物：小鼠、豚鼠、家兔易感
6
毒力因素：
荚膜多肽：荚膜抗吞噬，抑制抗体的作用，使易于扩散，引起 感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定
周围有棕绿色溶血区，出现双层溶血环 为β溶血（内环透明，外环淡绿色）。
牛乳培养基： 汹涌发酵或暴烈发酵
分解乳糖产酸产气，酪蛋白凝固，变成海绵状
14
15
三、致病性
* 致病作用主要在于所产生的毒素—蛋白质 * 毒素有12种，小写希腊字母表示α、β、γ、η….；
其中α、β 、ε 和ι是主要坏死、致死性、溶血性毒素 有些菌株还产生肠毒素
形成噬菌斑
* 串珠试验：
被检菌
含青霉素 培养基
形成串珠 生长抑制
*
明胶穿刺试验：
穿刺接种于 明胶培养基
18-20 ℃ 培养4-7d
呈倒置10松树状
2.动物实验：
病料(1:5乳悬液) 或培养物
皮下接种：小鼠0.1 ml 兔0.2-0.3 ml
败血症 而死亡
剖检变化：
注射部位呈胶样水肿 脾脏肿大 在内脏、血液中有大量带荚膜的竹节状菌体
* 梭菌在自然界分布广泛—土壤、污水、腐烂植物、动物肠道 * 人与动物的伤口及软组织感染灶
三、病原梭菌及梭菌病的诊断原则
* 本属有80多种，多为非病原菌，常见的致病菌约11种 * 多为人兽共患病病原 * 病原梭菌通常均能产生外毒素，其毒力强
12
产气荚膜梭菌 (Cl. Perfringens)
* 本菌又称魏氏梭菌或产气荚膜杆菌 * 在自然界分布极广—土壤、饲料、污水、乳汁、消化道粪便等 * 在一定条件下，可引起多种严重疾病
菌型：根据产生毒素种类，细菌分为A、B、C、D、E 等5个型
表: 产气荚膜梭菌菌型及所致疾病
细菌菌型 产气荚膜梭菌A型 产气荚膜梭菌B型
所致疾病 人气性坏疽和食物中毒, 坏死性肠炎(牛,仔猪), 兔腹泻等 羔羊痢疾,犊牛、羔羊、绵羊和山羊的肠毒血症或坏死性肠炎
产气荚膜梭菌C型
产气荚膜梭菌D型 产气荚膜梭菌E型
炭疽毒素：水肿毒素(edema factor,EF) 致死毒素(lethal factor,LF) 保护性抗原（PA）
三种成分单独无生物学
活性（毒性），三种相结 合时，表现毒性作用
增强微血管的通透性， 改变血液循环， 损害肾功能， 干扰糖代谢
导致动物死亡 具有免疫原性， 有保护作用
7
六、免疫性
患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。
绵羊猝狙, 羔羊、犊牛、仔猪、绵羊的肠毒血症和坏死性肠炎以及 人的坏死性肠炎,仔猪红痢,
羔羊、绵羊、山羊、牛的肠毒血症, 人肠毒血症
犊牛、羔羊肠毒血症, 兔腹泻.
16
四、微生物学诊断
热沉淀反应（ Ascoli氏沉淀反应） 被检抗原
3.血清学检查： 间接血凝试验
串珠荧光抗体检查
炭疽芽孢
串珠试验与 荧光抗体法结合11
第二节 梭菌属 (Clostridium)
一、属的特征
* 菌体杆状，两端钝圆或尖锐，常单在，革兰氏染色阳性 * 形成卵圆形或圆形的芽孢，常使菌体膨大，呈梭状
二、梭菌分布
菌体抗原： 细胞壁及菌体内的半抗原（多糖），与毒力无关 性质稳定（耐腐败、热）—Ascoli反应
保护性抗原： 胞外蛋白质抗原（炭疽毒素），具有免疫原性 免疫保护
芽孢抗原： 是芽胞外膜层含有的抗原决定簇，特异性抗原 具有免疫原性和血清学诊断价值。
5
五、致病性
本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽 易感性最强—牛、绵羊、鹿等 其次—马、驼、猪、山羊等次之 犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力 禽类一般不感染
一、形态及染色特性
菌体直杆状，两端钝圆，革兰氏阳性，形成芽胞（中央或近端） 多数菌株在动物体内可形成荚膜
13
二、培养及生化特性
本菌对厌氧条件要求不太严格加入葡萄糖、 血液则生长更好，适温37 ℃
肝片肉汤；生长迅速，5-6h 出现混浊，产生大量气体
葡萄糖琼脂； 37 ℃，24h形成 ，勋章样菌落
血液琼脂；灰白色，圆形，边缘呈锯齿状的大菌落，
具有芽胞的链杆菌
9
（2）分离培养：
被检材料
普通琼脂 血液琼脂 碳酸氢钠琼脂
* 荚膜检查： 强度株形成荚膜
噬菌斑 观察生长特性 生物学特性检测细菌
串珠 动物机体内
细菌 含碳酸氢钠或血清培养基 细（菌在噬C菌O体2条裂件解下试培验养）
* 噬菌体裂解试验： 炭疽杆菌与γ 噬菌串体珠试验裂解炭疽杆菌
具有高度的特异性
第十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌
内容提要 第一节 芽孢杆菌属
炭疽芽孢杆菌 第二节 梭菌属
产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 破伤风梭菌
1
第一节 芽孢杆菌属（Bacillus)
炭疽芽孢杆菌
炭疽芽孢杆菌—炭疽的病原体—人兽共患病
一、形态及染色特性
革兰氏阳性大杆菌，无鞭毛，不运动。形成芽孢、荚膜。 动物组织和血液:单在或呈短链，竹节状、有丰厚的荚膜 人工培养物:形成长链，形成芽胞，一般不形成荚膜
炭疽毒素 保护性抗原
刺激机体产生的抗体
抗感染作用
菌苗有第二号炭疽芽胞苗 无毒炭疽芽胞苗 抗炭疽血清
8
七、微生物学诊断
1.细菌学检查
采病料： 严禁剖检，局部采料（耳根部、肋间采取脾脏、 水肿液或渗出物、肠炭疽可采取粪便等
（1）涂片镜检：
组织病料
碱性美蓝 瑞氏染色 姬姆萨染色
有荚膜竹节状大杆菌
培养物
碱性美蓝 革兰氏染色